川芎嗪对癫痫大鼠大脑神经元内氏小体的影响

背景：川芎嗪能对抗中枢神经系统的损伤作用，内氏小体结构的变化可作为神经元受损的标志。目的：探讨川芎嗪对癫痫大鼠大脑皮质神经元内氏小体结构及数目的影响。设计：观察对比实验。单位：咸宁学院医学院生理学教研室。材料：实验于2004—09／2005—03在华中科技大学同济医学院解剖学教研室完成。选择正常健康SD大鼠40只，三四月龄，体质量（250&;#177;50）g，雌雄不拘。方法：大鼠麻醉后开颅，暴露大脑皮质记录区域，采用BL-410生物功能实验系统记录左右两侧脑电，应用青霉素诱发青霉素致痫组和川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组大鼠大脑皮质癫痫样放电。手术对照组在麻醉开颅手术1h后取大脑；青霉素致痫组在青霉素诱发癫痫1h后取大脑；川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组在青霉素诱发癫痫放电稳定后，再分别腹腔注射川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg，待抑制作用最明显时取大脑。分别制备脑组织切片，显示大脑皮质神经元内氏小体应用Thionine硫堇染色法，光镜下观察内氏小体结构的变化。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告系统对内氏小体染色结果进行定量检测，以每组标本15个视野吸光度的平均值作为该组内氏小体染色平均吸光度的测量值。主要观察指标：各组大鼠大脑皮质神经元内内氏小体的结构及数目变化。结果：40只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元内氏小体结构的比较：手术对照组可见许多层深蓝色染色的块状或颗粒状内氏小体。青霉素致痫组内氏小体全部溶解或消失。川芎嗪10mg／kg组内氏小体部分或全部溶解或消失。川芎嗪20mg／kg组内氏小体数目较青霉素致痫组及川芎嗪10mg／kg组明显增多。川芎嗪40mg／kg组可见染成深蓝色、分布均匀呈块状或颗粒状的内氏小体，与手术对照组比较，结构基本恢复正常。②各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元胞质内内氏小体染色平均吸光度的比较：青霉素致痫组的平均吸光度显著低于手术对照组[0．033&;#177;0．002，0．756&;#177;0．035（t=4．93，P〈0．01）]。川芎嗪20，40mg／kg组的平均吸光度显著高于青霉素致痫组[0．435&;#177;0．011，0．658&;#177;0．029（t=2．98，5．32，P〈0．01）1。川芎嗪40mg／kg组与手术对照组的平均吸光度相近（t=1．75，P〉0．05）。结论：川芎嗪能显著提高癫痫大鼠神经元小体的含量。癫痫的发病过程可能与大脑神经元内氏小体的结构和含量的变化有密切关系，而川芎嗪能使神经元内氏小体的结构和含量得以恢复，调节内氏小体的功能，从而抑制癫痫发作。     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马神经元凋亡变化的动态观察

目的：探讨大鼠癫痫发作时海马神经元凋亡变化。方法：采用红藻酸氨(KA)诱导大鼠癫痫发作模型，观察行为学及脑电图变化；用神经元尼氏体亚甲蓝特殊染色法观察大鼠癫痫发作时海马CA1区神经元损害情况；用原位细胞凋亡检测法观察癫痫发作时海马CA1区神经元凋亡情况及苯巴比妥干预后神经元凋亡的变化。结果：KA注射后大鼠出现严重边缘性惊厥，脑电图表现为持续性癫痫样放电。海马细胞在KA注射后8h开始出现凋亡阳性细胞，48h达高峰，主要表现在CA1区锥体细胞，经苯巴比妥干预后凋亡细胞明显减少。结论：癫痫发作后的迟发性神经元死亡很可能经由凋亡途径，早期终止癫痫发作可抑制海马神经元凋亡。     

