芦荟素通过激活ERK1/2-Runx 2信号通路介导对去卵巢大鼠骨量流失的保护作用

目的观察芦荟素对去卵巢大鼠骨量的影响,并探讨可能的机制。方法将30只雌性Sprague Dawley大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)及去卵巢大鼠+芦荟素治疗组(LHS,去卵巢大鼠每天接受50 mg/kg芦荟素治疗,持续12周)。12周后取双侧股骨进行微型计算机断层扫描(Micro-CT)检测股骨干骺端微观结果,通过组织病理切片观察骨小梁结果变化,通过骨生物力学检测骨强度改变以及运用蛋白质印迹(WB)检测可能的机制。结果OVX组大鼠的骨密度(bone mineral density,BMD)、骨显微结构、最大载荷和弹性模量等指标均明显低于Sham组(P<0.05)。芦荟素治疗后大鼠的骨密度、骨显微结构、最大载荷和弹性模量等指标均有明显改善,比较差异有统计学意义(P<0.05)。WB检测显示OVX组p-Erk1/2、Erk1/2、ALP、RUNX 2、OCN和OPN表达水平较Sham组明显下调(P<0.05)。LHS组p-Erk1/2、Erk1/2、ALP、RUNX 2、OCN和OPN表达水平较OVX组明显上调。结论芦荟素可以显著改善去卵巢大鼠股骨骨强度和骨量,这种疗效可能通过激活ERK1/2-Runx 2信号通路促进成骨来实现的。     

降钙素预防去势大鼠腰椎间盘退变的研究

[目的]观察降钙素对去卵巢大鼠腰椎骨量和椎间盘退变的作用。[方法]30只3个月龄Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机均分为3组,每组10只:假手术(Sham)组,去卵巢(OVX)组,去卵巢+降钙素(OVX+CT)组。3个月后处死动物,并于处死前10d和4d分别给予四环素和钙黄绿素双荧光标记。取L2～4椎体进行骨密度及骨组织形态计量学分析,L4～5腰椎及椎间盘进行VG染色,运用免疫组化检测椎间盘MMP-13的表达,观察椎间盘的病理学改变并根据组织学评分系统对腰椎间盘的退变程度(LVD)进行评分。[结果](1)腰椎间盘评分:OVX+V组显著高于Sham组及OVX+CT组;(2)腰椎骨密度及骨形态计量学骨量参数(BV/TV,Tb.N):OVX+V组显著低于Sham组及OVX+CT组;(3)免疫组化:OVX+V组大鼠椎间盘中基质金属蛋白酶MMP-13表达显著高于OVX+CT组、Sham组。[结论]降钙素可预防去卵巢大鼠腰椎间盘的退变,其作用机制可能与维持椎体骨量及微观结构,同时降低椎间盘中MMP-13的表达抑制基质的降解有关。     

吡咯喹啉醌通过降低氧化应激和RANKL/OPG比率减少去卵巢大鼠骨量流失研究

目的观察补充吡咯喹啉醌(PQQ)对去卵巢诱导的骨质疏松大鼠骨量和骨强度的影响。方法 30只12周龄(225～260 g)雌性SD大鼠随机分为3组(每组n=10),即OVX组、OVX+PQQ组和Sham组;其中OVX组和OVX+PQQ组进行手术切除双侧卵巢,而Sham组进行假手术; OVX+PQQ组术后食物添加4 mg/kg PQQ。治疗12周,在治疗结束收集血液和股骨,分别进行微型计算机断层扫描(Micro-CT)、生物力学检测、组织切片检测、蛋白印迹检测(WB)以及血清指标检测。结果Micro-CT和HE切片表明,与Sham组相比,OVX组的股骨骨密度和骨微观参数显著降低(P0.05); OVX组的小梁间距显著增加(P0.05),而OVX+PQQ上述指标明显优于OVX组(P0.05)。生物力学检测表明Sham组具有最高的极限载荷、能量和刚度;与OVX组比较,OVX+PQQ组极限载荷、能量和刚度明显增加(P0.05)。血清学表明,与Sham组大鼠相比,OVX大鼠血清CTX-1、TRACP-5b和MDA水平均显著升高,而T-AOC和SOD活性显著降低; PQQ治疗后显著改善(P0.05)。WB检测结果表明与Sham组大鼠相比,OVX大鼠RANKL和RANKL/OPG比率均显著升高,而OPG和FOXO1表达显著降低;经过PQQ后得到RANKL和RANKL/OPG比率均显著降低,而OPG和FOXO1表达显著增加(P 0.05)。结论 PQQ通过抑制氧化应激和降低RANKL/OPG比率来增加去卵巢大鼠骨量和骨强度。     

