角膜移植引起人与人之间的狂犬病

Creutzfeldt-Jakob病(痉挛性假硬化)经感染的角膜移植片传染于正常的受者,迄今已有报告。但作者认为,普通的病毒经角膜移植片人传染于人,尚未有叙述。作者报告1例狂犬病病毒从一狂犬病而麻痹的患者角膜移植片传染于一正常的受者。狂犬病患者男,39岁,有典型狂犬病症状及体征。住院第十六天死亡。立即将右眼角膜移植于39岁女性右眼圆锥角膜患者。手术和愈合是顺利的。4周半后感到右眼眶后头痛。次日为半边头痛及感到右面部麻木。第3天麻木扩散到右臂     

人眼角膜的胚胎发育

角膜的胚胎发育是从晶体泡与表面外胚层分离之后开始。晶体泡陷入视杯以后,留在表面的外胚层细胞就发育成角膜上皮。在表面外胚层和晶体泡之间伸入的中胚层组织,发商成角膜内皮细胞及角膜实质层。我们观察了676例7周至足月胚胎及胎儿眼球角膜的发育情况。兹将结果报导如下。材料和方法取出胚胎、胎儿眼球以Bouin氏液或5%福尔马林固定。第11周以前的眼球行石蜡包埋。第三个月的眼球以石蜡或火棉胶包埋。第四个月至足月的眼球均用火棉胶包埋。包埋的眼球行连续切片。苏木素——伊红染色。部分眼球还用PAS及阿新兰(pH2.5)     

人泪液电泳的观察

电泳(electrophoresis)作为研究带电分子的成分和含量的手段,现已广泛用于科研和临床检查上。1949年 Smollen应用电泳方法分析出泪液含有四种蛋白成分。1957年Brunish应用滤纸电泳分析出泪液的溶菌酶和六种蛋白成分。为了研究泪液溶菌酶、白蛋白和球蛋白的含量和这些成分与外眼病的关     

我国人的结膜蝇蛆病

蝇属于双翘目,环裂亚目(Cyclorrha-pna)。与医学有关的蝇种大致可以分为寄生类、吸血类及携带病原类三种。引起人眼结膜蝇蛆病的蝇种主要是寄生类蝇蛆,多为牛蝇科中的羊狂蝇(Oestrus OvisTinne)和狂蝇科马鼻蝇阔额鼻蝇(Rhi-noestrus Lati-Frons Gan),也有系皮蝇科纹皮蝇(Hypoderma Li neatum DeVill)和丝光绿蝇(Lucilia Sericata).等所致的人眼结膜蝇蛆病。有关眼蝇蛆病的报道,早在两千多年前我国就有“生蛆肿”病的记载,以后(赵学敏,1675)在《本草纲     

人视网膜的体外组织培养

细胞培养和动物实验是研究视网膜疾病的主要手段,但前者不能将视网膜作为整体参与反应,后者不能排除全身因素对局部组织真实反应的干扰,而体外组织培养可解决上述问题。小鼠、大鼠、鸡视网膜组织均可培养[1-3]。我们通过体外培养人视网膜组织,观察其视网膜神经上皮组织结构特征     

人胚胎眼睑的发育

关于人胚胎眼睑的发育,国外文献已有报道,国内李联祥等也曾有描述,但欠详尽.为完善国人眼睑发育的资料,本文观察了第6周至足月胚胎的眼睑发育过程. 材料和方法     

保存人羊膜对人脐静脉内皮细胞生长状态的影响

目的:观察保存人羊膜对体外培养及移植状态下人血管内皮细胞生长状况的影响,研究羊膜移植治疗角膜新生血管性疾病的机制。方法:取健康产妇胎盘羊膜,以酶消化加机械分离法去上皮,-80℃甘油保存。使用时复水,平铺于培养板底,干燥备用。1g/L胰蛋白酶灌流消化法收获人脐静脉内皮细胞,以1～1.7×108/L分别接种于培养板及铺有羊膜的培养板孔内培养。倒置显微镜及电镜进行形态学观察。待羊膜上细胞生长成完整单层后,将载有血管内皮细胞的羊膜移植到去内皮细胞的猫眼角膜内皮侧,3mo后取角膜植片行组织病理学观察。结果:羊膜及培养板上培养的细胞均在24h完全贴壁,2～3d形成单层,细胞为铺路石样,Ⅷ因子染色阳性。植入猫眼内的人脐静脉内皮细胞在长达3mo的观察期内仍存活,有些甚至增生成多层排列。结论:体外培养及移植状态下,保存人羊膜都不能抑制血管内皮细胞增殖,其抑制角膜新生血管形成的机制可能不是通过内皮细胞途径。     

