卡维地洛对老龄大鼠心房肌细胞起搏电流的作用

目的研究卡维地洛（Car）对大鼠心房肌细胞起搏电流（If）的影响，探讨其降低心房颤动的机制。方法选择22～24月龄SD大鼠分离心房肌细胞，利用全细胞膜片钳技术记录If。结果Car可明显降低老龄大鼠心房肌细胞的超极化激活起搏电流，在-150mV时，1．0μmol／L Car使If的电流密度从（3．2±0．4）pA／pF降至（2．4±0．3）pA／pF（P％0．01）。Car的抑制电流效应呈电压依赖性，即随着超极化电位的增加，Car的效应也增加。在0．1～30．0μmol／L的范围内，Car以浓度依赖性方式阻滞起搏电流，其IC50为1．37μmol／L（95％可信限为1．96～0．57μmol／L）。进一步，Car可以使If的稳态激活曲线向超极化方向移动，使半激活电压从（-87．5±2．3）mV移至（-96．2±4．7）mV。从而使电流激活减慢，这可能是其减少，If的主要原因。结论卡维地洛可明显降低老龄大鼠心房肌细胞起搏电流密度。     

肿瘤坏死因子α在急性缺氧状态下对豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流的抑制作用

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）在正常和急性缺氧状态下对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用。方法急性分离成年豚鼠的心室肌细胞，采用全细胞膜片钳法记录L-型钙通道电流，并分别在正常和急性缺氧的条件下，给予不同浓度的TNF-α（100U／ml、300U／ml、500U／ml），观察其对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的作用。结果在全细胞封接后20min，L-型钙通道峰值电流分别是：正常对照组-471．948 306．587pA；不同浓度TNF-α组-497．698 296．686pA（100U／ml）、-471．894 366．758pA（300U／ml）、-503．988 396．958pA（500U／ml）（与正常对照组相比P〉0．05）；急性缺氧组-369．577 104．280pA（与正常对照组相比P=0．022）；急性缺氧＋不同浓度TNF-α组-268．445 124．112pA（100U／ml）、-190．588 102．281pA（300U／ml）、-87．666 70．670pA（500U／ml）（与急性缺氧组相比P值均〈0．05）。结论在正常条件下，TNF-α对豚鼠心室肌细胞的L型钙通道电流无明显影响，但在急性缺氧条件下，TNF-α可以增强缺氧对该电流的抑制作用。     

马来酸曲美布汀对结肠平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

目的研究马来酸曲美布汀对豚鼠结肠平滑肌细胞膜钙激活钾通道的影响。方法酶解法急性分离单个豚鼠结肠平滑肌细胞,利用膜片钳技术在全细胞模式下记录钙激活钾电流[IK（ca）],用含有IK（ca）特异激动剂NS1619的生理盐水灌流细胞,使结肠平滑肌细胞处于超极化状态,检测给马来酸曲美布汀浓度分别为1．19μmol／L、5．95μmol／L、11．91μmol／L后的结肠平滑肌细胞膜IK（ca）。结果浓度为1．19μmol／L、5．95μmol／L、11．91μmol／L的马来酸曲美布汀可抑制豚鼠单个结肠平滑肌细胞膜IK（ca）（P均〈0．01）,当阶跃刺激为＋80mv时,其分别为超极化状态组的（65．87±4．80）％、（48．02±2．39）％、（18．88±2．29）％（P均〈0．01）。结论马来酸曲美布汀能抑制豚鼠结肠平滑肌细胞钙激活钾通道的开放,使细胞兴奋性升高,且呈浓度依赖性,这可能是马来酸曲美布汀治疗肠易激综合征便秘症状的机制之一。     

不同浓度葡萄糖和游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞株L6细胞胰岛素敏感性和细胞内活性氧的影响