褪黑素对去卵巢大鼠细胞因子水平和RANKL/OPG比值及骨密度的影响

目的 观察褪黑素对去卵巢大鼠细胞因子水平和RANKL/OPG比值及骨密度的影响。方法 将32只3月龄的雌性大鼠随机分为4组,每组8只。A：假手术组(Sham组),B：去卵巢组(OVX组),C：去卵巢+β-雌二醇治疗组[487.5 μg/(kg·d),OVX+E2组],D：去卵巢+褪黑素治疗组[50 mg/(kg·d),OVX+MEL组],药物治疗8周。治疗结束后,处死动物,取胫骨进行骨密度(bone mineral density, BMD)测定,对股骨进行细胞因子和基因表达分析。结果 治疗8周时,OVX组胫骨骨密度较Sham组显著降低(P<0.05),而OVX+MEL组的胫骨骨密度较OVX组显著增高(P<0.05);OVX组RANKL/OPG比值较Sham组显著增高(P<0.05);OVX组股骨IL-17A及IL-1β和TNF-α较Sham组显著增加 (P<0.05),而IL-23较Sham组显著降低 (P<0.05)。OVX+MEL组的股骨IL-17A及IL-1β和TNF-α较OVX组显著降低,而IL-23较OVX组显著增加(P<0.05)。结论 褪黑素可以通过降低RANKL/OPG比值,改善IL-23、IL-17A、IL-1β和TNF-α细胞因子的表达来增加骨密度。     

麦角甾苷治疗对去卵巢大鼠骨质疏松症保护机制研究

目的 探讨麦角甾苷(MJZG)治疗对去卵巢大鼠骨密度降低和骨量流失的潜在影响,并探索可能的机制.方法 通过双侧去卵巢构建骨质疏松大鼠模型;随后将大鼠随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及麦角甾苷(MJZG),每组10只;其中MJZG组大鼠接受麦角甾苷(100 mg/kg)治疗12周;待治疗截止时获取股骨标...     

硬化蛋白抗体和跑台运动对老龄去势大鼠骨重建的影响

目的探讨硬化蛋白抗体和跑台运动对老龄去势大鼠骨重建的影响。方法 8月龄雌性Wistar大鼠,按体质量随机分层分为5组:Sham组(假手术组)、OVX组(去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+运动组)、OVX+S组(去卵巢+硬化蛋白抗体组)、OVX+E+S组(去卵巢+运动+硬化蛋白抗体组)。在14w后取材进行相关指标测试。结果 1单纯性的运动锻炼能降低脂肪量,增加骨小梁数目,减少骨吸收标记物NTx水平,防止老龄去势大鼠全身、股骨骨密度发生下降。2单纯性的硬化蛋白抗体治疗能增加骨形成标志物OC,提高去势大鼠的皮质孔隙率、皮质骨体积和皮质骨厚度,提高骨密度。3运动与硬化蛋白抗体交互作用时,可以降低脂肪量,提高骨密度和皮质骨参数,增加骨量和骨强度,提高OC水平、降低NTx水平。结论适度的跑台运动可以防止老龄去势大鼠骨量丢失,改善去势大鼠骨健康。硬化蛋白抗体疗法可以增加皮质骨骨量和骨强度,预防去势大鼠绝经后对骨代谢的不良影响。硬化蛋白和运动表现出良好的协同作用,对老龄去势大鼠骨重建具有积极的作用。     

黄芪多糖治疗对去卵巢诱导骨质疏松大鼠骨密度、骨量和骨代谢的影响

目的探索黄芪多糖对去卵巢大鼠骨量和骨代谢以及BMP-2/Smads信号通路的影响。方法30只雌性SD大鼠进行去卵巢手术或假手术。正常饲养12周后被分为黄芪多糖组(ASNT组)、对照组(CON组)和去卵巢组(OVX组),其中黄芪多糖组每天给予400 mg/kg黄芪多糖治疗。通过骨密度、骨代谢指标、Micro-CT以及WB检测评估ASNT对骨质疏松症大鼠骨量、骨代谢以及BMP-2/Smads信号通路的影响。结果经过12周治疗,ASNT组大鼠骨密度较OVX组显著增加(P<0.05);ASNT治疗12周可以降低血清ALP和OC水平,增加血钙含量,增加股骨骨密度。经过12周治疗,ASNT组大鼠骨体积分数(BV/TV)、表面积体积分数(BS/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)较OVX组显著增加;而骨小梁间隙(Tb.Sp)较OVX组显著降低,差异比较有统计学意义(P<0.05)。WB结果表明OVX大鼠骨组织的BMP-2/Smsds信号通路受到抑制;ASNT可以通过上调BMP-2、p-Smad1和p-Smad5的表达显著激活BMP-2/Smsds信号通路传导。结论研究表明ASNT对去卵巢大鼠骨密度和骨量具有保护作用,可能和激活BMP-2/Smads信号通路有关。     

