红细胞稀有血型筛选、建库与应用

目的 通过在献血者中筛选稀有血型,获得针对高频血型抗原组表达阴性的稀有表型,解决临床稀有血型血液供应困难的难题.方法 在国家“十一·五”和“十二·五”计划项目中,通过国内13个省级血液中心的联合,利用血型血清学方法和分子生物学方法,我们开展了针对Duffy,Kell,Kidd,MNS,Gerbich,Diego,Yt,Lutheran,Colton,Ok以及ABO,Rh血型系统中高频抗原的筛选.在血清学筛选试验中,采用了适应于高通量的微量板法和改良的抗球蛋白法.这些方法在简化经典的间接抗蛋白试验的同时,又适用于血型自动化检测的需术.在这些血型系统稀有血型筛选中,有10多种稀有血型是通过筛选稀有等位基因的方法来完成的.通过组建多个多重PCR体系,我们成功地完成了针对k,s,Fy(a-),Co(a -),Yt(a-),Di(b-),Kp(c-),Kp(b-),Js(b-),Ok(a-)稀有等位基因的检测.由于单个实验室通常无法同时获各类稀有表型DNA作为分子诊断的实验对照,我们采用了定点诱变技术(SDM),通过环状诱变PCR方法,制备了各种稀有表型等位基因突变点片段,以用于分子生物学方法筛选稀有血型的对照.结果 在2008～ 2010年期间,参于项目的各单位共筛选献血者稀有血型135多万人次.其中北京、上海、广州、天津、武汉、浙江、江苏、成都血液中心筛选汉族献血者130万人次,新疆、内蒙、广西、昆明血液中心筛选少数民族献血者5万多人次.共获得各类稀有血型1000多例.其中包括极为罕见的Ko、Rhnull、Wr(b -)等稀有表型.众多新的血型等位基因和存于中国人群中的特殊遗传模式被发现.同时,也首次在中国人群中发现Yt(a-),Co(a-),Lu(a-b-)等稀有表型.2011年1月,中国稀有血型专业网站开通,通过信息发布、在线查询和BBS论坛讨论,进一步有益于稀有血型的信息交流与技术的推广.在最近2年的临床稀有血型输血应用中,共有＞4000 ml的稀有血液被用于临床抢救与治疗.结论 开展稀有血型筛选并建立全国性的稀有血型信息网络对解决临床稀有血型输注困难是有效的途径.扩大筛选的范围与增加筛选与验证的体系有助于中国稀有血型库的壮大.     

Sp295用自动分析仪测定红细胞表型,以满足致敏病人的需要

背景 常要求血液中心向致敏的病人在紧急情况下提供稀有血型红细胞(RBC)制品,血库需有充足的资源来满足需要,其策略有检测供者稀有表型和建立稀有血型库。作者的目的是探讨稀有血型库在供应稀有血制品中的作用。方法 1999年共提供了165845份确定表型的RBC,为了更有效地利用有限的稀有抗血清,预先测试了供者的OR1R1、R2R2、ROr和rr型,然后再测定D、C、c、E、e、Cw和K抗原,并使用PK200 Olympus分析仪。其它血型用半自动分型仪(Megaflex-TECAN)测定。当发现合适的稀有血型供者时,通知并鼓励该供者定期献血,并纳入稀有血型供者名单。因此,稀有血型供者到血液中心捐献RBC,可直接贮存于稀有血型库。作者还建立了一个专门的募捐计划动员     

南阳市RhD/C/c/E/e血型分型库建立的意义及应用

目的:了解南阳市无偿献血者Rh血型分型规律,建立Rh D/C/c/E/e抗原阴性供者库,为临床急救用血患者提供帮助,保障输血安全。方法:采用血型血清学方法对2014年南阳市81 462例无偿献血者血标本进行Rh D血型鉴定;经初筛和确证试验后,对Rh D阴性的血标本进行Rh E/e/C/c血型分型;采取统一的标准,对献血员详细资料认真登记;采用计算机管理系统,建立无偿献血者Rh E/e/C/c血型分型资料库及实物库。结果:Rh D阴性献血者300例(0.37%),Rh抗原表型为ccdee和Ccdee者占83.0%。结论:南阳市人群中Rh D阴性血型在所占的比例大约为4%,Rh D阴性献血者Rh E/e/C/c血型分型情况为:ccdee(50.67%)Ccdee(33.00%)ccd Ee(5.67%)CCdee(5.33%)Ccd Ee(5.33%)。建立Rh E/e/C/c血型分型库对临床输血具有深远的意义。     

