腱糖蛋白-C在载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块不同时期表达的变化

目的:探讨腱糖蛋白-C(TN-C)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中不同时期表达的动态变化。方法:取雄性SPF级ApoE~(-/-)小鼠50只(模型组),高脂饲料喂养,建立小鼠动脉粥样硬化模型,雄性SPF级野生型C57BL/6小鼠50只为对照组,同样高脂饮食。分别于喂养4、8、16、24、32周时处死小鼠,检测血脂,显微镜观察斑块病理改变并进行定量分析,免疫组化方法检测动脉粥样硬化斑块内TN-C表达。结果:模型组小鼠总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均高于对照组小鼠(P均0.05)。随着造模时间的进展,模型组小鼠斑块面积及斑块面积/管腔面积比值不断增加,各时期比较差异均有统计学意义(P均0.05)。模型组小鼠斑块内TN-C表达量随着动脉粥样硬化进展而增多,32周小鼠斑块内部TN-C表达升高最显著,高于8、16、24周小鼠(分别为0.49±0.07 vs 0.04±0.02、0.12±0.03、0.21±0.04,P0.05)。结论:TN-C的表达量随着斑块进展不断增加,可能与动脉粥样硬化进展及斑块不稳定性有关。     

急性心肌梗死患者血清内脏脂肪素与基质金属蛋白酶的相关性研究

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清内脏脂肪素及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9水平的变化。方法选择2015年3月~2016年3月淄博市中心医院心内科住院的首次AMI患者75例(AMI组),另选择年龄、性别相匹配的健康体检者60例(对照组),采用定量夹心酶联免疫吸附法检测血清内脏脂肪素、MMP-2、MMP-9及其他生化指标。对血清内脏脂肪素与MMP-2、MMP-9、高敏C反应蛋白及其他临床生化指标进行Pearson相关性分析。结果 AMI组LDL-C、内脏脂肪素、MMP-2、MMP-9及高敏C反应蛋白水平明显高于对照组[(3.45±0.87)mmol/L vs(2.89±0.65)mmol/L,(8.06±2.21)μg/L vs(5.53±1.23)μg/L,(150.18±74.58)μg/L vs(64.60±25.86)μg/L,(478.77±165.46)μg/L vs(263.54±99.35)μg/L,(12.07±2.50)mg/L vs(4.62±1.82)mg/L,P0.01]。AMI组血清内脏脂肪素与MMP-2、MMP-9、高敏C反应蛋白呈正相关(P0.01)。结论急性心肌梗死患者血清内脏脂肪素水平显著升高,表明血清内脏脂肪素与动脉粥样硬化斑块的破裂密切相关。     

下瘀血汤对酒精性肝病小鼠肝脏炎症和脂肪变性的改善作用

目的观察下瘀血汤对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)小鼠肝脏炎症和脂肪变性的改善作用,初步探讨其可能的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、对照美他多辛组、对照下瘀血汤组、酒精组、酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组,每组各8只。对照组、对照美他多辛组和对照下瘀血汤组造模过程中全程给予液体对照饲料。酒精组、酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组采用4周慢性乙醇喂养加急性乙醇灌胃法造模,造模第3周第1 d起,对照下瘀血汤组和酒精下瘀血汤组小鼠以0.4678 g/kg下瘀血汤灌胃,对照美他多辛组和酒精美他多辛组小鼠以2.857 mg/kg美他多辛灌胃。其余组小鼠以等体积蒸馏水灌胃。第32 d酒精组、酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组小鼠以31.5%乙醇灌胃,对照组、对照美他多辛组、对照下瘀血汤组小鼠以45%糊精灌胃。9 h后处死小鼠,留取静脉血和肝脏。计算各组小鼠肝体比值,检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、血清甘油三酯(triglyceride,TG)及肝脏TG水平。采用HE染色和油红染色观察肝脏病理形态学变化。采用免疫组织化学法检测中性粒细胞标志物髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝组织白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP1)mRNA的相对表达量。采用Western blot和RT-PCR检测脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1α(carnitine palmitoyltransferase 1α,CPT-1α)和过氧化物酶体增殖激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)的表达。结果与对照组相比,酒精组小鼠肝体比值[(4.78±0.48)%vs(3.71±0.36)%]、ALT [(44.71±25.37)U/L vs(20.41±7.11)U/L]、血清TG [(4.16±1.27)mmol/L vs(1.44±0.23)mmol/L]和肝脏TG [(27.15±6.43)mmol/g vs(10.74±9.83)mmol/g]均显著升高(P均0.05)。与酒精组相比,酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组小鼠ALT[11.79(10.17,24.48)U/Lvs(16.76±1.64)U/Lvs(44.71±25.37)U/L]、血清TG[(1.89±1.54)mmol/L vs 2.40(2.39,2.67)mmol/L vs(4.16±1.27)mmol/L]及肝组织TG [(14.18±5.88)mmol/g vs 19.77(5.92,20.90)mmol/g vs(27.15±6.43)mmol/g]水平均显著降低(P均0.05),肝体比值[(4.49±0.43)%vs(4.82±0.14)%vs(4.78±0.48)%]差异无统计学意义(t值分别为1.099、-0.165,P值分别为0.283、0.871)。HE和油红染色提示酒精组小鼠肝组织脂肪变性明显。免疫组织化学结果表明酒精组小鼠肝脏MPO阳染较对照组显著增加。与对照组相比,酒精组小鼠IL-6(1.95±0.74 vs 1.00±0.47)、IL-1β(2.06±0.64 vs 1.00±0.26)和MCP1(2.98±1.13 vs 0.99±0.30)及FAS [2.40±0.53 vs 0.916(0.876,1.221)] mRNA相对表达量均显著升高(z=-2.242,P=0.025;z=-3.695,P 0.001;z=-2.867,P=0.004;z=-3.838,P 0.001),CPT-1α(0.39±0.75 vs 1.00±0.22)和PPARα(0.27±0.08 vs 1.00±0.26)m RNA相对表达量显著降低(z=-4.392,P 0.001;z=-4.392,P 0.001);与酒精组相比,酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组IL-6(1.16±0.42 vs 0.93±0.42 vs 1.95±0.74)、IL-1β(0.75±0.19 vs 0.59±0.07 vs 2.06±0.64)、MCP1(1.27±0.25 vs 1.23±0.50 vs 2.98±1.13)及FAS(1.41±1.05 vs 1.43±0.30 vs 2.40±0.53)mRNA相对表达量均显著降低,CPT-1α[0.81(0.79,0.81)vs 0.72±0.14 vs 0.39±0.75]和PPARα(0.63±0.30 vs 0.69±0.41 vs 0.27±0.08)mRNA相对表达量显著升高(P均0.05)。Western blot表明,与对照组相比,酒精组小鼠FAS蛋白相对表达量(0.56±0.07 vs 0.20±0.02)上调(z=-2.309,P=0.021),CPT-1α蛋白相对表达量(0.24±0.02 vs 1.03±0.06)和PPARα蛋白相对表达量(0.17±0.01 vs 1.02±0.08)下调(P均0.05);与酒精组相比,酒精美他多辛组和酒精下瘀血汤组FAS蛋白相对表达量(0.31±0.02 vs 0.29±0.04 vs 0.56±0.07)均显著降低,CPT-1α蛋白相对表达量(0.43±0.01 vs 0.65±0.10 vs 0.24±0.02)和PPARα(0.55±0.07 vs 0.39±0.04 vs 0.17±0.01)显著升高(P均0.05)。结论下瘀血汤可通过抑制中性粒细胞浸润及炎症反应减轻酒精引起的脂肪生成并促进脂肪酸氧化,从而发挥保护肝脏的作用。     

