急性一氧化碳中毒大鼠脑内MIP-1α和ICAM-1的表达及高压氧干预后的变化

目的 观察急性CO中毒后大鼠脑内巨噬细胞炎性蛋白-1(MIP-1α)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,进一步探讨迟发性脑病(DNS)的免疫学机制.方法 将60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组和染毒后1、3、7、10 d组及染毒后HBO治疗7 d组,每组10只.通过HE和免疫组化染色,观察各组大鼠脑组织的病理学改变以及MIP-1α和ICAM-1的表达情况.结果 HE染色显示,正常对照组脑内细胞形态正常,染毒组脑皮质和海马有严重病理损伤,出现大量变性、坏死神经元,且随染毒时间的延长,损伤程度加重,经HBO治疗后,损伤减轻.免疫组化染色显示,正常对照组无MIP-1α和ICAM-1表达;染毒1 d组MIP-1α开始有表达,ICAM-1无表达;染毒3 d组MIP-1α表达增加,数量达高峰(P<0.05),ICAM-1开始有表达;染毒7 d组MIP-1α表达开始减少,ICAM-1表达数量达高峰(P<0.05),在血管内皮细胞和淋巴细胞上均有表达;染毒后HBO治疗7 d组MIP-1α和ICAM-1表达均显著减少,与染毒7 d组比较差异有统计学意义(P<0.05);染毒10 d组几乎无MIP-1α表达,偶见少数淋巴细胞上有ICAM-1阳性表达.结论 MIP-1α和ICAM-1可能参与DNS的发病过程,HBO可通过减少两者的表达来减轻脑组织的损伤.     

高压氧对异基因骨髓移植后aGVHD影响的实验研究

本研究探讨高压氧（HBO）在抗异基因骨髓移植后aGVHD和提高生存率中的作用及机制。给受致死量照射的C57BL／6受鼠注入供鼠BALB／c骨髓与脾淋巴细胞的混合液，分别给与高压氧、环孢素A、氨甲蝶呤处理。用流式细胞仪检测脾T细胞及其亚群和黏附分子CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD11a^＋、CD4^＋CD18^＋、CD8^＋CD11a^＋、CD8^＋CD18^＋的表达，用ELISA和RT-PCR法检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和TNFα的表达。结果表明：HBO组小鼠11天的活存率明显高于异基因移植组及CsA＋MTX组；HBO和CsA＋MTX可明显降低脾组织中CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD11a^＋、CD4^＋CD18^＋、CD8^＋CD11a^＋、CD8^＋CD18^＋的表达（P〈0.05）；HBO组小鼠血清IL-2和TNFα的浓度及脾组织中IL-2和TNFα mRNA的含量都低于异基因骨髓移植组（P〈0.05），但高于CsA＋MTX组；HBO组小鼠脾组织中IL-4和IL-10 mRNA的含量显著高于异基因骨髓移植组和CsA＋MTX组（P〈0、05）。结论：高压氧在对抗aGVHD和提高活存率方面优于环孢素A和氨甲蝶呤，其抗aGVHD的作用机制与调节促炎／抑炎细胞因子的分泌和黏附分子的表达及抑制T淋巴细胞作用有关。     

人参皂甙对烫伤脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响

目的：探讨人参皂甙对烫伤脓毒症后细胞免疫功能的影响及其作用机制。方法：健康雄性SD大鼠66只，随机分为脓毒症组（24只）、人参皂甙组（24只）和对照组（18只）。将大鼠用沸水致背部30％总体表面积Ⅲ度烫伤，烫伤后12h腹腔注射内毒素（5mg／kg）予以“二次打击”，制成烫伤脓毒症模型。用流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞、CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr细胞）的细胞数。结果：“二次打击”后大鼠外周血中CD4^＋T细胞、CD25^＋T细胞比例显著下降，CD8^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋Tr细胞比例显著升高；此过程随时间而加重，各时间点与对照组比较差异均有显著性（P均〈0．01）；用药后24h、72h占淋巴细胞百分比人参皂甙组CD8^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋Tr细胞占淋巴细胞百分比显著低于脓毒症组（P均〈0．01），CD4^＋T细胞、CD25^＋T细胞比例显著高于脓毒症组（P均〈0．01）。结论：烫伤和内毒素“二次打击”后外周血中CD4^＋CD25^＋Tr细胞表达增强，人参皂甙可有效抑制其表达，显著改善烫伤脓毒症时细胞免疫功能障碍。     