重组人甲状旁腺素（1-34)与雌激素对去卵巢大鼠骨代谢的影响

目的观察重组人甲状旁腺素(1-34)与雌激素单用和联用对去卵巢大鼠骨代谢的影响。方法选用雌性4月龄SD大鼠45只,随机分为5组:①假手术(Sham)8只;②去卵巢(OVX)9只;③雌激素治疗组(OVX E)10只:OVX2个月后给予苯甲酸雌二醇治疗6w;④PTH治疗组(OVX PTH)9只:OVX2个月后给予rhPTH(1-34)治疗6w;⑤雌激素与PTH联合治疗组(OVX E PTH)9只:OVX2个月后给予rhPTH(1-34)和E2联合治疗6w。观察各组大鼠胫骨近端松质骨骨小梁形态计量学参数,椎体生物力学指标及部分血清骨生化代谢指标。结果雌激素治疗组和PTH治疗组的骨静态参数均表现为骨量增加;雌激素治疗组的骨形成参数和骨吸收参数降低;PTH治疗组的骨形成指标明显升高,而骨吸收指标虽较Sham高,但较OVX组有所降低;E2与PTH联合治疗组与单用E2组和单用PTH组比较,骨量明显提高,骨转换率参数介于单用E2和单用PTH组之间。3个治疗组的生物力学指标较OVX组均有明显提高,其中E2与PTH联合治疗组改善最明显。结论雌激素和PTH可使去卵巢大鼠松质骨骨量增加和改善生物力学性能,两者联合治疗有协同作用。     

异补骨脂素对去卵巢骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞作用机制研究

目的探讨异补骨脂素对去卵巢骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenehymal stem cells,BMSCs)作用机制。方法18只C57/BL6雌鼠随机平均分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)和去卵巢加异补骨脂素组(OVX+ISO),各组6只。OVX组和OVX+ISO组分离背部近髂脊处肌肉,取出双侧卵巢,结扎上部输卵管,剪去双侧输卵管。Sham组相同入路后剪去包裹卵巢周围的部分脂肪组织。OVX+ISO组在去卵巢前5天开始灌胃异补骨脂素,灌胃剂量为20 mg/(kg·d),灌胃持续时间2个月,Sham组以等剂量生理盐水灌胃。造模后12周处死小鼠,取股骨下段评价骨髓腔中脂肪细胞量,行micro-CT扫描评价股骨下段骨量改变及RUNX2、PPAR-γ免疫荧光检测。结果异补骨脂素能明显减少由于去卵巢引起的股骨下段脂肪细胞增多;与此同时,异补骨脂素治疗能明显改善由于去卵巢引起的股骨下段骨量丢失,即OVX+ISO组骨小梁厚度(Tb.Th)、骨体积/总体积(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)大于OVX组,差异具有统计学意义(P0.05);而OVX+ISO组骨小梁体积(Tb.Sp)小于OVX组,差异具有统计学意义(P0.05)。对去卵巢C57/BL6小鼠股骨下段进行RUNX2和PPAR-γ免疫荧光提示,异补骨脂素治疗能增加股骨下段由于去卵巢引起的RUNX2表达降低,同时能抑制PPAR-γ表达增加,即OVX+ISO组股骨下段RUNX2、PPAR-γ免疫荧光表达强度高于OVX组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论异补骨质素对去卵巢小鼠BMSCs的作用机制为治疗骨质疏松提供了新的临床治疗手段。     