成纤维生长因子21对载脂蛋白E基因敲除小鼠脂质代谢的影响及机制

目的探讨外源性成纤维生长因子21(fibroblast growth factor,FGF21)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠血脂和动脉粥样硬化形成的影响及可能机制。方法雄性apoE-/-小鼠24只,随机分为2组:模型组12只和FGF21组12只,另外12只雄性C57BL/6J小鼠作为对照组。3组均给予高脂饮食8周诱导动脉粥样硬化斑块形成。采血测定血脂,通过HE和油红O染色观察斑块的形态,基因和蛋白表达分别应用实时荧光PCR和Western blot进行检测。结果模型组血管内膜增厚,内膜及中膜均可见巨噬细胞、细胞外脂质沉积及脂质侵蚀。与模型组比较,FGF21组TG[(1.82±0.37)mmol/L vs(2.56±0.39)mmol/L]、TC[(6.27±0.62)mmol/L vs(9.27±0.85)mmol/L]、LDL-C[(2.73±0.26)mmol/L vs(4.37±0.77)mmol/L]明显降低,HDL-C[(1.49±0.25)mmol/L vs(0.99±0.23)mmol/L]、过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA[(4.753±0.648)vs(1.348±0.158)]和FGF受体1mRNA[(145.064±33.203)vs(8.505±11.196)]明显升高(P<0.01)。结论FGF21能降低apoE-/-小鼠血脂及斑块形成,机制可能是通过增加过氧化物酶体增殖物活化受体γ的表达。     

运动抑制转化生长因子β1/smad信号通路对糖尿病大鼠心肌纤维化影响的研究

目的观察运动对T2DM大鼠模型心肌纤维化的改善作用,探讨TGF-β1/smad信号通路的作用。方法腹腔注射STZ和高脂饮食建立T2DM大鼠模型,分为正常对照组(NC)、T2DM组和T2DM运动组(T2DME)。NC组和T2DM组安静饲养8周,T2DME组进行8周的跑台训练。运动结束后测体重、血糖。天狼星红染色观察心肌组织胶原蛋白水平,通过计算胶原容积分数(CVF)得出心肌纤维化程度。免疫荧光染色观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量。Western blot测定心肌TGF-β1、smad2、p-smad2、smad3和p-smad3的含量。结果与NC组比较,T2DM组体重降低[(528±71)vs(362±33)g,P0.05],血糖升高[(6.4±3.8)vs(26.0±7.5)mmol/L,P0.01],心肌CVF升高[(2.2±0.31)%vs(5.8±0.45)%,P0.01],心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、TGF-β1、p-smad2和p-smad3蛋白表达升高(P0.05或P0.01)。与T2DM组比较,T2DME组血糖降低[(26.0±7.5)vs(21.0±6.8)mmol/L,P0.05],心肌CVF降低[(5.80±0.40)%vs(3.60±0.33)%,P0.05],心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白降低(P0.05),TGF-β1及p-smad2和p-smad3蛋白表达下调(P0.05或P0.01)。结论运动改善T2DM大鼠心肌纤维化,抑制TGF-β1的表达和smad2/3的磷酸化,TGF-β1/smad可能是运动抑制T2DM大鼠心肌纤维化的重要信号通路。     