多重PCR筛选新疆少数民族Fy(a-)、s-稀有血型

目的通过分子生物学方法,筛选新疆少数民族献血者样本中Fy(a-)、s-表型,了解这2种稀有血型抗原的分布情况,以解决Fy(a-)、s-稀有血型患者用血问题。方法采用多重PCR体系,以每5份标本混合检测方式,对1 020份无血缘关系健康少数民族献血者的血液DNA标本进行Fyb和S血型抗原基因分型。通过PCR-SSP验证方法,分别检测多重PCR中含有Fy(a-b+)/Fy(a+b+)或S+s-/S+s+阳性标本的高频等位基因Fya或s,从而获得稀有血型Fy(a-b+)或S+s-。结果在1 020例献血者中筛选出稀有血型Fy(a-)89例,s-46例。结论新疆少数民族献血人群中Fyb和S等位基因频率分别为29.66%和21.32%,通过筛选获得的稀有血型数据,为临床输注配合性血液提供了参考资料,并进一步丰富了中国稀有血型库。     

北京地区献血人群Duffy血型表型筛查及稀有血型库的建立

目的调查Duffy血型表型在北京地区的分布频率,将筛选出的稀有血型红细胞甘油化冷冻保存,并建立稀有血型献血者档案资料,解决Duffy稀有血型患者输血难题。方法收集北京地区无血源关系健康汉族献血者的血液标本1 752份,少数民族献血者标本274份,外籍献血者标本137份,利用微柱凝胶法鉴定Duffy血型表型,PCRSSP检测Duffy血型基因,并随机选择17例做Duffy血型基因编码区域序列测定,以检测表现型与基因型符合性。结果1 752名汉族献血者,274名少数民族献血者,137名外籍献血者的Duffy血型各表型分布分别为:Fy(a+b-)表型1 530例(87.33%)、227例(82.85%)、83例(60.58%),Fy(a+b+)表型213例(12.16%)、42例(15.33%)、32例(23.36%),Fy(a-b+)表型9例(0.51%)、5例(1.82%)、20例(14.60%),Fy(a-b-)表型0、0、2例(1.46%)。FYA基因频率分别为93.41、90.51、72.26,FYB基因频率分别为6.59、9.49、26.28,FY基因频率0、0、1.46。汉族与少数民族献血者,中国与外籍献血者表型频率比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。17例FY基因编码序列部分测序结果除2例Fy(a-b-)由于存在FYB基因外,其余标本与血清学、PCR-SSP法均符合。FYA与FYB基因的不同在于FY基因编码区域第131位核苷酸碱基为A或G。结论北京地区汉族献血者Fya阴性表型频率与国内报道相似,而少数民族及外籍献血者较高,在北京地区建立Fya阴性稀有血型供者库,以便解决稀有血型患者紧急输血问题,对提高输血安全具有重要意义。     

63039例无偿献血者Rh血型常规检测结果的分析

目的调查凉山彝族自治州(以下简称凉山州)无偿献血者RhD阴性献血者Rh血型抗原表型分布状况。方法对该站采集的63 039例无偿献血者血液进行RhD阴性筛查,对初筛阴性血用抗人球蛋白试剂确认并分型,然后进行统计分析。结果63 039例血液样本经全自动血型仪用盐水法初筛为阴性后,再经抗人球蛋白鉴定199例Rh阴性(0.32%),A型61例,B型44例,O型74例,AB型20例。共检出Rh血型系统6种表型,其中以dccee最常见,为43.22%,由高到低依次为dCcee、dCCee、dccEe、dCcEe、dccEE。结论通过筛查凉山州Rh血型分布,建立RhD阴性献血者档案,有利于及时招募献血者提供稀有血型血液,保障血液供应。     

乌鲁木齐地区少数民族无偿献血者Yt~b、Kp~c、K稀有血型抗原筛选

目的了解乌鲁木齐地区少数民族献血者Yt和Kell血型系统稀有抗原的分布情况。方法采用2套多重PCR体系,以每5份DNA标本混合检测方式,对1 020份无血缘关系健康少数民族献血者的血液DNA标本进行Yt~b、Kp~c和K稀有血型抗原基因分型。通过单一PCR-SSP方法,分别检测多重PCR中含有Yt~b、Kp~c和K阳性标本的高频等位基因Yt~a、Kp~b或k。结果在1 020例少数民族献血者中,检出90例Yt~a/Yt~b,4例Yt~b/Yt~b,未检出Kp~c阳性个体,检出24例K阳性标本均为杂合子K/k,Yt~b、K稀有血型抗原基因频率分别为4.8%和1.18%。结论通过筛选获得的稀有血型数据,为本地稀有血型库的建设、临床稀有血型患者输注配合性血液提供了重要参考资料。     