目的研究不同浓度的葡萄糖和游离脂肪酸（FFA）对骨骼肌L6细胞胰岛素敏感性及细胞内活性氧（ROS）的影响。方法L6细胞诱导分化成熟后,分为6组,以5mmol／L葡萄糖为低糖对照组,其中加0．3或1mmol／L的混合FFA为低糖低FFA或低糖高FFA组,以25mmol／L葡萄糖为高糖对照组,其中加0．3和1mmol／L的FFA的培养基为高糖低FFA或高糖高FFA组。干预48h,^3H—D葡萄糖摄取实验（加与不加100nmol／I,胰岛素37℃30rain）验证L6细胞胰岛素敏感性,经荧光探针H2DCFDA观察细胞内ROS含量的变化。结果在5mmol／L葡萄糖组,低糖对照组基础摄糖值为22777．6±6608．7,低糖低FFA组为26027．5±4085．7,低糖高FFA组为146805．1±21099．4。胰岛素刺激后,低糖对照组为76586．5±18450．1,低糖低FFA组为43738土9203．6,低糖高FFA组为32050．6±3362．3,较低糖对照组显著降低（P〈0．01）。在25mmol／L葡萄糖组,基础葡萄糖摄取量为11793．8±551．4,高糖低FFA组11887．3±2082．3高糖高FFA组为13886．1±3872．9,差别无统计学意义（P〉0．05）,但较低糖对照组显著降低（P〈0．01）．加入胰岛素刺激后,高糖对照组为42798．8±9441．5,高糖低FFA组为23946．9±3839．6,高糖高FFA组为13886．1±3872．9,各组之间差别显著（P〈0．01）。对细胞内R0s的研究发现,低糖低FFA组为2234．2±477．2,低糖高FFA组为1969．0±480．9,高糖对照组为1969．0土229．4,高糖低FFA组为2]84．5±734．2,高糖高FFA组为2571．3±96．7,可以显著增加的L6细胞内ROS,与低糖对照组（615．3±244．3）相比差别显著（P〈0．01）。除对照组之外的各组之间差别无统计学意义（P〉0．05）。结论高糖和高FFA可以诱导L6细胞出现氧化应激,同时高糖和高FFA是导致骨骼肌细胞胰岛素抵抗的重要原因之一。     

AngⅡ对人心房肌细胞膜钙通道电流的影响及替米沙坦的拮抗作用

目的观察AngⅡ对人心房肌细胞膜钙通道电流的作用,揭示其参与房性心律失常的电生理机制,为应用AngⅡ受体拮抗剂治疗房性心律失常提供实验依据。方法急性分离单个人心房肌细胞,采用全细胞膜片钳方法记录L型钙电流（ICaL）。实验分4组对照组,AngⅡ（0.1μmol/L）组,替米沙坦（0.01μmol/L）组,AngⅡ+替米沙坦组。结果与对照组相比,0.1μmol/LAngⅡ组使人心房肌细胞膜ICaL峰值电流密度显著增加（12.74±1.65vs-5.78±0.82pA/pF,P<0.05）。0.01μmol/L替米沙坦组对人心房肌细胞膜ICaL无显著影响（-5.70±0.79pA/pF）,但可拮抗AngⅡ的作用,AngⅡ+替米沙坦组的ICaL峰值电流密度（-7.38±0.91pA/pF）与AngⅡ组相比有显著差异（P<0.05）。结论AngⅡ显著增加人心房肌细胞膜ICaL峰值的电流密度。替米沙坦可拮抗AngⅡ对人心房肌细胞膜ICaL的作用。     