miR-33-5p对糖尿病肾脏疾病大鼠肾纤维化影响机制的研究

目的探讨miR-33-5p对DKD大鼠肾纤维化的影响机制。方法选取60只SD大鼠中未经任何处理的15只为正常对照(NC)组,其余45只建立DKD大鼠模型,造模成功后随机分为DKD模型组(DKD)、miR-33-5p拮抗剂组(miR-33-5p antagomir)及其阴性对照(antagomir-NC)组,每组各15只。antagomir-NC、miR-33-5p antagomir组尾静脉注射antagomir-NC或miR-33-5p antagomir,每周1次,持续12周。检测各组FPG、24 hUAlb、BUN和血肌酐(Scr)含量。Masson染色观察各组肾纤维化程度。qRT-PCR检测肾组织中miR-33-5p、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)mRNA表达水平。Western blot检测肾组织中TGF-β1、Smad同源物3(Smad3)、Smad2、p-Smad3、p-Smad2、平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)等蛋白表达水平。结果与DKD组比较,miR-33-5p antagomir组肾脏间质胶原纤维减少,24 hUAlb、FPG、BUN、Scr含量降低[(36.22±2.41)vs(19.24±1.25)mg/24 h,(29.15±1.53)vs(14.25±1.76)mmol/L,(18.33±3.16)vs(13.73±0.68)mmol/L,(60.17±2.37)vs(39.42±1.74)μmol/L,P0.05],肾组织中miR-33-5p、CollagenⅠmRNA、CollagenⅢmRNA降低[(5.19±0.20)vs(1.88±0.27),(3.44±0.21)vs(1.28±0.08),(4.71±0.32)vs(2.06±0.12),P0.05],TGF-β1、p-Smad3/Smad3、p-Smad2/Smad2、α-SMA等蛋白表达水平降低(P0.05)。antagomir-NC、DKD组各指标比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论抑制miR-33-5p表达可改善DKD大鼠肾纤维化,其作用机制可能与阻断TGF-β/Smad信号通路有关。     

雷公藤多苷对狼疮小鼠肾组织高迁移率族蛋白-1及转化生长因子-β1表达的影响

目的研究雷公藤多苷对狼疮小鼠肾组织高迁移率族蛋白-1(high mobility group box 1 protein,HMGB-1)及转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1表达的影响。方法建立慢性移植物抗宿主病(chronic graft versus host disease,c GVHD)狼疮样肾炎(lupus nephritis,LN)小鼠动物模型;取成模小鼠24只,随机分成LN模型组、醋酸泼尼松(Pred)组、来氟米特(LEF)组、雷公藤多苷(TG)组,每组6只,在造模后第9周,分别给予生理盐水、Pred、LEF及TG,共28 d。于第12周末代谢笼留取24 h尿液,检测24 h尿蛋白排泄率(urinary protein excretion,UPE);第12周末麻醉心尖取血,检测血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatine,SCr)含量;应用免疫组化方法检测HMGB-1及TGF-β1在动物模型肾组织的表达,同时分别检测了Pred、LEF、TG药物干预后,HMGB-1及TGF-β1在病变组织中表达的变化。结果与正常对照组相比,LN组小鼠的UPE[(1.40±0.50)mg24 h vs.(7.60±0.84)mg24 h]、BUN[(6.74±1.00)mmolL vs.(10.81±1.36)mmolL]、SCr[(45.43±8.51)μmolL vs.(130.48±8.82)μmolL]均显著增高(P0.01)。在降低UPE方面,TG组与Pred组差异具有统计学意义[(3.44±0.57)mg24 h vs.(4.65±0.50)mg24 h,P0.05]。与LN组相比,干预组小鼠肾脏病变均较LN组有所减轻,其中以LEF组、TG组病变最轻,病理改变相似;LN组小鼠肾脏组织中HMGB-1[(0.488 3±0.103 2)vs.(0.142 2±0.041 4)]和TGF-β1[(0.503 8±0.097 7)vs.(0.147 7±0.041 2)]表达与正常对照组比较明显增强,差异有统计学意义(P0.01)。干预组较LN组小鼠肾脏组织中HMGB-1和TGF-β1表达均明显减弱,其中TG组HMGB-1[(0.316 5±0.055 5)vs.(0.404 0±0.065 3)]和TGF-β1[(0.324 9±0.059 3)vs.(0.414 1±0.070 1)]减弱程度较Pred组更明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论 TG及Pred、LEF能显著下调HMGB-l和TGF-β1在c GVHD狼疮样肾炎小鼠肾组织中的表达,为临床开展以HMGB-l等为靶点的LN治疗提供了实验依据。     

冠心病患者血清MMP-8和MMP-9水平与冠脉易损斑块关系的研究

目的:研究冠心病(CHD)患者血清基质金属蛋白酶(MMP)-8和MMP-9水平与经虚拟组织学血管内超声(VH-IVUS)明确的冠脉易损斑块间的关系,分析易损斑块的危险因素,为其诊治提供理论依据。方法:依据VH-IVUS检查是否存在易损斑块,120例CHD患者被分为非易损斑块组(66例)和易损斑块组(54例)。对比分析两组间一般资料、高敏C反应蛋白(hsCRP)、空腹血糖、血脂、血肌酐、血尿酸、MMP-8和MMP-9水平。并依次采用单因素和多因素Logistic回归分析冠脉易损斑块的危险因素。结果:与非易损斑块组相比,易损斑块组hsCRP[(3.33±0.76)mg/L比(8.65±2.19)mg/L]、LDL-C[(2.92±0.51)mmol/L比(3.37±0.57)mmol/L]、MMP-8[(5.30±1.61)ng/ml比(8.98±2.80)ng/ml]和MMP-9[(82.63±6.64)ng/ml比(116.29±21.99)ng/ml]水平显著升高,HDL-C[(1.18±0.22)mmol/L比(1.01±0.19)mmol/L]水平显著降低,P0.05或0.01。多因素Logistic回归分析显示MMP-8、MMP-9、hsCRP和LDL-C是冠脉易损斑块的独立危险因素(OR=1.379~3.135,P0.05或0.01)。结论:MMP-8、MMP-9水平可作为预测和识别易损斑块的辅助检查指标,且有助于制定有针对性的治疗方案。     

