益肝降脂方预处理对酒精性脂肪肝SD大鼠肝脏PKCα表达的影响

目的:观察中药益肝降脂方预处理对酒精性脂肪肝SD大鼠肝脏蛋白激酶Cα(PKCα)基因与蛋白表达的影响,探讨益肝降脂方对酒精性脂肪肝内源性保护机制的诱发与强化的效应。方法:将116只SD大鼠随机分为模型组与中药干预组,所有大鼠均连续12周予高脂+酒精灌胃进行酒精性脂肪肝造模,中药组分别于实验第3周、第6周、第9周起实施干预。于实验6、9、12周末不同时段宰杀取样,观察大鼠的一般情况及肝脏组织病理学变化以评价造模,蛋白免疫印迹法(Western blot)观测PKCα蛋白表达量,RT-PCR法检测PKCαm RNA的表达活性。结果:HE染色显示模型组大鼠肝小叶结构改变,肝细胞索紊乱,肝细胞呈不同程度的脂肪变性、点状坏死及炎性细胞浸润;中药各干预组大鼠肝组织脂肪变均较模型组明显改善。中药各时段干预组大鼠肝组织PKCα蛋白含量与模型组比较均明显升高,PKCαm RNA的相对表达量明显高于模型组,且PKCαm RNA相对表达量随用药时间的先后呈进行性降低。结论:中药益肝降脂方早期干预能促进PKCα基因和蛋白的表达,有显著的药物预适应作用;益肝降脂方的预适应作用与用药早晚成正相关;中药益肝降脂方防治酒精性脂肪肝的机制可能与早期促发内源性保护实现预适应相关。     

探讨益肝降脂方对大鼠酒精性脂肪肝病理影响与疗效的相关性

[目的]通过观察肝脏组织形态学的改变以探讨求证益肝降脂方(YGJZF)对酒精性脂肪肝大鼠肝组织病理的影响及分析。[方法]实验共分为3期,共245只雄性SD大鼠分为3个大组:空白组15只、模型组50只、中药组180只。统一采用高脂饲料+乙醇灌胃法建立大鼠酒精性脂肪肝模型,并分别予以相应中药干预,获取各组大鼠肝脏同一位置组织制作苏木精-伊红(HE)染色病理切片,观察3组大鼠肝脏组织形态学的变化。[结果]中药各组大鼠肝组织损伤程度均较模型组轻,且两者存在显著差异性(P0.05)。[结论]YGJZF能够减轻酒精性脂肪肝大鼠肝组织的病理损伤,对酒精性脂肪肝有肯定的保护作用。     

赶黄草与槲皮素预防酒精性脂肪肝的比较研究

 目的 比较赶黄草与槲皮素预防酒精性脂肪肝的作用。方法 采用加入1.5%的硫酸亚铁饲料进行饲养,应用酒精灌胃方法建立大鼠酒精性脂肪肝模型,造模同时分别给予赶黄草提取物及槲皮素进行药物干预,以TPN为对照,对赶黄草提取物组和槲皮素组大鼠肝脏行病理学检查,检测并比较赶黄草提取物及槲皮素对大鼠血清中谷草转氨酶（ALT）、谷丙转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量的影响。结果 酒精灌胃6周后大鼠形成酒精性脂肪肝。与模型组比较,赶黄草提取物组及槲皮素组大鼠肝脏脂肪变明显改善,赶黄草及槲皮素组大鼠血中ALT,AST,TC, TG均明显降低(P<0.05,P<0.01);槲皮素组与含等量槲皮素的赶黄草提取物组比较,槲皮素组大鼠血中ALT,AST,TC,TG均明显高于赶黄草提取物组(P<0.05)。结论 赶黄草和槲皮素均具有预防酒精性脂肪肝的作用,但赶黄草效果更好;除槲皮素外,在赶黄草中还可能存在其他具有预防酒精性脂肪肝的更重要化学成分,也可能存在与槲皮素起协同作用的预防酒精性脂肪肝的化学成分。     

