STZ诱导的糖尿病鼠视网膜β-连环蛋白表达上调

目的:探讨链脲霉素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病鼠视网膜β-连环蛋白(β-catenin)表达以及与早期糖尿病视网膜病变发展的可能关系.方法:建立STZ诱导的糖尿病大鼠模型,用伊文思蓝检测视网膜血管的渗透性;免疫组织化学和Western blot方法检测糖尿病鼠视网膜及胰蛋白酶消化的视网膜微血管β-连环蛋白的表达情况.结果:糖尿病诱导4、8和12 wk后视网膜血管渗透性分别增加68%、91%和125%(P＜0.005).免疫组化分析证实对照组视网膜β-连环蛋白主要表达在视网膜光感受器、外网状层、内网状层、神经节细胞层、内界膜及视网膜微血管内皮细胞和周细胞.STZ诱导糖尿病大鼠12 wk后,视网膜及视网膜微血管β-连环蛋白表达显著增加.Western blot分析证明随着糖尿病视网膜病变的发展,视网膜β-连环蛋白表达显著增加.结论:STZ诱导的糖尿病视网膜β-连环蛋白的表达增加,提示β-连环蛋白J能参与早期糖尿病视网膜病变的发生.     

链尿佐菌素诱导的糖尿病鼠视网膜N-钙蛋白的表达

目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病鼠视网膜N-钙粘蛋白(N-cadherin)的表达。 方法 20只Sprague Dawley(SD)大鼠腹腔一次性注射65 mg/kg STZ建立糖尿病模型，另20只SD大鼠腹腔一次性注射等体积枸橼酸盐缓冲液作为对照。伊文思蓝检测视大鼠网膜血管的渗透性；免疫组织化学、Western blotting方法检测对照组及糖尿病组大鼠视网膜及用胰蛋白酶消化的视网膜微血管N-钙粘蛋白表达情况。 结果糖尿病诱导4、8、12 周后视网膜血管渗透性分别增加68%、91%、125%(P<0.005)。对照组视网膜N-钙粘蛋白主要表达在视网膜外网状层、内网状层、内核层、神经节细胞层、内界膜及视网膜微血管内皮细胞和周细胞之间。STZ诱导糖尿病鼠12周后视网膜及视网膜微血管N-钙粘蛋白表达显著下降。Western blotting分析结果显示随着糖尿病视网膜病变的发展，视网膜N-钙粘蛋白表达显著减少。 结论 STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜N-钙粘蛋白的表达降低，提示反应性N-钙粘蛋白可能参与早期糖尿病视网膜病变的发生。(中华眼底病杂志,2007,23:269-272)      

高糖诱导牛视网膜微血管周细胞FOXO1A表达增加

目的:探讨高糖培养牛视网膜微血管周细胞FOXO1A表达.方法:原代培养周细胞,用免疫细胞化学和Western blot 方法检测高糖诱导的牛视网膜微血管周细胞FOXO1A蛋白表达.结果:视网膜微血管周细胞在5mmo1/L D-葡萄糖培养72h后,FOXO1A免疫反应性主要表现在细胞核,在30mmol/L D-葡萄糖或5μmol/L H202培养72h后,FOXO1A免疫反应性显着增加,FOXO1A免疫反应性主要表现在细胞核和细胞质;Western blot发现高糖组和过氧化氢组周细胞培养48,72h 后FOXO1A蛋白活性和表达较对照组显着增加.结论:高糖诱导的视网膜微血管周细胞FOXO1A表达和活性显著增加.     

