原发性肝细胞癌患者外周血中MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶 2(MMP-2)mRNA、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)mRNA在原发性肝细胞癌(primary hepatocelluar carcinoma,PHC)患者外周血中的表达水平及其在PHC诊断中的临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测120例临床上确诊的不同临床分期的PHC患者、60例肝良性病变患者及60例健康体检者外周血中MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA 的表达水平.结果 PHC组MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA 表达水平明显高于肝良性病变组和健康对照组(P<0.05),而肝良性病变组和健康对照组中MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA 表达水平差异无统计学意义(P>0.05);随着PHC临床分期的升高MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA 表达水平呈现增高趋势(P<0.05);PHC 患者中有肝外转移者其MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA表达水平明显高于无肝外转移者(P<0.05).结论 MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的差异性表达与PHC临床病理分期及转移密切相关,具有重要的临床意义.     

阿托伐他汀对糖尿病心肌病大鼠心肌组织赖氨酰氧化酶的影响

目的 探讨阿托伐他汀对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌组织赖氨酰氧化酶(LOX)表达的影响及机制.方法 将30只DCM大鼠分为DCM组、治疗组(阿托伐他汀2 mg· kg-1·d-1灌胃)、β氨基丙腈(BAPN)组(BAPN 80 mg·kg-1·d-1灌胃),每组10只;另选10只SD大鼠为空白对照组.第8周末处死大鼠.提取心肌组织RNA及蛋白质,RT-PCR和Western blot测定心肌组织LOX、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及核因子-κB(NF-κB)mRNA和蛋白表达.结果 DCM组LOX、MMP-2及NF-κB mRNA和蛋白表达明显高于对照组(P＜0.01);与DCM组比较,治疗组及BAPN组LOX、MMP-2及NF-κB mRNA和蛋白表达明显下调(P＜0.01).结论 阿托伐他汀可逆转DCM大鼠心肌组织LOX表达,进而调控MMP-2及NF-κB表达.     

PDTC关节腔注射对兔创伤性OA软骨MMP-1、MMP-9 mRNA表达的影响

目的:观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)关节腔注射对兔创伤性骨关节炎(os-teoarthritis,OA)软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达及NF-κBp65活性的影响,探讨PDTC对兔创伤性OA软骨退变进程的影响。方法:取20只新西兰兔行右膝横断前交叉韧带术(ACLT),术后1周随机分为对照组和PDTC组,每组10只。PDTC组关节腔注射PDTC2mg(/只.次),每周2次,连续8周,对照组同一时间点关节腔注射等容量生理盐水。末次用药3天后处死白兔,解剖显微镜下观察股骨内髁软骨的形态学变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测股骨内髁软骨中MMP-1、MMP-9mRNA表达量,免疫组化检测股骨内髁软骨中NF-κBp65蛋白表达。结果:形态学示PDTC组软骨退变明显轻于对照组(P<0.05),RT-PCR示PDTC组MMP-1、MMP-9mRNA表达量均低于对照组(P<0.01),免疫组化示PDTC组NF-κBp65活性系数明显低于对照组(P<0.01)。结论:PDTC关节腔注射可能通过阻断创伤性OA软骨中NF-κB激活,进而抑制MMP-1、MMP-9mRNA表达,发挥软骨保护作用。     

