戊型肝炎病毒IgG抗体诊断试剂盒的研制及初步应用

目的 应用大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原建立HEV IgG抗体诊断(ELISA)试剂盒.方法 应用大肠杆菌表达的具有戊型肝炎主要抗原表位的表达蛋白HEV ORF23作为包被抗原,建立检测血清中抗HEV IgG的间接ELISA试剂盒.通过HEV IgG试剂盒对100份戊型肝炎患者血清和150份正常人阴性血清测定结果进行比较,评价本试剂盒的特异性、敏感性及稳定性.另选临床500份肝炎患者血清进行检测,评价本试剂盒的临床应用价值.结果 建立的抗HEV IgG间接ELISA试剂盒特异性、敏感性均为100%,重复性较好,在4℃至少可稳定存放6个月,与同类试剂的符合率为95%以上.500份血清样本中,戊型肝炎患者150例,检出HEV145份,阳性符合率为96.67%.结论 应用大肠杆菌表达的HEV重组抗原建立的检测试剂盒对血清抗HEV IgG的检测具有良好的特异性和敏感性,在戊型肝炎的临床诊断和流行病学调查中具有潜在的应用价值.     

应用TP-ELISA与RPR法检测吸毒人群梅毒抗体

目的通过TP-ELISA(梅毒-酶联免疫试验)、RPR(梅毒快速血浆反应素试验)、TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)等三种方法检测吸毒人群的梅毒抗体,了解TP-ELISA试剂的敏感性和特异性及吸毒人群梅毒的感染情况。方法使用TP-ELISA和RPR两种方法对454份吸毒人员的血清标本进行梅毒抗体检测,对其中一种或两种方法检测阳性标本用TPPA法进行确认。结果TP-ELISA检出阳性标本33份,RPR检出阳性标本17份,阳性率分别为7.26%和3.74%,两种方法的阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。经TPPA检测符合率达到100%。结论TP-ELISA试剂的检出率明显高于RPR试剂,其特异性及敏感性较高,重复性好,操作方法简便,通过酶标仪直接读取数据,适用于大规模的流行病学调查和血站献血人群的筛查。     

可提取核抗原抗体检测的性能验证

目的 可提取核抗原抗体(ENA)的性能验证.方法 对免疫印迹法检测的可溶性核蛋白抗体重复性和准确度进行评价.批内重复性验证:用6份特征性患者血清样本(5份阳性,1份阴性)对同一批号的产品进行检测,每份血清检测5次,比较阳性血清检测的结果,要求特异性抗体检出结果基本一致,阴性血清检测的结果为阴性;批间重复性验证:在3d内,用6份特征性患者血清样本(5份阳性、1份阴性)对同一批号的产品进行检测,每份血清每次复管检测1次,统计其阴阳性符合率;批批重复性验证:用6份特征性患者血清样本(5份阳性、1份阴性)对近3个月内所有不同批号的试剂进行检测,统计1年内所检测不同批号试剂的阴阳性符合率;阴性、阳性符合率:将100份已检测过的患者标本,其中阴性50份,阳性50份,重新检测1次,分别统计阴性、阳性重复检测结果的一致率.准确度验证:统计分析近3年参加卫生部临床检验中心及其他单位组织的室间质评结果与本室检测结果的阴性和阳性符合率.结果 批内、批间、批批及100份患者标本的阴性、阳性符合率均为100％.结论 本室免疫印迹法检测可溶性核蛋白抗体的重复性、准确度能满足实验性能验证的要求.     

IgM抗体捕捉ELISA法对脊髓灰质炎快诊的探讨

本文应用IgM抗体捕捉ELISA法,检测脊髓灰质炎(下称“脊灰炎”)患者血清标本112份,IgM阳性率为50.9％,31份双份血清同时进行中和试验,阳性率70.9％,62例有粪便病毒分离结果,阳性率54.8％;IgM分型与分离病毒中和定型的符合率92％(23/25),阳性率与取血的病日和血清稀释度相关。用“脊灰炎”口服三价疫苗(下称 TOPY)进行初免和加强免疫的婴儿,其IgM阳性率分别为84％和45.7％。初步认为本法特异性较高、有一定敏感性、需时短、操作简便,可作为脊灰炎的早期诊断,但其敏感性需进一步提高。     