迷走神经刺激控制海人藻酸诱导大鼠癫痫发作的电生理学研究

目的：通过动物实验，探讨间断性迷走神经刺激(vagus nerve stimulation，VNS)控制癫痫的最佳启动时间及其抗痫效果，观察VNS对海人藻酸致痫大鼠皮质电图和海马神经元电活动的影响。方法：实验选用成年、健康、体质量220—250g的Wistar大鼠，40g／L戊巴比妥钠腹腔麻醉后，颈部皮下注射海人藻酸(10mg／kg)复制癫痫模型。在癫痫发作前后分别给予大鼠左侧迷走神经间断刺激，用银球电极与金属微电极分别记录皮质电图和海马CAl区神经元电活动的变化。结果：①癫痫发作前给予VNS刺激(3.0—4．0mA，33Hz，1ms)50min，皮质电图结果表明可显著降低癫痫发作的严重程度，缩短发作持续时间，甚至可完全抑制发作(F=27．32，P&;lt;0．001)。而癫痫一旦发生再给予上述刺激，则只能降低发作的严重程度，而不能完全阻抑癫痫发作。②当皮下注射海人藻酸诱发海马CAl区神经元出现典型的不规则爆发样电活动后，给予上述刺激，CAl区神经元放电频率有所减少，停止VNS 60min和120min后，放电频率继续显著下降(F=8．531，P&;lt;0．05)。结论：①阻抑海人藻酸致痫模型发作，VNS启动越早，抗痫作用越佳。②间断性VNS对海人藻酸致痫大鼠的抗痫作用。     

大鼠受损背根节中型感觉神经元的温度敏感性

目的：观察大鼠损伤背根节（DRG）中型感觉神经元的热温度敏感性。方法：在急性离散的大鼠DRG中型神经元上,运用全细胞膜片钳技术,观察不同温度梯度刺激下受损DRG神经元的放电的特征。结果：大鼠损伤DRG中型神经元与热温度变化有一定的关系,它们根据放电模式可分为3型,其中62%（26/42）的中型神经元与热温度变化密切相关,随着温度的升高而引发的逐渐增强的膜电位去极化可引发频率由低到高的动作电位。随着温度的降低神经元又表现出频率由高到低的动作电位变化,放电后有规律的膜电位振荡,于较弱的超极化刺激可产生反跳动作电位,动作电位的幅值不一致。该类神经元具有电压依赖性。结论：大鼠受损DRG中型感觉神经元特别是紧张型放电的神经元对非伤害性刺激反应强烈,具有热温度敏感性。     

川芎嗪对痫性大鼠脑内神经细胞结构的影响

背景：川芎嗪可抑制脑海马神经元的放电活动，在体内吸收后能有效地透过血脑屏障，并广泛分布于大脑皮质、脑干、纹状体、海马、小脑和中脑等部位。目的：探讨川芎嗪及其不同药物浓度经腹腔注射对青霉素致病大鼠大脑皮质神经细胞结构的影响。设计：随机对照实验。单位：威宁学院医学院生理学教研室。材料：实验于2004-09／2005-03在华中科技大学同济医学院解剖学教研室完成。选择健康清洁级SD大鼠40只，雌雄不拘，体质量200-250g。随机分为5组，即手术对照组、青霉素致病组和川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组，每组8只。方法：大鼠麻醉开颅，暴露大脑皮质记录区域。采用BL-410生物功能实验系统记录左右两侧脑电，应用青霉素诱发青霉紊致病组和川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组大鼠大脑皮质癫痫样放电。手术对照组在麻醉开颅手术1h后取大脑；青霉素致病组在青霉素诱发癫痫1h后取大脑；川芎嗪10mg／kg，20mg／kg，40mg／kg组在青霉素诱发癫痫放电稳定后，再分别腹腔注射川芎嗪10mg/kg，20mg/kg，40mg/kg，待抑制作用最明显时取大脑。分别制备脑组织切片，苏木精-伊红染色。光学显微镜下观察。主要观察指标：各组大鼠大脑皮质神经细胞的结构变化。结果：40只大鼠全部进入结果分析。无脱失。①手术对照组大鼠大脑皮质神经细胞的形态结构正常。②青霉素致病组大鼠大脑皮质神经细胞结构出现明显的改变，核固缩。胞浆溶解，出现空泡状结构，胞质内未见尼氏体。③川芎嗪10mg／kg组大鼠与手术对照组比较，核固缩，胞浆溶解，出现空泡状结构，胞质内尼氏体减少。④川芎嗪20mg/kg组大鼠与手术对照组比较，神经细胞内空泡减少，胞浆增多，胞浆内可见少量尼氏体。细胞结构形态有所改善。⑤川芎嗪40mg/kg组大鼠与手术对照组比较，细胞核大而圆染色浅，胞质内可见块状的尼氏体。细胞结构形态趋于正常。结论：青霉素致病后大鼠大脑皮质神经细胞的形态结构异常，不同剂量的川芎嗪可以不同程度地改善大脑皮质神经细胞的形态结构，而高剂量川芎嗪的改善作用尤其显著，其抑制大鼠癫痫样放电活动可能通过这一途径实现。     