白藜芦醇对急性心肌梗死大鼠核因子-κB信号通路表达的影响

目的探讨白藜芦醇对急性心肌梗死(AMI)大鼠核因子-κB(NF-κB)信号通路表达的干预作用。方法将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、AMI组和白藜芦醇组,每组10只;AMI和白藜芦醇组大鼠采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法制备AMI模型,假手术组大鼠不结扎左冠状动脉前降支;术后第1天白藜芦醇组大鼠开始腹腔注射白藜芦醇10 mg·kg~(-1)·d~(-1),假手术组及AMI组大鼠分别注射等剂量生理盐水;每日1次,持续用药至术后4周。然后处死各组大鼠,取梗死区域的心肌组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测大鼠心肌组织中NF-κB、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、IκB激酶α(IKKα)蛋白及其mRNA的表达。结果 AMI组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKαmRNA表达显著高于假手术组(P<0.05),白藜芦醇组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKαmRNA表达显著低于AMI组(P<0.05),白藜芦醇组与假手术组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKαmRNA表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。AMI组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKα蛋白表达显著高于假手术组(P<0.05),白藜芦醇组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKα蛋白表达显著低于AMI组(P<0.05);白藜芦醇组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα蛋白表达显著高于假手术组(P<0.05),但2组大鼠心肌组织中IKKα蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白藜芦醇可以抑制AMI大鼠NF-κB信号通路表达情况,具有心脏保护效应。     

MMP-7在直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在直肠癌中的表达及临床意义。方法选取2015年10月至2018年8月商丘市第一人民医院普外科确诊的96例直肠癌患者标本,在距癌组织远端切缘1、2、3 cm处分别横向剪取宽2 mm的黏膜组织作为手术切缘(分别标记为A组、B组、C组),根据分化程度的不同,高、中分化组分别标记为A1组、B1组、C1组,低分化组分别标记为A2组、B2组、C2组,选取50例轻微慢性直肠炎症患者黏膜组织标本作为对照组(D组)。采用免疫组化方法检测各组黏膜组织中MMP-7的表达水平。结果直肠癌组织中MMP-7阳性表达率高于直肠非癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。A1组、B1组MMP-7阳性表达率均高于C1组、D组,差异有统计学意义(均P<0.05);C1组和D组MMP-7阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。A2组MMP-7阳性表达率高于C2组,差异有统计学意义(P<0.05);A2组和B2组MMP-7阳性表达率均高于D组,差异有统计学意义(均P<0.05);B2组和C2组MMP-7阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);C1组MMP-7阳性表达率低于C2组,差异有统计学意义(P<0.05);C2组MMP-7阳性表达率高于D组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论直肠癌组织中MMP-7存在异常表达,随着与直肠癌距离的增加,MMP-7在组织中的表达呈下降趋势,且可能随着分化程度的不同而发生改变,可以作为判断直肠癌安全手术切缘的参考。     

1,25-二羟维生素D3对慢性哮喘小鼠气道重塑中MMP-9及NF-κB表达的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性哮喘小鼠气道重塑模型肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及核转录因子κB(NF-κB)活化的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及VD组。卵白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘气道重塑模型。HE染色及Masson染色观察各组气道结构及上皮下纤维化,并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑;蛋白免疫印记法检测肺组织NF-κB p65的核移位;蛋白免疫印记法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测IκBα的表达水平;明胶酶谱法及RT-PCR法检测MMP-9的活性及mRNA表达。结果哮喘组出现炎性细胞浸润增多、上皮下纤维化及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变,而1,25-(OH)2D3的干预可有效减轻上述病理改变。VD组肺组织MMP-9活性为对照组的(3.46±0.57)倍,而哮喘组为对照组的(7.87±0.89)倍(P<0.05);VD组MMP-9 mRNA相对含量为(3.16±0.09),显著低于哮喘组(5.74±0.13)(P<0.05),但仍高于对照组(0.57±0.08)(P<0.05)。1,25-(OH)2D3显著抑制哮喘肺组织中NF-κB p65的核移位并上调IκBα的表达。结论 1,25-(OH)2D3能抑制哮喘肺组织中NF-κB的活化并减少MMP-9表达,进而干预慢性哮喘气道重塑过程。     