部分国产艾滋病病毒抗体检测试剂临床应用质量评价

目的　为掌握国产艾滋病病毒（ＨＩＶ） 抗体筛选酶免试剂的实际应用状况,对８ 种主要的国产ＨＩＶ抗体筛选酶免试剂进行了临床应用质量评价。方法　以一种进口ＨＩＶ 抗体筛选酶免试剂为参比,用８ 种考评试剂对２００ 份标本进行了统一的检测。２００ 份标本包括１００ 份经过确认的ＨＩＶ抗体阳性、阴性、可疑标本和１００ 份新疆吸毒人群的血清标本。结果　参比试剂可以检出全部７４ 份阳性标本,敏感性为１００ ％ ,而考评试剂有６ ～１８ 份不等的假阴性结果,敏感性为８１．１％ ～９１．９％ 。假阴性结果主要发生于来自吸毒人群的ＨＩＶ 抗体弱阳性标本。考评试剂的特异性相对较好,在１０７ 份阴性标本中,参比试剂将２ 份错判为阳性,特异性为９８ ．１ ％ ,考评试剂有０～８ 份标本错判为阳性,特异性为９２．５ ％ ～１００％ 。结论　考评试剂的主要问题是敏感性低,这可能与检测原理是间接法、抗原组成不全面、反应条件不合理等因素有关。     

2种登革热抗体检测试剂应用评价

[目的]探讨酶联免疫吸咐试验(EIJSA)、快速免疫层析法(ICT)检测试剂检测登革病毒(DV)抗体的敏感性、特异性及优缺点。[方法]用ELISA及ICT试剂同时检测来自登革热疫区入境人员血清标本的DV-IgM、IgG抗体,比较检测结果。[结果]用ELISA检测91份来自登革热疫区但无登革热体征的入境人员血清DV-IgG抗体,阳性59份,阳性率64．8％；对59份DV-IgG抗体阳性标本采用ICT法检测DV-IgM、IgG抗体,结果检出4份DV-IgM阳性,未检出DV-IgG阳性。ICT法检测181份血清标本DV-IgM、IgG抗体,检出12份DV-IgG阳性,阳性率6．63％；2份DV-IgM阳性,阳性率1．10％；其中44份血清标本采用ICT试剂不同批号检测DV-IgM、IgG抗体,批号为10014c- 12405的检出DV-IgM阳性7份,未检出DV—103阳性；批号为10014c一24505的检出4份DV-IgG阳性,1份DV-IgM阳性。[结论]2种试剂的敏感性和特异性及不同批次之间的稳定性有待进一步论证。     

几种国产HIV抗体酶免法检测试剂的质量评价

目的 考察国产艾滋病抗体酶免法试剂盒的质量，为部队选择质量好的艾滋病诊断试剂盒提供依据。方法 对7种主要的国产人免疫缺陷病毒(HIV)抗体酶免法试剂盒进行质量考核。以1种进口HIV抗体酶免法试剂为参比试剂，用7种考评试剂对300份血清标本进行了统一的检测。300份血清标本都经过免疫印迹方法确认，其中包括国家艾滋病参比实验室提供的50份血清和本实验室的250份血清。结果 参比试剂可以检测出全部125份阳性血清，敏感性为100％；国产试剂A、B、C、D和E可以检测出全部125份阳性血清，敏感性为100％；国产试剂F和G可以检测出124份阳性血清，敏感性为99．3％。在153份阴性血清中，参比试剂将1份错判为阳性，特异性为99．3％。国产考评试剂有1-6份错判为阳性，特异性为96．1％。99．3％。结论 国产酶免疫法HIV抗体检测试剂大部分已经达到或接近进口试剂质量水平，可以作为部队艾滋病初筛试验的诊断试剂盒。     

甲型病毒性肝炎的早期诊断:ELISA法检测特异性IgM抗体的研究

本文采用一种ELISA法检测IgM抗-HAV。当在本实验系统中加入2-ME处理的阳性血清或阳性血清结合后再用羊抗人IgM进行阻断试验,结果均可使其OD值下降约78%;甲肝流行点急性期血清IgM抗-HAV检出率高达92.3%(48/52),而恢复期血清仅达17.1%(7/41);11份急性乙肝和33份脐血清检测结果均为阴性;本法与Abbott HAVAB-M试盒检测结果符合率达86%;若以Abbott RIA法为标准,本法的敏感性和特异性分别为91.2%和80%,且重复性良好,操作简便,成太低和无放射性危害等优点。     

钩端螺旋体不完全抗体检查法的建立和应用

在本研究中,我们对两种方法即Coombs试验和间接血凝试验在诊断钩体病上的敏感性和特异性做了比较。共检查了110份血清。其中95份钩体病人血清、10份建康人血清和5份其它病的病人血清。结果证明Coombs试验比间接血凝试验有更高的敏感性,经统计学处理二者有极显著差别(p相似文献   

反向被动血凝抑制法用于流行性出血热血清抗体分型的试验

本文报告了用反向被动血凝抑制(RPHI)法进行流行性出血热血清抗体分型的实验结果。用该法共检查福建以EHF野鼠型为主和家鼠型疫区患者恢复期病人血清58份,发现前者A型34份(94.44%),后者R型22份(100%),证明了RPHI法与HI法对EHF血清抗体分型的结果是一致的。证实RPHI在临床诊断上的敏感性与特异性,可用于该病的血清抗体分型并具有实用价值。该病用本法进行抗体分型,国内外尚未见报道。     

