甲型肝炎抗原的提取和血清学鉴定

从10例典型甲型肝炎患儿的粪便提取到病毒抗原,从甲肝患儿恢复期血清提取到IgG,并使用直接电镜(DEM)、免疫电镜(IEM)、微量补体结合(MCF)、免疫粘连(IAHA)和固相放射免疫测定(SPRIA)等方法对提取到的抗原和抗体进行了全面交叉鉴定,证实为甲肝病毒抗HAv IgG。在提取抗原的方法上,除用差速离心、聚乙二醇沉淀外,还用氯仿去脂,排除了粪便中其它物质的干扰,保证提取到的抗原为特异性甲肝抗原。本文还讨论了IEM、MCF、IAHA和SPRIA方法的优缺点。     

乙型肝炎抗原IAHA和RIA检测方法的比较

为了探索乙型肝炎抗原与乙型肝炎的关系,配合临床对乙型肝炎的预防和治疗等方面的工作,从1972年以来,我室先后开展了对乙型肝炎抗原的检测方法:单相免疫扩散(SRID),对流免疫电泳(ES)、免疫粘连血凝试验(IAHA)和放射免疫自显影(RIA)。前两者阳性检出率明显不如后者。IAHA比前者要敏感     

应用免疫粘连血凝试验检测小鼠肝炎病毒及其与ELISA方法的比较

利用抗原和特异性抗体结合,在补体存在的条件下,使人的“0”型红细胞发生凝集性质的免疫粘连血凝试验(IAHA),当前已应用于病毒领域的许多方面,尤其是甲型肝炎病毒和乙型肝炎病毒的检测,并在实践中表明IAHA比补体结合试验、对流免疫电泳均为敏感。本文报告了卫生部上海生物制品研究所医学实验动物中心应用IAHA方法检测小鼠肝炎,并与ELISA方法在重复性、敏感性和应用性方面作了比较,兹将结果报告如下: 材料和方法 1.材料:抗原——鼠肝炎病毒沪-79株(本动物中心分离)。血球——人“O”型红细胞,保存于聚乙二醇血球保存液(708液),临用前用生理盐水洗二次,     

应用免疫粘连血凝试验检测人群中抗-HBc的初步报告

我们在商丘地区进行肝癌流行病学调查中,应用免疫粘连血凝试验(IAHA)检测1,378人的抗-HBc。兹将方法和结果报告如下;     

日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的产生及其特性鉴定

用细胞融合方法获得了6株分泌日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞系,经与4种黄病毒作交叉免疫荧光反应,可以将它们分为三组:日本乙型脑炎病毒种特异性,亚组特异性及黄病毒属特异性。通过功能性抗病毒分析(血凝抑制、中和及小鼠被动保护),提出该病毒表面(囊膜糖蛋白)至少存在6种抗原决定簇。经交叉血凝抑制反应,发现国内分离的日本乙型脑炎病毒毒株间在血凝素抗原性上存在明显差异。     

流行性出血热病毒抗原抗体同步检测85例报告

本文报道一种新的流行性出血热诊断方法。运用免疫学和免疫组织化学原理,采用免疫金银染色法作流行性出血热病毒抗原、抗体同步检测。用胶体金标记的L—133流行性出血热单克隆抗体,在患者淋巴细胞膜上直接显示出流行性出血热病毒抗原决定簇与膜受体的反应位置。又以患者血清为一抗,按滴度滴加于流行性出血热细胞抗原片上;用间接法显示患者受感染后机体产生的抗出血热病毒抗体滴度。前者用以确定患者是否已受感染或机体内是否尚存有病毒;后者为测定患者对病毒的反应能力,即所产生的抗病毒抗体滴度。     

用反向间接血凝抑制试验鉴定抗甲型肝炎病毒IgM与IgG抗体

本文报道以反向间接血凝抑制试验检测抗甲型肝炎病毒(HAV)IgM与IgG抗体结果。此法较免疫粘连血凝试验(IAHA)简单,且敏感性及特异性较高,为区别早、晚期HAV感染的有效血清学方法。作者用前述两种方法对163份甲型肝炎流行区人群血清进行抗HAVIgG抗体检测,结果RPHAI法阳性率为92.6％,IAHA法为64.4％;其次对47例甲型肝炎     