川芎嗪对癫痫大鼠大脑神经元内氏小体的影响(英文)

背景:川芎嗪能对抗中枢神经系统的损伤作用,内氏小体结构的变化可作为神经元受损的标志。目的:探讨川芎嗪对癫痫大鼠大脑皮质神经元内氏小体结构及数目的影响。设计:观察对比实验。单位:咸宁学院医学院生理学教研室。材料:实验于2004-09/2005-03在华中科技大学同济医学院解剖学教研室完成。选择正常健康SD大鼠40只,三四月龄,体质量(250±50)g,雌雄不拘。方法:大鼠麻醉后开颅,暴露大脑皮质记录区域,采用BL-410生物功能实验系统记录左右两侧脑电,应用青霉素诱发青霉素致痫组和川芎嗪10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg组大鼠大脑皮质癫痫样放电。手术对照组在麻醉开颅手术1h后取大脑;青霉素致痫组在青霉素诱发癫痫1h后取大脑;川芎嗪10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg组在青霉素诱发癫痫放电稳定后,再分别腹腔注射川芎嗪10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg,待抑制作用最明显时取大脑。分别制备脑组织切片,显示大脑皮质神经元内氏小体应用Thionine硫堇染色法,光镜下观察内氏小体结构的变化。采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告系统对内氏小体染色结果进行定量检测,以每组标本15个视野吸光度的平均值作为该组内氏小体染色平均吸光度的测量值。主要观察指标:各组大鼠大脑皮质神经元内内氏小体的结构及数目变化。结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元内氏小体结构的比较:手术对照组可见许多层深蓝色染色的块状或颗粒状内氏小体。青霉素致痫组内氏小体全部溶解或消失。川芎嗪10mg/kg组内氏小体部分或全部溶解或消失。川芎嗪20mg/kg组内氏小体数目较青霉素致痫组及川芎嗪10mg/kg组明显增多。川芎嗪40mg/kg组可见染成深蓝色、分布均匀呈块状或颗粒状的内氏小体,与手术对照组比较,结构基本恢复正常。②各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元胞质内内氏小体染色平均吸光度的比较:青霉素致痫组的平均吸光度显著低于手术对照组犤0.033±0.002,0.756±0.035(t=4.93,P<0.01)犦。川芎嗪20,40mg/kg组的平均吸光度显著高于青霉素致痫组犤0.435±0.011,0.658±0.029(t=2.98,5.32,P<0.01)犦。川芎嗪40mg/kg组与手术对照组的平均吸光度相近(t=1.75,P>0.05)。结论:川芎嗪能显著提高癫痫大鼠神经元小体的含量。癫痫的发病过程可能与大脑神经元内氏小体的结构和含量的变化有密切关系,而川芎嗪能使神经元内氏小体的结构和含量得以恢复,调节内氏小体的功能,从而抑制癫痫发作。     