中国HCV/HIV合并感染者T淋巴细胞表面CD81、CXCR3表达的研究

目的探讨T淋巴细胞表面受体CD81、CXCR3，在丙肝病毒（HCV）单纯感染，艾滋病病毒（HIV）单纯感染和HCV／HIV合并感染过程中的表达及意义。方法采用流式细胞术，检测HCV感染组（n=21），HIV感染组（n=14），HCV／HIV感染组（n=28）及正常对照组（n=30）人外周血CD4^＋T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞表面CD81、CXCR3的表达。结果HIV感染组及HCV／HIV合并感染组CD4^＋T细胞表面CD81、CXCR3表达显著降低（P〈0．001），CD8^＋T细胞表面CD81、CXCR3表达显著升高（P〈0．001）；HCV感染组CD4^＋及CD8^＋T细胞表面CXCR3表达轻度升高但差异不显著，CD81在CD4^＋T细胞表面轻度升高而在CD8^＋T细胞表面明显升高（P〈0．01）。结论中国HCV／HIV合并感染患者外周血T淋巴细胞表面受体CD81、CXCR3，在CD4^＋T细胞表面表达降低，而在CD8^＋T细胞表面表达升高。     

间充质干细胞对活化T淋巴细胞的免疫调节作用

本研究的目的是探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对活化T淋巴细胞的免疫调节作用及其在allo—HSCT相关GVHD防治中的作用。用终浓度为10μg/ml的PHA于不同时间作用T淋巴细胞，以^3H—TdR掺入法检测T细胞增殖功能；以不同数量的MSC分别与活化T淋巴细胞作用，根据MSC数量不同实验分为A组（对照组，不加MSC）、B组（MSC2×10^4）、C组（MSC4×10^4）、D组（MSC8×10^4），用^3H—TdR掺入法检测作用前后T细胞功能，FCM检测细胞免疫表型。结果显示，在终浓度为10μg／ml PHA作用下，T淋巴细胞的增殖能力随培养时间的延长而增强，48小时达高峰。FCM检测MSC细胞表型表明：CD44、CD105、CD29、FIK1表达阳性，不表达CD33、CD34、CD45、HLA—DR。随着MSC数量增加，与共培养前相比，T细胞的SI值逐渐降低（P〈0．05），但C组和D组间比较无差异（P〉0．05）。在低数量MSC作用下，CD3^＋CD4^＋表达低于对照组（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD152^＋高于对照组（P〈0．05）；C组和D组与对照组相比，CD3^＋CD4^＋表达明显降低（P〈0．01），CD3^＋CD8^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD152^＋明显增高（P〈0．01）。结论：丝裂原PHA可以使T细胞活化；骨髓MSC在体外可以使活化T细胞功能和细胞免疫表型发生改变，下调CD3^＋CD4^＋的表达，上调CD3^＋CD8^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD152^＋的表达。     

胸腺肽防治体外循环致机体免疫功能损害的研究

目的：探讨围术期使用胸腺肽对体外循环所致机体免疫功能损害的防治作用。方法：选择40例风湿性心脏瓣膜病患者．分为对照组和胸腺肽组，各20例。分别在术前第3天、体外循环结束后10min及术后第1、3、7天取外周静脉血测定T细胞计数，CD3^＋、CD4^＋,CD8^＋T细胞百分数，CD4^＋／CD8^＋T细胞比值，血清IgG、IgA、IgM浓度。结果：胸腺肽组体外循环结束后10min淋巴细胞计数及CD3^＋细胞百分数高于对照组（P〈0．05）；术后第1、3、7天CD4^＋T淋巴细胞百分数高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）．术后第3、7天CD8＋T淋巴细胞百分数低于对照组（P〈0．01）；术后第1、3、7天CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值均高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）；体外循环后各时点IgA、IgM浓度均高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：胸腺肽能减轻体外循环对细胞免疫及体液免疫功能的损害。     

