益智健脑颗粒对老年大鼠空间学习记忆及中枢胆碱能系统的影响

目的:观察益智健脑颗粒对老年大鼠空间学习记忆及中枢胆碱能系统的影响。方法:以自然衰老大鼠为研究对象,通过Morris水迷宫实验、尼氏染色及免疫组织化学等方法的检测,观察益智健脑颗粒对老年大鼠空间学习记忆、基底前脑胆碱能神经元及海马CA1与CA3区和第一躯体感觉区(S1Tr)M1受体阳性神经元的影响。结果:与老年对照组相比,益智健脑颗粒(10g/kg)治疗组平均逃避潜伏期至第四天两者有极显著差异,其空间探索实验中穿越平台次数及潜伏期呈极显著性差异;在内侧隔核(MSN)与斜角带核(VDB)内,胆碱能神经元数目增多,两者有显著性差异,在Meynert核(NBM)内有极显著性差异;海马区与大脑皮质神经元、M1受体阳性神经元数目有所增加,且在CA1与CA3区和S1Tr内有极显著性差异。结论:益智健脑颗粒能改善自然衰老大鼠空间学习记忆能力,机制可能是通过增强基底前脑胆碱能神经元Ch AT的表达水平,提高乙酰胆碱合成量,海马及大脑皮质胆碱能毒蕈碱M1受体表达水平上调则可接受更多来自基底前脑的投射,触发受体后效应,进而对衰老大鼠中枢胆碱能系统具有一定的保护作用。     

去大脑皮层血管痴呆模型的建立及评价

目的：建立血管性痴呆模型。方法：采用Wistar成年大鼠,去除大鼠脑左侧皮层血管建立模型。并结合行为学、神经组织病理学、AchE组化染色和ChHAT、BDNF、trkB免疫组化染色等方法对此模型进行了评价。结果：去除脑左侧皮层血管后,大鼠跳台及水迷官成绩显著下降。HE及Nissl染色观察到损伤侧皮质、海马CAI－CA4区的锥体细胞层及齿状回的颗粒细胞层细胞呈萎缩或呈空泡状的变性。大细胞基底核以及丘脑等处理细胞也呈萎缩变性。大鼠损伤侧皮质AchE阳性纤维分布稀疏,数量明显减少,海马CA1－CA4区 AchE阳性纤维都有不同程度的减少,CA1区减少最明显。大鼠皮质、海马BDNF、trKB表达降低,大细胞基底核AchE、ChAT、BDNF、trkB阳性神经抑数目减少,神经元明显萎缩。结论：去大鼠脑皮层血管痴呆模型,能充分模拟血管性痴呆的病理改变,且损害部位恒定,损及学习、记忆功能,实验结果重复性强,是研究血管性痴呆较理想的动物模型。     

地黄饮子对老年痴呆模型大鼠行为学、AchE及Na^＋K^＋-ATP、Ca^2＋-ATP酶活性的影响

目的：观察古方地黄饮子对老年性痴呆大鼠行为学，以及对大脑海马、丘脑及皮层等组织中的乙酰胆碱酯酶(AchE）、Na^ K^ -ATP、Ca^2 -ATP酶的活性的影响。方法：腹腔注射D-半乳糖建立亚衰老模型，大脑双侧Meynert基底核微注鹅膏蕈氮酸(Ibotenicacid，IBO)，建立拟AD模型，采用避暗法观察该模型大鼠学习记忆能力。并采用酶学测定大鼠大脑海马、丘脑及皮层中AchE、Na^ K^ -ATP、Ca^2 -ATP酶的活性。结果：地黄饮子能缩短模型大鼠避暗学习、记忆潜伏期，减少错误次数；降低大鼠脑组织中AchE的含量，提高ATP酶的含量。结论：地黄饮子能改善AD大鼠学习记忆能力，改善脑组织的能量代谢，防止AT—Pase活性降低．并可维持乙酰胆碱(Ach)的正常水平。     

