乙型肝炎患者肝组织中IL—18的表达

目的：探讨急、慢性乙型肝炎患者肝组织中IL－18的表达状况。方法：采用免疫组织化学以抗IL－18单克隆抗体对102例肝穿急、慢性乙型肝炎病毒性肝炎石蜡包埋组织中的IL－18进行了检测，部分病例采用原位杂交证实。结果：IL－18在Kupffer细胞、巨噬细胞及肝细胞胸浆表面，其中肝细胞与Kupffer细胞的表达相关。HBsAg及IL－18免疫组化双标记检测显示Kupffer细胞仅有IL－18的表达，部分肝细胞胸浆中有HBsAg和IL－18的双表达。Kupffer和肝细胞胞浆交信号证实了免疫组化结果的可信性。在急性乙型肝炎和慢性肝炎轻度以及慢性肝炎中、重度和慢性肝炎轻度无论是Kupffer还是肝细胞中IL－18的表达程度都有显著性差异（P＜0.05），但在急性和慢性肝炎中、重度之间无显著性差别（P＞0.05）。结论：乙型肝炎患者肝组织中IL－18的表达程度与肝组织炎症、组织损作程度及不同病理类型有关。     

RNA病毒性肝炎抗原表达特点及与肝细胞损伤的关系

目的　探讨HCV、HDV、HGV3种肝炎病毒抗原表达与肝细胞损伤及不同年龄组的关系。方法　采用免疫病理组织化学方法对380例病毒性肝炎患者肝穿活检组织进行检测。结果　肝组织中3种病毒抗原在各年龄组的检出率依次为青壮年＞老年＞儿童。在轻度、中度和重度慢性肝炎中,病毒抗原表达不同。结论　3种病毒抗原表达随患者年龄和肝细胞损伤程度不同而变化。但病毒抗原阳性的肝细胞数量与肝细胞损伤程度没有平行关系,在肝小叶大块坏死及新鲜坏死区内较少看到病毒抗原表达。     

抗人GPC3单克隆抗体在肝脏肿瘤组织学检测中的应用

目的应用抗人GPC3单克隆抗体检测肝脏良、恶性肿瘤组织中GPC3蛋白的表达。方法采用自制鼠抗人GPC3单克隆抗体及免疫组织化学技术检测19例正常肝组织、94例肝细胞癌(HCC)组织、20例胆管细胞癌组织、42例肝脏良性肿瘤组织中GPC3蛋白的表达,并分析GPC3蛋白表达水平与HCC患者临床病理参数的关系。结果 GPC3蛋白在肝细胞癌组织中阳性率达到79.8%,而血管瘤旁正常肝组织、胆管细胞癌组织和肝脏良性肿瘤组织中均不表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。HCC组织中GPC3蛋白的表达与血清AFP水平(P=0.020)、是否伴有门静脉癌栓(P=0.050)、有无包膜等因素相关(P=0.043)。结论抗人GPC3单克隆抗体可特异性检出肝细胞癌组织GPC3蛋白的表达,值得进一步研究以应用于临床诊治。     

CD137表达与慢性乙型肝炎患者肝脏免疫病理损伤程度的相关性研究

目的:探讨CD137表达与慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者肝脏免疫病理损伤程度的相关性。方法:采用ELISA法检测受试者外周血中CD137L的水平;免疫荧光法检测肝组织中CD137的表达;Western blot法检测肝组织中CD137和CD28蛋白水平表达;荧光定量PCR检测肝组织中CD137和CD28mRNA的表达。结果:重度CHB组患者血清CD137L的表达水平均明显高于健康对照组、轻度和中度CHB组患者（P<0.01）。肝组织中CD28mRNA在中度CHB组和重度CHB组患者的表达水平均较健康对照组及轻度CHB组患者明显升高（P<0.01）。重度CHB组患者CD137mRNA表达水平均较健康对照组、轻度CHB组和中度CHB组患者显著升高（P<0.01）。肝组织中CD28蛋白在中度CHB组和重度CHB组患者的表达水平均较健康对照组及轻度CHB组患者明显升高（P<0.01）。重度CHB组患者CD137蛋白表达水平均较健康对照组、轻度CHB组和中度CHB组患者中CD137蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。结论:CD137的活化参与CHB患者肝组织免疫病理损伤过程,与其损伤程度有相关性。     

