仙芦抗癌胶囊抗肿瘤作用及对肝癌HepG2细胞内Ca2+浓度的影响

目的观察仙芦抗癌胶囊的体内外抗肿瘤作用及对人肝癌HepG2细胞内Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响,从而揭示仙芦抗癌胶囊的抗肿瘤作用机制。方法通过观察仙芦抗癌胶囊对S180A荷瘤小鼠瘤质量和H22小鼠生存时间的影响,观察其体内抗肿瘤作用。通过MTT法观察含药血清对肝癌HepG2细胞的细胞毒作用。通过Fluo-3/AM标记HepG2肝癌细胞,激光共聚焦扫描显微术测定肿瘤细胞[Ca2 ]i,ATP酶试剂盒测定HepG2细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性。结果仙芦抗癌胶囊(1.00、0.50、0.25g/kg)对S180A小鼠的瘤体生长有显著的抑制作用,对H22小鼠的生存时间有显著的延长作用。仙芦抗癌胶囊体外对HepG2细胞有细胞毒作用;对细胞[Ca2 ]i有显著升高作用,高、中剂量(1.00、0.50g/kg)能够降低HepG2肝癌细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性。结论仙芦抗癌胶囊有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制为抑制肿瘤细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性,增加细胞[Ca2 ]i,从而诱导肿瘤细胞凋亡,达到抗肿瘤作用的目的。     

参麦注射液的抗肿瘤作用研究

目的 研究参麦注射液体内外抗肿瘤作用。方法 以小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌实体瘤模型考察参麦注射液的体内抑瘤作用;通过MTT法考察参麦注射液体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞的增殖抑制作用。结果 参麦注射液在体内对小鼠肉瘤S180、肝癌H22、Lewis肺癌均有显著的抑制作用,且呈剂量相关性,中、高剂量抑瘤率可达35%以上;体外对人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌HepG 2细胞亦有增殖抑制作用,且呈浓度–时间相关性,48 h的IC50值分别为0.36、0.72 g /mL,72 h的IC50值分别为0.21、0.29 g /mL。结论 参麦注射液体内外均有显著的抗肿瘤活性。     

新型八核铜配合物乳剂的体内外抗肿瘤作用

目的探讨新型八核铜配合物乳剂(N-Cu)的体内、外抗肿瘤作用。方法采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度N-Cu对HT29、HeLa、SGC7901和EC9706肿瘤细胞增殖的影响。利用S180腹水瘤小鼠模型观察不同浓度N-Cu的体内抗肿瘤作用。采用流式细胞仪测定不同浓度N-Cu对S180细胞周期的影响。结果 N-Cu作用4种肿瘤细胞24h后,细胞增殖均受到了不同程度的抑制,且呈浓度依赖性。N-Cu对荷S180小鼠的肿瘤生长有明显的抑制作用。N-Cu能使G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,细胞被阻滞于G0/G1期,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 N-Cu在体内、外具有抗肿瘤作用。     

刺果紫玉盘素J的体内外抗肿瘤作用

目的观察刺果紫玉盘素J(calamistrin J,Cal-J)的体内外抗肿瘤活性及其选择性。方法MTT法观察不同质量浓度的Cal-J对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞、人肝癌HepG2细胞、人宫颈癌HeLa细胞、人结肠癌Lovo细胞、肉瘤S180细胞5种肿瘤细胞系和正常人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖的影响,Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察Lovo细胞凋亡的形态变化。在S180荷瘤小鼠进行整体抑瘤实验,计算Cal-J的抑瘤率。结果Cal-J对NCI-H460、HepG2、HeLa、HELF、S180、Lovo等6种细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,其IC50依次为>100、(91±4)、(60.5±2.4)、(39.3±1.7)、(38±4)、(25±4)μg/mL。其中对Lovo细胞株抑制作用最强,且呈剂量、时间双重依赖性。Cal-J作用48h后,荧光显微镜下可见Lovo细胞核固缩,染色质凝聚等典型凋亡形态学特征。Cal-J对荷瘤小鼠S180移植瘤的生长有明显的抑制作用,Cal-J高、中、低(90、30、10mg/kg)剂量组的抑瘤率分别为51%、30%、17%,作用呈剂量依赖性。结论Cal-J对体外培养的多种人类肿瘤细胞和人胚肺成纤维细胞具有不同程度的细胞毒性作用,其中对人结肠癌Lovo细胞作用最强,并具有诱导细胞凋亡的作用。Cal-J还可抑制荷瘤小鼠S180移植瘤的生长。     