益肝降脂方预处理对酒精性脂肪肝SD大鼠HSP70表达的影响

目的:观察分析益肝降脂方(YGJZF)预处理对酒精性脂肪肝(AFLD)SD大鼠热休克蛋白70(HSP70)mRNA和蛋白表达的影响,探讨YGJZF对内源性保护机制中效应物质HSP70调控的意义。方法:SPF级雄性SD大鼠120只适应性喂养1周后,随机分为空白对照组4只、模型组22只、中药YGJZF干预组94只(包括第3周干预组35只,第6周干预组31只,第9周干预组28只)。模型组给予酒精灌胃+高脂饮食造模,中药组在造模进行同时于实验第3周、第6周、第9周起给予干预,于第6周末、9周末、12周末随机取材观察大鼠一般情况;分别采用RT-PCR法和Western blot法检测各组大鼠肝组织HSP70 mRNA和蛋白的表达情况;HE染色观察大鼠肝脏组织病理形态改变。结果:模型组及中药YGJZF不同时段干预组大鼠肝组织HSP70 mRNA和蛋白表达水平均明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,YGJZF不同时段用药组肝组织HSP70 mRNA和蛋白表达水平均降低,且各中药用药组间比较有统计学意义(P0.05),中药第3周干预组降低更加明显;HE染色显示模型组肝脏损伤最严重,中药第3周干预组肝细胞变性、坏死程度明显减轻,肝组织病变明显改善。结论:YGJZF预处理可降低和推迟慢性酒精刺激引起的HSP70的表达,减轻了酒精性肝损伤,实现了药物预适应样保护作用,早期干预显示效果明显;内源性信号传导路径中效应物质HSP70对慢性酒精刺激引起的酒精性肝损伤具有一定的缓解作用,这可能是YGJZF预处理减轻酒精性肝损伤的重要原因。     

腹部推拿对非酒精性脂肪肝病大鼠肠上皮细胞MLCK、P-MLC表达及P-MLC与F-actin共定位的影响

[目的] 研究腹部推拿对非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠肠上皮细胞肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、肌球蛋白轻链磷酸化（P-MLC）表达及P-MLC与多聚体的纤维状肌动蛋白（F-actin）共定位的影响。[方法] 复制NAFLD大鼠模型,采用随机数字表法分为腹部推拿组、模型组,每组9只。另设9只大鼠为正常对照组。腹部推拿组每日进行10 min推拿干预;模型组每日束缚大鼠,10 min后解开束缚。正常对照组不予任何干预手段;干预28 d后,利用免疫蛋白印迹（Western blot）方法检测MLCK及P-MLC蛋白表达;同时利用免疫荧光方法检测肠黏膜P-MLC与F-actin的共定位关系。[结果] 造模后MLCK及P-MLC的表达明显上升。而经过腹部推拿干预后,MLCK及P-MLC的表达下降,证明腹部推拿可以抑制MLCK及P-MLC的表达;同时,免疫荧光方法检测肠黏膜P-MLC与F-actin之间存在共定位,且腹部推拿干预的P-MLC和F-actin的表达量最高,证明腹部推拿可以促进P-MLC和F-actin共定位作用。[结论] 腹部推拿可以通过抑制MLCK及P-MLC蛋白表达及促进P-MLC和F-actin相互作用的途径重塑肠上皮细胞骨架,改善NAFLD大鼠肠道黏膜通透性,逆转NAFLD的脂肪变性。     

