抗VEGF抗体对骨肉瘤OS-732细胞血管生成及其肿瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的：探讨阻断血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF)的血管生成作用对骨肉瘤OS-732细胞及血管内皮细胞增殖、凋亡的影响。方法：应用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型,通过解剖显微镜血管计数,光镜HE染色,原位末端标记及PC-NA免疫组化检测观察VEGF抗体对骨肉瘤血管生成及肿瘤增殖,凋亡状态的影响。结果：VEGF抗体组肿瘤区血管数目及瘤细胞数显著低于PBS对照组,肿瘤细胞凋亡指数显著高于PBS对照组,增殖指数两组差异不明显,同时VEGF抗体组凋亡的微血管内皮细胞增多,增殖期微血管内皮细胞少见。结论：VEGF抗体能显著抑制骨肉瘤OS-732血管生成,抑制内皮细胞增殖,促进内皮细胞凋亡,可能是VEGF抗体发挥抗血管生成作用的途径之一,并可能通过抑制血管形成而促进肿瘤细胞凋亡,最终达到抑制瘤细胞生长的作用。     

去甲斑蝥素抗肿瘤分子机制研究进展

去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)具有综合性抗肿瘤作用机制,它可以通过调控细胞周期,抑制DNA复制来抑制肿瘤细胞增殖;激活线粒体途径,调整促凋亡和抗凋亡基因及蛋白的比例诱导肿瘤细胞发生凋亡;还能影响细胞的黏附和运动能力,减少胞外基质降解从而抑制肿瘤细胞的侵袭和转移;通过减小促血管生成因子和抗血管生成因子的比例,影响内皮细胞的功能来抑制肿瘤血管的生成;并能影响肿瘤细胞多种信号转导通路,这几个方面共同作用达到抗肿瘤效果。     

RhoA在缺氧诱导的乳腺癌细胞VEGF分泌和血管内皮细胞增殖、迁移及管腔形成中的作用

目的观察RhoA在缺氧诱导下对乳腺癌细胞MCF-7分泌VEGF水平的影响,以及对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖、迁移和管腔形成的作用。方法 ELISA检测缺氧条件下MCF-7细胞中RhoA的活化与失活对VEGF分泌水平的影响;建立MCF-7/HUVEC共培养模型,观察在缺氧刺激下MCF-7细胞中RhoA活性的变化对HUVEC增殖、迁移和管腔形成的影响。结果缺氧条件下,活性RhoA可以促进MCF-7细胞VEGF分泌,沉默RhoA可以抑制VEGF分泌;在共培养模型中,当MCF-7细胞中RhoA活化时,可以促进HUVEC增殖、迁移和管腔形成,而MCF-7细胞中RhoA沉默时,则HUVEC的上述生物学行为受到抑制。结论在缺氧刺激下,RhoA可能通过调控肿瘤细胞VEGF的表达水平,间接影响HUVEC的增殖、迁移和管腔形成能力,从而参与肿瘤新生血管的形成过程。     

番茄提取物抑制乳腺癌生长的实验研究

目的 探讨番茄提取物在乳腺癌动物模型中对肿瘤增殖、凋亡及血管生成的影响.方法 建立二甲基苯葸诱导的大鼠乳腺癌模型,给予高中低剂量番茄提取物灌胃,应用5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷标记法检测细胞增殖;原位末端标记法检测细胞凋亡;免疫组化法检测肿瘤微血管密度.结论 番茄组乳腺肿瘤的增殖指数和肿瘤微血管密度均低于对照组,且高剂量番茄组中乳腺肿瘤的凋亡指数较对照组升高,差异具有显著性(P<0.05).结论番茄提取物在乳腺癌中具有抗增殖、促凋亡和抗血管生成活性,具有潜在的抗肿瘤应用价值.     