升麻总苷抗肿瘤活性及其对肿瘤细胞周期的影响

目的研究升麻总苷提取物(Total Glycoside of Cimicifuga foetida,TGC)的体内、外抗肿瘤活性及其对人肿瘤细胞周期分布的影响。方法 MTT法检测TGC对人肿瘤细胞株的增殖抑制活性;体内实验观察TGC对小鼠肝癌H22移植瘤和人肝癌裸小鼠异种移植瘤Bel-7402的抑制作用;荧光染色法和流式细胞仪检测其对肿瘤细胞周期的影响。结果 TGC可明显抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,其IC50值为(76.16±2.94)mg·L-1;TGC 0.8 g·kg-1剂量可明显抑制小鼠肝癌H22和人肝癌Bel-7402裸小鼠移植瘤的生长;TGC 50 mg·L-1可明显诱导人肝癌HepG2细胞阻滞于G2/M期,呈现出一定的时-效关系。结论 TGC具有明显的体内、外抗肿瘤作用,其活性可能与阻滞肿瘤细胞周期有关。     

参芪合剂对荷瘤小鼠体内抗肿瘤作用的实验研究

目的:研究参芪合剂对荷瘤(S180)小鼠体内抗肿瘤作用机制。方法:通过建立荷瘤小鼠免疫功能低下模型,观察参芪合剂(黄芪、苦参、土槿皮、蛇床子、黄连)对荷瘤小鼠体内抗肿瘤作用。结果:参芪合剂可抑制荷瘤小鼠体内瘤体生长。结论:参芪合剂可明显抑制荷瘤小鼠体内肿瘤细胞的存活率。     

杠柳苷对 H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

目的 研究香加皮中杠柳苷体内抗肿瘤作用,探讨其可能作用机制。方法 将小鼠肝癌H22细胞经体外培养并于 BALB/c小鼠腹腔内传代后,无菌接种于小鼠皮下,建立荷瘤小鼠模型。采取不同剂量杠柳苷 (0.25、0.50、1.00 mg/kg) ip 给药,每天1次,连续 15 d,观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况,测定抑瘤率,应用流式细胞术检测杠柳苷对肿瘤细胞周期与凋亡的影响;采用透射电镜观察荷瘤小鼠肿瘤细胞超微结构的变化。结果 杠柳苷对小鼠 H22皮下移植瘤具有显著的抑制作用,小鼠成瘤时间明显晚于模型组,肿瘤生长缓慢,低、中、高3个剂量组抑瘤率分别为 60.28%、68.09%、74.74%。流式细胞术分析结果显示,不同剂量杠柳苷处理小鼠移植瘤细胞后,处于 G0/G1 期细胞明显增多,S 期和 G2/M 期细胞显著减少,与模型组相比差异显著(P＜0.05),其中1.00 mg/kg 杠柳苷组 G0/G1 期细胞由对照组的(46.90±5.80)% 升高至 (83.80±2.52)%,S 期和 G2/M 期细胞分别由对照组的 (38.30±5.11)%、(14.80±0.70)% 下降至 (5.33±2.73)%、(10.87±0.25)%;而且杠柳苷各组小鼠肿瘤细胞的凋亡率均明显增加,其中 1.00 mg/kg 组凋亡率高达 (32.35±1.75)%,并可见典型的凋亡峰。透射电镜观察可见,杠柳苷各组小鼠肿瘤组织中出现大量典型的凋亡细胞,而对照组瘤组织内多为富含线粒体与内质网的代谢旺盛的肿瘤细胞。结论 杠柳苷具有很强的体内抗肿瘤作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