高脂饮食通过抑制Wnt/β-catenin信号介导对骨质疏松大鼠骨密度和骨修复的负面影响

目的 评估高脂饮食（HFD）对骨质疏松大鼠骨密度（bone mineral density, BMD)及骨修复的影响并探讨可能的机制。方法 将雌性SD大鼠随机分为三组：假手术卵巢切除组（Sham）、手术卵巢切除模型组（OVX）、手术卵巢切除模型+HFD（OVX+HFD）;随后所有大鼠在双侧去卵巢手术或假手术后12周基础上制作双侧股骨干建立骨缺损模型,OVX+HFD组大鼠在股骨上接受HFD干预4周。随后使用影像学、血清学、骨生物力学以及基因水平检测来评估骨修复效果。结果 与Sham组相比,OVX和OVX+HFD组的血清E2、ALP水平均显著降低( P<0.05),而TRAP水平均显著升高(P<0.05);OVX和OVX+HFD组之间有显著差异(P<0.05)。Micro-CT检测显示OVX+HFD组骨修复效果较OVX和Sham组明显降低;定量检测结果显示OVX+HFD组的BMD、Tb.N和Tb.Th显著小于OVX组(P<0.01),而Tb.Sp(P<0.05)在OVX+HFD组中明显大于在OVX组。生物力学显示HFD干预后明显降低了去卵巢大鼠骨缺损部位的机械强度,包括大鼠股骨的极限载荷、刚度、能量吸收和弹性模量(P均<0.05);基因检测表明与OVX组相比,OVX + HFD组Smad2、Smad3和GSK-3βmRNA表达显著增加(P<0.01),而Wnt1和β-cateninmRNA表达均显著降低(P<0.01)。结论 HFD对骨质疏松状态下骨缺损愈合有负面影响,而这种影响可能是通过对Wnt/β-catenin信号传导抑制来实现的。     

重组合异种骨植骨修复骨囊肿所致骨缺损

2001年10月～2003年9月，笔者共收治28例骨囊肿患者，均采用病灶刮除，瘤腔灭活和重组合异种骨植骨治疗，获得满意疗效，体会如下。     

复合人工骨修复骨良性病变切除后骨缺损

目的探讨骨良性病变切除后骨缺损的修复方法，并对其疗效进行评估。方法总结1999年1月-2003年10月我科应用混合自体骨松质的异体脱蛋白骨松质复合自体红骨髓治疗骨良性病变切除后骨缺损28例。年龄12—61岁，平均20，5岁。结果除2例因死亡失访外，其余26例均取得满意随访，平均骨愈合时间为4．2个月。骨腔大小或植骨量不同，骨愈合时间不同。骨腔越大，植骨越多，骨愈合时间越长。本组病例未见明显排斥反应及并发感染。随访至今，无一例复发。结论利用这种复合人工骨修复骨良性病变切除后骨缺损的方法可行性好，安全性高，自体损伤小，便于推广，可用于骨缺损的修复。     

酒精摄入对酒精性骨重构大鼠骨形态、生物力学及骨髓稳态的影响

目的 探讨长期酒精摄入对酒精性骨重构大鼠模型骨组织形态、骨生物力学、骨髓稳态及氧化应激的影响.方法 雄性SD大鼠20只随机分为空白组和酒精组,每组各10只.酒精组大鼠采用20％(vol/vol)酒精腹腔注射,10 mL/kg,每日1次,共12周;正常组给予等体积生理盐水腹腔注射.收集股骨、胫骨和第五椎体行HE和micr...     

部分骨形态蛋白调节骨再生的临床研究进展

摘要：近年来,由于恶性肿瘤切除、外伤、牙齿创伤等原因而造成的骨缺损在临床上较为常见。此外,因为国民生活质量的改善,国民饮食结构转变成热量高、脂肪含量高及高嘌呤食物,导致糖尿病、心脑血管疾病、肥胖症、高脂血症等疾病患病率和发病率逐年增多,最终发生骨密度及骨代谢的改变,代谢性骨病也随之增多,因此骨修复及调节骨代谢成为当今很重要的研究方向,一些诱导骨形成的方法,如甲状旁腺激素疗法、双膦酸盐和Romosozumab也会产生不良反应,如肿瘤生长、高钙血症和颌骨骨坏死。随着人类对诱导骨形成研究的不断深入,骨形态蛋白(bone morphoprotein,BMPs)与骨再生的关系也受到越来越多研究者的关注。笔者将基于相关文献着重对部分骨形态蛋白临床应用的研究展开阐述,以期为骨缺损及代谢性骨病的治疗提供新思路、新方法。     

Aneurysmal bone cyst of the temporal bone: case report

BACKGROUND: Aneurysmal bone cysts (ABCs) are uncommon lesions of the temporal bone and their occurrence in the calvarium is rare. CASE DESCRIPTION: A case of a right temporal ABC is reported in a 14-year-old boy who presented swelling of the right temporal region. Magnetic resonance imaging showed a destructive and expansile bone lesion on the right anterior temporal and orbital bone. The lesion was removed in total by the right temporal craniotomy and orbitozygomatic osteotomy. ABC was diagnosed in the pathologic examination. The patient had good recovery during the postoperative course. CONCLUSIONS: This report presents the diagnosis and imaging of an ABC in the temporal bone. This localization is very rare for ABC. Total excision, if feasible, is the ideal treatment.     