CVB3m重复感染致小鼠血清TGF-β1与心肌TIMP-1变化及心脏胶原蛋白表达

目的 研究重复感染致病毒性心肌炎小鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)与心肌基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMp-1)及胶原表达相关性.方法 连续4次经腹腔注射接种柯萨奇病毒B3m(CVB3m)感染小鼠,分别于末次感染后10、20、30、40、50、60 d处死实验动物,ELISA法检查血清中TGF-β1水平;Western Blot法测定心肌中TIMP-1;氯胺T氧化法检测心脏胶原蛋白.结果 血清中TGF-β1在末次感染后10 d即见增加(37.4±12.6)ng/L;30 d时实验组[(54.5±15.4)ng/L]明显高于对照组[(37.4±16.8)ng/L],P＜0.05;60 d时实验组[(123.6±28.5)ng/L]仍明显高于对照组[(38.8±13.5)ng/L],P＜0.05.心肌中TIMP-1则在末次感染后40 d升高(484±52);60 d时实验组(483±47)仍显著高于对照组(417±48),P＜0.05.心肌中胶原蛋白水平在末次感染后30 d升高(11.84±1.94)g/kg;60 d时实验组[(18.56±3.51)g/kg]仍明显高于对照组[(9.88±0.84)g/kg],P＜0.05.结论 CVB3m重复感染可导致血清中TGF-β1持续升高,增加的TGF-β1与TIMP-1的高表达有关,TGF-β1和TIMP-1都与病毒重复感染导致的心脏胶原异常增殖有密切关系.     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响研究

目的观察二甲双胍对T2DM大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达的影响,探讨其对DKD的保护机制及与降糖效应的相关性。方法SD大鼠高脂饮食联合小剂量STZ腹腔注射建立T2DM模型,成模后随机分为T2DM组(n=10)、二甲双胍组[300mg/(kg·d),MET,n=8]和格列本脲组[5mg/(kg·d),GLY,n=8],设置正常对照组(NC,n=9)。干预8周后,检测各组FPG、HbA_1c,UAlb、尿肌酐(Ucr)、尿TGF-β1水平以及肾组织中TGF-β1mRNA和蛋白的表达,电镜观察肾小球基底膜厚度(GBMT)。结果8周末,与NC组比较,T2DM组TGF-β1 mRNA[(7.10±0.20)vs(1.00±0.07)]、TGF-β1光密度值(IOD)[(44.66±5.57)vs(14.08±1.98)]、尿TGF-β1与Ucr比值(UTCR)[(187.54±10.14)vs(34.51±4.67)ng/g]、FPG[(15.60±1.56)vs(4.45±1.07)mmol/L]、HbA_1c[(12.41±0.61)%vs(4.13±0.89)%]、GBMT[(266.58±21.68)vs(106±10.23)nm]、UACR[(136.31±6.84)vs(34.09±2.92)mg/g]升高(P0.05);与T2DM组比较,MET组TGF-β1 mRNA[(2.60±0.09)vs(7.10±0.20)]、TGF-β1 IOD[(21.85±6.54)vs(44.66±5.57)]、UTCR[(63.74±5.29)vs(187.54±10.14)ng/g]、GBMT[(150.98±17.25)vs(266.58±21.68)nm]、UACR[(98.92±5.40)vs(136.31±6.84)mg/g]降低(P0.05);与GLY组比较,MET组TGF-β1mRNA[(2.60±0.09)vs(4.69±0.12)]、TGF-β1 IOD[(21.85±6.54)vs(37.43±3.14)]、GBMT[(150.98±17.25)vs(203.67±23.32)nm]、UTCR[(63.74±5.29)vs(86.49±6.61)ng/g]、UACR[(98.92±5.40)vs(110.10±6.76)mg/g]降低(P0.05),两组FPG和HbA_1c比较,差异无统计学意义。结论二甲双胍降低糖尿病肾组织中TGF-β1水平,发挥肾脏保护作用,可能部分依赖于其降糖之外的作用。     