应用微量固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA)检测甲型肝炎抗原

自从Feinstone应用免疫电镜法发现甲型肝炎(下称甲肝)抗原以来,有关甲肝的研究进展很快。目前测定甲肝抗原、抗体的方法有补体结合试验、免疫粘附血凝试验(IAHA)及固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA)。国内已有免疫电镜及IAHA检测甲肝抗原的报道。最近我们应用国产聚苯乙烯微量细胞毒试验板(4×10孔,上海塑料三厂出品)作为载体,自甲肝患者恢复期血清提取IgG,分别以~(125)Ⅰ或~(131)Ⅰ标记后,对4份甲肝阳性粪便抗原作固相放射免疫测定,获得满意结果。     

酶联免疫吸附试验检测甲型肝炎抗原

自从应用免疫电镜法(IEM)检测甲型肝炎抗原以来,其他灵敏检测技术如免疫粘附血凝试验(IAHA)、固相放射免疫试验(SPRIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等也相继建立,其中以 ELISA 检测甲型和乙型肝炎抗原和抗体较为简便、特异、灵敏。本文介绍ELISA 检测甲型肝炎抗原,并与 IEM 和 SPRIA 进行比较。     

关于中国湖北省流行性出血热与朝鲜流行性出血热的病毒病因关系

<正> 在 Lee 等的报告中,证实了中国浙江省流行性出血热患者恢复期血清中,含有高效价的同朝鲜出血热病毒抗原起特异性免疫萤光反应的抗体。实验是应用间接免疫萤光法对三种来源的朝鲜出血热病毒抗原进行的:(1)黑线姬鼠肺(2)Wistar 大白鼠肺(3)A-549细胞系。最近又从中国湖北省的流行性出血热患者得到了10份恢复期血清,3份急性期血清。     

Identification of Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome(HFRS)Virus in Central Nervous System of Patients with HFRS

The location of hemorrhagic fever with renal syndrome(HFRS)virus in thecentral nervous system(CNS)of patients with HFRS was studied by reverse passive he-magglutination(RPHA),RPHA inhibition test(RPHI),immunohistochcmistry,and cellculture assays.HFRS virus antigen was picked out in the soluble supernatant of cerebro-spinal fluid(CSF)by RPHA;and HFRS viruses were identified in the cytoplasm of mo-nocytes and lymphocytes in CSF by FA or PAP staining;HFRS viruses were isolatedfrom CSF of patients;and furthermore,HFRS virus antigen was detected in ncuroglio-cytes of brain by IFA,FA,PAP and ABC staining.All the results indicate that HFRSvirus could infect the CNS of the patients via Mood-brain barrier.     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究与应用

作者概要地报道我室近年来对肾综合征出血热病毒单克隆抗体(McAb)的研究与应用,包括:①肾综合征出血热病毒及其血凝素抗原McAb杂交瘤细胞系的建之与鉴定,②选择其中高效优质的McAb进行病毒的抗原性分析;③以McAb亲和层析纯化病毒结构蛋白及其分析鉴定,④纯化HFRS-McAb及其应用;⑤以Mcab-IFAT检验HFRS患者外周血白细胞中的病毒抗原;⑥建立了McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原、检测不同疫区人和动物血清中特异性抗体(IgM和IgG)、患者血清中血凝抑制抗体等。并已应用于研究HFRS病毒结构及其特征、纯化病毒抗原组份及保护性抗原,对本病的早期快速检验诊断、流行病学调查、研究疫苗及免疫治疗等都有重要意义。     

Virion proteins of viruses causing hemorrhagic fever with renal syndrome; monoclonal antibody analysis

SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and Western blotting analysis by using 9 clones of monoclonal antibodies specifrc for hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) viruses were carried out on the virion proteins of 17 strains of HFRS viruses isolated from different areas in Asia and different hosts such as Apodemus agrarius, Rattus norvegicus, domestic cat and HFRS patients. Polypeptide with apparent molecular weight about 50 kilodalton(Kd) could be detected in all 17 strains of HFRS viruses. On this polypeptide there are two different antigenic determinants and one of them might be genus specific.     

EXTRACT10N AND SEROLOGIC STUDY OF HEPATITIS A ANTIGEN

A partially purified hepatitis A antigen (HAAg) was derived from feces of 10 children with type A hepatitis. IgG was extracted from sera of the patients during convalescence. The methods of direct electron microscopy (DEM), immune electrort microscopy (IEM), microcom- plement fixation (MCF), immune adherence he- magglutination (IAHA) and solid phase radio- immunoassay (SPRIA) were used successfully for identifying HAAg and antibody. The par- tially purified antigen and antibody were com- pletely cross identified and confirmed to be he- patitis A antigen and antibody. The advantages and disadvantages of IEM, MCF, IAHA and SPRIA are also discussed.     