电针夹脊穴的抗炎镇痛和免疫调节作用

背景：临床观察证实，针灸具有确切的抗炎和免疫凋节的作用，这是针灸防治各类免疫失调和急慢性炎症的基础。 目的：观察电针夹脊穴对佐剂性关节炎大鼠的抗炎镇痛作用及对其T细胞亚群的影响。 设计：完全随机分组设计，对照实验。 单位：山东中医药大学针灸基础实验室。 材料：选用纯种Wistar大鼠30只。适应性饲养5d后，随机将大鼠分为3组：正常对照组，模型组，电针夹脊穴组，每组10只。 方法：①实验于2005—01／2005—05在山东中医药大学针灸基础实验室完成。模型组和电针夹脊穴组用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎模型。于造模当天，电针夹脊穴组针刺双侧第3，5腰椎夹脊穴，用28号0．5寸（约1．65cm）不锈钢毫针在大鼠第3，5腰椎棘突下旁开约0．3cm直刺进针，接G6805—2A型多功能电针治疗仪给予疏密波（频率约4Hz，密波频率约60Hz），强度约为1mA，30min／次，1次／d，连续治疗7d。正常对照组及模型组以相同的方式捆绑固定（用粗布绳将大鼠捆绑固定于大鼠固定器）7d。②于造模前，造模后1，7d进行痛阈测定：采用热痛刺激仪的强光照射大鼠足垫部，将大鼠的缩爪潜伏期作为痛阈值。③造模前，造模后1，7d采用鼠足容积测定器测定大鼠右后爪足容积（容积排水法），计算肿胀率（％）=（造模后鼠足容积-造模前鼠足容积）／造模前鼠足容积&;#215;100％。④于造模后8d，采用FACSCalibur流式细胞仪检测血清CD4^＋,CD8^＋细胞表达率并计算CD4^＋／CD8^＋。⑤多个样本均数比较采用单因素方差分析和t检验。 主要观察指标：电针夹脊穴对佐剂性关节炎大鼠痛阈、足肿胀率及血清T细胞亚群的影响。 结果：大鼠30只均进入结果分析。①造模后1d，模型组、电针夹脊穴组大鼠右后足足容积明显高于正常对照组和造模前（P〈0．01）；肿胀率明显高于正常对照组（P〈0．01）。造模后7d，模型组右后足容积及足爪肿胀率明显高于正常对照组（P〈0．01），足容积明显高于造模前（P〈0．01）；电针夹脊穴组右后足足容积和肿胀率明显低于模型组（P〈0．05）。②正常大鼠造模前双后足痛阈无明显差异，造模后1d模型组和电针夹脊穴组大鼠致炎侧足痛阈较致炎前显著降低（P〈0．01），明显低于正常对照组（P〈0．01）；造模后7d模型组大鼠致炎侧足痛阅仍明显底于致炎前（P〈0．05）；电针夹脊穴组痛阈明显高于模型组（P〈0．05）。③模型组大鼠CD4^＋T淋巴细胞及CD8^＋T淋巴细胞百分率明显低于正常对照组显著降低（P〈0．01），CD4^＋／CD8^＋的比值明显高于正常对照组（P〈0.05）。电针夹脊穴组CD4^＋细胞百分率高于模型组，但差异不明显。CD8^＋细胞百分率明显高于模型组（P〈0.01），CD4^＋与CD8^＋比值明显低于模型组（P〈0．05）。 结论：电针夹脊穴有明显的抗炎镇痛作用，并能调整佐剂性关节炎大鼠的细胞免疫。     