骨肉瘤VEGF表达及VEGF抗体抑制血管生成的实验研究

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）表达与骨肉瘤血管生成和预后的关系,以及VEGF抗体抑制骨肉瘤细胞OS-732诱导血管生成的作用和可能机制,为以VEGF为靶点治疗骨肉瘤提供实验依据。方法应用免疫组化和形态计量方法,检测80例骨肉瘤VEGF表达、肿瘤微血管密度（MVD）,以及OS-732血管生成相关因子的表达。进一步应用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型观察VEGF抗体对OS-732诱导血管生成及肿瘤细胞生长的抑制作用。结果（1）骨肉瘤VEGF表达与肿瘤微血管密度（MVD）及预后密切相关。（2）OS-732表达VEGF和BFGF,而且VEGF表达强度明显高于BFGF,OS-732具有很强的诱导血管生成能力。（3）VEGF抗体干预实验结果显示VEGF抗体组肿瘤区血管密度明显低于PBS对照组,细胞凋亡指数显著高于PBS对照组,而增殖指数两组差异无统计学意义。同时,VEGF抗体组凋亡的微血管内皮细胞增多,增殖期内皮细胞少见。结论VEGF是骨肉瘤重要的血管生成因子,其表达可能是评估骨肉瘤预后的一项有价值的指标。VEGF抗体能够抑制内皮细胞增殖,促进内皮细胞凋亡,显著抑制骨肉瘤OS-732血管形成,并可能通过抑制血管形成而促进肿瘤细胞凋亡,达到抑制瘤细胞生长的作用。该结果提示VEGF可以作为骨肉瘤抗血管生成治疗的潜在靶分子。     

反义血管内皮细胞生长因子基因转染在调节人肺巨细胞癌血管生成及肿瘤生长和转移中的作用

目的　探讨反义血管内皮细胞生长因子 (VEGF)基因转染在减少肿瘤细胞内源性血管内皮细胞生长因子分泌 ,调节肿瘤血管生成和肿瘤生长转移中的作用。方法　利用脂质体法将反义基因转染到高转移性人肺癌细胞 (PG) ,以转基因肿瘤细胞培养上清刺激人脐静脉内皮细胞 ,进行噻唑蓝 (MTT)和3H胸腺嘧啶 (3HTdR)掺入实验 ;并将转基因肿瘤细胞接种于裸鼠体内 ,应用免疫组织化学法检测肿瘤内微血管密度 (MVD) ,探讨MVD与肿瘤生长转移的关系。结果　反义VEGF基因的转染 ,使肿瘤细胞VEGF分泌减少 ,其培养上清刺激人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)生长活性较空载体组减弱 ,HUVEC之DNA合成减少 ,裸鼠移植瘤内MVD为 41个± 9个 ,空载体组为 5 8个± 10个 ,两组比较t=2 715 ,P <0 .0 5。结论　反义VEGF基因的转染使肿瘤细胞分泌VEGF能力下降 ,肿瘤血管生成能力降低 ,这在肿瘤的生长和转移调节中有重要意义。     

蛇毒抗肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

蛇毒是一类有酶活性和其它生物活性的蛋白和多肽的混合物，其中具有抗肿瘤的活性成分主要是蛇毒解离素，细胞毒素，诱导凋亡的组分。蛇毒的抗肿瘤机制主要与破坏肿瘤细胞的细胞膜、影响细胞能量代谢、降低肿瘤细胞的恶性程度、抑制肿瘤细胞DNA合成、介导免疫反应、抑制肿瘤组织内的血管形成、肿瘤细胞的凋亡和抗原抗体中和有关。肿瘤的发生是细胞增殖与细胞凋亡平衡失调的结果，通过蛇毒诱导肿瘤细胞凋亡抗肿瘤的研究越来越受到关注，它贯穿于蛇毒活性成分抗肿瘤的全过程。本文就将蛇毒抗肿瘤的活性成分诱导的细胞凋亡机制作一综述。     