地黄饮子对老年痴呆模型大鼠行为学、AchE及Na+K+- ATP、Ca2+-ATP酶活性的影响

目的 :观察古方地黄饮子对老年性痴呆大鼠行为学 ,以及对大脑海马、丘脑及皮层等组织中的乙酰胆碱酯酶 (AchE)、Na K -ATP、Ca2 -ATP酶的活性的影响。方法 :腹腔注射D -半乳糖建立亚衰老模型 ,大脑双侧Meynert基底核微注鹅膏蕈氨酸 (Ibotenicacid ,IBO) ,建立拟AD模型 ,采用避暗法观察该模型大鼠学习记忆能力 ,并采用酶学测定大鼠大脑海马、丘脑及皮层中AchE、Na K -ATP、Ca2 -ATP酶的活性。结果 :地黄饮子能缩短模型大鼠避暗学习、记忆潜伏期 ,减少错误次数 ;降低大鼠脑组织中AchE的含量 ,提高ATP酶的含量。结论 :地黄饮子能改善AD大鼠学习记忆能力 ,改善脑组织的能量代谢 ,防止AT Pase活性降低 ,并可维持乙酰胆碱 (Ach)的正常水平。     

地黄饮子对AD模型大鼠的学习记忆及胆碱能损害的影响

目的：探讨地黄饮子对AD鼠学习记忆及胆碱能损害的影响。方法：模型组以D-半乳糖（D-gal）腹腔注射合并β淀粉样蛋白（Aβ）注射海马制备AD动物模型,各治疗组分别在造模的同时灌胃地黄饮子和抗脑衰胶囊、哈伯因。运用穿梭箱检测各组大鼠的学习记忆能力,采用生化法检测各组大鼠脑匀浆AchE,免疫组化方法观察SYN蛋白的变化。结果：中药治疗组均可使各组大鼠潜伏期降低、主动回避反应阳性率明显升高,被动逃避时间显著降低,表明主动、被动反应水平均有所回升,有显著性差异。灌服中药后各治疗组脑组织AchE活性降低,大鼠海马、皮层神经元SYN蛋白表达增加。结论：地黄饮子对痴呆鼠学习记忆能力的提高及改善神经元损伤的作用,可能与地黄饮子改善鼠脑神经元胆碱能损害,来上调海马和皮层神经元SYN蛋白的表达有关。     

天参益智方对老年性痴呆模型大鼠中枢神经递质的影响

目的:探讨天参益智方治疗老年性痴呆的作用机制。方法:以慢性铝中毒法复制老年性痴呆大鼠模型,采用免疫组化法检测模型大鼠海马和皮质内胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性以及兴奋性谷氨酸(Glu)含量。结果:天参益智方可显著提高老年性痴呆模型大鼠海马和皮质ChAT活性,降低AchE活性和兴奋性Glu含量。结论:天参益智方对胆碱能系统功能减退和谷氨酸递质异常增多引起的神经毒性有较好的改善和保护作用,这可能是其益智健脑的作用机制之一。     

固本化痰健脑方对拟痴呆大鼠胆碱系统的影响

目的：观察中药固本化痰健脑方对拟痴呆（AD）模型大鼠胆碱能神经系统功能的影响。方法：用鹅膏簟氨酸建立大鼠AD模型，用改良Ellman法测定大脑组织乙酰胆碱酯酶（AchE）活性，用组织化学染色及图像分析技术测定AchE纤维密度，观察AchE在拟痴呆模型大鼠大脑海马和纹状体尾壳核内的不同分布及密度改变。结果：模型组能显著增高脑AchE活性（P〈0．01），空白组、阳性对照组、固本化痰健脑方高剂量组和低剂量组的AchE活性显著性低于模型组（P〈0．01）；在纹状体尾壳核CPU区和海马CA区，空白组、阳性对照组、固本化痰健脑方高剂量组和低剂量组与模型组相比均具有较高的积分光密度（P〈0．01）。结论：固本化痰健脑方对鹅膏簟氨酸所引起的脑内胆碱能神经元损伤具有一定的保护作用，其作用机制与抑制乙酰胆碱酯酶活性和提高Ach递质的量有关。另外，固本化痰健脑方高剂量较低剂量疗效佳。     