川芎嗪对癫痫大鼠大脑神经元内氏小体的影响

背景:川芎嗪能对抗中枢神经系统的损伤作用,内氏小体结构的变化可作为神经元受损的标志.目的:探讨川芎嗪对癫痫大鼠大脑皮质神经元内氏小体结构及数目的影响.设计:观察对比实验.单位:咸宁学院医学院生理学教研室.材料:实验于2004-09/2005-03在华中科技大学同济医学院解剖学教研室完成.选择正常健康SD大鼠40只,三四月龄,体质量(250±50)g,雌雄不拘.方法:大鼠麻醉后开颅,暴露大脑皮质记录区域,采用BL-410生物功能实验系统记录左右两侧脑电,应用青霉素诱发青霉素致痫组和川芎嗪10 mg/kg,20 mg/kg,40 mg/kg组大鼠大脑皮质癫痫样放电.手术对照组在麻醉开颅手术1 h后取大脑;青霉素致痫组在青霉素诱发癫痫1 h后取大脑;川芎嗪10 mg/kg,20 mg/kg,40 mg/kg组在青霉素诱发癫痫放电稳定后,再分别腹腔注射川芎嗪10 mg/kg,20 mg/kg,40mg/kg,待抑制作用最明显时取大脑.分别制备脑组织切片,显示大脑皮质神经元内氏小体应用Thionine硫堇染色法,光镜下观察内氏小体结构的变化.采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告系统对内氏小体染色结果进行定量检测,以每组标本15个视野吸光度的平均值作为该组内氏小体染色平均吸光度的测量值.主要观察指标:各组大鼠大脑皮质神经元内内氏小体的结构及数目变化.结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元内氏小体结构的比较:手术对照组可见许多层深蓝色染色的块状或颗粒状内氏小体.青霉素致痫组内氏小体全部溶解或消失.川芎嗪10 mg/kg组内氏小体部分或全部溶解或消失.川芎嗪20 mg/kg组内氏小体数目较青霉素致痫组及川芎嗪10 mg/kg组明显增多.川芎嗪40 mg/kg组可见染成深蓝色、分布均匀呈块状或颗粒状的内氏小体,与手术对照组比较,结构基本恢复正常.②各组大鼠大脑皮质外颗粒层和外锥体细胞层神经元胞质内内氏小体染色平均吸光度的比较:青霉素致痫组的平均吸光度显著低于手术对照组[0.033±0.002,0.756±0.035(t=4.93,P＜0.01)].川芎嗪20,40 mg/kg组的平均吸光度显著高于青霉素致痫组[0.435±0.011,0.658±0.029(t=2.98,5.32,P＜0.01)].川芎嗪40 mg/kg组与手术对照组的平均吸光度相近(t=1.75,P＞0.05).结论:川芎嗪能显著提高癫痫大鼠神经元小体的含量.癫痫的发病过程可能与大脑神经元内氏小体的结构和含量的变化有密切关系,而川芎嗪能使神经元内氏小体的结构和含量得以恢复,调节内氏小体的功能,从而抑制癫痫发作.     

过度通气对在体大鼠脊髓背角WDR神经元兴奋性影响的实验研究

目的:考察过度通气对大鼠脊髓背角广动力范围(Wide dynamic range,WDR)神经元自发和疼痛诱发放电频率的影响。方法:将25只SD大鼠随机分为N(正常通气)和H(过度通气)两组。两组均在吸入麻醉下行椎板切除,记录与大鼠后足掌部皮肤感觉对应的脊髓背角WDR神经元放电频率百分比。N组正常通气120分钟,旨在排除手术创伤对WDR神经元的影响;H组实施过度通气60分钟后,恢复正常通气继续观察60分钟,目的为考察过度通气对该神经元电活动的影响。结果:(1)N组各采样点间WDR神经元自发和诱发放电频率百分比均无显著性差异。(2)H组过度通气后WDR神经元自发和疼痛诱发放电频率百分比较对照值显著降低,并随正常通气的恢复而恢复。(3)H组过度通气期间WDR神经元自发及诱发放电频率百分比均较N组相应时间点显著降低。结论:过度通气可使大鼠脊髓背角WDR神经元兴奋性降低。     

多巴胺对成瘾大鼠伏隔核神经元放电及形态的影响

目的 从整体反射及中枢Nacc神经元的放电活动和细胞形态角度初步探讨吗啡成瘾与戒断症状产生的机制。方法 实验分3个阶段：（1）观察正常大鼠Nacc神经元的性质及放电特点；（2）比较成瘾组和对照组大鼠Nacc神经元放电的区别；（3）研究多巴胺对成瘾组和对照组痛兴奋神经元（PEN）放电或痛抑制神经元（PIN）放电及甩尾反射潜伏期（TFL）或甩爬反射潜伏期（TPL）的同时影响。结果 伏隔核（Nacc）中12个PEN放电的频率秒净增值增加了（158.0&;#177;9.7）%，同时TFL缩短（60.0&;#177;2.7）%；而对成瘾组13个PEN的诱发放电频率秒净增值抑制率达（43.1&;#177;6.2)%（与对照组相比较），TFL延长率为（21.0&;#177;4.5)%。DA能抑制正常大鼠Nacc中PIN电活动PIN放电频率降低，抑制率为（80.0&;#177;9.7)%。但提高成瘾大鼠的PIN放电频率，放电的净增了（40.0&;#177;0.7）%和TPL的时间延长率为（20.0&;#177;4.3)%。结论 在吗啡成瘾与戒断条件下，Nacc内的多巴胺能神经元的活性发生明显改变，超微结构也发生变化。     