人内皮抑素重组腺病毒的构建及其在人视网膜色素上皮细胞的表达

目的 观察构建的含人内皮抑素(human endostatn,hES)基因腺病毒载体对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epitheliaum,hRPE)细胞的感染及其基因表达情况,为眼内新生血管性疾病治疗提供一定的实验依据.方法 原代培养hRPE细胞,行角蛋白免疫组织化学进行鉴定.从真核表达载体pEGFP-N1-ASP-hES将ASP-hES扩增,亚克隆至pAdTrack CMV穿梭质粒中,与pAdEasy 1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组为腺病毒载体,线性化后转染293细胞进行包装扩增.用该腺病毒感染hRPE细胞,应用荧光显微镜和Western blot检测病毒感染及外源基因的表达情况.结果 角蛋白免疫组织化学显示所培养的细胞为hRPE细胞,感染24 h后荧光显微镜下可见RPE细胞中有大量的绿色荧光蛋白表达,Western blot结果显示hES蛋白高表达.结论 构建的hES腺病毒对hRPE具有极高的感染效率,可作为一种良好的基因导入载体,为ES基因治疗眼内新生血管性疾病的进一步研究奠定了基础.     

人玻璃体液对培养的人视网膜色素上皮细胞和血管内皮细胞增生的影响

目的 探讨人玻璃体液对培养的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium, RPE）细胞和血管内皮细胞增生的影响。 方法 将人RPE细胞和血管内皮细胞株（vascular endothelial cell lines 304, VEC304）分别培养在1∶8、1∶ 4、1∶2（玻璃体液在总培养液中的体积比）的人玻璃体条件培养液（vitreous-conditioned medium, VCM）中，其中VCM分为有无血清2组，在不同作用时间（2～6 d），采用四唑盐(tetrazolium, MTT)比色法检测VCM对人RPE细胞和VEC304增生的影响。 结果 在有血清时，1∶4、1∶2的VCM在培养的各时间段对RPE细胞的促增生作用与对照组比较，差异有非常显著性意义（P＜0.01），对VEC304的抑增生作用与对照组比较，差异有显著性意义（P＜0.05）；在无血清时，1∶2的VCM在培养2 d时对RPE细胞的促增生作用与对照组比较，差异有显著性意义（P＜0.05），在培养4、6 d时的差异有非常显著性意义(P＜0.01）。 结论 一定体积分数的人VCM促进人RPE细胞的增生，抑制VEC304的增生，提示玻璃体液在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR) 和眼内血管增生性疾病中可能发挥不同的调控作用。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 140-142)     

人晶体上皮细胞的体外培养

目的:提供一种简单可行,易于掌握的体外培养人晶体上皮细胞的方法。方法:用无齿显微镊子将晶体囊膜分离出来,剪碎后直接移至细胞培养瓶中培养,当细胞长出融合后,用胰蛋白酶消化传代。结果:接种培养4天后,可见晶体上皮细胞开始长出,并以贴壁方式生长。结论:用此方法体外培养人晶体上皮细胞,具有简单、快捷、成功率高的优点。眼科学报1997;13:170—172。     

人视网膜母细胞瘤的细胞凋亡

目的 观察凋亡是否为视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞死亡的主要方式。方法 应用光镜（１６例）、电镜（４例）及ＴＵＮＥＬ标记（１２例）对ＲＢ进行观察研究。结果 光镜下凋亡细胞大多位于退化区。电镜下可见不同凋亡阶段的ＲＢ细胞,占瘤细胞死亡的４２％。ＴＵＮＥＬ标记阳性细胞大多位于肿瘤退化区。凋亡指数（ＡＩ）在未分化型和放疗后的ＲＢ中明显增高（Ｐ〈０．０５）,与视神经受累与否及临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论 凋亡可能是导致ＲＢ细胞死亡的主要形式,诱导调亡可作为促使ＲＢ退化的一种手段。     