肾综合征出血热病毒对人体骨髓细胞的影响

肾综合征出血热(HFRS)的发病机理非常复杂,其病理生理改变几乎涉及全身每个组织器官。骨髓作为免疫及造血系统的中心器官,无论其结构或功能上若有改变都将导致免疫和造血系统的功能异常、为探讨HFRS病毒对人体骨髓细胞的影响,我们应用免疫荧光技术、组织培养技术,并结合骨髓细胞学等检查进行了研究。     

HFRS患者汉滩病毒特异性CTL克隆靶细胞的建立及意义

目的:建立肾综合征出血热(HFRS)患者汉滩病毒(HTNV)核衣壳蛋白(NP)特异性CTL克隆的靶细胞.方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞(PBMC),并用EB病毒(EBV)转化B淋巴细胞,建立B淋巴母细胞样细胞系(B-LCL).然后,用含HTNVS基因的重组痘苗病毒(rVV)转染B-LCL,间接免疫荧光(IFA)检测NP的表达,并用HTNV特异性T细胞克隆对转染rVV的B-LCL进行细胞毒杀伤实验.结果:B淋巴细胞经EBV感染4wk左右,可形成B-LCL.HTNV-S基因在B-LCL中能有效表达NP,且能被HTNV特异性T细胞克隆识别.结论:成功建立了HFRS患者永生化B-LCL.含HTNVS的基因重组痘苗病毒转染的B-LCL可用作HTNV特异性CTL克隆的靶细胞.     

Study and Application of Monoclonal Antibodies against Virus of Haemorrhagic Fever with Renal Syndrome

This paper summarizes the study and application of monoclonal antibodies (McAbs)against haemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) virus in our department over the past sever-al years. The following six points are discussed: (1) establishment and characterization of thehybridoma cell lines secreting McAbs against HFRS virus and hemagglutinin of the virus: (2) theantigenic analysis of HFRS viruses in China by McAbs: (3) purification and application of theMcAbs: (4) purification and characterization of HFRS virus 50K stnactural protein by McAba-affini-ty chromatography and the McAbs possessing different characteristics: (5) detection of HFRS virusantigen in peripheral blood lymphocytes from HFRS patients by the McAb-IFAT; and (6)development of McAb-ELISA indirect sandwich methods, and detection of HFRS virus antigen andIgM, IgG and/or HI antibodies in human and animals. The results of the studies show that theMcAbs can be used for early diagnosis, epidemiological investigation, preparation of vaccine andimmunotherapy of HFRS.     

乙型肝炎合并HFRS与HFRS临床对比分析

目的探讨乙型肝炎合并肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）对ＨＦＲＳ临床及乙肝病毒血清学标志（ＨＢＶＭ）的影响。方法采用Ａｕ－５６０全自动生化分析仪检测肝、肾功能，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＢＶＭ，聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨＢＶＤＮＡ，并与３０例ＨＦＲＳ进行临床对比分析。结果合并感染肝、肾损伤轻，对乙肝病毒（ＨＢＶ）有短期抑制作用。结论两种嗜病毒合并感染并未加重病情及肝脏损伤。     

McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS患者血清中血凝抑制抗体的研究

作者采用抗HFHS病毒血凝素McAb和粗制血凝素抗原的ELISA间接夹心法,检测63份临床诊断为HFRS患者血清中血凝抑制抗体,同时使用血凝抑制试验进行比较。两者的阳性率均为74.6％,而ELISA的抗体滴度明显高于血凝抑制试验(P<0.01)。本法在临床诊断和流行病学监测中,有实用价值,并可能取代血凝抑制试验。     

微量血凝抑制试验在肾综合征出血热检验诊断中的应用

用我国分离的HFRSV(陈株)血凝素进行微量血凝抑制试验,检测了各代表性疫区出血热病人和实验感染动物血清,并与IFA法比较。结果表明MHIT具有较高的敏惑性、特异性和可重复性,简便易行,既可用于临床早期血清学诊断,也能用于血清流行病学调查,尤其适于基层应用。