外周血MMP-9及NF-κB在OSAHS合并高血压中的表达及其相关性研究

目的 探讨血浆基质金属蛋白酶9(MMP-9)和核转录因子kappa B(NF-κB)在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并高血压发病中的作用.方法 选取2014年1月至6月在该院呼吸内科及神经内科行多导睡眠监测的受试者,根据睡眠监测检查结果及是否合并高血压进行分组,鼾症组23 例,OSAHS组 32例,OSAHS合并高血压组31例;并根据高血压级别对OSAHS合并高血压组进行亚组分型,其中OSAHS合并高血压1级组9例,2级组9例,3级组13例.分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR的方法检测血浆MMP-9水平及单个核细胞中 MMP-9 和 NF-κB基因的表达水平.结果 OSAHS合并高血压组血浆MMP-9水平、单个核细胞MMP-9 mRNA和NF-κB mRNA的表达水平均明显高于鼾症组和OSAHS组,差异有统计学意义(P<0.05).OSAHS合并高血压3级组血浆MMP-9水平、单个核细胞MMP-9 mRNA和NF-κB mRNA的表达水平均明显高于OSAHS合并高血压1级组及2级组,比较差异有统计学意义(P<0.05).血浆MMP-9水平、 MMP-9 mRNA及NF-κB mRNA的表达与呼吸暂停低通气指数(AHI)、氧减指数(ODI)呈正相关(P<0.05),与最低血氧饱和度(LSaO2)呈负相关(P<0.05).血浆MMP-9水平与单个核细胞MMP-9 mRNA的表达呈正相关(P<0.05).单个核细胞MMP-9 mRNA的表达与NF-κB mRNA的表达呈正相关(P<0.05).结论 血浆MMP-9水平、 MMP-9 mRNA及NF-κB mRNA的表达水平在OSAHS合并高血压患者中明显增高并与疾病的严重程度相关,MMP-9在OSAHS合并高血压发病中起着重要作用,可能受NF-κB通路的调节.     

MMP-2和TIMP-2在脂多糖诱导的新生大鼠急性肺损伤中表达的变化

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metallo proteinase-2,MMP-2)及其组织抑制剂(tissue inhibitors of metallo proteinase-2,TIMP-2)在脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤中的作用.方法 选择30只新生7日龄SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(n=6)和急性肺损伤组(n=24),后者进一步分为1、2、4及6h亚组,每组6只.以LPS 腹腔注射建立急性肺损伤模型,观察注射LPS后不同时间点大鼠肺组织的病理改变,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中MMP-2和TIMP-2的蛋白及mRNA表达.结果 病理学检查证实新生大鼠急性肺损伤模型复制成功.与生理盐水对照组比较,急性肺损伤组注射LPS后MMP-2蛋白及mRNA均表达增加,4～6h达高峰,差异有统计学意义(均P<0.05).TIMP-2蛋白及mRNA表达在6h内可见微弱增加趋势,但与生理盐水对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05).结论 LPS致新生大鼠的急性肺损伤存在MMP-2和TIMP-2的表达失衡,进而可能通过破坏基底膜参与急性肺损伤的病理过程.     

柔肝化纤颗粒对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝脏MMP-2、TIMP-2的影响

目的探讨柔肝化纤颗粒对CCI_4诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-2抑制剂(TIMP-2)的影响。方法选取健康清洁SPF级大鼠78只,随机分为正常对照组(A组)、病理模型组(B组)、柔肝化纤颗粒组(C组)、大黄(?)虫丸组(D组)及秋水仙碱对照组(E组),后4组均建立CCI_4诱导的肝纤维化大鼠模型,而后分别给予生理盐水、柔肝化纤颗粒、大黄(?)虫丸、秋水仙碱灌胃,治疗5周、10周后分别取大鼠肝组织,采用免疫组织化学染色及计算机图像分析技术检测MMP-2及,TIM P-2。结果治疗5周、10周时与A组比较,B组肝组织炎性反应活动度计分、肝纤维化程度计分均明显升高(P<0.05),C、D、E组均较B组明显降低(P<0.05),其中C组下降较D、E组明显(P<0.05),而D、E组间差异无统计学意义(P>0.05);与A组比较,B组MMP-2、TIMP-2、MMP-2/TIMP-2均明显增高(P<0.05);与B组比较,C、D、E组MMP-2、TIMP-2表达、MMP-2/TIMP-2明显降低(P均<0.05),C组下降较D、E组更明显(P<0.05),而D、E组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论柔肝化纤颗粒能通过调节TIMP-2/MMP-2比例发挥对肝纤维化的防治作用。