HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中的生物碱含量

用HPLC法测定4 种不同工艺制备的黄连解毒汤提取物粉末及2 种日本汉方颗粒剂黄连解毒汤中的小檗碱和巴马汀含量.结果表明此方法简便、快速、精密度高、回收率较好.采用此法比较了上述6 种黄连解毒汤的生物碱含量.结果是新工艺制备的提取物中生物碱含量最高,其中小檗碱含量分别是东洋、津村黄连解毒汤的6 倍和13.8 倍,是传统水煎提取物的3 倍.     

膜分离与树脂联用制备黄连解毒汤中药固体制剂的研究

目的考察膜与大孔吸附树脂联用技术精制黄连解毒汤的可行性。方法根据目标成分小檗碱、黄芩苷及栀子苷的不同性状特点,采用膜分离、大孔吸附树脂对黄连解毒汤进行精制。结果3批样品干浸膏得率及其小檗碱、黄芩苷、栀子苷含量的平均值为5.81%、11.79%、15.61%、13.05%。结论膜分离和大孔吸附树脂技术是中药复方的有效精制技术,可用于黄连解毒汤的精制。      

酸性染料比色法测定黄连中小蘖碱的含量

目的　为中药黄连寻找简便、适用的含量测定方法。方法　用酸性染料比色法和薄层色谱扫描法测定黄连中小蘖碱的含量。结果　小蘖碱的线性范围为 4 15～ 33 2 μg·ml- 1(r =0 9998) ,平均回收率为 98 7% ,RSD为 1 4 0 % (n =5)。结论　五批黄连中小蘖碱的含量测定结果表明两种测定方法具有相同的准确度。因此 ,酸性染料比色法也可用于黄连中小蘖碱的含量测定     

RP-HPLC测定三种黄连中的生物碱含量

目的建立反相高效液相色谱法测定黄连中的原小檗碱型生物碱含量的方法;比较云南黄连、北美黄连、四川黄连生物碱含量的差别。方法采用安捷伦C18色谱柱、乙腈-水为流动相、345nm检测盐酸小檗碱、盐酸巴马亭、盐酸药根碱三种生物碱标准品的出峰时间以及三种黄连三种生物碱含量的多少。并对其进行精密度试验、样品稳定性试验、重现性试验、回收率试验。结果云南黄连、北美黄连、四川黄连三种黄连三种生物碱的含量分别为5.84%、1.26%、0.88%;6.15%、1.35%、0.95%和5.78%、1.38%、1.06%。加回收率分别为103.8%、103.8%、117.4%。结论云南黄连、北美黄连、四川黄连生物碱含量的差别没有统计学意义,本方法检测黄连中生物碱含量的方法快速简便,结果准确、可靠,重现性好。     

黄连解毒汤中小檗碱在脑缺血模型大鼠体内药动学与药效学相关性研究

目的 研究黄连解毒汤中小檗碱在脑缺血损伤模型大鼠体内的药动学过程及其与黄连解毒汤抗脑缺血作用的相关性。方法 实验分为假手术组和模型组,模型组以电凝法制备局灶性脑缺血模型。两组大鼠均ig给予黄连解毒汤（10.0 g/kg）,分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h眼眶取血,HPLC法测定小檗碱在大鼠血浆中的变化,绘制药-时曲线;测定模型组和假手术组大鼠给药后不同时间点血浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,结合小檗碱的药-时曲线和时-效曲线,比较相同剂量的黄连解毒汤给药后小檗碱在假手术组及模型组大鼠体内的药动学参数的差异以及模型组给药后的药效学指标变化,评价小檗碱在黄连解毒汤治疗脑缺血疾病中的作用。结果 小檗碱在模型组大鼠体内吸收迅速、代谢快、维持时间长,表现出其体内较强的循环性特点。与假手术组相比,局灶性脑缺血大鼠给予黄连解毒汤后,对小檗碱吸收充分,血中MDA水平显著降低,时-效曲线呈现双峰现象。造模后大鼠血清SOD活性降低,黄连解毒汤能提高SOD至正常水平,模型组大鼠的时-效曲线也出现双峰现象。结论 黄连解毒汤抗缺血性脑损伤作用可能与小檗碱在体内的水平有关,黄连解毒汤抗缺血性脑损伤作用与其升高SOD水平、降低MDA水平有关。     