微量酶联免疫吸附试验检测白喉毒素抗体的初步应用

本文报道了ELISA定量检测血清白喉毒素抗体的方法。经测定43名儿童血清ELISA滴度与锡克氏试验结果比较,锡克氏试验阳性与阴性血清的ELISA平均滴度分别为1:82.0及1:219.9,以ELISA滴度 ≥ 1:100及<1:100表示有或无免疫力,则与锡克氏试验的符合率为70%。我们对粗制毒素进行了纯化,用以作为抗原可进一步提高试验的敏感性。实验证明ELISA的特异性、敏感性和重复性均好,而且只需微量(10微升)血清,操作简便、为流行病学调查提供一个新的定量检测方法,可用以替代锡克氏试验。     

采用胶体金法和酶联免疫法检测艾滋病病毒(HIV)抗体结果分析

目的比较胶体金法和酶联免疫法检测HIV感染者血清抗体的敏感性和特异性。方法采用胶体金法和酶联免疫法,对2016年7月至2018年10月自愿咨询者采集的1 510份血清进行HIV抗体的检测。结果采用胶体金法检测出HIV抗体阳性者20份,其阳性率为1.32%;采用酶联免疫法检测出HIV抗体阳性者36份,其阳性率为2.38%。结论酶联免疫法的敏感性较高,建议有艾滋病高危行为者到检测机构采用酶联免疫法检测艾滋病病毒(HIV)抗体。     

犬恶丝虫感染胶体金试纸条检测方法的建立及应用

目的建立犬恶丝虫血清抗体检测胶体金试纸条方法。方法利用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体,犬恶丝虫MTFP重组蛋白作为诊断抗原标记检测线(T线),兔抗SPA抗体标记质检线(C线),对建立的各项条件进行优化,制备胶体金试纸条;对建立的方法进行特异性、敏感性、稳定性验证试验。用建立的胶体金试纸条检测方法对62份犬血清样本进行检测。结果所制备的胶体金试纸条敏感性为1∶8,重复性良好,检测犬等孢球虫阳性血清、犬蛔虫阳性血清结果均为阴性。应用制备的胶体金试纸条检测62份犬血清,阳性样本4份,阴性样本58份,阳性检出率6.45%。结论建立的犬恶丝虫感染胶体金试纸条检测方法具有特异性、稳定性等特点,为犬恶丝虫病的诊断提供了一种新的检测方法。     

用EDTA制备军团菌抗原检测血清抗体的研究

用简化方法提取Lp1~6和Legionella micdadei (Tatlock)的EDTA抗原并和超声波抗原平行检测2份医院工作人员血清,Lp1抗体滴度均为1:80~160;4例军团菌肺炎病人的7份血清中,有3份用两种抗原检测Lp1抗体滴度均升高达1:1 280~2560;另4份血清用EDTA抗原检测,结果比超声波抗原检测结果低1~3个稀释度;但均达到诊断水平(1:320)。检测33份正常人血清,与以上结果的趋势一致,提示EDTA抗原的敏感性与特异性均比较好,且制备方法简便,值得进一步研究。     

应用纯化重组外膜脂蛋白LipL32检测钩端螺旋体病抗体

目的 建立以纯化重组外膜脂蛋白LipL32为基础的钩端螺旋体(钩体)病抗体的检测方法 .方法 以摹因重组技术获取重组钩体外膜脂蛋白LipL32,以该蛋白为抗原,分别使用间接法和夹心法ELISA应用于不同人和鼠血清的检测,检测结果 与钩体显微镜凝集试验(MAT)进行比较,同时人血清的检测结果 还与进口试剂盒比较.结果 纯化的重组蛋白检测9例钩体确诊病例双份血清标本,三种ELISA法的检出率与MAT无明显差别.检测45份MAT阳性标本,间接法ELISA敏感性为71.11%(32/45),夹心法ELISA为80.00%(36/45),而进口 ELISA阳性13份,占28.89%(13/45),25份可疑占55.56%(25/45).特异性检测,MAT阴性血清69份,间接和夹心法ELISA特异度均为97.10%(67/69),其中检测门诊体检血清43份,间接和夹心法ELISA均为阴性,进口ELISA检测14份,也为阴性.检测非钩体发热病例血清标本16份,间接和夹心法ELISA共检出2份阳性,进口ELISA则是1份阳性,12份可疑.检测梅毒螺旋体质控阳性血清10份,四种方法 均为阴性.重组蛋白检测鼠血清标本274份,夹心法ELISA的敏感性为86.75%(131/151),特异性为99.19%(122/123),符合率为92.34%(253/274),与MAT检测结果 相符.结论 重组LipL32蛋白具有结合活性,可应用于钩体血清抗体的检测,其中夹心法ELISA对鼠血清钩体抗体的检测显示较好的敏感性和特异性,适用于钩体病现场血清流行病学大样本调查.     