5-氟尿嘧啶衍生物-稀土配合物的合成及抗肿瘤活性

目的：合成了一种新的稀土配合物[Nd（C20H15FN2O4）2Cl·H2O]·7H2O,并研究其抗肿瘤活性。方法：通过元素分析、摩尔电导、红外光谱、核磁共振氢谱和热重-差热分析,确定了该类配合物的化学组成。采用四氮唑蓝（MTT）比色法测定了配体N1,N3-双邻甲苯甲酰基-氟尿嘧啶（DTFu）及配合物对HepG2肝癌细胞株和ZR-75-30人乳腺癌细胞株的抗肿瘤活性,流式细胞术检测肿瘤细胞周期。结果：DTFu及其钕配合物对两种细胞株均有明显抑制增殖的能力,且钕配合物抗肿瘤活性明显强于配体。结论：配合物通过抑制细胞进入S期,影响肿瘤细胞内DNA的复制和合成,从而使细胞在G1期堆积,最终抑制肿瘤细胞的增殖。     

黄芪多糖抗S180肉瘤作用及其免疫调节的影响

目的 研究黄芪多糖的体内外抗S180肉瘤作用及其免疫调节机制.方法 建立S180肉瘤小鼠模型作为研究对象,观察黄芪多糖的体内外抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠外周血液中CD4+T细胞、CD8+T细胞水平、白细胞介素IL -2和白细胞介素IL -4的调节作用.结果 黄芪多糖对S180肉瘤小鼠有显著的瘤抑制作用(P＜0.01),可使外周血CD4T细胞表达增加,CD8+T细胞表达降低,增高白细胞介素IL -2水平、降低白细胞介素IL -4水平.结论 黄芪多糖剂通过调节异常的免疫状态而发挥抗S180肉瘤作用.     

戴氏绿僵菌提取物对小鼠肿瘤S180抑瘤活性研究

目的: 研究戴氏绿僵菌无性型戴氏绿僵菌培养液上清液中生物活性物质对小鼠肿瘤S180的抗肿瘤活性.方法: 体外传代肿瘤细胞株杀伤试验采用MTT法,小鼠体内肿瘤细胞生长检测采用实体瘤称重法,IL-2检测采用酶联免疫吸附测定法(双抗夹心法).结果: 戴氏绿僵菌培养液提取物在高浓度时对体外传代肿瘤细胞株S180有显著的抑制作用,抑瘤率分别为28.06%、23.92%、35.55%、30.92%;对小鼠体内S180实体瘤的生长有显著的抑制作用,抑瘤率分别为22.09%、39.11%、41.67%;能提高荷瘤小鼠血清中IL-2水平,IL-2水平分别为84.627、106.915、136.911 ng/L.结论: 戴氏绿僵菌提取物在体内和体外均具有抑瘤作用,其抑瘤机理可能与提高机体免疫抑瘤能力有关.     

p16在重组人肿瘤坏死因子诱导的HepG2肝癌细胞凋亡中的作用研究

目的:研究p16在重组人肿瘤坏死因子(rmhTNF)诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法:用rmhTNF处理肝癌细胞,以流式细胞仪检测细胞周期变化,蛋白免疫印迹检测细胞内p16的表达变化。用siRNA干扰p16的表达后,再予流式细胞仪检测细胞的凋亡变化。结果:rmhTNF可以诱导肝癌细胞HepG2的凋亡,同时也可以诱导p16的表达的增加。干扰p16的表达可以逆转由rmhTNF诱导的肝癌细胞的凋亡。结论:p16在rmhTNF诱导的肝癌细胞的凋亡中发挥着重要的作用。     

