HCV核心抗原检测用于丙型肝炎早期诊断的价值评估

目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-c Ag)检测用于丙型肝炎早期诊断的价值.方法 对门诊体检人群、无偿献血人群进行HCV抗体初检、复检,筛选HCV阳性血清标本(HCV抗体初检、复检均为阳性)、HCV可疑血清标本(初检或复检HCV抗体单项结果阳性)检测HCV核心抗原;同时对单项ALT增高的标本、血液筛查合格标本进行HCV核心抗原的检测.对HCV核心抗原阳性标本做HCV RT-PCR检测.结果 56例HCV阳性血清标本检测出HCV-c Ag阳性15例,49例HCV可疑血清标本检测出HCV-c Ag阳性11例,47例单项ALT增高的标本检测出HCV-c Ag阳性1例,112例合格标本未检出HCV-c Ag阳性.HCV-c Ag阳性标本经PCR测定HCV-RNA阳性23例.结论 HCV-c Ag检出时间早于抗体,缩短了检测"窗口期",可用于丙型肝炎的早期诊断.     

ELISA试剂检测抗HCV反应性结果分析

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)进口酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在血液筛查中的效果及与国产试剂、重组免疫印迹试验(RIBA)确证检测的相关性。方法用RIBA确证试剂及国内销量前2名的国产抗HCV ELISA试剂对56例进口抗HCV ELISA试剂检测呈反应性的标本进行检测分析。结果 56例标本经RIBA确证结果为阳性12例,不确定18例,阴性26例。3种试剂均为反应性的9例标本中,确证阳性7例,不确定1例,阴性1例。结论目前市售的丙型肝炎ELISA试剂均存在较大的生物学假阳性,不同试剂间检测结果仍存在一定差异。为确保输血安全,建议有条件的采供血机构实验室抗HCV检测时以国产和进口试剂联合检测为佳。     

溶血对国产新型间接法试剂检测HCV抗体的影响

目的探讨样本溶血对改模后国产HCVELISA试剂检测结果的影响。方法分别将50例HCV阴性标本、弱阳性标本和强阳性标本人为造成不同程度的溶血,比较溶血前后不同试剂检测标本OD值的变化差异,分析溶血标本是否对间接法ELISA实验存在干扰,不同试剂间是否存在差异。结果对于HCV抗体阴性标本,两种试剂检测溶血标本的OD值与溶血前比较差异无统计学意义(P>0.05);对于HCV抗体弱阳性标本,两种试剂在5、10、15g/L溶血标本检测的OD值与溶血前比较,差异有统计学意义(P<0.05),在检测20g/L溶血标本的OD值与溶血前比较差异无统计学意义(P>0.05);两种试剂检测结果OD值均随溶血程度增加而呈现先降低后增加的曲线变化;对于HCV抗体强阳性标本,两种试剂在溶血后标本检测OD值与溶血前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论改模后间接法HCV抗体检测试剂抗溶血干扰能力增强,但溶血标本对改模后HCV酶免试验结果仍存在多种干扰,有可能导致检验结果出现偏差;国产HCV试剂之间存在差异,对于灰区结果和重度溶血标本需要重新取样,进行再捡。     

酶免疫条带技术检测抗-HCV的初步探讨

丙型肝炎病毒 ( HCV)是引起输血后非甲非乙型肝炎 ( PT- NANBH)的主要致病因子 [1] ,1 989年CHIRON公司的 CHOO等人采用最新的分子生物学技术首次从基因水平阐明了 PT- NANBH病毒的基因结构 [2 ] ,并将其命名为丙型肝炎病毒。检测抗 - HCV抗体的 ELISA试剂经过了三代的发展 ,灵敏度与特异性都有所提高。为了解决 EL ISA方法中存在的假阳性问题 ,笔者采用 RIBA3.0试剂测定 5 1例经 ELISA检测为阳性的标本 ,结果报道如下。材料与方法1　标本来源　 5 1例 ELISA法抗 - HCV阳性标本均来自本站的无偿献血者 ,均应用两种以…     