人角膜上皮干细胞的识别

目的 探讨人角膜上皮干细胞的分子标记。方法 对人角膜和角膜缘部位行组织学检查以分析角膜缘解剖结构。对人角膜切片和整个角膜组织行免疫组织化学染色以检测中央角膜和角膜缘部位未分化标记,如核蛋白p63、乳腺癌抵抗蛋白（ABCG2,BCRP1）、烯醇化酶α、整合素拍、胡及β1、表皮生长因子受体（EGFR）、细胞角蛋白19（CK19）、14（CK14）及转铁蛋白受体（CDT1）的表达,经荧光显微镜和激光扫描共焦显微镜观察。对角膜中部和角膜缘上皮细胞的mRNA进行半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和原位杂交以检测其相关基因的表达。结果 角膜缘部位横向切片显示角膜缘上皮细胞为乳头放射状排列,对应于Vogt栅栏环境。未分化标记整合素β1、EGFR、烯醇化酶α及CK19在角膜缘基底细胞胞质染色较表层细胞更强;p63、ABCG2、整合素胡蛋白仅见于角膜缘基底部上皮细胞。激光扫描共焦显微镜观察和RT—PCR结果显示角膜缘表达p63、ABCG2、整合素胡蛋白及mRNA。原位杂交显示p63仅表达于角膜缘基底层细胞。结论 角膜缘上皮呈乳头放射状排列,角膜缘干细胞群具有复合标记：p63表达于细胞核、ABCG2表达于胞质、整合素胡表达于胞膜。采用这些标记复合体,可将角膜缘干细胞群与其他上皮细胞区分。     

中国人正常眼的调节力

一百多年前Donders(1864)首先报告欧洲人正常眼的调节力。以后石原忍(1919)和Duane(1922)相继报告日本人、美国人正常眼的调节力正常值及昼夜波动曲线。关于中国人正常眼的调节力,方怀时曾报告10～35岁的正常值以及段昌敏用逐步回归法推算5～59岁各年龄组的调节力。目前国内计算调节力一般多用Duane 或石原忍报告各年龄组的正常值。中国地域辽润,地跨温带和亚热带。调查中国人各年龄组调节力正常值实有必要。本文对广东地区466正常眼作了调节力的测量,结果报告如下:     

人视网膜色素上皮细胞NF-kB的表达

目的探讨核因子闎(NF-кB)在体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞中的基础表达以及吡咯二硫代氨基甲酸乙酯(pyrollidi ne dithiocarbamate,PDTC)、IL-1β对NF-кB表达的影响. 方法体外培养的hRPE细胞经同步化后分2组分别加药(1)无PDTC组分别加入IL-1β、生理盐水(用于检测NF-кB在hRRE中的基础表达);(2)PDTC组分别加入IL-1β、生理盐水(用于检测NF-кB在PDTC预处理后hRPE中的表达).免疫荧光抗体染色、流式细胞计数法(flow cytometry, FCM)测定上述2组标本中hRPE的NF-кB的表达率. 结果 NF-кB在hRPE中的基础表达率为8.05 %,IL-1β作用后表达率升高到30.26%; hRPE细胞经PDTC预处理后,NF-кB的表达率下降为3.74%,加入IL-1(10 υg·L-1)作用后表达率为3.66%. 结论 IL-1β可以显著提高NF-кB在hRPE细胞中的表达;PDTC可以显著降低体外培养的hRPE中的NF-кB表达率,PDTC亦可显著抑制由IL-1β诱导的NF-кB的活化过程.     

我国人正常视野的测定

本文用Goldmann视野计对80名(160眼)正常人进行了视野测定,得出我国人视野的正常数值,Ⅰ4e 等视线为上方42°、鼻侧52°、下方52°、颞侧62°;Ⅰ2e 等视线为上方20°、鼻侧24°、下方24°、颞侧32°。正常等视线受年龄、种族不同的影响,无性别差异。中央视野左眼大于右眼,这可能与熟练程度有关(本组受检查者全部先查右眼后查左眼)。     

人与动物房水的谷胱甘肽

谷胱甘肽与角膜水化有关;在氨基酸转移的Meister循环中发挥作用;在X—线和半乳糖白内障时它的含量明显降低;它有防止氧化损害的作用;因此,眼组织的谷胱甘肽受到较大重视。作者测定人等房水中的谷胱甘肽含量。房水平均总谷胱甘肽(即还原型GSH+氧化型GSSG)含量为:兔17.3、狗6.0、猴6.0、狒狒2.4、人     

人晶状体上皮细胞的体外培养

目的建立一种简单可行的人晶状体上皮细胞体外培养的方法.方法利用组织块贴片法,对人晶状体的前囊膜和赤道部囊膜进行培养.对培养的细胞进行形态学观察和鉴定.结果组织块贴壁48～72h后可见人晶状体上皮细胞从组织块边缘长出,具有上皮细胞的形态特点,10～15 d后融合.在体外细胞可传五代,但第三代以后细胞表型向成纤维细胞转化.SABC法染色结果细胞胞浆内α-晶状体蛋白染色阳性.结论成功地建立起人晶状体上皮细胞体外培养模型,可用于后囊膜混浊发病机理和药物试验研究.