抗HER2人源化单克隆抗体体内外抗肿瘤活性评价方法的建立

目的:建立抗HER2人源化单克隆抗体体内外抗肿瘤活性的评价方法.方法:利用HER2表达阳性的人乳腺癌细胞系BT-474建立抗HER2单抗体内外活性评价方法,对上海市细胞工程重点实验室制备的抗HER2人源化单抗的体外生物学活性、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性、对BT-474荷瘤裸鼠的治疗作用及荷瘤裸鼠瘤体组织H-E染色及免疫组化检测rhHER2-mAb的分布与Herceptin进行了比较研究.结果:建立了完整的该人源化单抗的体内外活性评价方法,测评结果显示,上海市细胞工程重点实验室制备的抗HER2人源化单抗在体外有效抑制BT-474细胞增殖,与Herceptin体外生物学活性相似,EC50分别为148.3和145.9 ng/ml;可通过ADCC效应杀伤BT-474细胞,与Herceptin的EC50值一致,分别为185.0和183.9 ng/ml;抑制BT-474裸鼠异种移植模型肿瘤的生长,与无关抗体治疗组或PBS治疗组相比具有统计学差别(P<0.05),与Herceptin抑制能力接近,4 mg/kg剂量组相比没有统计学差别;免疫组织化学检测显示抗体集中分布于肿瘤组织.结论:建立的评价方法可对抗HER2单抗的抗肿瘤活性进行客观准确的评价,国内研制的抗HER2人源化单克隆抗体与进口同种抗体相比具有相同的体内外活性.     

芹菜素对A375黑色素瘤生长、迁移和血管生成的影响及其作用机制

目的  探讨芹菜素对A375黑色素瘤增殖、迁移和血管生成的影响及其作用机制。方法  采用四唑氮化合物（MTS）法检测芹菜素对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响;裸鼠皮下移植瘤模型考察芹菜素对体内黑色素瘤生长的影响;划痕实验检测芹菜素对细胞体外迁移的影响;小管形成实验检测芹菜素对人黑色素瘤血管生成的影响;Western blot检测芹菜素对A375细胞中调控增殖及血管生成相关蛋白表达的影响,如血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、磷酸化P38（p-P38）、总蛋白P38（t-P38）、磷酸化Erk（p-Erk）、总蛋白Erk（t-Erk）。结果  体外芹菜素处理A375细胞后,肿瘤细胞的体外增殖及体内生长较空白对照组明显受抑制;肿瘤细胞的迁移能力较溶剂对照组明显减弱;小管形成实验中,芹菜素能够抑制肿瘤细胞诱导的血管生成;分子机制研究发现,芹菜素能抑制血管生成相关蛋白VEGF及MMP-9的表达,同时芹菜素也能抑制调控肿瘤细胞增殖相关蛋白,如p-P38及p-Erk的表达。结论  芹菜素能抑制A375黑色素瘤生长、迁移及血管生成,其机制可能与抑制调控肿瘤细胞增殖及血管生成相关蛋白的表达有关。

     

TW-37 对肺癌细胞和血管生成的影响及其机制研究

目的 研究TW-37 对肺癌细胞生长和血管生成的影响及其机制。方法 使用不同浓度的TW- 37 处理人微血管内皮细胞（HMEC-1）。采用qRT-PCR 和蛋白免疫印迹法检测细胞内血管内皮生长因子 （VEGF） 及其转录因子的转录和表达,通过血管生成与鸡胚绒毛尿囊膜（CAM） 试验检测HMEC-1 细胞的 血管生成能力,通过MTT 与流式细胞术分析细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。建立异种移植模型,检 测TW-37 对肿瘤进展的影响。处死小鼠并收集肿瘤,采用免疫组织化学法分析VEGF 和血管密度标志蛋白 的表达。结果 TW-37 可以抑制CAM 上生成新的血管,并且呈剂量依赖性。TW-37 可抑制HMEC-1 细胞 的迁移和侵袭（P <0.05）,并诱导细胞凋亡（P <0.05）。TW-37 可抑制VEGF、ERK 及HIF-1α的表达（P < 0.05）。体内实验表明,TW-37 可以抑制肿瘤生长和血管生成。结论 TW-37 通过ERK/VEGF 抑制血管生 成和肺癌的体内外进展。     