缺血再灌注期间不同时相氟比洛芬酯处理对乳鼠心肌细胞钠电流的影响

目的：研究缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）期间不同时相（缺血时、缺血后再灌时）氟比洛芬酯处殚对乳鼠心肌细胞钠电流的影响。方法：实验分为四组：1组（对照组）为体外培养乳鼠心室肌细胞;Ⅱ组（I/R组）为相同的细胞,缺血3小时,再灌注1小时;III组（氟比洛芬酯缺血时处理组）在I/R缺血时相加入氟比洛芬哺（0.15μM）;IV组（氟比洛芬酯缺血后再灌注时处理组）在I/R再灌注时相加入氟比洛芬酯（0．15μM）。采用膜片钳全细胞模式分别记录并比较四组的钠电流。结果：和I组相比,II组存每一指令电压上都增大钠电流;在测试电压为-20mV的条件下,钠电流峰值电流密度从-375．47±70．31（pA/pF）增至-557．11±12786（pA/pF）（n=5,P〈f0.05）;稳态激活半激活电压（V1/2）分别为-4281±1．21mV和-3149±2．40mV（n=5,P〈005）;稳态欠活半激活电压（V1/2）分别为-7424±5．89mV和-68．70±6．26mV（n=5,P〈005）;通道失活后恢复T分别为2569±19．47ms和7．534±3．24ms（n=5,P〈0．05）。III、IV组钠电流峰值电流密度从-375．47±70．31（pA/pF）分别降至-208．80±121．44和-278．91±188．26（pA/pF）（n=5,P〈0．05）;通道稳念激活V1/2分别为-40．89±9．81mV和-39．49±3．70mV（n=5,P〉O05）;稳态失活V1/2分别为74．45±5．02mY和-75494±3．32mV（n=5,P〉0．05）;通道失活后恢复T分别为24．98±16．41ms和26．30±11．82ms（n=5,P〉005）。III、IV组之间各指标间的差异无统计学意义。结论：I/R处土型可以增大钠电流的峰值电流,并使电压电流曲线下移;减慢通道的时间依赖性激活,促进通道的电爪依赖性失活,失活后恢复变快。而在I/R缺血和再灌注两个时相使用氟比洛芬酯均能有效阻制钠通道的这螳改变。     

膀胱内翻性乳头状瘤中EphA2蛋白、mRNA的表达及意义

目的观察膀胱内翻性乳头状瘤（IPB）组织中受体酪氨酸激酶（EphA2）蛋白、mRNA的表达,并探讨其意义。方法采用免疫组化sP法检测26例IPB（IPB组）、15例低级别膀胱移行细胞癌（BTCC组）和10例正常膀胱组织中的EphA2蛋白。采用逆转录实时定量PCR技术检测各组EphA2 mRNA的表达。结果IPB组、BTCC组EphA2蛋白的表达量（IA值）分别为13826±3996和13112±3587,与对照组的8364±3915相比,P均〈0．05;IPB组与BTCC组相比P〉0．05。以对照组为1,IPB组与BTCC组EphA2 mRNA表达分别上调（2．12±0．95）和（2,01±0．86）倍;IPB与BTCC组比较,P〉0．05。结论IPB组织中EphA2过表达,其可能促进了膀胱内翻性乳头状瘤的癌性转化。     

1，25-二羟维生素D3对高糖环境下人肾小管上皮细胞维生素D受体及血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的观察1,25-二羟维生素D,[1,25-（OH）2D3]对高糖状态下人近端肾小管上皮细胞（HK-2）维生素D受体（VDR）以及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）表达的影响。方法体外培养HK-2细胞,实验分为对照组（糖浓度5．5mmol／L）、甘露醇组（19．5mmol／L）、高糖组（糖浓度25．0mmoL／L）、高糖＋1,25-（OH）,D,组（浓度1．0×10^-6、1．0×10^-7、1．0×10^-8mol／L）和高糖＋1,25-（OH）2D3＋siRNAVDR干扰组,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测VDRmRNA表达,Westernblotting检测VDR蛋白表达,双荧光素酶报告基因系统检测VDR基因转录活性,放射免疫法检测AngⅡ含量。多个样本间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用g检验。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞中VDRmRNA、蛋白的表达及基因转录活性均明显降低（分别为1．34±0．22比2．47±0．31、0．51±0．06比1．14±0．13、0．51±0．21比1．42±0．28,均P〈0．05）。1,25-（OH）2D3上调高糖条件下HK-2细胞中VDRmRNA、蛋白的表达及基因转录活性,且呈浓度依赖性（分别为1．964-0．31比1．34±0．22、0．934-0．08比0．51±0．06、1．12±0．23比0．51±0．21,均P〈0．05）。与对照组相比,高糖使HK-2细胞分泌AngⅡ增加[（88±10）比（17±2）ng／L,P〈0．05]。1,25-（OH）2D3浓度依赖性下调高糖诱导的AngII高表达[（44±5）比（884-10）ng／L,P〈0．05]。利用RNA干扰诱导VDR基因沉默后,1,25-（OH）2D3不能下调高糖诱导的AngⅡ高表达[（87±12）比（88±10）ng／L,P〉0．05]。结论1,25-（OH）2D,可能通过VDR介导的方式负性调节高糖环境下人肾小管上皮细胞AnglI表达,从而对糖尿病肾脏疾病的进展起到延缓作用。     