婴儿巨细胞病毒肝炎肝组织病原和病理检测

目的:对婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎病例作肝组织病原和病理检查,直接诊断CMV的肝脏感染及相应的病理变化.方法:10例肝组织标本,其中5例血清抗CMV-IgM阳性临床诊断为CMV性黄疸肝炎者为实验组,另5例血清抗CMV-IgM阴性为对照组.采用PAP法检测肝组织中CMV-IEA和EA.结果:10例肝组织内检出CMV-IEA和CMV-EA均阳性5例(5/10);CMV肝炎实验组中,检出阳性4例(4/5);对照组阳性1例(1/5).CMV-IEA均位于感染细胞核内,CMV-EA在细胞核和胞浆中均可见,但以胞核为多见,阳性细胞多较集中分布,主要感染细胞为肝细胞、血管内皮细胞、胆管上皮细胞和炎性浸润细胞.10例肝组织内均有不同程度肝细胞肿胀变性或空泡形成,以及炎性细胞浸润,部分病例可见肝细胞内淤胆、汇管区纤维组织增生及肝细胞坏死.结论:对血清抗CMV-IgM阳性、临床诊断为CMV肝炎者与肝组织病原学检查基本相符,而个别血清抗CMV-IgM与肝组织CMV抗原检测不符;CMV抗原阳性组肝细胞损害程度与CMV抗原阴性组无明显差异.     

慢性乙型肝炎共价闭合环状DNA定量测定在诊断和治疗中的价值

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测慢性乙型肝炎(CHB)肝组织HBVcccDNA定量在CHB诊断和治疗中的价值.方法 分别采用FQ-PCR、酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测48例CHB和10例非CHB肝组织HBVcccDNA、肝组织和血清HBVDNA定量、乙型肝炎病毒标志物(HBVM).同时用链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连接法(SP)检测肝细胞中HBcAg表达.研究肝组织HBVcccDNA与HBVD-NA、HBeAg、肝细胞HBcAg水平及肝实质损害间的关系.结果 (1)肝组织cccDNA定量与组织、血清HBVD-NA定量呈正相关(r=0.837,P<0.001;r=0.627,P<0.005).(2)肝组织cccDNA定量与肝细胞内HBcAg 半定量呈正相关(r:0.618,P<0.005).(3)肝组织cccDNA定量与肝实质损害无明显相关(P>0.05).(4)HBeAg阳性较抗-Hbe阳性者肝组织cccDNA定量、肝组织和血清HBVDNA定量高(P<0.05).结论 FQ -PCR法检测肝组织cccDNA定量是评价HBV复制最直接可靠的指标,在CHB的诊断和治疗中有重要意义.     

慢性乙肝患者肝细胞胞浆和胞核的HBcAg表达强度与肝脏炎症纤维化、乙肝病毒复制的关系

目的 分别评定慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者肝细胞胞浆和胞核的HBcAg表达强度,分析与临床的关系,研究肝细胞胞浆和胞核内HBcAg的作用。方法 对CHB患者肝活检标本317例行免疫组化染色,显示HBc Ag在肝细胞胞浆和胞核的表达强度,同时记录患者的多种临床指标。分别分析肝细胞胞浆和胞核的HBcAg表达强度相互关系以及与各临床指标的关系。结果 HBcAg胞浆和胞核表达强度无相关关系(r=0. 104,P=0. 064)。HBcAg表达胞核阴性组比阳性组呈现年龄更大,ALT、肝组织炎症活动度分级(G)及纤维化分期(S)更高,但血清HBeAg阳性率更低的特点; HBcAg表达胞浆阴性和阳性组两组的上述指标差异均无统计学意义(P>0. 05)。HBcAg胞核和胞浆表达阴性组均比阳性组血清HBVDNA载量更低,差异有统计学意义(P=0. 025,P=0. 00)。结论 肝细胞胞核的HBcAg表达强度与肝脏炎症和纤维化联系的紧密性远高于肝细胞胞浆内HBcAg。肝细胞胞核内HBc Ag表达强度可能才是肝脏炎症活跃和纤维化进展的关键,且CHB患者肝细胞胞浆、胞核的HBcAg表达强度均与HBV复制呈正相关。     