黄连解毒汤中三种成分在大鼠体内的药代动力学研究

目的：研究黄连解毒汤中盐酸小檗碱、黄芩苷、栀子苷在大鼠体内的药代动力学。方法：健康大鼠灌胃给予黄连解毒汤,收集不同时间的含药血浆,采用HPLC法测定大鼠血浆中盐酸小檗碱、黄芩苷、栀子苷三种成分的血药浓度,运用3P97药代动力学软件拟合房室模型,计算其药动学参数。结果：黄连解毒汤中盐酸小檗碱和黄芩苷在大鼠血浆中的药-时过程属于一室开放模型,栀子苷在大鼠血浆中的药-时过程属于二室开放模型。结论：建立了HPLC法测定黄连解毒汤中三种成分血药浓度的方法,为黄连解毒汤的合理用药提供了药代动力学数据,同时也为中药复方的药代动力学研究提供了可借鉴的方法。     

反相高效液相色谱法的运用对黄连中三种生物碱的含量测定

目的：利用反相高效液相色谱法测定黄连中3种生物碱的含量,鉴定其质量标准。方法：用反相高效液相色谱法测定川黄连中小檗碱、巴马亭以及药根碱的含量,色谱柱选择C18色谱柱,以乙腈一水为流动相,在345nm下检测小檗碱、巴马亭以及药根碱标准品的峰面积和出峰时间,计算川黄连中3种生物碱的含量。结果：小檗碱、巴马亭以及药根碱的峰面积分别为536．35931、143．11522以及88．73728。计算出川黄连中的3种生物碱的含量分别为5．38％、1．38％以及1．06％。小檗碱、巴马亭以及药根碱加回收率试验显示,3种生物碱的回收率分别为103．8％、103．8％以及117．4％。川黄连的精密度检验为RSD是0．8％,精密度较高。结论：反相高效液相色谱法测定黄连中生物碱的含量灵敏度高,精密度高,可以为黄连的质量监测和药效评估提供有利依据。     

HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中的生物 …

用ＨＰＬＣ法测定４种不同工艺制备的黄连解毒汤撮物粉末及２种日本汉方颗粒剂黄连解毒汤中的小檗碱和巴马汀含量。结果表明此方法简便、快速、必度高、回收率较地。采用此法比较了上述６种黄连解毒汤的生物碱含量。结果是新工艺制备的提取物中生物碱含量最高,其中小檗碱含量分别是东洋、津村黄连解毒汤的６倍和１３．８倍,是传统水煎提取物的３倍。     

黄连须根的处理对黄连饮片质量的影响

目的对不同产地黄连的净品及须根中的盐酸小檗碱含量进行测定,探讨增加黄连药用部位的可行性,为黄连炮制工艺提供依据。方法采用高效液相色谱法。流动相︰乙腈︰水(磷酸二氢钾,磷酸调pH值)(26:74v/v)︰测定波长:345nm;柱温:25℃;流速:0.8ml/min。结果测定结果显示,利川、石柱、大邑黄连净品盐酸小檗碱含量平均值分别为5.22%、5.64%、5.40%,三产地黄连须根中有效成分的含量平均值分别为2.06%、2.36%、2.00%,几乎占黄连净品的2/5。结论黄连须根中盐酸小檗碱含量值较高,可保留须根,不仅可以增加其药用部位,也可以保证其质量,为机械化大生产提供品质保障的依据。     

毛细管区带电泳法测定黄连、黄柏炮制前后小檗碱的含量

目的:考察黄连、黄柏药材炮制前后小檗碱的含量变化.方法:采用熔融石英毛细管柱(50μm×72.5 cm,有效长度64.2 cm)作为分离通道,50 mmoL/L Na2HPO4-NaH2PO4(pH=6.7)-甲醇(2:1)作为缓冲溶液,运行电压30 kV,毛细管柱温20℃,检测波长275mm.结果:小檗碱的线性范围为O.010 8～0.0756 mg/L,τ=O.999 3,小檗碱在黄连和黄柏中的回收率分别为101.56%、RSD2.0%和95.6%、RSD 1.32%.结论:毛细管区带电泳法简便、准确,重复性好,黄连、黄柏炮制后小檗碱的含量均有降低.     