槲皮素脂质体纳米粒对肝癌HepG2细胞生长的抑制作用

目的 比较槲皮素脂质体纳米粒化后对肝癌HepG2细胞的抑制作用是否优于纯槲皮素.方法 将不同浓度的槲皮素悬液与采用薄膜蒸发-高压均质法制备的槲皮素脂质体纳米粒,空白脂质体纳米粒槲皮素,加入到肝癌HepG2细胞悬液中进行培养,24h,48h后,加入MTT,观察细胞生长状况,分析抑制情况.结果 48h光密度值:同浓度的槲皮素脂质体纳米粒明显较槲皮素,空白脂质体纳米粒小,与5-Fu比较,明显较大,差异有显著性(P＜0.05).结论 在所使用的浓度范围内,槲皮素脂质体纳米粒对体外肝癌HepG2细胞生长的抑制作用更优于纯槲皮素.     

槲皮素联合奥曲肽对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

目的研究槲皮素联合奥曲肽对人乳腺癌细胞增殖的影响.方法槲皮素联合奥曲肽作用于体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7,MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,免疫细胞化学法检测生长激素、胰岛素及端粒酶的表达.结果槲皮素与奥曲肽在较高浓度水平联用抑制MCF-7细胞增殖.结论槲皮素联合奥曲肽对MCF-7细胞增殖具有抑制作用,其机制与阻滞细胞周期,抑制生长激素、胰岛素及端粒酶的表达有关.     

钌配合物[Ru（MeIm）4（bpy）]2+的合成及对人肝癌细胞株增殖的影响

目的合成钌配合物[Ru(MeIm)4(bpy)]2+并初步探讨其体外抗肝癌活性。方法利用元素分析、电喷雾质谱(ESI-MS)、核磁共振(NMR)等对目标化合物进行表征并通过溴化乙啶(EB)竞争结合实验检测其与DNA的结合能力;采用MTT法检测其对3株人肝癌细胞株HepG2、HCC-LM3和MHCC-97L细胞增殖的影响,用Hoechst33342染色法观察细胞凋亡的形态学改变,以流式细胞仪观察药物作用后细胞的凋亡率和细胞周期的变化。结果合成并表征了金属钌配合物[Ru(MeIm)4(bpy)]2+,同时竞争结合实验表明其能取代EB结合DNA。该化合物可抑制HepG2、HCC-LM3和MHCC-97L的增殖,呈浓度和时间依赖性。该化合物对HepG2细胞的增殖抑制作用最为明显,且浓度依赖性地诱导HepG2细胞凋亡,并随着作用时间的延长Sub-G1凋亡峰越增加。31.25～125μg/ml钌配合物阻滞细胞于G0/G1期,而浓度达250μg/ml时则阻滞细胞于G2/M期。结论合成的目标产物钌配合物[Ru(MeIm)4(bpy)]2+在体外可抑制人肝癌HepG2细胞的生长并能诱导其发生凋亡。     

二烯丙三硫抑制人前列腺癌细胞生长

【目的】 研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用及相关机制&#65377; 【方法】 MTT法测定DATS对PC-3细胞生长的影响;细胞形态学,流式细胞仪(FCM)等检测细胞凋亡;western blot&#65380;比色法分别检测凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和Bcl-xL/Bcl-xS的表达以及Caspase-3活性变化&#65377; 【结果】 DATS明显抑制PC-3细胞的生长,呈浓度和时间依赖性;DATS作用72 h的IC50为14 μmol/L;14 μmol/L DATS作用PC-3细胞不同时间后,细胞凋亡率增高;western blot显示凋亡抑制蛋白Bc1-2&#65380;Bcl-xL表达减少,比色法表明Caspase-3活性增高&#65377;【结论】 DATS诱导细胞凋亡是其抑制前列腺癌PC-3细胞生长的重要机制,该机制可能与Bc1-2&#65380;Bcl-xL和Caspase-3表达及活性变化有关&#65377;     