顺德地区RhD阴性供者信息库的建立与临床应用

目的分析本地区RhD阴性血型分布状况,创建RhD阴性供者信息库,合理制备和保存RhD阴性成分血。方法采集无偿献血者标本,用血型血清学方法筛选RhD阴性供者,并进行RhD阴性鉴定和CcEe表型分型,创建RhD阴性供者信息库。按计划制备并用深低温等技术保存RhD阴性成分血。结果1998年10月～2008年12月共筛查无偿献血者147464例,最后鉴定为Rh（D）阴性供者340例（0.23%）。其中A型92例（27.06%）;B型86例（25.29%）;0型138例（40.59%）;AB型24例（7.06%）。表型ccdee和Ccdee占84.41%。10年向临床供应RhD阴性血363U。结论建立RhD阴性供者信息库,为输注RhD阴性血的患者,特别是已产生同种抗体患者,提供RhD和CcEe表型相配合的供者血液,有效预防因Rh抗原同种免疫反应所致的各类溶血性输血反应,提高血液输注的疗效。     

Rh血型表型库的建立及在临床输血中的应用

目的建立Rh血型表型数据库,应用于临床。方法随机选择南宁市无偿献血者39785名,进行Rh血型系统的C、C、D、E、e抗原检测;采用计算机管理,录入献血者的详细资料,建立Rh血型表型数据库。结果南宁市人群ABO血型比例分别为A（22．64％）、B（25．84％）、O（46．72％）、AB（4．80%）,Rh血型中CCDee最多见,其后依次为CcDEe、CcDee、ccDEE等;Rh（D）阴性265人,占0．9％。结论建立Rh血型表型数据库,对于保证合理用血及应急供血具有重要的临床意义。     

唐山地区无偿献血者Rh血型表型调查

目的 对唐山地区无偿献血者进行Rh血型表型检测,成立Rh血型表型信息库应用于临床.方法 对20 122例随机无偿献血者血液标本进行RhD阴性及阳性检测,并进行Rh血型系统的C,c,D,E,e抗原分型.结果 唐山市无偿献血者Rh血型中CcDEe 及CCDee最多见.结论 对唐山地区无偿献血者Rh血型表型调查,建立Rh血型表型数据库,对于保证临床合理用血及应急供血具有重要的意义.     

应用多重PCR技术筛选中国新疆少数民族Di~(b-)、Co~(a-)稀有血型

目的:探讨中国新疆少数民族献血人群中Diego和Colton血型系统稀有抗原的分布情况。方法:采用多重PCR体系,以每5份标本混合检测方式,对1 020份中国新疆少数民族随机献血者的血液DNA标本进行Di~a和Co~b血型抗原基因分型。通过PCR-SSP验证方法,分别检测多重PCR中含有Di~((a+b-))/Di~((a+b+))或Co~((a-b+))/Co~((a+b+))阳性标本的高频等位基因Di~b或Co~a,以获得稀有血型表型Di~(b-)、Co~(a-)。结果:在1 020例献血者中筛选出Co~(b+)12例,Di~((a+b+))45例、Di~((a+b-))1例。结论:中国新疆少数民族献血人群中Di~a和Co~b频率为2.30%、0.59%,通过筛选获得的稀有血型数据,为临床输注配合性血液提供了参考资料,并进一步丰富了中国稀有血型库。     

上海地区人群中部分稀有血型筛选

目的了解上海地区人群中部分稀有血型的频率和分布情况,用于解决临床上稀有血型的用血问题。方法利用稀有单克隆、多克隆抗血清,对Kell血型系统的K0,Miltenberger血型系统的Mur ,Duffy血型系统的Fya-,高频率抗原中的Lan-、Vel-进行筛选;用2 mol/L尿素进行Kidd血型系统的Jk(a-b-)表型筛选。筛选方法包括试管法间接抗人球蛋白试验(IAT),U型96孔微量板IAT和U型96孔微量板盐水直接离心法试验。结果从24 093名献血者中发现1例K0表型;在2 970名献血者中检出15例Mur ;从200名献血中,检出1例Fya-;从6 153名献血者中发现2例Vel-;在300名献血者中发现了1例Lan-;在102 760名献血者中,成功检出4例Jk(a-b-)。结论Mur 、Lan-、Jk(a-b-)表型频率明显高于白种人;Fya-表型频率低于白种人。     