益肝降脂方对酒精性脂肪肝大鼠肝组织MMP-9活性的影响水

目的：探讨益肝降脂方（YGJZR）对酒精性脂肪肝大鼠肝组织病理及MMP-9活性的影响,以期了解分析益肝降脂方防治酒精性脂肪肝的可能机制。方法：雄性SD大鼠80只,分为空白对照组（20）只,模型组（30只）,中药组（30只）,采用免疫组化SABC法测定三组模型肝脏组织中MMP-9的表达。并制备各组大鼠肝脏病理切片。结果：中药组大鼠肝组织内MMP-9的阳性表达率高于模型组大鼠肝脏组织,差异有统计学意义（P〈0．01）,且与HE染色切片提示的肝组织病理损伤呈负相关。结论：中药益肝降脂方可使大鼠肝脏组织内MMP-9的表达增加,纤维化程度相对较低．其防治酒精性脂肪肝的机制与促进肝组织MMP-9表达．抑制肝纤维化有关．     

神经复元方对H2O2诱导的大鼠海马神经元损伤后雄激素受体活化的影响

[目的] 探究神经复元方对过氧化氢（H₂O₂）诱导的SD大鼠海马神经元损伤中雄激素受体（AR）的活化影响,探讨其治疗卒中后抑郁的作用机制。[方法] 取新生24 h的SD大鼠的海马组织,分离原代大鼠海马神经元,通过微管相关蛋白2 （MAP-2）免疫荧光鉴定细胞。对SD大鼠给予神经复元方灌胃处理,分离血清,获得空白血清和含药血清,再利用细胞计数试剂（CCK8）检测确定含药血清的最佳处理浓度。使用 100 μmol/L的H₂O₂对大鼠海马神经元细胞处理致损伤,分为空白血清组、损伤模型+空白血清组、损伤模型+含药血清组、损伤模型+氟西汀4组。利用蛋白质免疫印迹法（Western blot）和免疫荧光检测各组AR蛋白磷酸化及非磷酸化的情况。[结果] 与空白血清组相比,损伤模型+空白血清组的AR、p-AR蛋白表达显著下降。与损伤模型+空白血清组相比,损伤模型+含药血清组和损伤模型+氟西汀组的AR、p-AR蛋白表达上升。[结论] 神经复元方对H₂O₂诱导的SD大鼠海马神经元损伤有一定修复作用,能够促进AR活化,提示AR可能为神经复元方治疗脑卒中后抑郁的重要靶蛋白。     

腹部推拿对大鼠乙醇性胃黏膜损伤的修复作用及机制研究

[目的] 研究腹部推拿对大鼠乙醇性胃黏膜损伤的修复作用及作用机制。[方法] 采用无水乙醇灌胃法复制胃黏膜损伤大鼠模型,将造模大鼠随机分为腹部推拿组和模型组,另设空白对照组。腹部推拿组每天予推拿干预,模型组和空白对照组不予任何干预手段,干预21 d后,观察大鼠行为学改变;取胃组织,观察大鼠胃黏膜组织损伤情况及病理改变;酶联免疫吸附（ELISA）法测定胃黏膜组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和表皮生长因子（EGF）的含量。[结果] 腹部推拿组大鼠扭体反应和旷场实验均有改善。模型组大鼠胃黏膜出现较严重的肉眼可见损伤,而经腹部推拿干预后胃黏膜损伤明显减轻。病理学结果显示,空白对照组大鼠胃黏膜结构完整,模型组大鼠胃黏膜损伤明显,出现炎性细胞浸润,而腹部推拿组大鼠胃黏膜损伤程度较轻。与空白对照组比较,模型组大鼠胃黏膜TNF-α、IL-6的分泌显著升高,EGF含量显著降低,经腹部推拿干预后炎性因子均有所下降,EGF显著升高。[结论] 腹部推拿可以通过降低胃黏膜TNF-α、IL-6的含量,提高EGF的含量,发挥促进大鼠乙醇性胃黏膜损伤的修复作用。     