HOLRBT治疗膀胱肿瘤疗效观察

目的观察经尿道钬激光膀胱肿瘤切除术（HOLRBT）治疗浅表性膀胱肿瘤的疗效。方法496例浅表性膀胱肿瘤患者,256例采用HOLRBT治疗（HOLRBT组）,240例采用经尿道膀胱肿瘤电切术（TURBT）治疗（TURBT组）。结果手术均获成功。HOLRBT组术中出血量（4．5±5．6）ml、膀胱冲洗时间（20±12）h、尿管留置时间（2．5±2．2）d、术后住院时间（3．0±1．2）d、术后1a复发率21．9％,TURBT组分别为（10．8±6．9）ml、（35±19）h、（4．0±2．5）d、（5．2±2．1）d、24．2％,以上指标两组相比,P均〈0．05。TURBT组中发生闭孔神经反射33例,膀胱穿孔4例;HOLRBT无闭孔神经反射发生。TURBT组仅85例（35．4％）例获得肿瘤分期,且都为较小的肿瘤;而HOLRBT组235例（91．8％）获得病理分期,两组病理分期获得率相比P〈0．05。结论HOLRBT治疗浅表性膀胱肿瘤,疗效满意。     

普鲁卡因胺、利多卡因和普罗帕酮对豚鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换尾电流的抑制作用

目的利用全细胞膜片钳技术观测Ⅰ类抗心律失常药物普鲁卡因胺、利多卡因、普罗帕酮对Na /Ca2 交换尾电流的影响.方法采用蛋白酶消化的成年豚鼠单个心室肌细胞及全细胞膜片钳技术,记录Na /Ca2 交换尾电流并观察药物对它的影响.结果 3种药物对Na /Ca2 交换尾电流的抑制均呈剂量依赖性,但抑制程度不同.10 μm、50 μm、100 μm的普鲁卡因胺使豚鼠心室肌细胞Na /Ca2 交换尾电流从对照值(142±13) pA依次降低至(132±11) pA、(120±12) pA、(96±13) pA,相同浓度的利多卡因使Na /Ca2 交换尾电流从对照值(155±10) pA分别降低至(150±9) pA、(141±9) pA、(132±9) pA,同样浓度的普罗帕酮使Na /Ca2 交换尾电流由对照值(151±8) pA分别降至(134±8) pA、(119±10) pA、(93±11) pA.结论Ⅰ类抗心律失常药物对心室肌细胞Na /Ca2 交换尾电流具有抑制作用,且不同Ⅰ类抗心律失常药物对Na /Ca2 交换尾电流的抑制程度不同.     

神经生长因子在多次盐酸灌注食管气道高反应豚鼠肺组织中的表达

目的观察多次盐酸灌注豚鼠食管对呼吸道黏膜内神经生长因子（nerve growth factor,NGF）物质表达的影响。方法将20只豚鼠按随机数字表法分为2组,每组10只。①模型组：用盐酸氯胺酮将豚鼠轻度麻醉,将5F胃管插入豚鼠食管至食管中下端,灌注含0．5％胃蛋白酶的盐酸（0．1mol／L,8滴／min,20min／d）,连续灌注14d;②对照组：用PBS代替盐酸灌注食管,方法同上。用免疫组织化学方法测定两组豚鼠肺组织NGF的免疫反应变化;用免疫印迹法（Western blotting）检测肺组织NGF的免疫反应变化;Metamoph图像分析系统对结果进行分析。结果免疫组织化学结果显示（染色反应强度用灰度值表示）：模型组豚鼠气管和细支气管黏膜内NGF物质阳性反应的平均灰度值明显地低于对照组[（108．46±9．89）vs（135．86±4．01）]（P〈0．01）。Western blotting显示NGF在模型组豚鼠的肺内平均相对光密度值明显强于对照组[（1．415±0．155）vs（0．550±0．039）]（P〈0．01）。结论多次盐酸灌注豚鼠食管后呼吸道黏膜内NGF物质表达明显增多,提示NGF可能参与胃食管反流性呼吸系统疾病的发病过程。     