云浮地区无偿献血者RhD阴性血型库的建立与临床应用

目的了解云浮地区无偿献血者Rh血型分布规律,建立无偿献血者RhD阴性血型库,以满足临床需求,保障输血安全。方法采用RhD初筛试验及确证试验对2005年1月至2009年12月共87 000例无偿献血者血标本进行RhD血型鉴定,经初筛和确证试验为RhD阴性的血标本用抗-C、抗-c,抗-E、抗-e进行Rh血型抗原分型;并建立RhD阴性献血者资料库,采用计算机管理系统对资料库定期进行更新和维护;对确认为RhD阴性的血液分别制备成悬浮红细胞、新鲜冷冻血浆,普通冷冻血浆,冷沉淀,浓缩血小板等血液成分并贮存及时应用于RhD阴性受血者。结果经RhD初筛试验及确证试验鉴定为RhD阴性献血者235例(0.27%),其中O型93例(39.57%),A型65例(27.66%),B型62例(26.38%),AB型15例(6.38%);Rh抗原表型为ccdee和Ccdee者占84.26%;5年来共向临床RhD阴性受血者供应RhD阴性血液248 U,未发生溶血性输血不良反应及产生同种抗体。结论建立RhD阴性献血者资料库,提供Rh血型抗原表型相配合献血者的血液,不仅可有效预防溶血性输血反应,而且可以避免产生同种抗体,并提高血液输注的疗效;还可为云浮地区科学、合理地开发和利用血液资源,确保临床用血的需要和安全发挥更为重要的作用。     

天津市滨海新区Rh+无偿献血者Rh血型表型的分布调查

目的 探讨天津市滨海新区Rh+献血者Rh血型表型的分布情况,建立Rh+血型表型数据库,确保临床输血安全,减少输血不良反应的发生.方法 采用简单随机抽样法选择2013年1月至2015年12月天津市第五中心医院输血科留存的2 672份Rh+库存悬浮红细胞为研究对象.研究对象纳入标准:①所有悬液红细胞均来自天津市滨海新区中心血站;②血液经Rh系统中抗-D检测,确定为Rh+血型;③血液入库时,严格核对运输条件、物理外观、血袋封闭及包装、标签等,均应符合血液入库标准.采用微柱凝胶法进行Rh血型系统的抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e检测,并根据抗原检测结果计算Rh血型各表型频率.结果 本组2 672例Rh+无偿献血者的Rh抗原中,按照抗原阳性率由高至低排序,依次为抗-D(100.0％)、抗-e(90.8％)、抗-C(86.7％)、抗-c(58.2％)及抗-E(48.8％)抗原.本组2 672例Rh+无偿献血者中,共检测出9种Rh血型表型,按照抗原频率由高至低排序,依次为CCDee (40.5％)、CcDEe(35.5％)、CcDee(9.4％)、ccDEE(9.2％)、ccDEe(4.1％)血型表型,其他4种表型仅占1.3％(35/2 672).结论 天津市滨海新区Rh+无偿献血人群的Rh血型表型以CCDee为主.建立Rh+血型表型数据库,可为临床及时提供表型相合的Rh+血液,防止由于Rh血型系统不合引起的输血反应,确保临床输血安全.     

稀有血型血液的国际互助国际输血协会稀有血型献血者专题委员会的报告

前言 稀有血型血液(简称稀有血)的特异性很强,虽需求甚少,一旦在本地满足不了这种特殊血型病人的需要,可寻求国际互助,以确保稀有血的供应。国际输血协会(ISBT)稀有血型献血者专题调查委员会的建立,推动了稀有血国际互助的过程,并制定了切实可行的血液服务方针。     

1例类孟买血型的血型血清学鉴定

<正>孟买型(Bombay phenotype)血型是Bhende于1952年发现,1961年Levine又发现了类孟买型(para-Bombay phenotype),这两种稀有血型的血清学特点是在其表型的红细胞上完全或部分缺失H抗原[1]。在上海血液中心学习期间收到来自乌鲁木齐血液中心血液标本1例,疑似类孟买血型,应用血清学方法鉴定其血型。目前国内分布类孟买血型的报道的频率为:福建为1/8500,北京为1/102万[2,3]。其血清     