降脂益肝茶对非酒精性脂肪肝大鼠防治作用的实验研究

目的：观察实验药物降脂益肝茶对非酒精性脂肪肝大鼠的防治作用。方法：选用Wistar大鼠为实验动物，用高脂饲料喂养12周复制大鼠非酒精性脂肪肝模型，以东宝甘泰片作对照观察降脂益肝茶对模型大鼠的影响。结果：与模型组相比，降脂益肝茶能显著降低血脂、改善肝脏功能．对肝脏指数无影响。病理结果显示：降脂益肝茶能显著减轻模型大鼠肝细胞脂肪变性程度，与阳性对照药东宝甘泰片相比，其差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：降脂益肝茶具有良好的抗脂肪肝的作用。     

降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪肝肝型脂肪酸结合蛋白mRNA表达的影响

目的:观察降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)mRNA表达的影响。方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(每组10只):正常组(N1,N2)给予普通饲料喂养;模型组(M1,M2)和治疗组(D₁,D_{2)给予高脂饮食喂养;D1组在给予高脂饮食的基础上于0周时即给予降脂益肝冲剂,D2组于8周时给予降脂益肝冲剂,同时模型组和正常组分别给予等量的饮用水,于8周、12周末两个时点处死大鼠。测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素敏感指数(ISI);HE染色观察肝组织病理变化;RT-PCR分别检测各组大鼠肝脏L-FABP的表达。结果:模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG升高,ISI降低,伴典型的脂肪性肝炎;与模型组相比,治疗组的各项指标比同期模型组都有所改善,两组间有统计学差异。模型组大鼠肝组织的L-FABPmRNA表达增高,与模型组相比治疗组L-FABPmRNA表达显著降低,说明降脂益肝冲剂能减少脂肪肝大鼠肝组织L-FABPmRNA的表达。结论:降脂益肝冲剂能通过调节L-FABP的表达来调节脂质代谢,改善胰岛素抵抗,降低肝脏的脂质沉积,有效地治疗大鼠非酒精性脂肪肝。}     

针刺对5-氟尿嘧啶所致肠黏膜屏障破坏大鼠的保护作用

目的:观察针刺对5-氟尿嘧啶(5-Fu)所致肠黏膜屏障破坏的保护作用,为临床针刺防治化疗引起的肠黏膜损伤提供实验依据。方法:30只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组和针刺组,每组10只。腹腔注射5-Fu复制肠黏膜损伤模型。针刺组针刺双侧"天枢"和"足三里"穴,每天1次,连续6d。观察大鼠体质量变化、腹泻状况评分、小肠黏膜厚度,ELISA法测定血浆内毒素(endotoxin,ET)含量、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性和D-乳酸(D-lactate acid,D-LA)水平。结果:从实验第2天起,模型组体质量始终低于空白组(P0.05,P0.01);实验第6天,针刺组体质量高于模型组(P0.05)。模型组和针刺组大鼠均在实验第6天达到腹泻高峰,且第6天时针刺组的腹泻发生率和腹泻均分均低于模型组(P0.01)。实验第7天,模型组小肠黏膜厚度低于空白组(P0.01),针刺组和模型组比较小肠黏膜厚度的差异无统计学意义(P0.05)。模型组血浆ET含量、DAO活性和D-LA水平均明显高于空白组(P0.01);针刺组血浆ET含量、DAO活性和D-LA水平均低于模型组(P0.01)。结论:针刺疗法对5-Fu所致大鼠肠黏膜屏障的破坏有一定的保护作用,能够促进肠功能恢复。     

鲜生地(冻干粉)对肝损伤模型大鼠肠生物屏障的影响

[目的]探讨鲜生地(冻干粉)对肝损伤模型大鼠肠生物屏障的影响。[方法]采用Pringle’s maneuver法制作大鼠肝缺血再灌注损伤模型。将64只实验大鼠随机分为假手术组、模型组、鲜生地(冻干粉)组及乳果糖组。观察大鼠粪便球杆菌比例、菌落培养,测定血清内毒素水平。[结果]鲜生地组、乳果糖组粪便中益生菌增加,大肠杆菌减少,血清内毒素水平降低。[结论]鲜生地能够调节肠道菌群,降低血内毒素水平,可能通过改善肠生物屏障,使肝细胞得到恢复。     