多参数追加建议在胰岛素泵强化治疗中的应用

目的 评估采用多参数追加建议的持续皮下胰岛素输注（CSⅡ）系统在临床应用中的安全性和有效性,以探讨多参数追加建议的临床应用价值.方法 2012年5月至2013年7月,将来自国内三甲综合医院内分泌病房的158例糖尿病患者,按2∶1∶1的比例随机分配至3组：多参数追加建议的持续皮下胰岛素输注（BA-CSⅡ）组、普通的持续皮下胰岛素输注（CO-CSⅡ）组和每日多次皮下胰岛素注射（MDI）组,用χ^2检验、Mann-Whitney U检验、Kruskal-WallisH检验比较3组患者住院治疗期间的血糖控制情况、不良事件及胰岛素用量的差异.结果 BA-CSⅡ组患者的餐后血糖达标率为78.1％ （50/64）,显著高于CO-CSⅡ组[52.3％ （23/44）,χ^2=7.955,P＜0.05]和MDI组[50.0％（18/36）,χ^2=8.375,P＜0.05],且出院时的餐后血糖水平显著低于CO-CSⅡ组[（7.8±2.0）比（9.1±2.8） mmol/L,Z=-2.301,P＜0.05]和MDI组[（7.8±2.0）比（9.1 ±2.2）mmol/L,Z=-2.920,P＜0.05].BA-CSⅡ组患者的低血糖（≤3.9 mmol/L）发生率和高血糖（≥10 mmol/L）人均发生频次均少于其他两组（P＞0.05）.3组患者住院期间的日平均胰岛素用量,BA-CSⅡ组低于MDI组[（44±17）比（56±27）U,P＞0.05],CO-CSⅡ组显著低于MDI组[（39±12）比（56±27）U,Z=-2.690,P＜0.05].与人院日相比,BA-CSⅡ组及CO-CSⅡ组患者出院日的胰岛素用量减少,而MDI组用量增加,但3组间差异无统计学意义（均P ＞0.05）.结论 采用多参数追加建议的CSⅡ进行胰岛素强化治疗,有利于餐后血糖达标,且不会增加胰岛素用量,同时有利于减少血糖波动.对于糖尿病住院患者,多参数追加建议的CSⅡ治疗方式能更安全有效地控制血糖.     

中药胆宁片治疗胆囊胆固醇结石作用机制的实验研究

[目的]探讨胆宁片对胆固醇结石豚鼠胆汁中黏蛋白及血清IL-2水平的影响.[方法]雌性豚鼠60只,体重（300±20）g,随机分为空白组、模型组、胆宁片组和熊脱氧胆酸组,每组15只;除空白组外,采用“高胆固醇致石食饵诱发法”建立豚鼠胆固醇结石模型,并于造模成功后分别对各治疗组予药物干预,胆宁片组灌服胆宁混悬液0.52 g· kg-1·d-1,熊脱氧胆酸组灌服熊脱氧胆酸混悬液0.05 g·kg-1·d-1,模型组与空白组均灌服等容量的生理盐水,8周后观察各组豚鼠一般情况、胆汁中黏蛋白及血清IL-2水平.[结果]胆宁片可显著降低豚鼠胆固醇结石成石率,并能显著降低胆囊黏蛋白及血清IL-2水平（P＜0.05,P＜0.01）.[结论]胆宁片能直接调节胆囊黏蛋白等相关促成核因子,同时能通过调节血清中IL-2间接调控胆囊黏蛋白水平,从而调控成核过程,对胆囊胆固醇结石有一定的治疗作用.     