慢性乙型病毒性肝炎及其相关肝硬化、肝癌患者肝组织中 TLR4、TGF －β1及 CCL20的表达及意义

目的：通过检测慢性乙型病毒性肝炎（ CHB ）及其相关肝硬化、肝细胞癌（ HCC ）患者肝组织中TLR4、TGF－β1、CCL20表达的变化,探讨TLR4、TGF－β1、CCL20是否与CHB 迁延不愈有关,以及是否参与CHB相关的肝硬化和HCC发生、发展的可能机制。方法选取临床标本,分为4个组,包括正常对照组、CHB 组、肝硬化组、HCC 组。分别为3例健康人、15例CHB患者、7例肝硬化患者、25例HCC 患者肝组织标本,共有石蜡切片150张,采用免疫组织化学方法检测TLR4、TGF－β1、CCL20在各组中的表达。用免疫荧光双标法分别检测TLR4与TGF－β1在CHB、肝硬化、HCC 患者肝组织标本上的共表达;TLR4与CCL20在CHB、肝硬化、HCC 患者肝组织标本上的共表达。结果免疫组化结果显示,TLR4、TGF－β1、CCL20在CHB组、肝硬化组、HCC组肝组织中的表达均明显高于正常对照组（ P＜0．05）, HCC组与CHB 组的表达差异有统计学意义（ P＜0．01）,其中肝硬化组与HCC组的差异无统计学意义（ P＞0．05）;免疫荧光双标结果显示TLR4与TGF－β1和CCL20均共定位于肝细胞胞浆和胞膜上。结论 HBV感染可上调CHB及与其相关的肝硬化、HCC患者肝组织中TLR4、TGF－β1、CCL20的表达,且TLR4、TGF－β1、CCL20在HCC 患者肝组织中的表达明显高于CHB 患者。     

慢性乙型肝炎患者肝脏组织TOLL样受体4的变化和意义

目的 通过检测慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织Toll样受体4(TLR4)的表达变化及其与肝脏病理、临床分度、血清HBV DNA对数值等的关系,探讨TLR4在CHB的意义.方法 采用Elivision二步免疫组织化学方法 检测75例CHB及10例健康对照组肝组织TLR4的表达并予以评分,然后与肝脏病理炎症分级及纤维化分期、临床分度和血清HBV DNA对数值[Lg(血清HBVDNA)]等进行相关性分析.结果健康对照组肝组织无或仅有少量TLR4的表达,CHB组肝组织TLR4的表达明显增强并显著高于健康对照组;在轻、中和重度慢性乙型肝炎患者肝组织TLR4表达强度记分分别为(1.0±0.5),(2.3±0.5)和(2.9±0.4)分,随着临床分度的增加,CHB肝组织上的TLR4表达逐步显著升高(F=104.8,P<0.01,两两间比较均P<0.05),肝组织免疫组化染色强度与临床分度间呈正相关(r=0.838,P<0.01);TLR4的表达强度与肝组织炎症活动度分级(G)呈正相关(r=0.579,P<0.05);但与Lg(血清HBV DNA)以及肝组织纤维化分期(S)均无相关.结论 CHB患者肝细胞TLR4表达上调,TLR4可能与CHB的发病有关.     

慢性病毒性肝炎肝细胞凋亡与Fas抗原和病毒表达的相互关系

采用原位末端标记技术对一组慢性病毒性肝炎患者肝细胞凋亡状况进行研究，并探讨其与病毒和Fas抗原表达的关系。结果：31例患者，25例肝组织中检出末端标记阳性细胞，散布于肝小叶和肝窦内，部分炎症坏死灶中和胆管上皮细胞也可检出阳性细胞；组织炎症活动度较大者和病毒抗原阳性者凋亡指数较高；凋亡细胞可为病毒抗原阳性和阴性；Fas抗原阳性与阴性组间凋亡程度无显著差异。这种现象提示肝炎病毒可能主要通过间接途径向感染和非感染病毒的肝细胞传递死亡信号，其机制有待进一步研究。慢性病毒性肝炎肝细胞凋亡与Fas抗原和病毒表达的相互…     

ICAM-1蛋白和mRNA在慢性乙型肝炎肝组织中的表达

目的：探讨肝组织细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达在慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）发病机制中的作用。方法：用原位杂交和免疫组织化学技术检测１１例正常人和５０例慢性ＨＢＶ感染者肝内ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白表达情况。结果：正常人和慢性无症状ＨＢｓＡｇ携带者肝细胞无ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和ＩＣＡＭ－１表达,ＣＨＢ患者肝细胞１－ＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和ＩＣＡＭ－１表达增强,阳民生肝细胞多分布在汇管区周围和腺泡内炎     