三种不同试剂检测丙型肝炎病毒抗体的比较

丙型肝炎是我国主要的病毒性肝炎之一,其最大特点是易演变成慢性。目前尚无有效的疫苗能够预防丙型肝炎病毒(HCV)感染,也无特效的药物治疗。因此探讨抗-HCV的快速临床检测方法和试剂,有助于早发现、早治疗,并对控制各种交叉感染具有重要意义。     

第4代人类免疫缺陷病毒酶免检测试剂的应用与分析

目的通过与第3代人类免疫缺陷病毒(HIV)酶免试剂的比较,分析第4代试剂的检测性能。方法运用第3代和第4代试剂平行检测无偿献血者标本、室内质控品、室间质评血清和临床干扰性标本,比较其特异性和灵敏度。结果从无偿献血者血样中检出有反应性标本20例,其中第3代试剂检出7例,第4代试剂检出16例,有2例标本由双方共同检出并最终确认为阳性。检测1NCU/mL室内质控品,S/CO值无明显差异,变异系数(CV)值在11%～14%。室间质评血清检测中,对临界值弱阳性标本的判定只有第4代HIV试剂准确无误。检测干扰性标本,两种试剂检测结果完全一致,未见交叉反应。结论第4代HIV酶免检测试剂适合献血者的筛查,有利于保障血液的安全。     

艾滋病病毒感染对酶联免疫吸附试验试剂检测静脉吸毒人员丙型肝炎病毒抗体反应强度影响的探讨

目的探讨艾滋病病毒(HIV)感染对ELISA试剂检测静脉吸毒人员丙型肝炎病毒(HCV)抗体的影响,为HIV、HCV混合感染检测策略的提出和修改提供理论依据。方法按是否感染HIV分组对两种抗-HCVELISA试剂检测反应强度(S/CO)≥1的分布进行对比,采用SPSS 15.0软件分析。结果两组样本经两种试剂检测反应强度(S/CO)的构成差异有统计学意义(P0.05),HIV阳性组HCV抗体检测低反应强度的构成高于HIV阴性组(P0.05)。对科华试剂检测为低反应强度的标本,与用Ortho试剂检测结果的一致性在两组间差异有统计学意义(P0.05)。结论是否感染HIV对科华HCV抗体ELISA试剂及Ortho HCV 3.0 ELISA试剂反应强度均有影响。HIV感染者可能出现HCV抗体ELISA检测不确定或假阴性反应,弱阳性反应标本可增加假阳性可能。     

联合进口与国产试剂检测献血者抗-HCV的必要性分析

目的　探讨5种不同厂家酶免疫试剂的灵敏度和联合应用的必要性。方法　将2 0份抗 HCV阳性标本按1∶10 0～1∶15 0 0不同倍数进行稀释,用5种进口与国产酶免疫试剂检测不同稀释倍数抗 HCV阳性标本。结果　2 0份阳性标本经5种不同厂家试剂检测,结果均为阳性,无一漏检。随着2 0份血样稀释倍数增加,阳性标本检出数和检出阳性标本的试剂数逐渐减少,当稀释倍数达到1∶110 0～1∶130 0时,国产与进口试剂在灵敏度上的差异有显著性(P <0 .0 1)。结论　献血者初复检宜分别选用灵敏度不同的国产和进口试剂联合检测,以确保检测结果的可靠性。     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法酶联免疫试剂的初步临床评价

目的对研制的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）酶联免疫检测试剂进行临床评价。方法以克隆表达的HCV多表位嵌合蛋白作为包被抗原，经多表位嵌合蛋白修饰后用于标记抗原，研制HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂；检测血液筛查阴性标本440份，乙肝表面抗原阳性标本90份，HIV抗体阳性标本10份，梅毒螺旋体抗体阳性标本90份及丙型肝炎病毒抗体阳性标本259份。结果对259份HCV抗体阳性标本进行检测时，有3份标本未检出，应用Chiron RIBA确认试剂检测后，结果为阳性。其余标本的检测结果均为阴性。结论采用HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂共检测889份标本，其中只有3份标本结果不一致，总符合率99．7％，敏感性和特异性较好。     