nesfatin-1对大鼠迷走复合体内葡萄糖感受神经元和胃扩张敏感神经元兴奋性的作用

目的观察nesfatin-1对大鼠迷走神经复合体（DVC）内胃扩张敏感神经元和葡萄糖感受神经元放电频率的调制作用,探讨其参与摄食调控的可能机制。方法采用多管玻璃微电极记录单个细胞单位放电的电生理学方法,观察大鼠DVC区微量注射nesfatin-1前后上述两种神经元放电频率的变化,以微量注射9 g/L NaCl作对照。结果在DVC中记录到经多管微电极给予葡萄糖的109个神经元,有46个神经元放电频率降低（鉴定为G-INH）;31个神经元放电频率升高（鉴定为G-EXC）;32个神经元对葡萄糖没有反应。在39个G-INH经多管微电极给予nesfatin-1,有33个神经元放电频率降低,1个神经元放电频率升高,5个神经元对nesfatin-1无反应。在26个G-EXC神经元中,有20个神经元放电频率升高,3个神经元放电频率降低,3个神经元对nesfatin-1无反应。对89个神经元进行胃扩张（GD）刺激,在DVC中记录到48个神经元被激活（鉴定为GD-EXC）,21个神经元被抑制（鉴定为GD-INH）,其余20个神经元对胃扩张无反应。在42个GD-EXC神经元中,32个神经元被nesfatin-1所兴奋,10个神经元对nesfatin-1无反应。在18个GD-INH神经元中,16个神经元被nesfatin-1所抑制,2个神经元无反应。上述两类神经元经多管微电极给予9 g/L NaCl,注射前后神经元放电频率的变化无统计学意义。结论 nesfatin-1能够调制DVC胃扩张敏感神经元和葡萄糖感受神经元的兴奋性,这可能是nesfatin-1抑制摄食的部分机制。     

体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因的表达

背景：颞叶癫痫的发病与海马神经元丢失死亡有关，但其海马神经元丢失的具体方式和详尽机制还不清楚，难以确定海马神经元癫痫样放电与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cysteine-containing ASPartate—specific protease，Caspase-3）激活及神经元凋亡的必然联系。 目的：观察体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及Caspase-3基因的表达情况。 设计：开放性实验。 单位：解放军第二军医大学长海医院神经外科，解放军第二军医大学长征医院神经外科。 材料：实验于2002-06／2003—06在解放军第二军医大学神经外科实验室完成。选取出生24h内的SD大鼠10只，雌雄不拘。Caspase-3流式检测试剂盒购自美国BD公司，PCR引物由上海皓嘉公司合成。 方法：①将24h内新生SD大鼠断头取脑，解剖出双侧海马，制备海马神经元癫痫样放电细胞模型。通过全细胞膜片钳对细胞模型放电情况进行检测。以培养8d并经无镁处理的神经元细胞作为癫痫样放电模型组，以培养8d但未经无镁处理的神经元细胞作为空白对照组，记录电位变化。②采用反转录-聚合酶链法克隆大鼠全长caspase-3 cDNA．并加以标记；采用原位杂交和流式细胞术检测caspase-3基因表达和神经元凋亡情况。 主要观察指标：①Caspase-3基因cDNA的克隆结果。②Caspase-3原位杂交检测结果。③细胞凋亡检测结果。 结果：①反转录-聚合酶链反应扩增的产物经12g/L琼脂糖凝胶电泳显示约800bp DNA片段区带，与预期值一致。DNA序列测定显示所得克隆的开放阅读框架长843bp。②杂交显示空白对照组海马阳性染色神经元少于10％，神经元突起饱满，形成广泛的突触联系。癫痫样放电模型组无镁处理3h后，染色阳性细胞明显增多；无镁处理12h后，有较多强阳性染色神经元，基本保持有神经元突起，但突起变得菲薄。③流式细胞分析显示。无镁处理6h后凋亡细胞开始明显增加，单位时间内凋亡细胞数不尽一致。 结论：癫痫样放电可以启动caspase-3表达，继而介导神经元凋亡。     