两种黔产淫羊藿总黄酮对痴呆大鼠记忆影响的研究

目的研究贵州产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿中淫羊藿总黄酮(TFE)对D-gal-AlCl3模型大鼠学习记忆能力的影响,比较两种淫羊藿TFE对大鼠学习记忆改善效果差异。方法实验联用D-gal-AlCl312周造模,同时按剂量100,50mg.kg-1.d-1分别灌胃给予TFE。采用Morris水迷宫行为学实验检测其空间记忆能力;应用生化分析技术检测脑组织SOD、AchE活性及MDA含量;HE染色观察海马神经元形态变化。结果 D-gal-AlCl3复合造模形成了大鼠学习记忆障碍,海马神经损伤;两种TFE均能改善模型大鼠学习记忆能力,升高脑组织SOD活性,降低MDA含量及AchE活性,减轻海马区域的病理损伤,以粗毛淫羊藿组效果显著。结论黔产两种淫羊藿TFE在对抗自由基损伤,保护海马神经元,改善D-gal-AlCl3所致脑老化模型大鼠学习记忆能力的作用方面,粗毛淫羊藿较黔岭淫羊藿作用为优。     

银杏内酯A对胆碱能神经功能损伤引起的SD大鼠学习记忆的促进作用

目的 研究银杏内酯A对Meynert基底核（NBA)损伤引起的SD大鼠学习记忆的改善作用。方法 通过N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）单侧损伤SD大鼠NMB以破坏胆碱能神经功能，采用Y型迷宫法检测动物空间辨别学习记忆能力，利用放射化学法检测皮层胆碱乙酰转移酶（ChAT)活力，观察银杏内酯A对胆碱能损伤记忆功能的恢复，脑内ChAT的变化。结果 银杏内酯A对胆碱能损伤记忆功能具有恢复作用，且能防止ChAT活力降低。结论 银杏内酯A能改善NBM损伤引起的大鼠学习记忆能力。     

电针对慢性应激所致大鼠空间学习记忆障碍及海马胆碱能功能的影响

目的 :探讨电针对慢性应激致空间学习记忆障碍大鼠海马胆碱能功能的影响。方法 :采用电击足底结合噪声应激建立大鼠学习记忆障碍模型 ,Morris水迷宫观察动物的空间学习记忆能力 ,放免法检测乙酰胆碱 (Ach)含量、胆碱乙酰转移酶 (ChAT)和乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性。结果 :慢性应激可引起大鼠空间学习记忆功能障碍 ,海马Ach含量减少 ,ChAT和AchE活性降低。电针对上述改变有显著的保护作用。结论 :电针改善慢性应激引起的大鼠空间学习记忆功能障碍可能与其增强海马胆碱能系统的功能有关。     

聪圣胶囊对去皮层血管大鼠前脑脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶mRNA作用的实验研究

目的：研究聪圣胶囊对去皮层血管模型大鼠前脑脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA、酪氨酸激酶（trkB)mRNA作用及机理。方法：建立去大鼠脑皮层血管模型,用原位杂交方法测定聪圣胶囊对其模型大鼠BDNF mRNA、trkB mRNA表达。结果：发现去皮层血管后,聪圣胶囊对大鼠大脑皮质、海马中BDNF mRNA、trkB mRNA表达明显降低,海马CA1区下降最明显,大细胞基底核未见有BDNF mRNA的表达,而存在trkB mRNA的表达。结论：聪圣胶囊通过增强BDNF mRNA、trkB mRNA的表达,促进BDNF及trkB蛋白的合成,挽救将要变性的神经元,维持它们的存活。     

聪圣胶囊对去皮层血管大鼠前脑脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶mRNA作用的实验研究

目的研究聪圣胶囊对去皮层血管模型大鼠前脑脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA、酪氨酸激酶(trkB)mRNA作用及机理.方法建立去大鼠脑皮层血管模型,用原位杂交方法测定聪圣胶囊对其模型大鼠BDNFmRNA、trkBmRNA表达.结果发现去皮层血管后,聪圣胶囊对大鼠大脑皮质、海马中BDNFmRNA、trkBmRNA表达明显降低,海马CA1区下降最明显,大细胞基底核未见有BDNFmRNA的表达,而存在trkBmRNA的表达.结论聪圣胶囊通过增强BDNFmRNA、trkBmRNA的表达,促进BDNF及trkB蛋白的合成,挽救将要变性的神经元,维持它们的存活.     