白芍总苷对HepG2细胞增殖的抑制作用

目的 探讨白芍总苷（TGP）对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用。方法 采用Mtt法检测TGP对HepG2细胞增殖的影响;应用荧光显微镜观察药物作用后的细胞形态;用流式细胞术检测TGP对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果 TGP（1．0～5．0g／L）能抑制HepG2细胞生长,且呈浓度依赖性;TGP（1．5、2．5g／L）分别作用72h后,HepG2细胞出现体积缩小,荧光染色增强,胞核或胞质中可见致密浓染的块状或颗粒状黄绿色荧光染色;TGP（1．0、1．5g／L）药物作用72h后,流式细胞仪可检测到细胞凋亡现象并发现显著的S期阻滞。结论 TGP在体外能够抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,并能诱导细胞凋亡。     

附子提取物抗胃癌SGC-7901细胞增殖及诱导癌细胞凋亡实验研究

[目的]观察附子提取物诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用及机制。[方法]分别采用不同浓度(20、40、80 mg·mL~(-1))的附子溶液干预SGC-7901胃癌细胞24h、48h、72h,用四唑盐(MTT)比色法检测附子提取物对肿瘤细胞的抑制作用:采用以上浓度梯度的附子干预SGC-7901细胞24h(或采用80 mg·mL~(-1)的附子干预0h、24h、48h),应用Annexin V-FITC/PI双重染色,通过流式细胞仪观察SGC-7901的凋亡情况。[结果]附子提取物能显著地抑制SGC-7901细胞的生长,并具有浓度及时间依赖性,细胞有明显的凋亡改变。[结论]附子提取物具有抗胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导癌细胞凋亡的作用。     

苦参碱诱导HepG2细胞凋亡与cyclin D1和p27kip1关系的实验观察

目的研究苦参碱抗肿瘤机制，初步探讨其与细胞周期调控蛋白cyclin D1和p27^kip1是否有关。方法苦参碱诱导后运用电镜、流式细胞仪方法检测HepG2细胞形态及细胞周期分布，并用免疫细胞化学法检测细胞内cyclin D1和p27^kip1蛋白表达变化。结果发现苦参碱诱导HepG2细胞凋亡，使细胞周期停滞于G1期。随着干预的苦参碱浓度增加cyclin D1下调，而p27^kip1蛋白上调，有统计学意义（P〈0．05）。结论苦参碱抗肿瘤机制可能是诱导肿瘤细胞凋亡，与细胞周期调控蛋白cyclin D1和p27^kip1有关。     

白藜芦醇对小鼠白血病细胞的诱导凋亡作用及免疫学机制

【目的】初步探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)抗白血病的免疫学机制。【方法】用MTT比色法测定肿瘤细胞生长抑制率,流式细胞术分析其细胞周期。分别采用溶血分光光度法、改良的Mayer法及双抗体夹心ELISA法,检测荷瘤小鼠的免疫功能及细胞因子含量变化。【结果】在一定范围内Res可以时间-剂量依赖的方式抑制白血病L1210细胞增殖、促进其凋亡。Res可促进荷瘤小鼠T细胞增殖、抗体的生成,并且上调IL-2、减少IL-8的分泌水平。【结论】Res可直接抑制白血病L1210细胞增殖,并且通过调节机体免疫应答的水平,协同发挥抗肿瘤作用。     

FHIT基因转染对肝癌细胞系HepG2的作用

目的:探讨外源性FHIT基因的表达对肝癌细胞株HepG2的影响. 方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1-FHIT及空载体pcDNA3.1( )导入肝癌细胞系HepG2中,G418选择培养,经免疫组化和Western blotting鉴定其过表达. 用流式细胞仪、普通光镜、透射电镜观察FHIT基因的表达对HepG2细胞凋亡和增殖的影响. 结果:获得FHIT基因稳定表达的肝癌细胞株HepG2-FHIT. 转染FHIT基因的HepG2细胞的生长速率明显下降,电镜下超微结构发生了凋亡早期改变,流式分析细胞的生长周期可见S/G2期阻滞. 结论:外源性FHIT基因在体外通过诱导其凋亡及细胞周期俘获作用可有效抑制HepG2生长增殖.