适宜的迷走神经刺激参数对癫痫的控制作用

背景：迷走神经刺激参数直接关系到迷走神经刺激的抗痫效果及患者使用的安全性，选择适宜的迷走神经刺激参数组合足实现迷走神经刺激抗痫作用的关键因素。目的：观察电刺激参数包括输出电流、波宽、频率、开肩时间、关闭时间、何时启动等在迷走神经刺激拧制癫痫巾的作用。设计：单一样本实验。单位：首都医科大学基础医学院神经生物学系。材料：实验于2000-09/2002-09在首都医科大学基础医学院神经生物学系电生理实验室完成。选择健康成年Wistar大鼠36蛤。方法：36只大鼠经海大藻酸复制大鼠癫痫模型，通过采用不同的迷走神经刺激参数组合，以大鼠行为学、心电图、皮层电图、海码神经元放电活动为观测指标，观察迷走神经刺激参数在控制致痫大鼠中的作用，并从中筛选适宜的刺激参数组合。主要观察指标：①海人藻酸致痫效应。②迷走神经刺激参数组合及其抗痫效应。结果：36只大鼠均进入结果分析。①迷走神经刺激的抗痫效应的观察卡要在痫性发作4h以内。②当波宽为2ms，刺激强度为3—3．5mA，频率为30～35Hz，开启1min，关闭2min时，连续刺激迷走神经50min时，抗痫效果显著，痫性皮层电图的发作时间明显缩短，严重程度显著降低；致痫大鼠海马CA1区神经元暴发性放电频率降低（P〈0．05）。结论：在保证受试者心电活动正常的前提下，能有效控制痫性发作的最小刺激参数绢合为晶适参数组合，日对心脏功能沿有影响。     

骨髓间充质干细胞移植大鼠脑梗死区的超微结构变化

背景：近来的研究发现骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)对缺血性脑血管病有治疗作用，接受细胞移植的脑梗死区超微结构的观察可进一步证实该作用。目的：观察接受MSCs局部注射移植的大鼠脑梗死区超微结构的变化，以了解MSCs移植对梗死区超微结构的影响。设计：随机对照实验研究。单位：解放军第三军医大学西南医院神经病学中心。材料：实验于2002-04／2002-09在解放军第三军医大学动物所及中心实验室完成。实验动物为健康幼年及成年Wistar大鼠12只，雌雄不限。随机分为移植组6只和对照组6只。干预：建立大鼠大脑中动脉栓塞模型，将体外分离培养的大鼠MSCs注射至大鼠脑梗死区，两组大鼠于移植后第4周电镜观察大鼠脑梗死区超微结构变化。主要观察指标：移植组及对照组大鼠脑梗死区超微结构变化。结果：接受移植的梗死区可见外形幼稚的细胞存活，并围绕在神经元周围，梗死区神经元胞浆中出现了丰富的游离核糖体，而对照组大鼠梗死区神经元胞核固缩，并有嗜神经细胞现象。结论：大鼠MSCs移植对缺血性脑损伤具有一定修复作用。     

迷走神经刺激控制海人藻酸诱导大鼠癫痫发作的电生理学研究

目的:通过动物实验,探讨间断性迷走神经刺激(vagusnervestimulation,VNS)控制癫痫的最佳启动时间及其抗痫效果,观察VNS对海人藻酸致痫大鼠皮质电图和海马神经元电活动的影响。方法:实验选用成年、健康、体质量220～250g的Wistar大鼠,40g/L戊巴比妥钠腹腔麻醉后,颈部皮下注射海人藻酸(10mg/kg)复制癫痫模型。在癫痫发作前后分别给予大鼠左侧迷走神经间断刺激,用银球电极与金属微电极分别记录皮质电图和海马CA1区神经元电活动的变化。结果:①癫痫发作前给予VNS刺激(3.0～4.0mA,33Hz,1ms)50min,皮质电图结果表明可显著降低癫痫发作的严重程度,缩短发作持续时间,甚至可完全抑制发作(F=27.32,P<0.001)。而癫痫一旦发生再给予上述刺激,则只能降低发作的严重程度,而不能完全阻抑癫痫发作。②当皮下注射海人藻酸诱发海马CA1区神经元出现典型的不规则爆发样电活动后,给予上述刺激,CA1区神经元放电频率有所减少,停止VNS60min和120min后,放电频率继续显著下降(F=8.531,P<0.05)。结论:①阻抑海人藻酸致痫模型发作,VNS启动越早,抗痫作用越佳。②间断性VNS对海人藻酸致痫大鼠的抗痫作用     