糖尿病大鼠视网膜黏附连接蛋白表达的变化

目的:探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病视网膜黏附连接VE-cadherin和β-catenin的表达。方法:SD大鼠50只,随机分为正常对照组(Con)、糖尿病组(DM)。腹腔注射STZ建立DM模型,2,5,8wk处死动物。用伊凡思蓝方法检测视网膜的渗透性;用免疫组织化学和Western blot方法检测各组大鼠视网膜VE-cadherin和β-catenin的表达情况。结果:造模后2,5,8wk大鼠视网膜血管渗透性增加。免疫组化分析证实DM大鼠视网膜VE-cadherin主要表达在视网膜血管上,β-catetin主要表达在视网膜外界膜、外核层、外网状层、内网状层和内界膜。Western blot分析证明随着DM视网膜病变的发生发展,视网膜VE-cadherin表达量显著减少,2,5,8wk组与Con组两两比较均有差异(P<0.05);而β-catetin表达量显著增加,2,5,8wk组与Con组两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:STZ诱导的DM大鼠VE-cadherin表达量减少而β-catetin表达量显著增加,两者成反比。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠视网膜β-连环蛋白的影响

目的 探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellims,DM)视网膜β-连环蛋白(β-catenin)的表达,观察辛伐他汀(simvastatin,Sim)对β-catenin表达的影响,探索他汀类药物可能的非调脂性治疗作用.方法 SD大鼠72只,随机分为正常对照组、Sim治疗组(Sim组)、DM生理盐水组(DM组).腹腔注射STZ建立DM模型,成模后Sim组予以Sim灌胃(20 mg·kg-1·d-1),DM组等量生理盐水灌胃,2周、5周、8周处死动物.用伊凡思蓝方法 检测视网膜血管渗透性;用免疫组织化学染色和Western blotting检测各组大鼠视网膜β-catenin的表达情况.结果造模后2周、5周和8周大鼠视网膜血管渗透性增加,DM组伊凡思蓝含量分别为(21.68±3.70)μg·g-1、(25.34±4.40)μg·g-1、(29.78±4.30)μg·g-1,Sim能够改变这种变化,Sim组伊凡思蓝含量分别为(16.45±5.20)μg·g-1、(19.28±4.10)μg·g-1、(23.23±4.60)μg·g-1.免疫组织化学分析证实视网膜β-catenin主要表达在视网膜外界膜、外核层、外网状层、内网状层、内界膜.Western blotting分析证明随着糖尿病视网膜病变的发生发展,STZ诱导的DM大鼠视网膜β-catenin表达量显著增加,DM组与正常对照组和Sim组差异均有统计学意义(P<0.05).结论 STZ诱导的DM大鼠β-catenin表达量增加,Sim可显著抑制这种改变,改善DM大鼠视网膜微循环.     

高迁移率蛋白1在糖尿病大鼠视网膜组织中的表达及其机制

目的：探讨高迁移率蛋白1( high lobility group box 1, HMGB1)在糖尿病大鼠视网膜中的表达及其可能机制。
　　方法：将SD大鼠60只随机分为糖尿病组和对照组。采用STZ腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,糖尿病组大鼠腹腔注射STZ 60lg/kg,对照组腹腔注射同等剂量的生理盐水。分别于1、2和4lo时处死大鼠,摘取视网膜,HE染色观察视网膜结构变化,荧光血管造影观察视网膜血管变化, TUNEL染色观察视网膜细胞凋亡情况, Western Blot检测视网膜中HMGB1和NF-κB的表达。
　　结果：与对照组相比,糖尿病组大鼠视网膜各层细胞排列紊乱,细胞密度减低,可见微血管病变,以及内、外核层变薄和神经节细胞的凋亡;荧光血管造影见周边毛细血管迂曲,可见血管闭塞及无灌注区;Western Blot 检测HMGB1和NF-κB表达呈时间依赖性增高,且两者表达呈正相关(P<0.05)。
　　结论：HMGB1在糖尿病大鼠视网膜中表达增加, HMGB1可能通过NF-κB信号通路参与了糖尿病视网膜病变的发生。     

Ets-1和VEGF在实验性糖尿病视网膜中的共表达

目的：阐明VEGF和Ets-1在糖尿病大鼠视网膜内的表达特点和分布特点。 方法：腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠模型。STZ注射后4wk处死动物，分离各组视网膜总蛋白进行Western　blot分析。将眼球固定后制成14μm厚的冰冻切片进行Ets-1和VEGF免疫荧光双标检测。 结果：Ets-1和VEGF在糖尿病大鼠视网膜内表达均显著增强，而且Ets-1和VEGF在视网膜内的分布特点相似，几乎在视网膜各层均共表达。 结论：Ets-1可能对VEGF诱导的糖尿病视网膜病变有促进作用。     