应用OsteoSet修复骨囊肿术后骨缺损

目的 观察OsteoSet颗粒在修复骨囊肿术后骨缺损中的临床疗效.方法 应用OsteoSet颗粒修复骨囊肿术后骨缺损21例,骨缺损范围为2.0 cm×2.1 cm×3.0 cm～4.1 cm×3.0 cm×6.2 cm.根据病变情况制定手术方案,合并有病理性骨折者术中应用内固定.结果 随访11～24(17.38 ±4.10)个月,骨愈合良好,愈合时间3～6个月,无复发及并发症.按Neer和Chigira的标准并结合X线评价骨囊肿愈合情况,21例骨囊腔完全愈合,均达到Ⅳ级.结论 应用OsteoSet颗粒修复骨囊肿术后骨缺损安全可靠,效果满意,是一种理想的骨移植替代物.     

Building better bone: The weaving of biologic and engineering strategies for managing bone loss

Segmental bone loss remains a challenging clinical problem for orthopaedic trauma surgeons. In addition to the missing bone itself, the local tissues (soft tissue, vascular) are often highly traumatized as well, resulting in a less than ideal environment for bone regeneration. As a result, attempts at limb salvage become a highly expensive endeavor, often requiring multiple operations and necessitating the use of every available strategy (autograft, allograft, bone graft substitution, Masquelet, bone transport, etc.) to achieve bony union. A cost‐sensitive, functionally appropriate, and volumetrically adequate engineered substitute would be practice‐changing for orthopaedic trauma surgeons and these patients with difficult clinical problems. In tissue engineering and bone regeneration fields, numerous research efforts continue to make progress toward new therapeutic interventions for segmental bone loss, including novel biomaterial development as well as cell‐based strategies. Despite an ever‐evolving literature base of these new therapeutic and engineered options, there remains a disconnect with the clinical practice, with very few translating into clinical use. A symposium entitled “Building better bone: The weaving of biologic and engineering strategies for managing bone loss,” was presented at the 2016 Orthopaedic Research Society Conference to further explore this engineering‐clinical disconnect, by surveying basic, translational, and clinical researchers along with orthopaedic surgeons and proposing ideas for pushing the bar forward in the field of segmental bone loss. © 2017 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 35:1855–1864, 2017.

     

同种异体骨颗粒复合自体骨移植治疗近膝关节骨巨细胞瘤骨缺损

[目的]探讨同种异体骨颗粒和自体骨复合体在近膝关节骨巨细胞瘤骨缺损的疗效。[方法]自1996年3月-2006年3月,24例膝周患者经病理检查证实为骨巨细胞瘤;其中股骨远端骨巨细胞瘤11例,胫骨近端骨巨细胞瘤13例。以机械及化学方法将同种异体骨进行脱抗原处理为骨颗粒,术中将骨巨细胞瘤于外科边缘彻底刮除,将同种异体骨颗粒复合取得的自体骨彻底紧密填塞骨缺损空腔;术后支具外固定辅助活动膝关节12周。[结果]本组术后早期均未发生严重并发症。24例病例术后随访1-6年,平均2年8个月。所有病例均未见肿瘤复发,1例发生轻度病理性骨折,经制动2个月治愈。所有骨移植体X线片上显示理想的替代形态。疗效评定采用M ank in评定标准,优：20例,良：4例,优良率达100%。[结论]同种异体骨颗粒复合自体骨移植能有效治疗近膝关节骨巨细胞瘤造成的骨缺损。     

复合羧甲基纤维素重组合异种骨骨泥的制备

[目的]在制备重组合异种骨的基础上,加入塑型剂,探索其合适的成分比例,研究小牛脱钙骨泥的制备方法。[方法]分别制备小牛松质骨的完全脱钙颗粒和生化方法提取纯化牛骨形态发生蛋白(BMP),通过真空冻干机将松质骨和BMP充分复合后冻干,制成重组合异种骨(RBX)骨粉,按一定比例加入羧甲基纤维素(CMC)作为塑形剂无菌分装,使用时加适量生理盐水或自体血液即制备成骨泥。电镜下观察其孔径、BMP复合情况,大体观察其塑形性。[结果]制备的小牛脱钙骨泥极易塑形,塑形后不易松散,并且具有一定的弯曲强度,一侧应力后材料不会出现裂隙。骨泥复合材料经电镜观察,载体孔隙较多,孔径多在100μm以上,BMP与载体复合良好。[结论]复合BMP小牛脱钙骨泥物理性状稳定,可塑性强,使用方便。骨泥材料经电镜扫描有良好的孔隙结构,BMP与载体复合良好。