健脑益智汤对拟血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

目的观察健脑益智汤对拟血管性痴（VaD）大鼠的治疗作用，并探讨其机制。方法采用改进的双侧颈总动脉永久结扎法（2-VO）建立VaD大鼠模型，灌胃给药，用Morris水迷宫法评价健脑益智汤对VaD模型大鼠学习记忆功能的影响，并用免疫组化法检测海马CAI区胆碱乙酰转移酶（ChAT）的表达，比较各组结果之间的差异。结果（10.6～42．4）g／kg健脑益智汤可以明显改善大鼠的学习记忆功能，健脑益智汤治疗组大鼠海马CAI区神经细胞ChAT的阳性表达明显高于模型组。结论健脑益智汤对拟VaD大鼠学习记忆功能有一定的改善作用，其机制可能与增强拟VaD大鼠海马CAI区神经细胞ChAT表达有关。     

电针对神经干细胞移植痴呆大鼠学习能力和组织内乙酰胆碱酯酶的影响

目的:观察电针对神经干细胞(NSCs)海马内移植老年性痴呆(AD)大鼠学习和组织内乙酰胆碱酯酶含量的影响,探讨电针治疗老年性痴呆的机制。方法:采用β-淀粉样蛋白(β-AP)向海马CA1区定向注射制做AD模型,将大鼠分为5组:正常组、模型组、移植组、电针组和移植电针组,每组各12只。针刺选取百会、大椎、人中3个穴位。大鼠跳台检测学习能力;酶免法检测血清、海马和大脑皮层组织内乙酰胆碱酯酶(AChE)含量。结果:移植电针组大鼠跳台潜伏期比模型组增加(P0.05),错误次数比模型组减少(P0.05);血清、海马和大脑皮层组织内AchE含量比模型组降低(P0.05),血清和海马内AchE含量与移植组比较有显著性差异(P0.05)。结论:电针对大鼠组织内乙酰胆碱酯酶含量的改善是治疗AD的作用机制之一,电针结合神经干细胞移植治疗效果更佳。     

针刺对神经干细胞海马内移植痴呆大鼠学习记忆和海马胆碱能系统的影响

目的:观察针刺对神经干细胞(NSCs)海马内移植老年性痴呆(AD)大鼠学习记忆和海马胆碱能系统的影响,探讨针刺治疗老年性痴呆的机制。方法:采用β-淀粉样蛋白(β-AP)向海马CA1区定向注射制做AD模型,将大鼠分为五组:正常组、模型组、移植组、针刺组和移植针刺组,每组各12只。针刺选取百会、大椎、人中三个穴位,并接通电针仪。大鼠跳台检测行为学指标;酶免法检测海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。结果:移植针刺组大鼠跳台潜伏期比模型组增加(P<0.05),错误次数比模型组减少(P<0.05);海马组织ChAT含量比模型组提高(P<0.05),AchE含量比模型组降低(P<0.05);移植针刺组与移植组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:针刺对大鼠海马胆碱能系统的改善是治疗AD的作用机制之一,针刺结合神经干细胞移植治疗效果更佳。     

覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠 学习记忆作用机制研究

目的: 考察覆盆子有效部位对D-半乳糖联合氢化可的松造成肾阳虚型痴呆大鼠的影响,初步阐明覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆的作用机制。方法: 大鼠ip D-半乳糖125 mg·kg^-1,连续6周,后2周im 氢化可的松混悬液25 mg·kg^-1,造成肾阳虚痴呆模型,空白组和模型组灌胃生理盐水,其余各组每天均预防性灌胃覆盆子氯仿部位或乙酸乙酯部位高、低剂量(均按生药量计为24,12 g·kg^-1),连续4周。进行历时5 d的Morris水迷宫实验后,取大鼠皮层进行乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase, AchE)和胆碱乙酰化转移酶(choline acyltransferase, ChAT)活性检测、取海马CA1区进行HE染色和tau蛋白免疫组织化学检测。结果: 与空白组相比,模型组学习记忆能力下降,皮层AchE活性显著升高,ChAT活性显著降低,海马CA1区Pser404-tau阳性细胞明显增加;与模型组比较,覆盆子氯仿部位高、低剂量组、覆盆子乙酸乙酯部位高、低剂量组均能不同程度改善痴呆大鼠学习记忆能力,降低皮层AchE活性,升高ChAT活性;增加海马CA1区细胞总数,减少坏死细胞数,降低细胞坏死率;减少海马CA1区Pser404-tau阳性细胞数。结论: 覆盆子有效部位可能通过降低AchE活性,升高ChAT活性,保护海马CA1区神经元,减少tau蛋白表达而起到改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆。     