单核细胞趋化蛋白-1在实验性糖尿病大鼠视网膜中的表达及意义

目的 研究单核细胞趋化蛋白（monocyte chemoattractant protem-1,MCP-1）在不同病程实验性糖尿病大鼠视网膜的表达及探讨MCP-1与糖尿病视网膜病变发生发展的关系.方法 Wistar大鼠64只随机分为正常对照组（NC组）16只和糖尿病造模组（DM组）48只,DM组腹腔注射链尿佐菌素诱发糖尿病,将造模成功DM组糖尿病大鼠随机分为2周、4周、12周和20周组,每组各12只.到各时间点后处死,采用Western Blotting和免疫组织化学法,分析MCP-1在不同病程糖尿病造模大鼠视网膜中的表达,对免疫印迹结果采用计算机图像分析系统处理.结果 免疫印迹结果显示：正常大鼠视网膜中MCP-1的表达非常微弱,糖尿病诱导成功后2周MCP-1蛋白表达比正常组明显增加（P＜0.05）,并随时间的延长表达逐渐增加,到12周时达最高.免疫组织化学结果显示：正常大鼠视网膜各层均无MCP-1表达,大鼠糖尿病诱导成功后2周,视网膜表面血管即有MCP-1阳性细胞表达,以后随病程延长而表达增多.结论 MCP-1在视网膜的表达与糖尿病视网膜病变的发生密切相关.     

PACAP38调控TRPC6表达对糖尿病视网膜病变大鼠的保护作用

目的　探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽-38（pituitary adenylate cyclase-activating peptide-38,PACAP38）在糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）过程中的视网膜保护是否由瞬时受体电位通道6（TRPC6）介导。方法　将30只SD大鼠随机分为空白对照组和STZ组,每组15只。经单次腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱发大鼠糖尿病动物模型。根据不同的干预方式,在注射STZ 2周后,一次性向大鼠一眼玻璃体内注射100 μmol·L^-1 PACAP38（STZ+ PACAP38组）,另一眼注射等量的PBS作为对照（STZ对照组）。采用Western blot和免疫组织化学分析视网膜组织中瞬时受体电位离子通道蛋白6（transient receptor potential channel 6,TRPC6）的表达情况。利用光学相干断层扫描检测各组大鼠的视网膜厚度。将视网膜神经节细胞系RGC-5细胞暴露于高血糖和低氧环境,分别给予PACAP38、TRPC6通道激动剂（OAG）、PAC1受体拮抗剂（PACAP6-38）、TRPC6通道阻滞剂（SKF96365）处理,对照组用完全培养基常规培养,采用MTT法分析不同药物处理对RGC-5细胞活力的影响。结果　与空白对照组大鼠视网膜厚度相比较,STZ对照组视网膜厚度显著增加（P＜0.05）,STZ+PACAP38组大鼠视网膜厚度较STZ对照组明显减少（P＜0.05）。免疫组织化学结果显示:与空白对照组相比较,STZ对照组及STZ+PACAP38组大鼠神经节细胞层、内丛状层、内核层和外丛状层中均检测到了TRPC6免疫阳性信号,且STZ对照组TRPC6免疫阳性表达显著高于STZ+PACAP38组（P＜0.05）。Western blot分析显示,STZ组大鼠视网膜TRPC6蛋白表达显著高于STZ+PACAP38组（P＜0.01）。与HG+DFO+OAG组相比,PACAP38与OAG联合处理可显著提高RGC-5细胞活力（均为P＜0.01）。结论　PACAP38可抑制STZ诱导的DR大鼠视网膜增厚,提高体外暴露于高血糖/低氧环境中RGC-5细胞活力,其可能机制是通过调控TRPC6过表达有效逆转了糖尿病大鼠视网膜病变。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠视网膜血管内皮钙黏蛋白表达的影响