广藿香油对感染后肠易激综合征大鼠肠黏膜屏障的影响

目的:研究广藿香油对感染后肠易激综合征(PI-IBS)大鼠肠黏膜机械屏障和免疫屏障的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组,PI-IBS模型组、藿香正气液组、广藿香油低、中、高剂量组,每组8只。采用结肠灌注乙酸的方法建立PIIBS大鼠模型。正常组和模型组ig生理盐水,藿香正气液组ig藿香正气液3.3 m L·kg~(-1),广藿香油低、中、高剂量组分别ig广藿香油2,3,4 g·kg~(-1),每日1次,共5 d。采用透射电镜观察结肠黏膜上皮细胞超微结构;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)的方法检测各组大鼠血清二胺氧化酶(DAO)和血清免疫球蛋白A(SIg A)含量;采用免疫组化检测结肠肠黏膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果:PI-IBS大鼠结肠上皮细胞微绒毛稀疏,长短不一,有微绒毛断裂现象。广藿香油高剂量组对受损的上皮细胞有改善作用。PI-IBS组血清DAO含量高于正常组(P0.05)。广藿香油高剂量组血清DAO含量低于PI-IBS组(P0.05),与正常组比较,无显著性差异。PI-IBS组血清SIg A含量低于正常组(P0.01)。藿香正气液组、广藿香油高剂量组血清SIg A含量与正常组之间无显著性差异。PI-IBS组ICAM-1蛋白表达IA值明显高于正常组(P0.01)。广藿香油高剂量组ICAM-1蛋白表达IA值均明显低于模型组(P0.05),与正常组比较,无显著性差异。结论:广藿香油通过修复受损的肠上皮细胞的超微结构,降低肠道通透性,保护肠黏膜机械屏障。通过促进SIg A分泌,抑制ICAM-1的表达,发挥对PI-IBS免疫屏障的调节作用。     

葱白提取物对非酒精性脂肪肝模型大鼠ATPase6、ATPase8表达的影响

[目的]观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠ATP合酶Fo亚基6(ATPase6)、ATP合酶Fo亚基8(ATPase8)表达的影响,并探讨其作用机制。[方法]将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组,每组10只。采用高脂饮食喂养复制NAFLD模型大鼠,造模10周后,给予葱白提取物连续干预4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)的含量;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝脏组织结构变化;Real time PCR检测大鼠肝脏组织中ATPase6、ATPase8 mRNA的表达。[结果]与正常组比较,模型组出现明显肝脂肪变性,血清ALT、AST、TC、TG水平明显升高(P0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA的表达明显降低(P0.05);相较于模型组,葱白低、中、高剂量组肝脂肪变性均不同程度减轻;血清ALT、AST、TC、TG水平均不同程度降低(P0.05),ATPase6、ATPase8 m RNA表达不同程度升高(P0.05)。与葱白低剂量组比较,葱白中、高剂量组肝脂肪变性减轻明显,ALT、AST、TC、TG水平明显降低(P0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA水平明显升高(P0.05),中、高剂量葱白组之间差异无统计学意义。[结论]葱白提取物能够改善肝脂肪变性,可能与提高ATPase6、ATPase8的表达,增加肝线粒体ATP合成有关。     