仙人掌提取物对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响

目的 :探讨仙人掌提取物对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响。方法 :①小鼠的抗疲劳实验 :鼠 40只 ,随机分为 2组 ,对照组每d灌胃生理盐水 ,实验组每d灌胃仙人掌提取物 40 0mg/kg ;于第 14d作游泳试验 ,测定游泳时间。②小鼠耐缺氧实验 :小鼠 40只 ,随机分为 2组 ,灌胃方法同上 ,将小鼠放置于 2 5 0ml盛有 15g钠石灰磨口瓶中 ,测定小鼠的存活时间。结果 :实验组小鼠游泳时间和存活时间明显高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :仙人掌提取物可提高小鼠抗疲劳、耐缺氧能力     

抗核抗体和疱疹病毒IgG类抗体间的相关性

用ＥＬＩＳＡ间接法检测了人血清中的ＣＭＶ和ＨＳＶⅠＩｇＧ类抗体，４８份间接荧光免疫技术检测的ＡＮＡ阳性血清和５７份ＡＮＡ阴性血清，ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率分别为６９％和３９％。３１份免疫印迹法检测的ＥＮＡ抗体阳性血清和６２份ＥＮＡ阴性血清，ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率分别为７１％和４２％，两类抗核抗体阳性组和阴性组间ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率有显著性差异，但ＨＳＶⅠＩｇＧ类抗体水平在这些抗核抗体阴性、阳性组间的差异不具显著性。     

47例习惯性流产妇女抗心磷脂、抗精子及抗子宫内膜抗体的分析

目的 :探讨抗心磷脂抗体 (ACA )、抗精子抗体 (As Ab)及抗子宫内膜抗体 (EMAb)在习惯性流产中的作用。方法 :采用 EL ISA法对 4 7例习惯性流产少数民族妇女和 4 0例正常生育妇女血清中 ACA、As Ab及 EMAb进行检测。 结果:ACA阳性 2 0例 (42 .6 % ) ,As Ab阳性 2 4例 (5 1.1% ) ,EMAb阳性 17例 (36 .2 % ) ,ACA、As Ab、EMAb阳性率明显高于对照组 (P均 <0 .0 1)。结论:检测血清中 ACA、As Ab和 EMAb对诊断习惯性流产有重要作用     

具有鼻咽癌相关抗原内影像的抗独特型抗体研究

用抗人鼻咽癌单抗FC2 ,HNL5 (Ab1)分别免疫Balb/C小鼠 ,制备了两株抗独特型抗体 2H4和 5D3(Ab2 )。结果显示 :2H4和 5D3分别与FC2和HNL5特异性结合 ,抑制Ab1与靶细胞的反应 ,诱导产生能与相应Ab1竞争结合靶抗原的抗抗独特型抗体 (Ab3) ;并能诱发特异性迟发型超敏反应 (DTH)和细胞增殖反应。表明 2H4和 5D3具有鼻咽癌相关抗原的内影像 (Ab2 β) ,能模拟鼻咽癌相关抗原诱导体液和细胞免疫反应。     

两种方法建立小鼠抗GBM肾炎模型的比较

目的探讨建立小鼠抗肾小球基底膜（GBM）肾炎模型的方法。方法72只昆明小鼠随机分为3组,肾炎模型A组、B组和正常对照组。肾炎模型A、B组小鼠一次性尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清（16ml／kg）,正常对照组小鼠注射等量正常兔血清。肾炎模型A组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清前1周,背部皮内注射正常兔血清进行预免疫;肾炎模型B组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清后24h,尾静脉注射脂多糖（1mg／kg）。于实验第7、14、21、28天取尿液和血清标本,分别检测尿蛋白、血肌酐、血尿素氮含量。并于上述时间点分别取。肾组织观察病理变化。结果。肾炎模型组小鼠注射兔抗小鼠GBM血清后,第7天尿蛋白、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高,均高于正常对照组,且A组升高更明显（P〈0．05）。肾组织病理表现为：。肾炎模型A组肾小球基底膜明显增厚,系膜区大量电子致密物沉积,足突融合;壁层上皮细胞增生,大量新月体形成,肾小球囊腔变窄,并可见肾小球纤维化形成,其病变程度均高于肾炎模型B组。正常对照组小鼠肾组织无明显病理变化。结论免疫球蛋白预免疫法可以更好地建立小鼠抗GBM肾炎模型。     