白藜芦醇对小鼠营养性肥胖伴生殖功能损害的作用

目的 探讨白藜芦醇对肥胖性不育的防治作用.方法 36只雌性昆明小鼠按随机区组法分为3组(对照组、高脂组和干预组),每组12只,分别喂以正常饮食、高脂饮食和高脂饮食加白藜芦醇.分别在4周、8周和12周时监测动物体重、空腹血糖和糖耐量情况.喂养12周后检测小鼠空腹胰岛素、血清雌二醇、黄体生成素、睾酮水平,以阴道脱落细胞判断小鼠动情周期,以雌、雄个体3:1的比例进行交配,观察小鼠生育能力.结果 喂养12周后高脂组和干预组小鼠体重[(61.52±6.92),(63.06 ±5.80)g]都明显高于对照组[(47.76±5.02)g],差异具有统计学意义(P＜0.05);而干预组体重相对于高脂组差异没有统计学意义(P＞0.05).高脂组空腹血糖[(6.98±0.33)mmol/L]和空腹胰岛素[(38.02 ±7.21) μIU/L]明显高于对照组[(5.30±0.36) mmol/L,(30.29±5.58)μIU/L],差异均具有统计学意义(P＜0.05);干预组空腹血糖[(5.45 ±0.67) mmol/L]和空腹胰岛素[(30.21 ±4.60)μIU/L]与高脂组相比明显下降,且差异均具有统计学意义(P＜0.05).性激素分析显示高脂组雌二醇[(5.67 ±0.98) ng/L]与黄体生成素[(0.346±0.025) IU/L]较对照组[(3.007 ±0.721) ng/L,(0.202 ±0.041) IU/L]明显升高(P＜0.05);干预组雌二醇[(2.115 ±0.353)ng/L]和黄体生成素[(0.245 ±0.041) IU/L]与高脂组相比明显下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05).睾酮含量各组之间没有统计学差异.高脂饮食还导致动情周期紊乱甚至消失,卵巢组织学显示高脂饮食导致闭锁卵泡数量明显增加.结论 高脂饮食能够诱导雌性小鼠肥胖、代谢综合征与生殖功能损害,白藜芦醇对此能起到一定缓解作用.     

大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制剂-2表达的影响

目的探讨大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响。方法实验大鼠随机分为健康对照(NC)组、糖尿病模型(DM)组及大黄素治疗(DM+Emodin)组(40mg/kg),各12只。至36周时处死所有大鼠,收集血、尿标本,检测生化指标和24hUAlb;取肾组织标本,采用RT-PCR和Western blot检测相关mRNA及蛋白。结果 36周时,与NC组比较,DM组和DM+Emodin组血糖[(6.44±0.83)vs(33.11±3.02),(32.39±2.78)mmol/L]、HbA1c[(5.6±0.6)%vs(18.0±3.2)%,(20.1±3.3)%]、SBP[(108±9)vs(131±14),(131±8)mmHg]、肾重/体重比[(5.3±0.6)vs(11.5±1.0),(10.4±1.3)]、eGFR[(5.9±1.2)vs(12.9±2.2),(11.2±1.2)ml/(min·173m2)]及UAlb[(3.3±1.8)vs(52.8±30.1),(26.6±10.5)mg/24h]升高(P0.001),DM+Emtin组肾重/体重比、eGFR及UAlb均低于DM组(P0.05或P0.01)。与DM组比较,DM+Emodin组MMP-2 mRNA[(1.43±0.36)vs(1.13±0.19),P0.05]、TIMP-2 mRNA[(1.70±0.27)vs(1.23±0.18),P0.001]上调现象被抑制,且MMP-2[(2.45±0.24)vs(2.98±0.55),P0.01]、TIMP-2[(2.07±0.30)vs(1.59±0.37),P0.001]蛋白表达水平下调。结论大黄素可以减少糖尿病大鼠肾组织中MMP-2/TIMP-2表达,减少蛋白尿,可能延缓DN进展。     

两种血清学指标与老年冠心病患者冠状动脉脂质斑块稳定性关系研究

目的 探讨血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)、甲壳质酶蛋白40(YKL-40)水平与老年冠心病患者冠状动脉脂质斑块稳定性的关系。方法 选取2021年8月至2022年8月郑州市第七人民医院心内科收治的老年冠心病患者128例为实验组，另选取同期行常规体检的老年体检者50例为对照组，采用ELISA法检测2组血清MMP-9、YKL-40水平，采用光学相干断层扫描测定实验组冠状动脉脂质斑块纤维帽厚度(FCT),应用Pearson单因素分析及ROC曲线评估实验组冠心病患者血清MMP-9、YKL-40水平预测冠状动脉FCT的临床价值。结果 实验组血清MMP-9、YKL-40水平高于对照组[(186.98±22.36)μg/L vs(56.36±12.02)μg/L,(89.28±6.22)μg/L vs(18.25±3.26)μg/L,P<0.01]。实验组稳定性心绞痛、不稳定性心绞痛、急性心肌梗死患者MMP-9、YKL-40逐渐升高，FCT逐渐降低；冠状动脉病变支数越多，心功能分级越高，MMP-9、YKL-40越高，FCT越低(P<0.05)。Pearson单因素分析显示，实验组血清M...     

细胞因子在类风湿关节炎患者肺间质病变中的意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)继发间质性肺疾病(RA-ILD)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)和转化生长因子β,(TGF-β1)的变化及其意义.方法 RA组29例,RA-ILD组28例(其中早期RA-ILD组16例,中晚期RA-ILD组12例),对照组为健康体检人员29名.采用ELASA法检测血清中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1水平.计量资料用-x±s表示,多组间比较采用方差分析,两组间比较采用t检验,关节分级资料采用卡方检验.结果 RA组和RA-ILD组血清TIMP-1水平[(645±220)和(536±188)μg/L]明显高于对照组[(392±92)μg/L],RA-ILD组血清TGF-β1.水平[(13.1±10.0)μg/L]明显高于RA组和对照组[(3.9±2.9)和(2.4±1.7)μg/L],RA组与RA-ILD组血清TIMP-1水平、RA组与对照组血清TGF-β1的水平无明显差别.各组血清MMP-9水平和MMP-9/TIMP-1均无明显差别.中晚期RA-ILD组血清TIMP-1水平[(690±110)μg/L]明显高于早期RA-ILD组[(420±147)μg/L],中晚期RA-ILD组血清TGF-β1水平[(17.9±8.2)μg/L]明显高于早期RA-ILD组[(9.5±9.9)μg/L].中晚期RA-ILD组血清MMP-9/TIMP-1(0.9±0.1)明显低于早期RA-ILD组(1.2±0.4).早期RA-ILD组血清MMP-9水平[(537±309)μg/L]与中晚期RA-ILD组[(595±110)μg/L]无明显差别.结论 血清TGF-β1可以作为RA患者ILD的诊断标志,且在一定程度上可反映RA-ILD肺部病变的严重程度.MMP-9/TIMP-1下降能反映肺部病变的严重程度.血清MMP-9水平不能作为RA-ILD的诊断指标及ILD肺部病变严重程度的判定指标.     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化血脂及反映斑块稳定性的MMP-9/TIMP-1比值的影响