花生四烯酸乙醇胺对乳鼠心肌细胞外向钾通道电流的影响

目的研究内源性大麻样物质花生四烯酸乙醇胺(AEA)对乳鼠心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)及持续外向钾电流(Isus)的作用。方法体外培养乳鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳方法检测不同浓度的AEA对Ito及Isus的作用。结果20nmol/LAEA即可显著抑制心肌细胞Ito及Isus的电流密度(分别为16.13±3.31pA/pFvs14.48±1.97pA/pF,及11.17±3.25pA/pFvs10.16±3.21pA/pF;P均<0.01)。逐步增加AEA的浓度至100,500nmol/L及1,5,10μmol/L仍然对Ito及Isus有抑制作用,但对Ito电流密度抑制最多的是5μmol/LAEA,而对Isus电流密度产生最大抑制作用的AEA浓度为1μmol/L。结论AEA对体外培养的乳鼠心肌细胞的Ito及Isus具有抑制作用,这一作用在一定的药物浓度范围内随剂量增加而增加。     

巨噬细胞移动抑制因子对HL-1细胞T型钙电流的调控

目的 观察巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor,MIF）对心房肌细胞T型钙电流（T-type calcium channel current,ICa,T）的调控.方法 使用全细胞膜片钳和分子生物分析方法检测心房肌细胞ICa,T的表达.结果 在体外培养的心房肌细胞株（HL-1细胞）中,小鼠重组MIF（20、40 nmol/L,24 h）可明显抑制ICa,T的峰值电流,与对照组比较,差异均有统计学意义[峰值内向电流：（-17.5±2.9）pA/pF vs.（-27.9±3.4） pA/pF,P＜0.05;（-11.3±1.7）pA/pF vs.（-27.9±3.4）pA/pF,P＜0.01];并可损伤电压依赖的ICa,T激活,使T型钙通道α1G和α1H亚单位mRNA表达下调.而Src非特异性抑制剂genistein和特异性抑制剂PP1可逆转40 nmol/L MIF所致的ICa,T下调[genistein：（-11.3±1.7）pA/pF vs.（-16.1±0.8）,P＜0.05;PPI：（-11.3±1.7）pA/pFvs.（-19.0±3.2）pA/pF,P＜0.05].结论 MIF可能通过影响ICa,T参与心房颤动的病理过程,Src可能参与该信号转导途径.     

微电极阵芯片技术在心肌电生理研究中应用的可行性

目的探讨60极微电极阵芯片(MEA)技术在整体心脏、心肌组织片和培养心肌等电生理研究中的应用。方法①80只豚鼠,开胸取心脏并以2.5ml/min速度Langendorff灌流心脏20min,信号稳定后采样;②60只SD大鼠,开胸取心,剪取5mm×5mm大小的心脏组织片,置于MEA盘,台氏液间歇灌流5min,用5μV×1ms的刺激脉冲连续刺激,刺激间隔为1s,比较心房和心室组织片场电位(FPs)形态和传导时间;③20窝出生后3天以内的昆明小白鼠,消化分离心肌细胞,培养于MEA盘内,进行组织信号采样。结果①大鼠整体心脏灌流30～90min内能够记录到稳定的自主节律下的FPs信号,心室肌场电位时程(FPdur)210±78ms;心房肌FPdur164±58ms;房室传导时间320±150ms;并能记录到FPs激动顺序图。②心肌组织靶点取样,台氏液间歇灌流和电刺激下,组织的兴奋性可以稳定保持2h。心室肌组织片FPdur115.80±11.61ms,心房组织片FPdur83.71±6.48ms,刺激信号在心房组织片的传导时间66.46±6.73ms,心室组织片传导时间47.40±5.62ms;③小鼠乳鼠心脏原代培养心肌24h时后开始有散在、不同步的细胞克隆搏动和点状FPs信号,72h后细胞融合,开始记录到基本同步的群动和多位点FPs信号,培养心肌自发搏动频率150±100次/分。结论 MEA技术可以稳定记录小动物整体灌流心脏,心脏定点取样组织片,培养心肌细胞60极场电位和电传导特性。     