固相反向间接血凝试验检测抗-HBs的抗独特型抗体

目的建立固相反向间接血凝试验检测抗 HBs的抗独特型抗体的方法。方法用羊抗人IgG包被聚苯乙烯微孔板 (V型 ) ,捕捉血清中的抗 HBs的抗独特型抗体 (IgG) ,再加入抗 HBs致敏的血球 ,观察其凝集结果。结果对正常人血清标本 116例以及HBsAg阳性血清标本 10 2例进行了抗 HBs的抗独特型抗体检测 ,在HBsAg阳性血清标本中共检出抗 HBs的抗独特型抗体阳性标本 2 4例 ,阳性率为 2 3 7%。结论该方法具有简便、快速 ,又不需要特殊设备等优点。     

血清抗HCV—IgM检测的临床意义

目的：检测血后病毒性丙型肝炎患者，活动期慢性丙型肝炎患者，稳定期慢性丙型肝炎患者，血液透析患者，献血员及健康人群血清中抗ＨＣＶ－ＩｇＭ，观察抗ＨＣＶ－ＩｇＭ与肝细胞损伤的关系，方法：自建的检测ＨＣＶ－ＩｇＭ的ＥＬＩＳＡ法，结果：健康人群的血清抗ＨＣＶ－ＩｇＭ的阳性率显著低于其他组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．００５），输血后丙肝炎患者及活动期慢性丙型肝炎患者血清抗ＨＣＶ－ＩｇＭ的阳性率显著高于其他组。其     

β-受体阻滞剂治疗高血压现状

β-肾上腺素能阻滞剂(简称β阻滞剂)治疗高血压病已随着药理学发展以及新的β阻滞剂如美托洛尔、阿替洛尔等不断涌现,临床应用日益广泛。现今西利洛尔等第三代长效β阻滞剂已用于临床,为高血压防治提供了更好的选择条件。此外,研究发现β-阻滞剂可使左心     

不育(孕)症精液及子宫颈粘液抗精子抗体检测

目的 :了解抗精子抗体 (AsAb)及其类型与不育 (孕 )症的关系。方法 :采用ELISA法检测AsAb ,支原体采用培养法 ,衣原体用金标法。结果 :12 0例不育症精液和 36例不孕症子宫颈粘液AsAb总阳性率为 2 6 .2 8% ;其中精液阳性率为 2 0 .83% ,子宫颈粘液阳性率为 44 .40 % ,男女间差异有显著性 (P <0 .0 1)。抗体类型中 ,IgM型男性阳性率 2 .5 0 % ,女性为 8.33 % (P>0 .0 5 ) ;IgG型男性阳性率 6 .6 7% ,女性为 36 .11% (P <0 .0 0 5 ) ;IgA型男性阳性率 12 .5 0 % ,女性为 30 .5 6 % (P <0 .0 5 )。精液中IgM和IgA间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,但IgG与IgA和IgM间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;子宫颈粘液中IgM分别与IgA和IgG间差异均有显著性 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,但IgG与IgA间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。同时进行支原体、衣原体检测 ,感染与否和AsAb(+ )间差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :精液和子宫颈粘液AsAb是不育 (孕 )症的重要原因 ,以IgG和IgA型为主 ;支原体和衣原体感染对产生AsAb无显著影响     

把握“三个代表”的深刻内涵维护最广大人民的根本利益

“三个代表”的重要思想是对我们党近80年历史经验与教训的全面总结 ,是对20世纪国际社会主义运动兴衰成败的历史思考的结果 ,是适应新世纪党的建设和国家建设的现实需要而产生的。维护人民利益是“三个代表”的根本要求 ,维护人民利益必须依靠群众反腐败 ,反腐败必须以维护人民根本利益为宗旨。