目的观察链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病视网膜血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）的表达及辛伐他汀对VE-cadherin表达的影响,探讨他汀类药物可能的非调脂性治疗作用。方法尾静脉注射STZ法建立糖尿病大鼠模型,造模成功48只。成模次日起,24只大鼠每日给予辛伐他汀20 mg/kg灌胃为辛伐他汀组,24只等量生理盐水灌胃为糖尿病组;另选24只大鼠作为正常对照组。分别在造模后2、5、8周各组取8只大鼠采用伊凡思蓝（EB）法检测视网膜的渗透性,免疫组织化学和Western blot法检测各组大鼠视网膜VE-cadherin的表达情况。结果与正常对照组比较,辛伐他汀组和糖尿病组大鼠体重明显下降,差异均有统计学意义（P〈0.01）,血糖显著上升,差异均有统计学意义（P〈0.01）。与糖尿病组大鼠比较,各时间点辛伐他汀组大鼠体重均明显上升,而血糖均显著下降（P〈0.05）。免疫组织化学分析证实,VE-cadherin在糖尿病组大鼠视网膜血管呈黄褐色阳性表达。Western blot分析表明随着糖尿病视网膜病变（DR）的发生发展,糖尿病组视网膜血管表达VE-cadherin的量显著减少,与正常对照组和辛伐他汀组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。糖尿病组和辛伐他汀组EB渗透量明显高于正常对照组（P〈0.01）,辛伐他汀组低于糖尿病组（P〈0.05）。结论STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜血管中VE-cadherin表达量减少,辛伐他汀可改善这种改变,提示辛伐他汀对DR有预防和治疗作用。     

玻璃体内注射色素上皮源性因子对大鼠早期糖尿病视网膜病变的保护作用

目的　观察玻璃体内注射色素上皮源性因子（ｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ-ｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒ,ＰＥＤＦ）对ＳＤ糖尿病大鼠视网膜ＰＥＤＦ、血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）、炎性相关因子细胞间黏附分子-１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅ-ｃｕｌｅ-１,ＩＣＡＭ-１）和单核细胞趋化蛋白-１（ｍｏｎｏｃｙｔｅｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ-１,ＭＣＰ-１）以及细胞通透性相关因子紧密连接蛋白-１（ｚｏｎｕ-ｌａｏｃｃｌｕｄｅｎｓ-１,ＺＯ-１）和蛋白激酶Ｂ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＢ,ＰＫＢ,又称Ａｋｔ）表达的影响,探讨ＰＥＤＦ对早期糖尿病视网膜病变的保护作用。方法　选取６～８周龄ＳＤ大鼠６０只,随机分为４组:正常对照组（ＣＯＮ组）、糖尿病组（ＤＭ组）、糖尿病生理盐水注射组（ＤＭ＋ＮＳ组）和糖尿病ＰＥＤＦ注射组（ＤＭ＋ＰＥＤＦ组）。链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型后第１周、２周、３周时,ＤＭ＋ＰＥＤＦ组大鼠玻璃体内注射ＰＥＤＦ,而ＤＭ＋ＮＳ组注射同样体积的生理盐水。第４周时处死大鼠,摘出眼球,进行视网膜组织病理学及电镜观察。并采用免疫组织化学方法检测视网膜ＰＥＤＦ、ＶＥＧＦ、ＩＣＡＭ-１、ＭＣＰ-１以及ＺＯ-１、Ａｋｔ的表达情况。结果　糖尿病大鼠均造模成功。４周糖尿病病程尚不能导致明显的视网膜新生血管形成。在透射电镜下,ＤＭ组大鼠视网膜可见神经节细胞水肿,线粒体肿胀变大,基质肿胀明显,可见大部分或全部的嵴消失,部分双侧膜融合,粗面内质网扩张,而玻璃体内ＰＥＤＦ注射可以明显地改善这一病理改变。ＤＭ组大鼠ＰＥＤＦ主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层以及内丛状层、光感受器基质以及色素上皮层、脉络膜等部位;ＶＥＧＦ主要表达于神经节细胞层,ＩＣＡＭ-１主要表达在光感受器层,ＭＣＰ-１主要表达在视网膜内层细胞,包括节细胞层和内核层,ＺＯ-１蛋白主要表达于内核层的细胞以及神经节细胞,Ａｋｔ主要表达于内丛状层以及脉络膜的细胞浆中。同ＣＯＮ组相比,ＤＭ组、ＤＭ＋ＮＳ组视网膜中ＰＥＤＦ、ＶＥＧＦ表达差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,而ＩＣＡＭ-１、ＭＣＰ-１表达增加,ＺＯ-１、Ａｋｔ表达减少,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。ＤＭ＋ＰＥＤＦ组大鼠视网膜中ＰＥＤＦ、ＶＥＧＦ的表达较ＤＭ组和ＤＭ＋ＮＳ组差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,但ＩＣＡＭ-１、ＭＣＰ-１表达减少,ＺＯ-１、Ａｋｔ表达增多,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＰＥＤＦ可以明显地改善糖尿病视网膜病变早期视网膜神经节细胞的损害,通过减少炎性因子和增加细胞连接蛋白而减轻血-视网膜屏障的破坏,从而对早期糖尿病视网膜病变起一定的防治作用。     