大鼠神经干细胞与“癫痫样细胞”体外共培养后的分化发育

背景：在癫痫微环境神经干细胞能否被诱导分化为异常放电的“癫痫神经元”？癫痫微环境包括两种情况：一是“无镁”细胞外液，二是与癫痫细胞共培养。其中前者比后者的致癫痫作用强。 目的：模型模拟体内癫痫微环境，将大鼠海马神经干细胞和正常海马神经元以及“癫痫神经元”体外共培养，观察干细胞的分化发育情况。 设计：重复测量观察。 单位：哈尔滨医科大学附属第一医院。 材料：实验于2005—08／2007—04在哈尔滨医科大学病原学教研室及药理学教研室完成，选用150只新生Wistar大鼠，雌雄不拘，由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。兔抗鼠突触素抗体购自美国LabVision公司。携带增强型绿色荧光蛋白标记基因的血清型2型腺相关病毒购自北京本元正阳公司。Axopatch 200B放大器为美国Axon公司产品。5111A示波器为美国Tektronix公司产品。 方法：①分离大鼠海马神经元，采用“无镁”外液处理神经元建立“癫痫神经元”模型。常规方法培养大鼠海马神经干细胞，将绿色荧光蛋白标记的神经干细胞分别与正常海马神经元、“癫痫神经元”共培养14d。②应用膜片钳记录与两种神经元共培养后细胞突触后电位；利用免疫荧光检测神经千细胞突触素抗体染色情况；将神经干细胞分化的神经元放入“无镁”外液，应用膜片钳记录其突触后电位。 主要观察指标：①海马神经干细胞与两种神经元共培养14d后突触后电位、突触素抗体染色结果。②分化后神经元在“无镁”外液中突触后电位及“癫痫样放电”情况。 结果：①神经干细胞与正常海马神经元共培养后，膜片钳记录到60％（6／10）神经干细胞14次，5min兴奋性突触后电位；与“癫痫神经元”共培养后记录到12次，5min兴奋性突触后电位。②神经干细胞分别与正常海马神经元及“癫痫神经元”共培养后，免疫荧光检测均显示80％（12／15）表达绿色荧光蛋白的干细胞突触素抗体染色阳性。③60％（9／15）干细胞分化的神经元在“无镁”外液中出现14次，5min时程约10s的兴奋性突触后电位，未记录到“癫痫样放电”。 结论大鼠海马神经干细胞与“癫痫神经元”体外共培养后可形成功能性突触，未转变成“癫痫神经元”。     

多巴胺对成瘾大鼠伏隔核神经元放电及形态的影响

目的从整体反射及中枢Nacc神经元的放电活动和细胞形态角度初步探讨吗啡成瘾与戒断症状产生的机制。方法实验分3个阶段:(1)观察正常大鼠Nacc神经元的性质及放电特点;(2)比较成瘾组和对照组大鼠Nacc神经元放电的区别;(3)研究多巴胺对成瘾组和对照组痛兴奋神经元(PEN)放电或痛抑制神经元(PIN)放电及甩尾反射潜伏期(TFL)或甩爪反射潜伏期(TPL)的同时影响。结果伏隔核(Nacc)中12个PEN放电的频率秒净增值增加了(158.0±9.7)%,同时TFL缩短(60.0±2.7)%;而对成瘾组13个PEN的诱发放电频率秒净增值抑制率达(43.1±6.2)%(与对照组相比较),TFL延长率为(21.0±4.5)%。DA能抑制正常大鼠Nacc中PIN电活动PIN放电频率降低,抑制率为(80.0±9.7)%。但提高成瘾大鼠的PIN放电频率,放电的净增了(40.0±0.7)%和TPL的时间延长率为(20.0±4.3)%。结论在吗啡成瘾与戒断条件下,Nacc内的多巴胺能神经元的活性发生明显改变,超微结构也发生变化。     

伏核注射γ-氨基丁酸对大鼠伏核痛反应神经元放电的影响

目的：观察伏核（NAc）注射γ-氨基丁酸（GABA）后，NAc中痛反应神经元的放电变化以及荷包牡丹碱（Bic）对GABA的阻断效应，研究GABA与NAc在痛觉信息通路中的作用。方法：在60只成年Wistar大鼠上采用NAc内注药，以串脉冲刺激坐骨神经作为伤害性刺激，玻璃微电极细胞外记录痛反应神经元的放电变化。结果：（1）NAc内分别注射GABA 25、50、75μg／μl能够使正常大鼠NAc中痛兴奋神经元（Pain excitation neurons，PEN）的痛诱发放电频率减少，潜伏期延长；痛抑制神经元（Pain inhibition neurons，PIN）的痛诱发放电频率增加，诱发放电完全抑制时程缩短。PEN与PIN的反应与GABA剂量间呈量效关系；（2）侧脑室注入GABA。受体拮抗剂Bic能够阻断其上述效应。结论：GABA可通过同时影响NAc中PEN和PIN的放电活动而产生镇痛效应。     