rhG-CSF对骨髓采集物中记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用

本研究主要探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）对骨髓采集物记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用。采用流式细胞仪检测稳态骨髓（SS—BM）和rhG—CSF预激的骨髓（G—BM）中CD4^＋、CD8^＋T细胞百分比及其记忆细胞表面黏附分子CD49d、CD54、CD62L和CD11a的表达。结果显示：rhG—CSF应用后骨髓采集物中CD4^＋、CD8^＋T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低（P〈0．001）,记忆T细胞的比例没有明显变化;CD49d在CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达百分比显著下降（p〈0．05）,但在记忆T细胞的表达百分比没有明显的变化;CD54在CD4^＋及其记忆T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞的表达百分比明显降低（P〈0．05）,而在CD8^＋记忆T细胞的表达百分比没有明显变化;CD62L在CD4^＋、CD8^＋及其记忆T细胞的表达百分比显著下降（P〈0．01）;CD11a在CD4^＋及其记忆T细胞的表达百分比明显降低（p〈0．05）,而在CD8^＋及其记忆T细胞的表达百分比没有明显变化。结论：rhG—CSF部分下调骨髓中CD4^＋、CD8^＋以及相应的记忆T细胞上黏附分子表达。     

热休克抗原致敏树突状细胞联合射频消融治疗荷瘤大鼠的免疫效应

目的将热休克抗原致敏后的树突状细胞（DC）应用于射频消融术（RFA）后治疗大鼠Walker 256实体瘤，探讨其对大鼠免疫机能的影响。方法将Walker 256肿瘤细胞经热休克冻融后致敏大鼠骨髓细胞衍化的DC以获得DC瘤苗；48只荷Walker 256实体瘤SD大鼠随机分成4组：对照组1（n=10）仅行RFA治疗；对照组2（n=10）仅行DC瘤苗治疗，对照组3（11=10）行RFA＋未致敏DC治疗，实验组（n=18）行RFA＋DC瘤苗治疗。治疗前及治疗后第4天分别测量各组大鼠外周血中CD4^＋T淋巴细胞、CD8^＋T淋巴细胞及CD4^＋／CD8^＋比值，超声评价各组肿瘤治疗前后体积变化，记录大鼠的荷瘤生存期。结果治疗后，与三组对照大鼠相比，实验组大鼠外周血中CD4^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值显著升高，CD8^＋T细胞显著下降（P〈0．05）；实验组实体瘤体积增大明显缓慢于各对照组（P〈0．05），且维持较长的荷瘤生存期（P〈0．05）。结论在RFA后应用冻融热休克抗原致敏DC治疗大鼠实体瘤可有效地改善其抗肿瘤免疫机能，并在延缓残存肿瘤生长，延长大鼠荷瘤生存期中发挥一定作用。     

腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4^＋CD45RA^＋T和CD4^＋CD45RO^＋T细胞的影响

目的 探讨腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4^＋ CD45RA^＋T细胞和CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达的影响.方法 67例直肠癌患者中,33例拟进行腹腔镜手术,设为L组,34例拟进行开腹手术,设为O组.观察术前1d、术后2d、术后7d患者Th1、Th2、CD4^＋ CD45RA^＋T、CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达水平.结果 L组患者术前和术后Th1、Th2、CD4^＋ CD45RA^＋T、CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达无显著差异（P＞0.05）.O组术后2d、术后7d患者Th1细胞表达水平显著下降（P＜0.01）,Th2细胞表达显著升高（P＜ 0.01）;CD4^＋ CD45RA^＋T细胞的表达显著升高（P＜0.01）,CD4＋ CD45RO＋T细胞的表达显著降低（P＜0.05）.结论 腹腔镜手术较开腹手术对直肠癌患者的免疫平衡、CD4^＋ CD45RA^＋T细胞和CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达的影响小,对机体细胞免疫功能干扰较轻.     