慢性乙肝患者血清NO与肝纤维化关系探讨

目的:研究慢性乙肝患者(CHB)血清一氧化氮(NO)、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LA),IV型胶原(C-IV)血清水平的变化,探讨其在肝纤维化机制中的作用.方法:应用比色法、放免法测定107例CHB、20例健康成人血清NO、HA、LN、C-IV水平.结果:CHB轻、中、重度及肝硬化患者血清NO水平均显著高于对照组(P＜0.01),并随着肝损害和肝纤维化程度的加重而升高,血清NO水平与血清HA、LN、C-IV水平呈相关(P＜0.01).结论:NO不仅与肝损伤密切相关,而且与肝纤维化程度相关,NO参与病毒性肝炎及肝纤维化的病理过程,检测NO有助于判断慢性肝病肝纤维化的程度.     

慢性重型乙型肝炎肝内淋巴细胞AICD现象的探测

目的 了解肝脏局部浸润淋巴细胞是否存在AICD现象及其意义。方法 利用S－P法检测10慢性重型乙型肝炎肝组织Fas和FasL表达。结果 10例慢性重型乙型肝炎肝内浸润淋巴细胞和肝细胞皆有不同程度的Fas和FasL的表达，Fas和FasL在淋巴细胞和肝细胞皆以膜浆型表达为主。结论 慢性重型乙型肝炎和肝组织内细胞损伤的效靶关系十分复杂，肝组织浸润淋巴细胞存在激活诱导细胞死亡现象，浸润的淋巴细胞可能通过Fas/FasL介导的凋亡途径而下调免疫反应。     

慢性乙型肝炎患者血清脂联素水平及其临床意义

目的研究慢性乙型肝炎（CHB,简称慢性乙肝）患者外周血脂联素水平及意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测60例CHB患者（轻度、中度和重度各20例）和20例健康体检者血清中脂联素水平,并测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平,对脂联素和肝功能损伤程度的相关性进行分析。结果 CHB轻、中度组患者血清脂联素水平与对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）,但重度组显著升高（P〈0.01）。脂联素水平与ALT和AST水平呈正相关（均P〈0.01）。结论血清脂联素水平与肝损害程度密切相关,提示脂联素可能参与了机体对抗炎症、保护肝脏功能的过程。     

Study on FAS/FAS-L Expression in Liver Tissue and Hepatocyte Apoptosis in Patients with Hepatitis Gravis

The main pathologic basis of hepatitis gravis isthe death and degeneration of large amount of hepa-tocytes,which leading to hepatic failure.Two typesof hepatocyte death are involved in hepatitis gravis:necrosis and apoptosis.Fora long time,necrosiswasthoughtto be the main type of damage to hepatocytein hepatitis gravis,while no much attention waspaidto apoptosis.The important implications of cellularapoptosis hasbeen recently identified in the pathologyof hepatitis gravis,especially the elevat…     

hFgl2在不同型别肝病患者中表达的临床意义

目的 研究hFgl2在不同型别肝病患者中的表达,分析hFgl2的表达水平与肝病发展的关系.方法 收集我院2011年1月~2013年6月入住我院的不同型别肝病的患者,把健康受试者45例、慢性乙型肝炎轻度患者50例、慢性乙型肝炎中度患者45例、慢性乙型肝炎重度患者47例、慢性重型乙型肝炎患者50例及肝癌患者45例分别分为A、B、C、D、E和F组,采用Northern blot分析不同组织中hFgl2的表达强度,表达最强的组织利用Western Blot法测定hFgl2在不同型别肝病患者中的表达,两组间进行比较,观察hFgl2在各组间的表达差异是否具有统计学意义.结果 在选取的8个组织中,hFgl2在外周血中表达水平最强;慢性乙型肝炎中度组、重度组、慢性重型乙型肝炎组及肝癌组中hFgl2的表达高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）,慢性乙型肝炎重度组、慢性重型乙型肝炎组及肝癌组的hFgl2表达均高于慢性乙型肝炎中度组,差异有统计学意义（P〈0.05）,而慢性乙型肝炎轻度组hFgl2的表达略低于健康对照组,差异无统计学意义（P〉0.05）,慢性重型乙型肝炎组hFgl2表达略高于肝癌组,但差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 hFgl2在不同型别的肝病患者中表达水平不同,并随肝病严重程度的增加表达升高.     