以血清药理学方法研究黄连解毒汤对小鼠的药效动力学

目的以含药血清对小鼠肝匀浆体外生成丙二醛(M DA)的抑制作用为指标,研究黄连解毒汤及单味药水煎剂的药效动力学。方法测定小鼠ig黄连解毒汤及单味药所得含药血清对M DA生成作用的经时过程,并考察黄连解毒汤含药血清、单味药煎剂及小檗碱、黄芩苷抑制M DA生成作用的剂量-效应关系。结果小鼠ig黄连解毒汤、黄连、黄芩、黄连 黄芩后,含药血清均可抑制体外肝匀浆M DA生成,且作用呈剂量依赖性。各药的Em ax分别为86%、76%、79%及81%;tm ax分别为180、120、5及15 m in;其煎剂对M DA生成抑制作用呈剂量依赖性;小檗碱在0.12~10 ng/mL无明显的抑制作用;黄芩苷在1.11~10μg/mL有抑制作用,且作用亦呈剂量依赖性。结论黄连解毒汤体内抗氧化作用强于各单方。黄芩苷可能是黄芩药液和含药血清中的抗氧化成分之一,而小檗碱可能与含药血清抗氧化作用无关;小鼠ig黄连解毒汤及其单味药所得含药血清对M DA生成呈时间和剂量依赖性。     

葛根芩连方药中小檗碱、药根碱和巴马汀的高效毛细管电泳分析

目的以高效毛细管电泳法分离并测定葛根芩连方药中黄连生物碱。方法通过毛细管区带电泳法,以60%的磷酸盐(60 mmol/L,pH=8.0)与40%甲醇为缓冲液,苄基三乙基氯化铵为内标,紫外254 nm检测,分离并测定葛根芩连汤水提物及微丸中小檗碱、巴马汀、药根碱的含量。结果黄连中生物碱在6 min内得到很好的分离,小檗碱、巴马汀、药根碱的加样回收率分别为99.05%、98.70%和97.76%;相对标准偏差(RSD)分别为2.12%、1.85% 和1.95%。结论该方法具有良好的精密度和回收率,可作为黄连制剂的研究提供含量测定方法。     

不同煎煮条件下黄连解毒汤中小檗碱溶出率考察

目的以黄连解毒汤为例说明不同煎煮条件下对中药汤剂中有效成分溶出率的影响。方法以小檗碱的溶出量为指标,采用高效液相色谱法对不同煎煮条件下(煎煮时间、次数、煎煮前浸泡)黄连解毒汤中小檗碱的溶出率进行动态分析。结果煎煮30 min,煎2次小檗碱的溶出量、溶出率明显增加。     

基于HPLC法的黄连供试品制备工艺研究

目的:在2010版药典及相关文献的基础上,对以HPLC法测定黄连提取液含量的供试品制备工艺进行优化.方法:以溶剂种类、超声时间、溶剂用量为因变量.以小檗碱和黄连碱为指标性成分进行单因素试验考察,其中溶剂种类主要考察了:水、水:盐酸(100∶1)、甲醇:盐酸(100∶1)、不加溶剂4种;超声时间以RSD法进行评价,时间梯度为:0、5、10、15、20、25、30min;溶剂用量以线性关系来评价,溶剂用量分别为:5、10、15、20、30、40、50mL.结果:以甲醇:盐酸(100∶1)为溶剂,超声时间对提取液样品含量测定的影响为:RSD小檗碱=0.9460％,RSD黄连碱=0.8765％;溶剂用量对提取液样品含量测定的影响:Y小檗碱=-1.736X+133.70,R=0.9940,范围:30～50mL;Y黄连碱=-0.3430X+29.97,R=0.9920,范围:30～50mL;结论:超声时间对黄连提取液的含量测定无影响,溶剂用量对黄连提取液的影响范围为30～50mL.     