鳖甲寡肽I-C-F-6对乙醇诱导的小鼠慢性肝损伤的实验研究

[目的]探讨鳖甲寡肽I-C-F-6对乙醇诱导的小鼠慢性肝损伤的预防作用,并分析其可能的保护机制。[方法]将90只ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、寡肽低剂量组(0.12 mg/kg)、寡肽高剂量组(0.24 mg/kg)、阳性药组(240.00 mg/kg)。正常对照组和模型组均皮下注射生理盐水(0.12 m L/kg);寡肽低剂量组和寡肽高剂量组分别皮下注射寡肽的生理盐水溶液(0.12 m L/kg);阳性药组灌胃还原型谷胱甘肽生理盐水溶液(0.12 m L/kg),同时除正常对照组外,其余4组给予灌胃40%乙醇(0.12 m L/kg),每日1次,连续16周。16周后,末次给乙醇12 h后处死小鼠采集血液样品和肝组织样品,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)的活力,肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛含量(MDA),单胺氧化酶(MAO)的活力,并进行病理组织学检查。[结果]鳖甲寡肽I-C-F-6使灌胃乙醇后小鼠体内ALT、AST、MDA、MAO、AKP的含量显著降低(P0.05),肝组织匀浆中SOD的活力明显升高(P0.05),肝脏病理损伤减轻。[结论]鳖甲寡肽I-C-F-6对小鼠慢性酒精性肝损伤具有一定的预防保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,清除自由基,升高SOD的活力有关。     

中药金三莪对实验性肝纤维化大鼠小肠通透性的影响

目的　观察中药金三莪对实验性肝纤维化大鼠小肠通透性的影响及其作用机制。方法　将大鼠分为A ,B ,C 3组 ,B组和C组采用四氯化碳造模 ,C组于造模第 4周开始灌胃中药金三莪 ,A组和B组灌胃生理盐水 ,共 4周。观察各组大鼠肝功能 ,血清内毒素、D -乳酸、二胺氧化酶 (DAO)及光镜下肝和小肠组织的病理改变。结果　C组大鼠血清ALT及AST值降低 ,肝小叶结构趋于正常 ,纤维间隔变薄 ,血清内毒素、D -乳酸、DAO水平减低 ,与B组比较有显著性差异。结论　中药金三莪能有效保护肠黏膜 ,阻止肠通透性增加 ,可减轻四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的肝损伤及纤维化程度。     

火针干预脊髓损伤大鼠后血清对神经干细胞增殖分化的影响

[目的]研究离体状态下火针干预脊髓损伤大鼠后提取血清对神经干细胞增殖分化的影响。[方法]将15只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及火针组,相应干预3 d后取各组大鼠血清。从孕14天昆明小鼠胚胎脊髓组织中分离培养神经干细胞,同时采用上述各组血清进行培养,7 d后观察各组神经干细胞增殖与分化情况。[结果]神经干细胞在各组血清中均能存活、增殖并可向神经元分化,火针组神经干细胞增殖数目显著多于假手术组及模型组,且火针组神经元分化比例高于其余两组(P<0.05)。[结论]火针干预脊髓损伤大鼠后血清可促进神经干细胞增殖并向神经元分化。     

甘草总皂苷及水提物对肝损伤大鼠肠道菌群的影响

目的探讨甘草总皂苷及水提物对肝损伤大鼠肠道菌群的影响。方法采用ip四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤模型,模型大鼠分为4组,分别ig给予甘草总皂苷和甘草水提物,并以联苯双酯作为阳性对照组,模型组ig生理盐水。同时设对照组,ig给予生理盐水。于给药结束后,测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;收集大鼠粪便,通过16 S rRNA测序对各组大鼠肠道菌群的多样性进行分析。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清中ALT、AST水平均显著降低(P0.05、0.01);与模型组比较,联苯双酯组大鼠菌群结构未发生显著变化,而甘草总皂苷组及甘草水提物组均表现出不同的群落组成。并且相对于水提物组,总皂苷组显著提高了乳酸杆菌属和杆菌门S24-7科菌群的相对丰度。但甘草总皂苷组和甘草水提物组的大鼠肠道菌群与对照组大鼠肠道菌群之间仍存在差异,并没有完全恢复到正常状态。结论甘草总皂苷与甘草水提物均可以改善慢性肝损伤,并对肝损伤大鼠肠道菌群发挥不同的调控作用。