伊布利特对兔急性心肌梗死后梗死周边区心外膜心室肌细胞L型钙电流的影响

目的观察伊布利特对急性心肌梗死(AMI)后一周心室肌细胞L型钙通道电流(ICa-L)的影响。方法兔开胸,左前降支结扎造成AMI,1周后酶解分离梗死周边区心外膜心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录10-6mol/L伊布利特细胞外液(伊布利特组)对梗死周边区心外膜心室肌细胞ICa-L活性的影响,并与正常对照组(对照组)及AMI但未灌流伊布利特组(AMI组)比较。结果①AMI 1周时兔梗死周边区心室肌细胞ICa-L受到抑制,电流密度-电压曲线(I-V)上移,ICa-L电流密度峰值降低[-3.52±0.91 pA/pF(n=10)vs-5.68±1.53 pA/pF(n=10),P<0.05];伊布利特组电流密度峰值为-4.84±1.22 pA/pF(n=8),较AMI组显著增大(P<0.05),与对照组比较,虽有减小,但无差异(P>0.05)。②AMI组、伊布利特组ICa-L失活曲线明显左移,以AMI组左移更加明显,对照组半数失活电压(V0.5)为-32±4 mV(n=10),AMI组V0.5增加为-46±7 mV(n=10,P<0.05),伊布利特组V0.5为-36±6mV(n=8),与对照组比较无差异(P>0.05)。结论AMI后1周梗死周边带心室肌细胞L型钙通道受阻滞,伊布利特对缺血引起的ICa-L的异常有明显改善作用。     

罗格列酮对四氧嘧啶介导的糖尿病家兔心室肌细胞L型钙通道电流的影响

目的探讨罗格列酮对家兔心室肌细胞L型钙通道电流(I_(CaL))的影响。方法四氧嘧啶建立糖尿病家兔模型后,利用酶解法急性分离心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术观测糖尿病和罗格列酮对心肌细胞I_(CaL)的影响,并与正常家兔进行比较。结果 (1)正常组家兔心室肌细胞I_(CaL)电流密度[(-8.83±2.31)pA/pF]大于糖尿病组[(-8.84±1.98)pA/pF],但差异不具有统计学意义。(2)给予罗格列酮后正常和糖尿病家兔组心室肌细胞I_(CaL)[正常组:基线电流密度(-8.83±2.31 pA/pF)大于5 min电流密度(-4.17±1.89 pA/pF)和10 min电流密度(-5.54±1.63)pA/pF,糖尿病组:基线电流密度(-8.84±1.98)pA/pF大于5 ml‘n电流密度(-4.97±1.15)pA/pF和10 min电流密度(-3.89±1.06)pA/pF],各时段差异均有统计学意义(各组P<0.05)。(3)空腹血糖[(7.65±1.60)mmol/L]小于建模48 h[(17.72±9.15)mmol/L]及1周后空腹血糖[(20.84±9.48)mmol/L]。各时段胰岛素水平[空腹(23.45±9.22)mmol/L,48 h后(22.69±8.94)mmol/L,1周后(21.65±11.91)mmol/L]差异均无统计学意义(各组P>0.05)。结论正常家兔组I_(CaL)电流密度与糖尿病家兔组相似,提示糖尿病对心肌细胞I_(CaL)无明显影响;罗格列酮对心脏的作用不依赖于高血糖存在与否,提示罗格列酮可能通过某些与胰岛素水平有关的特定机制作用于心肌细胞;四氧嘧啶所致糖尿病模型是一种不完全等同于1型及2型糖尿病的独特模型,但去除了胰岛素抵抗的影响。该模型可以用来作为高血糖对心肌细胞离子通道影响的研究载体。     

重组人脑钠肽对兔缺血再灌注后心室肌细胞L-钙离子通道电流的影响

目的研究重组人脑钠肽（rhBNP）对缺血再灌注后心室肌细胞L-钙通道电流（ICa-L）的影响,并探讨其细胞学离子机制。方法 45只新西兰大耳白兔随机分为缺血再灌注动物模型组（I-R组,n=15）、rhBNP治疗组（n=15）和假手术组（n=15）。采用酶解方法分离缺血部位心室肌外膜单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录ICa-L。结果①心律失常发生率：与I-R组比较,rhBNP组兔室速、室颤发生率及持续时间明显下降,而且其心律失常的评分也明显低于I-R组[（2.6±0.7）vs.（3.6±0.8）,P〈0.05];②电流密度峰值：I-R组、对照组、rhBNP组ICa-L电流密度峰值（0mV）逐渐升高,分别为（-4.34±0.92）pA/pF、（-3.42±0.76）pA/pF、（-3.13±1.22）pA/pF。结论 rhBNP可降低心肌缺血再灌注期间心律失常的发生率,心肌缺血再灌注后ICa-L明显增高,rhBNP可使ICa-L下调,逆转电重构。