用不同厂家ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性分析

目的探讨不同厂家酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)结果的差异性。方法用4种不同厂家生产的第3代ELISA抗HCV试剂检测经上海科华公司生产的ELISA抗HCV试剂检测为阳性的出入境体检人员的血清标本62例,结果不一致的标本再用MP HCV BLOT3.0检测确认。结果A、B、C、D 4种试剂阳性反应数分别为59、50、43和53份,其中试剂B和C、B和D比较差异无统计学意义(P>0.05);试剂C和D比较差异有统计学意义(P<0.05)。4种试剂反应都阳性标本37份,结果不一致的标本25份,经确认有9份标本阳性。结论不同厂家抗HCV试剂检测结果的阳性率有较大差异,提示选择灵敏度较高的试剂进行初筛,并且要有另一种灵敏度和特异性高的试剂作为复检方法,当2种试剂检测都为阳性,且标本吸光度值与阳性判定值(cut off)的比值(S/CO)≥3.8时,则可判定为抗HCV阳性;当检测结果为阳性但其S/CO值≤3.8或其中1种检测方法结果为阴性,建议用免疫重组印迹(RIBA)试验确认。     

抗-HCV-IgG抗体及血清HCV RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值

目的探讨抗-HCV-IgG抗体与血清HCV RNA应用于丙型肝炎诊断中的临床价值。方法选择2014年10月~2016年10月检验科收集的114例丙型肝炎待查者的血清标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对抗-HCV-IgG抗体进行检测,同时采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)对HCV RNA载量进行检测。统计所有标本抗-HCV-IgG抗体、HCV RNA检测结果。结果采用ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率为25.44%(29/114);采用荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率为27.19%(31/114)。31例HCV RNA阳性标本中抗-HCV-IgG阳性标本有26例,符合率为83.87%(26/31)。ELISA检测抗-HCV-IgG抗体阳性率与荧光定量PCR检测HCV RNA阳性率的差异无统计学意义(P0.05)。伴随HCV RNA病毒载量的不断增多,抗-HCV-IgG阳性抗体检出率明显提高;不同HCV RNA病毒载量的相邻区间的抗-HCV-IgG阳性抗体检出率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 ELISA检测抗-HCV-IgG抗体和荧光定量PCR检测HCV RNA应用于丙型肝炎诊断均具有一定的临床价值,血清HCV RNA病毒载量是判断HCV感染的重要依据,能够有效反映病毒活动性及复制程度,然而单一的抗-HCV-IgG抗体、HCV RNA检测尚存在局限性,易出现漏诊,两者联合检测可显著提高丙型肝炎检出率,做到早诊断、早治疗,提高临床疗效。     

血液筛查中丙型肝炎病毒检测方法的应用评价

目的比较血液筛查中丙型肝炎病毒的检测方法,并探讨其应用价值。方法收集2011年8～12月血液筛查中酶联免疫吸附试验(ELISA)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阳性标本共41例,使用重组免疫印迹试验进行确证;同时用新创、Ortho两种抗-HCV ELISA试剂以及Architect Anti-HCV Reagent化学发光试剂进行检测,比较三者结果的差异。结果统计学分析显示,3种检测方法的检测结果差异有统计学意义。重组免疫印迹试验检测HCV阳性35例,阴性6例,与Architect化学发光法结果相符,新创ELISA法检测41例全为阳性,Ortho ELISA法检测阳性33例,阴性8例。结论 Ortho试剂对HCV检测的特异性高于新创试剂,化学发光法对HCV检测的特异性高于ELISA法,化学发光法与ELISA法联合检测能提高血液筛查中HCV的阳性检出率,对可疑标本再做重组免疫印迹试验分析。     

丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸与丙型肝炎抗体及肝功能的检测

目的对丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)定量检测结果与丙型肝炎抗体(抗-HCV)的检测结果以及丙氨酸转氨酶(ALT)水平进行比较分析,探讨其相关性及临床意义。方法对251例丙型肝炎患者血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测HCV RNA含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测抗-HCV,用生化自动分析仪检测ALT值。结果251例丙型肝炎患者血标本均为抗-HCV或HCV RNA阳性,其中:①抗-HCV阳性235例(93.6%);HCV RNA阳性197例(78.5%)。②抗-HCV和HCV RNA同时阳性181例(72.1)%;抗-HCV阳性,HCV RNA阴性54例(21.5%);HCV RNA阳性,抗-HCV阴性16例(6.4%);③ALT异常者164例(65.3%),其中HCV RNA阳性143例,HCV RNA阴性21例;ALT正常87例,其中HCV RNA阳性54例,HCV RNA阴性33例;HCV RNA水平与ALT异常率呈正相关(rs=0.468,P=0.000),而与ALT水平高低无相关性(r=-0.048,P=0.447)。结论抗-HCV和HCV RNA含量的检测在丙型肝炎的诊断中具有重要意义;二者同时检测可以提高临床对丙型肝炎的诊断;丙型肝炎患者HCV RNA水平与ALT异常率呈正相关,而与ALT水平高低无相关性。     

121例抗-HCV弱阳性病例的调查研究

目的 探讨抗-HCV弱阳性标本对感染丙型肝炎病毒(HCV)判断.方法 对2007年3月1日至2008年9月30日6 752例患者中121例抗-HCV弱阳标本复查及HCV-RNA定量检测,并在3、6个月及1年后再作抗-HCV及HCV-RNA检测,以确定感染HCV状况.结果 121例抗-HCV弱阳性标本复查后,只有116例为阳性标本,其中HCV-RNA阳性15例;3个月后第2次复查抗-HCV阳性只有12例,HCV-RNA阳性9例;6个月后第3次复查抗-HCV阳性只有10例,HCV-RNA阳性8例;1年后第4次复查抗-HCV阳性只有9例,HCV-RNA阳性8例.结论 抗-HCV弱阳性标本不能忽视,最好能随访复查,以确定是否感染HCV.     

重组免疫印迹试验对3种进口抗-HCV ELISA试剂组合应用的探讨

目的探讨3种进口抗-HCV ELISA试剂两两组合的应用价值。方法采用3种进口抗-HCV ELISA试剂同时筛查51例抗-HCV结果不一致的弱阳性标本,并用抗-HCV分段确证试剂进行确证。结果 51例抗-HCVELISA弱阳性标本,抗-HCV分段确证试剂阳性35例,可疑16例,16例可疑标本经NAT检测分析:HCV RNA阳性7例,确认为阳性;9例为阴性,判定为抗-HCV可疑。单一ELISA试剂假阴性率19.24%~72.41%,试剂组合后假阴性率4.76%~30.95%。结论选择抗-HCV检测试剂的最佳组合对保证输血安全意义重大。     

Murex丙型肝炎病毒血清分型试剂应用及其评价

目的探讨检测丙型肝炎病毒的血清学分型实用检测方法。方法采用Abbott公司的Murex HCV酶联免疫抗原竞争法,对67例抗-HCV阳性的慢性丙型肝炎患者血清进行检测。结果67份抗-HCV阳性标本中,61份可分型,分型率为91.0%(61/67)。其中1型44例(72.1%),2型15例(24.6%),3型1例(1.6%),(1+2)型1例(1.6%);同时,对44例HCV RNA阳性标本进行基因分型,两者符合率为97.6%。结论Murex HCV血清分型方法特异、敏感、简便、快速,其结果对临床抗病毒治疗具有指导作用。     