高压氧对一氧化碳中毒大鼠血小板CD61及多形核白细胞黏附分子 CD11b/CD18表达的影响

背景一氧化碳中毒后的脑损伤与白细胞在微血管上的黏附性及其与黏附分子发生的生化反应直接相关.目的观察一氧化碳中毒后,高压氧治疗对大鼠外周血血小板CD61及多形核白细胞黏附分子CD11b/CD18表达的影响.设计观察对比实验.单位首都医科大学附属北京朝阳医院实验室.材料实验于2002-01/03在首都医科大学附属北京朝阳医院实验室完成.选择健康成年Wistar大鼠128只,雌雄不拘.用抽签法随机分为4组,正常对照组8只,一氧化碳中毒组、高压对照组及高压氧治疗组各40只.其中后3组又分别分为一氧化碳中毒后、高气压处理后及高压氧处理后第1天(当日立即),第5,10,15,20天5个时相组,每组8只.方法将一氧化碳中毒组、高压对照组和高压氧治疗组大鼠分别暴露于体积分数为2.995×10-3一氧化碳下60 min,高压对照组给予0.2 MPa高压空气处理,高压氧治疗组给予给予0.2 MPa高压氧治疗1 h,1次/d.血标本采集分别在一氧化碳中毒后第1,5,10,15,20天早晨进行.麻醉大鼠后用心内注射的方式采血.应用流式细胞仪测定一氧化碳中毒大鼠在不同时间段外周血血小板CD61及多形核白细胞黏附分子CD11b/CD18的表达.CD61及CD11b/CD18表达均以平均荧光强度为单位定量测定.主要观察指标①各组大鼠外周血血小板CD61相对表达量(荧光指数)的变化.②各组大鼠外周血多形核白细胞黏附分子CD11b/CD18相对表达量(荧光指数)的变化.结果128只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠外周血血小板CD61相对表达量(荧光指数)的变化一氧化碳中毒组大鼠在一氧化碳中毒后第1,5,10天外周血血小板CD61相对表达量明显高于对照组(t=2.625～4.428,P＜0.05～0.01);高气压组大鼠在高气压治疗后第1,5,10天的血小板CD61相对表达量显著高于对照组(t=2.586～2.704,P＜0.05);高压氧组大鼠仅在高压氧处理后第1天血小板CD61的相对表达量高于对照组(t=2.947,P＜0.05).②各组大鼠外周血多形核白细胞黏附分子CD11b/CD18相对表达量(荧光指数)的变化一氧化碳中毒组大鼠外周血CD11b/CD18相对表达量在一氧化碳中毒后第1,5,10,15和20天均显著高于对照组(t=2.665～4.452,P＜0.05～0.01).高气压组大鼠在高气压治疗后第1,5,10和15天的外周血CD11b/CD18相对表达量均显著高于对照组(t=3.124～4.627,P＜0.05～0.01).高压氧组大鼠在高压氧处理后第1,5,10天的外周血CD11b/CD18相对表达量均显著高于对照组(t=3.549～4.223,P＜0.01).结论一氧化碳中毒后大鼠外周血血小板CD61及多形核白细胞黏附分子CD11b/CD18的表达增高并持续一段时间,高压氧能有效下凋血小板及细胞黏附分子的水平,可以进一步解释一氧化碳中毒后高压氧治疗的脑保护作用.     