大孔吸附树脂分离纯化黄连小檗碱研究

目的：筛选适用于分离纯化黄连小檗碱的大孔吸附树脂。方法：本文考察了10种大孔吸附树脂,筛选出了适用于分离纯化黄连小檗碱的D101大孔吸附树脂,其静态吸附量为18.08 mg/g,静态和动态解吸率均为95%以上。结果：选用D101大孔吸附树脂,先水洗除杂,再用4～5倍树脂体积的60%乙醇洗脱,浓缩干燥,产品中小檗碱的含量为30.02%,产品收率为9.12%。结论：本法简单、易行,适合黄连小檗碱的提取。     

黄连解毒汤有效成分浸出工艺的研究

本文以黄连解毒汤中有效成分小檗碱、黄芩甙、栀子甙为综合指标，用正交试验法（Ｌ８２＾７）研究了超声浸出的最佳工艺。     

不同炮制工艺对黄连中盐酸小檗碱含量的影响

目的对黄连的生品、酒制品、姜制品和吴茱萸制品中的盐酸小檗碱含量进行测定,为以后黄连炮制工艺提供依据。方法采用高效液相色谱法。流动相：乙腈∶水（磷酸盐溶液,磷酸调pH值,（28∶72v/v）;测定波长：346nm;柱温：25℃;流速：1ml/min。结果炮制之后黄连中小檗碱的含量均有不同程度的提高,其增加程度分别为姜黄连〉酒黄连〉吴萸连〉生黄连。结论这三种炮制方法所炮制出来的黄连,其盐酸小檗碱的含量没有显著性差异。     

不同产地黄连的质量评价

目的:评价不同产地的黄连药材质量。方法:采用HPLC法测定不同产地黄连中盐酸小檗碱的含量。色谱条件:diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250nm,5μm),流动相为乙睛-0.1%磷酸溶液(50:50),检测波长265nm。结果:盐酸小檗碱在0.25～4.0μg范围内线形关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.7%,RSD=0.34%,8个样品黄连中盐酸小檗碱的含量为5.8%～8.6%。结论:不同产地黄连在盐酸小檗碱含量上有一定差异,但均符合现行《中国药典》2005版规定,总体质量良好。     

不同贮藏期黄连的化学成分分析

目的:比较不同贮藏期黄连小檗碱型生物碱的含量变化.方法:采用HPLC法测定不同贮藏期的黄连中Groenlandicine、非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱以及总碱的含量.结果:随着贮藏期的延长,黄连中小檗碱型生物碱的含量无显著变化.结论:黄连应保存在常温、干燥、阴凉、通风的条件下,以保证其质量和药用功效.     

生物碱和黄酮类成分在泻心汤复方配伍中的含量研究

目的 建立同时测定泻心汤中黄连碱、小檗碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法,并探索配伍对各成分含量的影响.方法 采用C18柱,流动相:甲醇-2%甲酸水溶液(0.1%三乙胺)梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;柱温:40℃;检测波长:346 nm;不同配伍之间的差异采用SPSS软件进行方差分析.结果 建立了同时测定生物碱和黄酮类成分含量的方法,这7个成分在一定浓度范围内线性关系良好,高、中、低质量浓度加样回收率稳定.与单味黄连、黄芩相比,复方中7个成分含量均降低.大黄使黄连碱、小檗碱、巴马汀、黄芩苷和汉黄芩苷含量降低,使黄芩素和汉黄芩素含量增加;黄连使黄芩素和汉黄芩素的含量降低,使汉黄芩苷含量增加,对黄芩苷影响不大;黄芩使黄连碱、小檗碱和巴马汀的含量降低.结论 本法准确可靠,重现性好,结果稳定,适合于泻心汤中生物碱和黄酮类成分的分析.不同配伍对各成分含量有影响,其影响非常复杂.