不同方法测定对丙型肝炎诊断的影响分析

目的通过对两种丙型肝炎检测方法的比较,选择适合临床体检筛查快速检测的丙型肝炎的实验室诊断技术。方法对抗HCV特异性抗体进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测;同时,对HCV RNA采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)检测,对比两种方法的检出率。结果 600份标本中,50份检出抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性,其中有47份标本HCV RNA检测呈阳性,两种方法的符合率为94.0%。结论第3代抗HCV抗体检测试剂盒,有较高的灵敏度和特异性,可作为临床筛查HCV感染的主要检测方法。     

Murex丙型肝炎病毒血清分型试剂应用及其评价

目的探讨检测丙型肝炎病毒的血清学分型实用检测方法。方法采用Abbott公司的Murex HCV酶联免疫抗原竞争法，对67例抗-HCV阳性的慢性丙型肝炎患者血清进行检测。结果67份抗-HCV阳性标本中，61份可分型，分型率为91．0％(61／67)。其中1型44例(72．1％)，2型15例(24．6％)，3型1例(1．6％)，(1 2)型1例(1．6％)；同时，对44例HCV RNA阳性标本进行基因分型，两者符合率为97．6％。结论Murex HCV血清分型方法特异、敏感、简便、快速，其结果对临床抗病毒治疗具有指导作用。     

HCV胶体金与ELISA法在献血者体检中的应用比较

目的应用丙型肝炎病毒（HCV）胶体金法检测无偿献血者,并与抗-HCV ELISA法比较。方法对2008年1月～2009年12月的5830例无偿献血者,先应用HCV胶体金试纸条检测,再分别用试剂1、试剂2两种抗-HCV ELISA试剂进行常规初检、复检。对HCV胶体金法阳性的标本、试剂1初检、试剂2复检阳性的标本,再进行HCV RNA RT-PCR荧光定量检测。结果在被检测的5830份标本中,HCV胶体金法阳性有11份,抗-HCV ELISA试剂1初检阳性12份、试剂2复检阳性13份;其中初检、复检均阳性的11份,仅初检阳性1份和仅复检阳性2份,HCV RNA RT-PCR荧光定量检测阳性11份。结论本组检验HCV胶体金法与HCV RNA RT-PCR荧光定量法结果符合率为100.0%,HCV胶体金试纸法假阳性率低,操作简便、快速,适合无偿献血者抗-HCV筛选。     

丙型肝炎病毒分片段试剂对抗-HCV临界值附近标本的确认价值

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)分片段(抗-HCV-C、抗-HCV-NS3、抗-HCV-NS4、抗-HCV-NS5)试剂对抗-HCV临界(CO)范围标本的确认价值。方法酶联免疫吸附法(ELISA)方法检测抗-HCV总抗体,结果为临界值(S/CO)或灰区状态(CO±10%)的可疑标本,分离血清后贮存于-29℃低温冰箱内,集中用丙型肝炎病毒(HCV)抗体分片段酶联免疫确认试剂,在全自动酶标分析仪上进行检测,收集可疑标本44例,其中抗-HCVCO±10%阳性24例及CO±10%阴性20例。同时收集抗-HCV总抗体S/CO值大于5.0的标本30例,健康对照标本20例。结果44例抗-HCVELISA总抗体检测S/CO值为灰区状态标本中,HCV分片段确认为阳性者为22.7%(10/44),可疑者为6.8%(3/44),阴性者为70.5%(31/44)。抗-HCVCO±10%阳性中的假阳性率为54.2%(13/24),抗-HCVCO±10%阴性中的假阴性率为5.0%(1/20)。30例抗-HCV检测S/CO值大于5.0的标本中,HCV分片段确认阳性者为80.0%(24/30),可疑者为13.3%(4/30),阴性者为6.7%(2/30);20例健康对照组HCV分片段确认试验均呈阴性反应。结论用HCV分片段酶联免疫确认试剂对抗-HCVELISA总抗体检测是较好的旁证试验,特别对不确定的灰区标本进一步的确认意义甚大,可降低抗-HCV在检测低危人群时所产生的假阳性及假阴性结果,提高临床丙型肝炎诊断的准确率,对血站安全用血、避免浪费血源有一定的实用价值,且操作简便,易于推广应用。