ElastPQ弹性成像技术检测慢性乙型肝炎患者肝硬度的价值

目的：探索ElastPQ弹性成像技术检测慢性乙型肝炎患者肝硬度的价值。方法选择2014年1月至2015年3月期间慢性乙型肝炎患者54例,根据肝损害程度分为轻度组16例、中度组15例、重度组23例,并选择正常对照组10例,使用ElastPQ弹性成像技术检测其肝硬度,统计分析其差异性。结果(1)正常对照组肝硬度(5.464±0.176) kPa,慢性乙型肝炎组肝硬度(9.104±0.678) kPa,慢性乙型肝炎组肝硬度高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)不同程度肝损害组肝硬度分别为轻度组(5.521±0.460) kPa,中度组(8.660±0.916) kPa,重度组(11.210±1.135) kPa。不同程度肝损害组肝硬度比较差异有统计学意义(F=4.946,P<0.05);轻度组分别与中度组和重度组肝硬度比较差异均有统计学意义(P<0.05),而中度组与重度组肝硬度比较差异无统计学意义(P>0.05),且肝功能损害程度越高患者的肝硬度越高。结论 ElastPQ弹性成像技术可以无创定量有效检测肝硬度,为临床治疗慢性乙型肝炎及干预其进展提供了有力的依据。     

丁型肝炎病人肝组织HDAg与HBsAg/HBcAg和HBV DNA表达及关系

目的：探讨丁型肝炎病人肝组织中ＨＤＡｇ与ＨＢｓＡｇ／ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达及关系。方法：应用免疫组化双重染色和原位杂交,检测７９例丁型肝炎病人肝组织ＨＤＡｇ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达,以５２例乙型肝炎作对照。结果：丁型肝炎ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ检出率（８１％、７１％）较乙型肝炎（９４％、９２％）低（Ｐ〈０．０５或０．０１）。ＨＤＡｇ以肝细胞核表达为主,ＨＢｓＡｇ以肝细胞浆表达     

自身抗体及肝功能检测对慢性乙型肝炎合并自身免疫性肝病患者的临床意义

目的 分析自身抗体、肝功能指标在慢性乙型肝炎、自身免疫性肝病以及慢性乙型肝炎合并自身免疫性肝病患者中的表达情况,探讨自身抗体及肝功能检测对慢性乙型肝炎合并自身免疫性肝病早期诊断的临床意义。方法 本次研究收集2013—2021年在苏州市第五人民医院就诊的109例健康志愿者（healthy control, HC）,72例慢性乙型肝炎患者（chronic hepatitis B, CHB）,74例自身免疫性肝病患者（autoimmune liver disease, AILD）以及24例慢性乙型肝炎合并自身免疫性肝病患者（CHB+AILD）作为研究对象。所有入组样本均采集基本信息、入院肝功能指标以及自身抗体检测结果,健康志愿者未进行自身抗体检测。采用SPSS、GraphPad软件对全部数据进行统计分析。结果 年龄、性别在4组样本间差异无统计学意义,其中抗线粒体M2型抗体（anti-mitochondrial antibody M2, AMA-M2）和抗可溶性酸性磷酸化核蛋白抗体（anti-soluble acidic phosphorylated nuclear protein antibody, 抗SP100抗体）在CHB+AILD组[29.2%（7/24）, 17.4%（4/23）]的检测率高于CHB组[5.1%（3/59）, 0（0/59）],提示这2种自身抗体的检测有助于对CHB和CHB+AILD进行鉴别诊断。此外,包括总胆红素在内的8种肝功能指标在4组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。其中,CHB+AILD组总胆红素和直接胆红素水平均高于CHB组和AILD组,而总蛋白和白蛋白水平均低于CHB组和AILD组。碱性磷酸酶和谷氨酰转肽酶在AILD组和CHB+AILD组均高于CHB组。采用二元Logitic回归分析发现联合总胆红素、直接胆红素、白蛋白、谷丙转氨酶以及碱性磷酸酶构建诊断评估模型,评估准确率为0.902。结论 联合自身抗体和肝功能指标检测将有助于增强临床医生对CHB、AILD及CHB+AILD的鉴别诊断能力,从而有助于降低对CHB+AILD的漏诊率,实现早期诊断,为患者更早获得合理治疗和临床治愈提供理论依据。