高压氧对急性胰腺炎大鼠T淋巴细胞亚群及胰腺组织病理变化的影响

目的 研究急性胰腺炎(AP)时是否存在T淋巴细胞亚群改变及高压氧治疗对其的影响.方法 按随机数字表法将56只SD大鼠分为假手术组、模型组、高压氧治疗组,后两组均采用胰管结扎法制备AP模型,制模后每组再随机分为术后1、3、7 d 3个亚组,每个亚组8只.高压氧治疗组制模当日即进行2.5 atm(1 atm=101.325 kPa)高压氧干预,每日1次,每次2 h.于相应时间点处死大鼠,采用流式细胞仪测定血中T淋巴细胞亚群;同时取胰腺组织电镜下观察细胞核、线粒体、粗面内质网和滑面内质网,并进行评分.结果 术后1 d模型组、高压氧治疗组血淀粉酶即显著低于假手术组.模型组术后CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值均明显降低,提示AP时可能存在免疫功能抑制.经过7 d的高压氧治疗,CD4+细胞于术后3 d、7 d明显升高[(27.92±2.10)%比(20.79±2.80)%,(26.58±4.50)%比(17.76±4.40)%],CD8+于术后7 d明显升高[(25.32±3.70)%比(22.46±3.10)%],CD4+/CD8+比值于术后3 d、7 d明显升高(1.07±0.14比0.86±0.15,1.04±0.11比0.79±0.12,P<0.05或P<0.01).电镜下观察发现,高压氧治疗组胰腺组织细胞核、线粒体、粗面内质网和滑面内质网病理评分(分)均较模型组明显改善(10.8±1.6比17.9±1.7,22.1±1.6比27.5±1.3,16.8±1.0比29.3±0.8,21.2±1.4比28.7±1.2,均P<0.01).结论 本研究显示,7 d的高压氧治疗对胰腺超微结构及T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群和CD4+/CD8+比值有改善作用,可能通过改善细胞免疫功能对胰管结扎诱导的AP起到一定治疗作用.     

CO中毒迟发性脑病大鼠脑内星形胶质细胞和少突胶质细胞的表达及高压氧治疗对其表达的影响

目的探讨CO中毒迟发性脑病（DNS）大鼠脑内星形胶质细胞和少突胶质细胞的表达情况及高压氧（HBO）治疗对上述两种胶质细胞表达的影响，分析迟发性脑病的发病机制。方法建立DNS大鼠模型，用HE染色观察大鼠脑组织病理学变化，用免疫组织化学方法，采用小鼠抗大鼠神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）单克隆抗体、小鼠抗大鼠RIP单克隆抗体检测大鼠脑内星形胶质细胞和少突胶质细胞的表达。结果HE染色标本上，正常对照组大鼠脑内细胞形态正常，DNS大鼠脑皮质出现大片疏松区，海马锥体细胞层稀疏，可见点片状坏死；HBO组坏死程度相对较轻。免疫组化结果显示，与对照组比较，DNS组GFAP表达明显增多（P〈0．05），且阳性细胞形态发生改变；RIP表达随损伤时间的推移逐渐减少（P〈0．05）；HBO组GFAP较7d组表达减少（P〈0．05），RIP较7d组表达增多（P〈0．05）。结论星形胶质细胞和少突胶质细胞在DNS的发病过程中起重要作用，高压氧治疗可针对胶质细胞改善患者脑组织损伤程度。     

Role of vascular cell adhesion molecule 1/very late activation antigen 4 and intercellular adhesion molecule 1/lymphocyte function-associated antigen 1 interactions in antigen-induced eosinophil and T cell recruitment into the tissue

To determine the role of vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM- 1)/very late activation antigen 4 (VLA-4) and intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1)/lymphocyte function-associated antigen 1 (LFA-1) interactions in causing antigen-induced eosinophil and T cell recruitment into the tissue, we studied the effect of the in vivo blocking of VCAM-1, ICAM-1, VLA-4, and LFA-1 by pretreatment with monoclonal antibodies (mAb) to these four adhesion molecules on the eosinophil and T cell infiltration of the trachea induced by antigen inhalation in mice. The in vivo blocking of VCAM-1 and VLA-4, but not of ICAM-1 and LFA-1, prevented antigen-induced eosinophil infiltration into the mouse trachea. On the contrary, the in vivo blocking of VCAM-1 and VLA-4, but not of ICAM-1 and LFA-1, increased blood eosinophil counts after antigen challenge, but did not affect blood eosinophil counts without antigen challenge in sensitized mice. Furthermore, the expression of VCAM-1 but not ICAM-1 was strongly induced on the endothelium of the trachea after antigen challenge. In addition, pretreatment with anti-IL-4 mAb decreased the antigen-induced VCAM-1 expression only by 27% and had no significant effect on antigen-induced eosinophil infiltration into the trachea. The in vivo blocking of VCAM- 1 and VLA-4 inhibited antigen-induced CD4+ and CD8+ T cell infiltration into the trachea more potently than that of ICAM-1 and LFA-1. In contrast, regardless of antigen challenge, the in vivo blocking of LFA- 1, but not of ICAM-1, increased blood lymphocyte counts more than that of VCAM-1 and VLA-4. These results indicate that VCAM-1/VLA-4 interaction plays a predominant role in controlling antigen-induced eosinophil and T cell recruitment into the tissue and that the induction of VCAM-1 expression on the endothelium at the site of allergic inflammation regulates this eosinophil and T cell recruitment.     