大鼠下橄榄核毁损对前庭核神经元自发性放电活动的影响

目的：研究下橄榄核-小脑通路对成年大鼠中枢耳石器神经元自发性放电活动的影响。方法：用3-乙酰吡啶腹腔内注射破坏下橄榄核神经元，观察中枢耳石器神经元自发性放电活动的变化。结果：下橄榄核毁损后，规则型放电神经元的比例明显增加，C神经元呈现出规则的和不规则的两种放电类型，而Ⅰ神经元全部表现为规则型放电。同时，与正常对照组相比，各类神经元的自发性放电频率均值明显增强，其间的差异均具有显著性意义(t=3．2871-11．7916，P&;lt;0．005-0．0001)。结论：下橄榄核毁损后，中枢耳石器神经元的自发性放电活动受到了明显影响。提示发出爬行纤维的下橄榄核通过对浦肯野细胞活动的影响，在中枢耳石器神经元的自发性放电活动方面发挥着重要的调控作用。     

小剂量藜芦碱诱发大鼠脑海马CA1区锥体神经元异常放电癫痫脑片模型的特征

背景：阵发性去极化漂移是癫痫活动的脑神经元的细胞学特征，过去认为其产生与突触传递异常有关。近年来，阵发性去极化漂移的内因机制得到进一步关注和重视。目的：观察小剂量藜芦碱诱发大鼠脑海马CA1区锥体神经元产生癫痫样活动的特征，探讨其可能的离子机制。设计：探索性观察实验。单位：解放军第四军医大学的神经科学研究所。材料：实验于2002-10／2004-10在解放军第四军医大学神经科学研究所完成。选择出生后14d的健康SD大鼠40只，所需试剂购自天津市医药公司和Sigma公司。干预：大鼠经腹腔麻醉后取脑切片，通过0．5μmol／L藜芦碱诱发癫痫样活动。在6张脑片上诱发产生阵发性去极化飘移样放电后，灌流液中加入80nmol／L河豚毒素，在另外5张脑片上，用抗癫痫药物苯妥英（5μmol／L）替换河豚毒素，观察在不同药物作用下细胞电生理特性的变化。主要观察指标：①细胞放电模式。②电压钳模式下通过细胞，Ⅰ-Ⅴ反应计算河豚毒素敏感性持续性钠电流的大小。结果：小剂量藜芦碱细胞外灌流后，随着神经元膜的超极化，大鼠CA1区锥体细胞表现出固定模式的阵发性去极化漂移串样放电，这种电活动可被小剂量（80nmol／L）河豚毒素或（5μmol／L）苯妥英所阻断。电压钳模式下测量阈下河豚毒素敏感性钠电流，在膜电位-55，-60，-65mV范围内，癫痫放电神经元测值明显增大，表明小剂量藜芦碱可增强持续性钠电流，并具有电压依赖性。结论：小剂量藜芦碱可在大鼠脑海马CA1区锥体神经元上诱发出阵发性去极化漂移样癫痫活动。小剂量河豚毒素或苯妥英可阻断这种癫痫活动，其离子机制可能与持续性钠电流的增强有关。     

谷氨酸对丘脑束旁核痛反应神经元放电的影响

目的：研究脑室注射谷氨酸(Glu)对大鼠丘脑束旁核痛反应神经元电活动的影响。方法：以电脉冲刺激右侧坐骨神经作为伤害性刺激，用玻璃微电极细胞外记录神经元的放电。结果：脑室注射Glu(1．5μg／10μ1)可使痛兴奋神经元(PEN)放电频率的净增值增加，潜伏期缩短；使痛抑制神经元(PIN)的抑制时程明显延长，放电频率的净增值降低。结论：Glu能加强：PEN和抑制PIN的电活动，提示Glu在痛觉调制中起兴奋作用，介导中枢伤害性信息的传递。