单核细胞趋化蛋白-1在早期糖尿病大鼠视网膜中的表达及意义

目的　探讨单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )在早期糖尿病大鼠视网膜中的表达及其与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。 方法　Wistar大鼠随机分为正常对照组 (NC组 )和糖尿病模型组 (DM组 ),每组 12只。大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病模型。8周时全部处死,采用Western免疫印迹法和免疫组织化学法,分析MCP 1在早期DM大鼠视网膜中的表达,对免疫印迹结果采用计算机图像分析系统处理。 结果　8周时,免疫印迹结果显示视网膜中MCP 1的表达DM组明显高于NC组(P<0 01),免疫组织化学法显示 8周时DM大鼠视网膜表面血管、内核层均可见MCP 1阳性着染细胞。 结论　MCP 1在视网膜组织中的表达与DR的发生有密切关系。     

syndecan-1在糖尿病视网膜中的表达

目的:观察syndecan-1在增殖性糖尿病视网膜病变患者视网膜增殖膜及糖尿病大鼠视网膜中的表达变化。方法:SD大鼠行链脲佐菌素腹腔注射以诱导糖尿病。造模成功后,墨汁灌注及视网膜铺片观察视网膜的血管情况。免疫组织化学染色检测大鼠视网膜及人糖尿病视网膜增殖膜中syndecan-1蛋白的表达。结果:糖尿病大鼠9wk时,视网膜周边血管走形迂曲,毛细血管网明显减少,部分毛细血管灌注不良。对照组大鼠的视网膜syndecan-1呈阳性表达,其中神经纤维层、节细胞层呈强阳性表达,内丛状层和光感受器外节呈中度阳性表达,外丛状层呈弱阳性表达。糖尿病大鼠视网膜中,syndecan-1的表达减低,其中神经纤维层、神经节细胞层、光感受器外节呈中度阳性表达,内丛状层及外丛状层呈弱阳性表达。13例人糖尿病视网膜病变视网膜增殖膜标本中,syndecan-1弱阳性表达8例(61.5%),阴性表达5例(38.5%)。结论:临床和动物实验共同表明,糖尿病状态下,视网膜中syndecan-1的表达降低。     