针刺对神经干细胞海马内移植痴呆大鼠学习记忆和脑内胆碱能系统的影响

目的:观察针刺对神经干细胞(NSCs)海马内移植老年性痴呆(AD)大鼠学习记忆和脑内胆碱能系统的影响,探讨针刺治疗老年性痴呆的机制.方法:采用β -淀粉样蛋白(β- AP)向海马CA1区定向注射制做AD模型,将大鼠分为5组:正常组、模型组、移植组、针刺组和移植针刺组,每组各12只.针刺选取百会、大椎、人中3个穴位,并接通电针仪.大鼠跳台检测行为学指标;酶免法检测大脑皮层及海马组织胆碱乙酰转移酶(CHAT)含量.结果:移植针刺组大鼠跳台学习、记忆所需次数比模型组减少(P＜0.05);移植针刺组大脑皮层及海马组织ChAT含量比模型组提高(P＜0.05),与移植组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:针刺对大鼠脑内胆碱能系统的改善是治疗AD的作用机制之一,针刺结合神经干细胞移植治疗效果更佳.     

黄芪注射液抑制糖尿病大鼠海马神经元凋亡的机制研究

[目的]探讨黄芪注射液对糖尿病模型大鼠认知功能的影响及其作用机制。[方法]40只雄性SD大鼠,除空白组(n=10)外腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)复制Ⅰ型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和黄芪注射液组(1.6 mg/kg),给药10周。以Morris水迷宫法进行学习记忆功能测试,随即处死大鼠分离血清及脑组织,分别测定空腹血糖、空腹胰岛素水平和乙酰胆碱酯酶含量,RT-PCR法测定海马Bcl-2及Bax mRNA表达情况,免疫蛋白印迹法(Western blot)测定海马乙酰胆碱酯酶和Caspase-3的蛋白表达及免疫组化法观察海马各区Caspase-3蛋白的阳性表达情况。[结果]黄芪注射液能显著提高糖尿病脑病大鼠学习记忆能力,降低糖尿病大鼠空腹血糖水平及AchE含量,升高血清胰岛素水平,减少海马AchE及Caspase-3蛋白的表达,升高海马抗凋亡基因Bcl-2的表达,降低促凋亡基因Bax的表达。[结论]黄芪注射液能够显著改善糖尿病大鼠学习记忆功能,其作用机制可能与减少AchE含量、抑制神经细胞凋亡有关。     

补肾活血中药治疗血管性痴呆的实验研究

在MID动物模型上,以西药脑复康为对照,采用水迷宫和放免法观察了醒脑胶囊主要成份补肾活血药物对痴呆大鼠学习记忆能力及脑组织(海马、皮质)中神经肽AVP、SS含量的影响。结果:中药组和脑复康组大鼠游迷宫所需时间和错误次数均明显少于模型组(P<0.05或P<0.01),其中中药组大鼠游全程时间显著少于脑复康组(P<0.05或P<0.01),错误次数与脑复康组无显著性差异(P>0.05)。同时中药组与脑复康组大鼠血浆、脑组织(海马、皮质)中AVP、SS含量均显著高于模型组(P<0.01),且中药组AVP、SS含量又明显高于脑复康组(P<0.05或P<0.01)。提示补肾活血中药能明显改善VD大鼠学习记忆能力,疗效与脑复康相近。同时补肾活血中药能显著提高VD大鼠血浆、脑组织(海马、皮质)中神经肽AVP、SS含量,且优于脑复康。推测血浆及脑组织中神经肽AVP、SS含量的提高可能是中医补肾活血法治疗VD的神经生化基础之一。