高压氧预处理对小鼠皮肤移植术后脾淋巴细胞及其黏附分子的影响(英文)

本研究探讨高压氧预处理对同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的影响及其分子机制。BALB/c供鼠与C57BL/6受鼠,各自或共同接受高压氧预处理;受鼠在皮肤移植术后,腹腔注射常规免疫抑制剂环孢素A。采用免疫荧光染色技术和流式细胞术,观察不同处理方案对小鼠脾淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及淋巴细胞表面黏附因子LFA-1(CD11a/CD18)表达的影响。结果表明,与对照组相比,HBO预处理组小鼠脾淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+及其表面黏附分子CD4+CD11a+、CD4+CD18+、CD8+CD11a+、CD8+CD18+的表达均下降,以供鼠和受鼠都接受HBO预处理同时与环孢素A联合应用组下降最明显(p0.05);HBO预处理与环孢素A联合应用组小鼠一般状态好于单独应用HBO预处理或环孢素A组。结论:高压氧预处理与环孢素A联合应用较单独应用高压氧预处理和环孢素A可更好地降低皮肤移植术后的免疫排斥反应,其保护作用的分子机制与调节淋巴细胞的活性并抑制其表面黏附因子的表达作用相关。     

HIV/AIDS患者B7-H1的表达特点及与疾病进展关系研究

目的 研究HIV/AIDS患者外周血mDC及不同亚群T淋巴细胞B7-H1及PD-1的表达水平,分析其与疾病进展的相关性,探讨B7-H1及PD-1信号通路在HIV感染中的作用.方法 采集中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所红丝带门诊36例未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者(无症状HIV组、AIDS组)及20名健康对照组...     

Lymphocyte adhesion through very late antigen 4: evidence for a novel binding site in the alternatively spliced domain of vascular cell adhesion molecule 1 and an additional alpha 4 integrin counter-receptor on stimulated endothelium

Recent studies demonstrate that alternative splicing of mRNA from a single gene can produce two forms of vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1): a six-immunoglobulin (Ig) domain form (VCAM-6D) and a seven-Ig domain form (VCAM-7D). Using a COS cell transient expression assay, we investigated whether VCAM-6D and VCAM-7D differ functionally in adhesion to the integrin VLA-4 (CD49d/CD29) on lymphoid cells. Binding of lymphoid cell lines and peripheral blood lymphocytes was completely blocked by VLA-4 monoclonal antibody (mAb) and one VCAM-1 mAb (4B9) to both VCAM-6D and VCAM-7D, whereas one VCAM-1 mAb (E1/6) completely blocked binding to VCAM-6D but only partially inhibited binding to VCAM-7D. We conclude that there is one VLA-4 binding site in the six Ig domains shared between VCAM-6D and VCAM-7D, and that the alternatively spliced domain 4 present in VCAM-7D provides a second VLA-4 binding site that is blocked by 4B9 but not the E1/6 mAb. We compared the inhibitory effects of anti-VCAM-1 and anti-VLA-4 mAbs on lymphoid cell adhesion to cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The anti-VCAM-1 mAb 4B9 blocked the binding of PBL and lymphoid tumor cells to stimulated HUVEC better than the anti-VCAM-1 mAb E1/6. Because VCAM-7D is the predominant form of VCAM-1 expressed by stimulated endothelial cells, this difference in VCAM-1 mAb inhibition is attributed to lymphoid cell binding to VCAM-7D on stimulated HUVEC. Although the anti-VLA-4 mAb and anti-VCAM-1 mAb 4B9 equally inhibited PBL binding to stimulated HUVEC, mAb 4B9 inhibited the binding of two lymphoid cell lines significantly less than anti-VLA-4 mAb. Combination of 4B9 mAb with function-blocking antiserum to human fibronectin, a second known ligand for VLA-4, also failed to inhibit as much as anti-VLA-4 mAb. These findings suggest that adhesion of lymphoid cell lines through VLA-4 or other alpha 4 integrins may involve inducible counter-receptor(s) on endothelium distinct from either VCAM-1 or fibronectin. Time course experiments indicate that the fraction of alpha 4 integrin-dependent binding that can be blocked by anti-VCAM-1 mAb E1/6 rises and peaks within 2 h of tumor necrosis factor (TNF) stimulation.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