风疹IgG抗体ELISA检测方法的建立和应用

目的:建立血清风疹IgG抗体(RV-IgG)酶联免疫测定(ELISA)方法,初步探讨其应用价值。方法:采用RV-GOS株感染Vero细胞制备风疹病毒(RV)抗原,并经浓缩和纯化后,建立定量间接ELISA方法。应用该方法对深圳市宝安区加～40岁270例育龄妇女血清进行RV-IgG检测,与FDA认证的意大利Dia Sorin公司生产的RV-IgGELISA方法检测试剂盒进行比较。结果:两种方法相关系数为0.92,P相似文献   

梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用

目的评价3种梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用价值。方法对65份梅毒阳性血清和96份健康体检阴性的血清用苍白密螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和苍白密螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)3种方法进行检测。结果 3种方法检测65份梅毒血清中,TRUST阳性61份,阳性率为93.8%;TP-ELISA阳性63份,阳性率为96.9%;TPPT阳性65份,阳性率100.0%;3种方法检测96份健康者血清,TRSUT和TP-ELISA均检出生物假阳性。结论 TRUST敏感性、特异性均最低,TP-ELISA敏感性和特异性高于TRUST,TPPA敏感性和特异性最高;TRSUT对于非特异性的梅毒血清学试验,仅可作为疗效观察和随访有无复发或再感染的指标。     

人纤维蛋白原抗体的检测

目的:根据人纤维蛋白原临床实验要求,对使用了一定量的人纤维蛋白原制品的病人血清中人纤维蛋白原有无抗体进行测定。方法:参照中国合格评定国家认可委员会CNAS-CL39等有关文件内容要求,结合本实验室的实际情况,制定了此方案。使用了上海双赢生物科技有限公司生产的人纤维蛋白原抗体酶联免疫分析定性试剂盒,对精密度、诊断敏感性、特异性、同一项目不同仪器的比对、CUTOFF值等各项参数在本实验室探究性地进行研究。结论:1.精密度的试验:3个样品连续检测10次后的CV分别为9.3%、14.1%、13.6%判断标准:CV小于15%,2.特异性实验:20份正常血清检测结果计算符合率为100%。3.诊断敏感性的验证:取10份已知真阳性的样本用常规检测方法检测,计算检测阳性的样本占样本总数的比例为100%。4.同一项目不同仪器的比对,MK3酶标仪CV%:3.28%-9.84%。TECAN.SPECTRA酶标仪CV%:2.82%-7.04%。5.CUTOFF值连续统计一段时间的检测结果 ,处于临界范围的结果比为0(小于5%判为合格)。     

四种艾滋病病毒抗体初筛试剂质量的评估

目的　评估国内现行使用的部分 HIV抗体初筛试剂质量。　方法　 2种国产、2种进口试剂用 2 0 0份血清样品 (其中已知结果和未知结果的血清各 10 0份 ,已知结果的阴、阳性血清均经免疫印迹法 WB法确认 )分别进行对比测试 ,初筛阳性和可疑结果的血清用 WB确认。　结果　对 4种试剂的敏感性、特异性、功效率、NPV(阴性预测值 )和 PPV(阳性预测值 )分别进行了比较。　结论　 4种被评估的试剂中 ,胶体硒法稍劣于其他三种 EL ISA法 ,但无显著性差异 ,经 U检验 (P>0 .0 5 ) ,其他三种间无显著性差异 ,经 U检验 (P>0 .0 5 )     

胶体金SPA双联抗体检测试纸条法诊断日本血吸虫病的初步研究

目的建立一种简便快速且可同时检测两种抗体的试纸条免疫诊断方法。方法用可溶性虫卵抗原(SEA)、童虫抗原(SSA)作检测抗原,建立胶体金SPA双联抗体检测试纸条法(F-SPA-dipstick),并与可溶性虫卵抗原胶体金染料试纸条法(SEA-DDIA)及间接血凝试验(IHA)作对比检测观察。结果用F-SPA-dipstick法检测急性血吸虫病人血清32份、慢性血吸虫病人血清78份,其敏感性分别为100%和94.87%;检测健康人血清85份,其特异性为97.65%;检测肝吸虫病人血清和肺吸虫病人各35份,其交叉反应率分别为2.86%和5.71%。检测结果与SEA-DDIA及IHA相似。结论F-SPA-dipstick法可作为一种血吸虫病快速诊断方法,具有较高的敏感性和特异性,操作简便快速,不需特殊仪器设备,有着较好的开发应用前景。