非诺贝特对糖尿病视网膜病变小鼠视网膜神经细胞的保护作用及机制

目的　探讨嘌呤受体P2X7-NOD样受体蛋白-3（Nod-like receptor pyrin domain 3，NLRP3）炎性相关信号转导通路在糖尿病小鼠视网膜神经细胞中的表达情况，初步研究非诺贝特对糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）的保护作用。方法　健康雄性小鼠60只，随机分为实验对照组（N组）、糖尿病组（D组）、非诺贝特治疗组（F组），D组及F组通过腹腔内注射链脲佐菌素制备DR模型，分别于造模后每天记录血糖情况，并于4周、8周、12周进行三组间血糖水平的比较。自造模成功后第2天起，F组每天口服非诺贝特100 mg·kg^-1连续喂养12周，4周后免疫荧光化学法观察视网膜神经胶质细胞及视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell，RGC）的活化情况，Western blot检测视网膜组织中P2X7、NLRP3蛋白的表达情况。结果　与N组相比，D组血糖水平在造模后4周、8周、12周随时间推移均有不同程度增长，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。N组中，GFAP少量表达；D组4周时GFAP的表达主要分布于内界膜（inner limiting membrane，ILM）、RGC层和内丛状层（inner plexiform layer，IPL）；非诺贝特治疗后，F组小鼠视网膜GFAP主要分布于ILM和RGC层，且密度与D组相比明显减弱。Western blot检测结果显示:N组中，视网膜P2X7和NLRP3蛋白仅有少量表达；D组中二者的表达水平在4周时明显升高，与N组相比，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；而此时F组经非诺贝特治疗后小鼠视网膜组织中P2X7和NLRP3蛋白的表达水平较D组明显降低，但仍高于N组，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　非诺贝特可通过下调糖尿病小鼠视网膜组织中P2X7和NLRP3蛋白的表达从而发挥视网膜保护作用。     

糖尿病大鼠视网膜中血管内皮生长因子的表达

目的 利用糖尿病大鼠动物模型，通过大鼠视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothellal growth fac—tor，VEGF)的表达情况，探讨VEGF在糖尿病视网膜病变(Diabetlc Retinopathy，DR)发展过程中作用机理。方法 复制链脲佐菌素(Streptozocin，STZ)糖尿病大鼠动物模型，取不同组、不同时期大鼠视网膜，利用免疫组织化学及原位杂交方法，检测VEGF蛋白质及mRNA的表达情况。结果 正常对照组(H)、血糖恢复组及糖尿病1月组(H1)大鼠视网膜均无VEGF蛋白质及mRNA的阳性表达。糖尿病3月组(M3)未见VEGF mRNA表达，而在内核层及节细胞层VEGF蛋白表达阳性(34％)，此表达与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性细胞相同。糖尿病5月组(M5)VEGFmRNA表达阳性率为67％，表达位于视网膜各层，内界膜中的表达与GFAP免疫组化阳性分布相同，VEGF蛋白质表达强阳性(89％)，主要位于内核层、节细胞层的细胞及血管上。结论 VEGF在STZ大鼠视网膜中的表达与病程相关，而且VEGF的产生存在着自分泌和旁分泌多种途径。     

Distribution and expression of RhoA in rat retina after optic nerve injury

BACKGROUND: RhoA is a small guanosine triphosphatase which participates in signaling pathways of axonal repellents or inhibitors. However, the distribution and expression of RhoA in the rat retina after optic nerve injury has not been elucidated yet. OBJECTIVES: To study the distribution and expression of RhoA in the rat retina after optic nerve injury. METHODS: Immunohistochemistry was used to determine the distribution of RhoA in rat retina after optic nerve injury. The expression of RhoA was analyzed by Western blot. RESULTS: In normal retina and the retina 1 day after optic nerve injury, RhoA was distributed in the retinal ganglion cell (RGC) layer. Three days after optic nerve injury, it existed in RGCs and the inner plexiform layer. However, 7 days after surgery its immunoreactivity was abundant not only in the RGC and inner plexiform layers but also in the inner nuclear and outer plexiform layers. Western blot analysis showed that the expression of RhoA increased significantly in the retina after optic nerve injury in comparison with normal retina. CONCLUSION: These results indicate that the distribution and expression of RhoA were extended and enhanced after optic nerve injury, and that RhoA plays an important role in optic nerve regeneration.