周口地区RhD阴性献血者血型抗原分析

周口地区2002—10／2007—12无偿献血97341人次，共鉴定出184名RhD阴性血型献血者。我们结合ABO血型对这些献血者的其他Rh血型抗原加以鉴定和分析，并结合ABO血型分布进行统计分析，以掌握其分布规律，指导对稀有Rh血型的保存和实用型稀有血型库的建立。     

采供血区域无偿献血者RhD阴性血型库的建立与临床应用

目的了解奉节县和巫山县地区无偿献血者RhD血型分布规律,建立无偿献血者RhD阴性血型库,以满足临床需求,保障输血安全。方法采用RhD初筛试验及确证试验对2004年3月15日至2011年6月30日,共103例无偿献血者血标本进行RhD血型初筛和确认鉴定,并建立了RhD阴性献血者资料库,采用纸质记录,计算机管理系统记录,对资料库定期进行更新和维护;与献血者常保持联系和沟通,一旦医院需要和血站预约后,便和献血者进行联系,请他们来献血,邀请的献血者采用先近后远的原则,采集的血液经初复检合格后再发往所需的医疗机构。结果经RhD初筛试验及确证试验鉴定为RhD阴性献血者,7年间49 000人次,再次献血30%(49 000～14 700)初次献血者34 300人,共103例,占献血人次的3‰。其中O型43例(41.7%),A型28例(27.2%),B型24例(23.3%),AB型8例(7.70%);7年间向临床RhD阴性受血者供血9 400mL,未发生溶血性输血不良反应及产生同种抗体。结论建立RhD阴性献血者资料库,提供RhD血型抗原表型相配合献血者的血液,不仅可有效预防溶血性输血反应,而且可以避免产生同种抗体,并提高血液输注的疗效;还可以为采供血辖区科学、合理地开发和利用血液资源,确保临床用血的需要和安全发挥更为重要的作用。     

RhD阴性血型抗原分析在临床输血安全中的应用研究

目的从临床输血安全的研究角度,实施有效的管理和应用,指导对RhD阴性血型稀有血液资源的保存与实用性稀有血型库的建立。方法采用瓷板法对RhD抗原进行初筛,RhD初筛阴性的血液标本,用间接抗人球蛋白法(IAT)进行确认试验;RhD确认阴性的试验标本再进行吸收和放散试验;再用盐水试管法对RhC、Rhc、RhE和Rhe抗原的鉴定。结果从165 041名献血者初筛出651名RhD抗原阴性者,其中RhD阴性抗原确认为633名,弱D型为18名,在633名RhD抗原阴性献血者中,ABO血型分布为:O型(36.81%)(A型(30.49%)>B型(26.07%)(AB型(6.63%);RhD阴性血型抗原表现型以ccdee(59.08%)和Ccdee(30.96%)居多,其次为CCdee、ccdEe、CcdEe、CCdEe、CcdEE和ccdEE表现型,未见CCdEE表现型。从整体随机抽取确认为阴性的316名献血者中共检测出DEL型71名,所占比例为22.47%。结论把O型CCdEE和ccdEE表现型红细胞,在工作中发现后及时冻存并在临床上针对使用,在建立使用型稀有血型库和解决临床对特殊血型的需求具有实际的临床应用意义。     

罕见抗-Di~b母婴血型不合配合型血液筛选及家系调查——附一例报告

目的诊断抗-Dib导致的母婴血型不合,筛选稀有Di(b-)血液并做家系调查。方法对患儿进行直抗试验,放散试验及游离试验,对产妇进行不规则抗体筛选及鉴定并检测其红细胞主要血型抗原;使用稀释的抗-Dib利用48孔微孔板以试管法间接抗球法从献血者和产妇亲属中筛选Di(b-)血液。结果产妇为Di(b-)稀有血型,产生了抗-Dib导致新生儿溶血病;从345名献血者和产妇亲属中各筛选到1例Di(b-)稀有血型,产妇亲属为患儿献血,患儿康复。结论建立了1种相对简便的间接抗球试验大规模筛选稀有血液的方法,诊断了抗-Dib母婴血型不合新生儿溶血病,为临床提供了稀有的Di(b-)血液。