目的:观察白藜芦醇对动脉粥样硬化兔血脂代谢、主动脉过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将70只雄性新西兰白兔随机分为5组:A组喂普通饲料,B组喂高脂饲料,C、D、E组喂高脂饲料的同时分别给予白藜芦醇4mg/kg.d、8mg/kg.d、16mg/kg.d进行干预。于12周末取血测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清MMP-9、TIMP-1水平。取完整胸主动脉,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察主动脉PPARγ、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达。结果:病理对照组(B组)TG[(2.46±0.32)mmol/L∶(0.42±0.23)mmol/L]、TC[(30.19±3.98)mmol/L∶(1.07±0.22)mmol/L]、HDL-C[(1.74±0.50)mmol/L∶(0.63±0.30)mmol/L]、LDL-C[(16.82±1.95)mmol/L∶(0.53±0.15)mmol/L]、PPARγ[(0.78±0.07)∶(0.59±0.05)]、TIMP-1[(91.80±9.23)ng/ml∶(68.49±9.04)ng/ml]、MMP-9[(341.96±9.94)ng/ml∶(164.04±7.08)ng/ml]水平均明显高于正常对照组(A组)(P均0.01);随着白藜芦醇剂量的增大,血清TG、TC、LDL-C水平,MMP-9及其mRNA表达,和MMP-9/TIMP-1比值显著降低,HDL-C、TIMP-1及其mRNA表达显著升高,在中、高剂量组(D、E组)更为明显(P0.05～0.01),呈一定的剂量依赖性。结论:白藜芦醇可改善兔动脉粥样硬化血脂代谢紊乱,通过降低MMP-9/TIMP-1比值稳定粥样硬化斑块。     

大黄酸对NOD小鼠糖尿病肾病的治疗作用观察

目的 :观察大黄酸对NOD小鼠糖尿病肾病的防治作用。　 方法 :在NOD小鼠发生糖尿病后 ,以大黄酸 15 0mg/ (kg·d)灌胃 ,连续 15周 ,进行有关生化和形态学检查。　 结果 :随着观察时间的延长 ,糖尿病NOD小鼠的血糖持续升高 ;而治疗组小鼠则随着大黄酸治疗时间的延长 ,血糖水平进行性下降。 15周时 ,治疗组与模型组血糖水平比较 ,差异非常显著 [(7 8± 3 80 )mmol/Lvs(13 9± 4 80 )mmol/L ,P <0 0 1]。大黄酸明显降低糖尿病NOD小鼠血甘油三酯 [(0 74± 0 13)mmol/Lvs (2 16± 0 73)mmol/L ,P <0 0 1]和胆固醇 [(1 84± 0 5 5 )mmol/Lvs (6 5 3±5 2 7)mmol/L ,P <0 0 5 ]水平 ,预防血肌酐的升高 [(4 5 6± 9 0 ) μmol/Lvs (6 1 8± 6 6 ) μmol/L ,P <0 0 1],也减少 2 4h尿蛋白的排泄 [(0 37± 0 17)mg/ 2 4hvs (3 32± 0 6 8)mg/ 2 4h ,P <0 0 1]。组织学显示 ,大黄酸治疗后的糖尿病NOD小鼠肾小球和丝球体面积明显减少 ,系膜增宽及细胞外基质积聚明显改善。双侧肾脏重量和肾重指数也明显降低。免疫荧光染色结果显示 ,经大黄酸治疗后的糖尿病NOD小鼠其肾小球FN荧光染色明显减弱 ,免疫球蛋白沉积减少。电镜下可见 ,糖尿病NOD小鼠系膜区增宽 ,系膜基质增多 ,肾小球毛细血管袢基膜增厚 ,上     

健脾疏肝丸对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α-固醇调节元件结合蛋白-1-脂肪酸合成酶信号转导通路的影响