高原地区大鼠烫伤延迟复苏后Peyer结中低氧诱导因子-1α表达对T淋巴细胞凋亡与增殖的影响

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和淋巴细胞凋亡在不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后的变化及意义.方法 Wistar大鼠132只,分别在l 517 m和3 848 m海拔高度随机分为延迟复苏组(DFR,,n=30)、即时复苏组(IFR,n=30)、假伤组(SG,n=6).建立30%总体表面积(TBSA)Ⅱ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72 h各取6只大鼠开腹,取回肠组织肠肇Peyer结,采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)、免疫组化染色与图像分析技术.观察回肠Peyer结中淋巴细胞凋亡率及HIF-1α和CD3的阳性表达.结果 DFR组伤后各时间点Peyer结淋巴细胞凋亡率均明显高于同海拔高度IFR各组,随海拔高度上升凋亡率升高,伤后12 h凋亡率最高(P均<0.05).HIF-1α阳性表达位于Peyer结中淋巴细胞胞核内,IFR组和DFR组表达强度明显高于同海拔SG组,并随海拔高度上升而增强(P均<0.05).CD3表达位于Peyer结中T淋巴细胞胞膜上,IFR组和DFR组CD3表达强度低于同海拔SG组,并随海拔高度上升而减弱,伤后12 h表达降至最低(P均<0.05).结论 高原地区烫伤延迟复苏后HIF-1α表达增高可能是Peyer结T淋巴细胞凋亡率增加和细胞数降低的重要原因之一.     

The role of cytokines, adhesion molecules, and chemokines in interleukin-2-induced lymphocytic infiltration in C57BL/6 mice.

IL-2 mediates the regression of certain malignancies, but clinical use is limited because of associated toxicities, including parenchymal lymphocytic infiltration with multiple organ failure. Secondarily induced cytokines are important mediators of IL-2 toxicity and IL-2-induced lymphocyte-endothelial adherence and trafficking. The recently discovered C-C chemokines, RANTES (regulated on activation, normal T expressed and secreted) and macrophage inflammatory protein-1alpha, have also been implicated in lymphocytic migration. We hypothesized that IL-2 alters cytokine, C-C chemokine, and adhesion molecule expression in association with parenchymal lymphocytic infiltration. C57BL/6 mice were injected with 3x10(5) IU of IL-2 or 0.1 ml of 5% dextrose intraperitoneally every 8 h for 6 d, then killed. IL-2 induced massive lymphocytic infiltration in the liver and lung and moderate infiltration in the kidney in association with organ edema and dysfunction. Immunostaining showed increased intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) expression in association with this organ-specific lymphocytic infiltration. Flow cytometry showed increased expression of the corresponding ligands (lymphocyte function-associated antigen-1 and very late antigen-4) on splenocytes. IL-2 increased TNF-alpha mRNA and protein expression in the liver. Organs infiltrated by lymphocytes had increased TNF-alpha mRNA, whereas RANTES mRNA was increased in all organs, regardless of lymphocytic infiltration. IL-2 toxicity involves organ-specific TNF-alpha and RANTES production with increased ICAM-1 and VCAM-1 expression as potential mechanisms facilitating lymphocytic infiltration and organ dysfunction.