目的探讨健脾疏肝丸对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝X受体(liver X receptorα,LXRα)-固醇调节元件结合蛋白-1(sterolregulatory element-binding protein-1,SREBP-1)-脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)信号转导通路的影响。方法将32只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)SD雄性大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组,每组8只。正常组进食普通饲料,其他组进食高脂饲料,健脾疏肝丸组给予4.86 g/(kg·d)灌胃,易善复组给予0.123 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃。灌胃与造模同时进行,共8周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平。对大鼠肝组织切片进行HE染色和油红O染色,于光学显微镜下观察。采用免疫组织化学法、蛋白质免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大鼠LXRα、SREBP-1及FAS的表达水平。结果 (1)正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠ALT[(3.40±0.81)U/L vs(9.98±2.27)U/L vs(7.80±1.52)U/L vs(6.43±1.89)U/L]、AST [(10.61±1.17)U/L vs(23.63±4.82)U/L vs(18.04±2.98)U/L vs(16.42±3.30)U/L]、TNF-α[(2.40±0.96)×10~(-3)μg/L vs(6.64±0.92)×10~(-3)μg/L vs(4.87±1.35)×10~(-3)μg/L vs(4.45±1.39)×10~(-3)μg/L]、IL-6 [(0.95±0.81)pg/ml vs(7.88±3.08)pg/ml vs(3.17±1.26)pg/ml vs(1.64±0.55)pg/ml]、TG [(0.33±0.13)mmol/L vs(0.90±0.24)mmol/L vs(0.62±0.37)mmol/L vs 0.62(0.46,0.66)mmol/L]、TC [(2.10±0.42)mmol/L vs 5.34(5.17,6.12)mmol/Lvs(3.68±0.63)mmol/Lvs(3.41±0.81)mmol/L]、HDL-C [(1.07±0.17)mmol/Lvs(0.62±0.14)mmol/Lvs(0.78±0.13)mmol/Lvs(0.79±0.12)mmol/L]及LDL-C[0.38(0.26,0.41)mmol/L vs(0.69±0.11)mmol/L vs(0.41±0.13)mmol/L vs(0.43±0.10)mmol/L]水平差异均有统计学意义(P 0.05)。与正常组相比,模型组AST、ALT、LDL-C、TG、TC、IL-6及TNF-α显著升高,HDL-C显著降低(P 0.05);与模型组相比,健脾疏肝丸组和易善复组AST、ALT、LDL-C、TG、TC、IL-6、TNF-α显著降低,HDL-C显著升高(P0.05);与健脾疏肝丸组相比,易善复组大鼠血清TC显著降低(P 0.05),其他各指标差异无统计学意义(P 0.05)。(2)肝组织HE染色和油红O染色示:与正常组相比,模型组大鼠肝脏脂肪变严重;与模型组相比,健脾疏肝丸组大鼠肝脏脂肪变减轻。(3)免疫组织化学结果表明,正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠LXRα(345872±52737 vs 544998±55506 vs 436319±65076 vs 448588±104641)、SREBP-1(259408±71143 vs 538701±62336vs 399705±102395 vs 394167±158047)和FAS(201683±48205 vs 466884±74934 vs 425589±63672 vs417852±84373)相对表达水平差异有统计学意义(P 0.05)。与正常组相比,模型组各蛋白相对表达水平均显著升高(P 0.05);与模型组相比,健脾疏肝丸组与易善复组各蛋白相对表达水平显著下降(P 0.05);健脾疏肝丸组与易善复组各蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P 0.05)。(4)Western blot结果表明,正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠LXRα[0.80±0.29 vs 1.57(1.30,1.67) vs 1.09±0.30 vs 1.10±0.36]、SREBP-1(0.42±0.12 vs 1.15±0.45 vs 0.86±0.20 vs 0.84±0.20)和FAS(0.43±0.12 vs 1.10±0.40 vs 0.81±0.26 vs 0.80±0.28)相对表达水平差异有统计学意义(P 0.05)。与正常组对比,模型组小鼠各蛋白相对表达水平显著升高(P 0.05);与模型组对比,健脾疏肝丸组及易善复组小鼠LXRα蛋白相对表达水平显著降低(P 0.05),健脾疏肝丸组与易善复组相比,各蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P 0.05)。(5)正常组、模型组、健脾疏肝丸组和易善复组大鼠肝组织LXRα[1.13±0.38 vs 4.14(4.01,4.35) vs 2.65±1.85 vs 1.35(0.54,4.23)]、SREBP-1、FAS[1.37±0.49 vs 4.35±1.97 vs 1.98(1.88,3.22)m RNA相对表达量差异有统计学意义(P 0.05)。与正常组相比,模型组LXRα[1.46±0.51 vs 6.13±1.17 vs 3.82±2.06 vs 1.56(1.19,4.74)]、SREBP-1、FAS vs1.83(1.64,4.29)] m RNA相对表达量显著升高(P 0.05);与模型组对比,健脾疏肝丸组及易善复组LXRα、SREBP-1、FAS m RNA表达均显著降低(P 0.05),健脾疏肝丸组与易善复组相比,LXRα、SREBP-1、FAS m RNA表达差异无统计学意义(P 0.05)。结论健脾疏肝丸对大鼠NAFLD的改善作用可能与其抑制LXRα-SREBP-1-FAS信号转导通路有关。     

基于云智能系统对2型糖尿病患者院外血糖管理的效果研究

目的探讨分析基于云智能系统对T2DM患者院外血糖管理的应用效果,为社区血糖管理提供新模式。方法选取T2DM患者120例,采用随机数字表法将其分为云智能组和对照(Con)组,每组各60例。云智能组首次接受云智能终端使用的培训,并全程使用云智能系统。Con组每月到糖尿病中心进行门诊常规诊疗;并于第25~48周接受云智能终端使用的培训和干预。分别于第24、48周血糖控制指标比较。结果两组第24周、48周时上述指标与初始血糖比较均呈下降趋势,特别是云智能组各时间点比较,差异有统计学意义[FPG(9.6±2.7)vs(5.4±0.9)vs(4.7±0.8)mmol/L,2hPG(15.4±3.1)vs(7.8±1.2)vs(7.1±0.9)mmol/L,HbA_1c(9.7±2.6)%vs(6.4±1.1)%vs(5.3±0.9)%,P0.05];第24周时,云智能组FPG、2hPG、HbA_1c均优于Con组[(5.4±0.9)vs(7.6±1.8)mmol/L,(7.8±1.2)vs(10.5±2.1)mmol/L,(6.4±1.1)%vs(8.3±1.7)%,P0.05];第48周时,两组上述指标比较,差异无统计学意义[(4.7±0.8)vs(5.0±1.4)mmol/L,(7.1±0.9)vs(7.4±1.1)mmol/L,P0.05],而云智能组HbA_1c低于Con组[(5.3±0.9)%vs(6.5±1.2)%,P0.05];云智能组第1和第2阶段平均每月血糖监测次数均高于Con组[(45.3±3.7)vs(35.7±2.8)次/月,(25.4±3.3)vs(18.5±2.5)次/月,P0.05)]。BMI云智能组第1阶段BMI低于Con组[(24.6±2.7)vs(27.8±3.4)kg/m~2,P0.05]。结论基于云智能系统的糖尿病管理模式有助于对T2DM患者血糖水平进行即时掌握和管理,可有效提高血糖控制效果。     

应用~(18)F-FDG PET/CT活体成像探讨吡格列酮对兔动脉粥样硬化斑块易损性与钙化的影响

目的应用18氟-氟代脱氧葡萄糖(18F-fluorodeoxyglucose,18F-FDG)正电子发射型计算机断层显像(positron emission computed tomography,PET)/计算机断层扫描(computed tomography,CT)探讨吡格列酮对实验性兔动脉粥样硬化斑块易损性及钙化的作用,及钙化与易损性之间的相关关系。方法 20只雄性新西兰大白兔随机分为吡格列酮组(n=10)和对照组(n=10)。制作动脉粥样硬化模型,吡格列酮组给予每日吡格列酮灌胃。两组大白兔在第8周和第18周抽血检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC),三酰甘油(triglyceride,TG),低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C),高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP),基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的浓度,并各进行一次PET/CT扫描,测量标准摄取值(standardized uptake value,SUV)(SUVmax、SUVmean)。实验动物处死,主动脉组织行病理免疫组化,比较两组斑块面积、斑块纤维帽厚度、纤维帽厚度与斑块面积比值、钙化面积百分比。结果两组间第8周与第18周TC、TG、LDL-C浓度比较,差异无统计学意义(P0.05)。第18周,吡格列酮组hs-CRP[(4.67±0.46)ng/mL vs.(6.21±0.93)ng/mL,P0.01)]、MMP-9[(43.50±1.94)ng/mL vs.(60.24±3.62)ng/mL,P0.01]、SUV值(P0.01)较对照组下降。吡格列酮组第18周时的TG[(1.48±0.85)mmol/L vs.(1.70±0.90)mmol/L,P0.01]、hs-CRP[(4.67±0.46)ng/mL vs.(6.08±0.75)ng/mL,P0.01]、MMP-9[(43.50±1.94)ng/mL vs.(50.44±2.05)ng/mL,P0.01)]、SUV值(P0.01)均低于第8周时,差异有统计学意义。吡格列酮组相应动脉的斑块面积、钙化面积百分比较对照组低,斑块纤维帽厚度,纤维帽厚度/斑块面积比值较对照组高,差异有统计学意义(P0.05)。结论18F-FDG PET/CT可以用于评估动脉粥样硬化斑块的易损性,并可以对于血管早期钙化做出提示;吡格列酮可以用于改善动脉粥样硬化斑块的易损性,并可以控制血管早期钙化的发展进程。     

普罗布考对动脉粥样硬化兔的高密度脂蛋白逆转运功能中酶蛋白和受体的影响

目的:探讨普罗布考对动脉粥样硬化(AS)兔的高密度脂蛋白逆转运功能中酶蛋白和受体的影响。方法:新西兰大白兔(共24只)随机分为3组:对照组(n=8):用普通饲料饲养;高脂组(n=8):用高脂饲料喂养;普罗布考组(n=8):在高脂饲料的基础上给予普罗布考喂养。饲养12周通过比色法测定血脂,通过酶联免疫吸附法检测血清磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)和胆固醇酯转移蛋白(CETP),并采用免疫组化方法检测主动脉壁斑块内三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和清道夫受体-BI(SR-BI)表达水平。结果:实验后第12周(1)血脂指标:与高脂组比较,普罗布考组血清总胆固醇[TC,(15.95±1.51)mmol/L vs(21.95±3.71)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[LDL-C,(13.01±2.28)mmol/L vs(17.90±3.51)mmol/L]、高密度脂蛋白胆固醇[HDL-C,(0.56±0.10)mmol/L vs(1.13±0.12)mmol/L]水平明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。(2)LCAT和CETP:与对照组[CETP(2.07±0.64)μg/ml和LCAT(27.01±8.26)μg/ml]比较,高脂组[CETP(1.24±0.54)μg/ml和LCAT(15.02±3.81)μg/ml]明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);与高脂组比较,普罗布考组[CETP(3.43±1.01)μg/ml和LCAT(38.10±7.96)μg/ml]明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。(3)主动脉壁斑块ABCA1和SR-BI受体表达:与高脂组比较,普罗布考组ABCA1阳性表达的面积(%)显著增加[(46.81±10.01)%vs(24.10±8.48)%,P0.01];SR-B1阳性表达面积(%)亦显著增加[(48.04±10.90)%vs(18.61±6.77)%,P0.01],两组比较差异均有统计学意义。结论:普罗布考通过增加高密度脂蛋白外周动脉受体ABCA1和SR-BI表达,增加LCAT和CETP的量,促进HDL的RCT功能,从而改善HDL的功能。