全反式维A酸、阿维A和他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及意义

目的 探讨全反式维A酸(ATRA)、阿维A及他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡及Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及其意义。方法 采用体外培养和流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-PI法),SABC免疫细胞化学方法检测细胞Bax/Bcl-2蛋白表达情况。结果 浓度均为10^-5mol/L的ATRA、阿维A及他扎罗汀能不同程度地诱导了人黑色素瘤细胞A375凋亡,其中阿维A作用最为显著,凋亡率13.42%,明显高于对照组、ATRA及他扎罗汀组(均P<0.05);其次为ATRA(5.03%,明显高于对照组及他扎罗汀组,P<0.05)和他扎罗汀组(凋亡率2.88%)。3种维A酸亦使A375细胞Bax蛋白阳性表达增强而Bcl-2蛋白阳性表达减弱(P<0.05),其中阿维A作用最强,其次为ATRA和他扎罗汀。结论 维A酸促进A375细胞凋亡可能部分通过以线粒体为核心的凋亡途径。阿维A可能是防治黑色素瘤的有效药物。     

维A酸诱导人类恶性黑色素瘤细胞株A375凋亡的受体机制研究

目的研究维A酸诱导人类恶性黑素瘤细胞株A375凋亡的受体机制。方法通过Bax／Bcl-2免疫细胞化学染色、TUNEL法、Annexin V／PI染色以及活性Caspase-3检测3种维A酸（9-cis-RA、at-RA and 13-cis-RA）、维A酸A受体（RAR）激动剂TTNPB和维A酸X受体（RXR）激动剂Ma对A375细胞凋亡的影响。结果维A酸和TTNPB均不同程度的上调Bax表达并下调Bcl-2表达．Annexin V／PI和TUNEL检测结果均显示维A酸和TTNPB可诱导A375细胞凋亡，同对照相比均差异有统计学意义（P〈0．05），而Ma与对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。活性Caspase-3分析显示，除了Ma外，所有试剂均不同程度的上调Caspase-3的表达，以TTNPB的作用最强（P〈0．05）。结论维A酸诱导A375细胞凋亡的作用涉及到Caspase-3途径。维A酸诱导A375细胞凋亡与RAR的激活可能有关，而与RXR的激活无关。     

蛇床子素对人黑色素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨蛇床子素对人黑色素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响。方法:人黑色素瘤细胞株A375细胞体外培养,将对数生长期的A375细胞以不同浓度的蛇床子素处理,MTT法检测A375细胞增殖;流式细胞术检测A375细胞凋亡;RTPCR法检测A375细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达水平;Western blotting检测A375细胞IκB-α、p-NF-κB、NF-κB、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:蛇床子素可降低A375细胞增殖率以及Bcl-2 mRNA、p-NF-κB和Bcl-2蛋白表达水平,呈浓度依赖性;同时增加A375细胞凋亡率以及Bax mRNA、IκB-α、Bax蛋白表达水平,呈浓度依赖性,但对NF-κB表达无明显影响。结论:蛇床子素能诱导A375细胞增殖抑制和凋亡,呈浓度依赖性,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。     

维A酸抑制人类舌鳞癌Tca8113细胞增殖及诱导凋亡的受体机制研究

目的研究维A酸抑制人类舌鳞癌Tca8113细胞株的增殖和诱导凋亡的受体机制。方法用MTT法和细胞周期分析法研究3种维A酸（9-cis—RA、at—RA和13-cis—RA）、TTNPB（RAR激动剂）和甲氧普烯酸（Ma，RXR激动剂）对Tca8113细胞增殖的影响。通过Bax／Bcl．2免疫细胞化学染色、TUNEL法及活性caspase-3检测，研究维A酸诱导Tca8113细胞凋亡的作用。结果维A酸和TTNPB对Tca8113细胞均有不同程度的抑制增殖作用，其中TTNPB的抑制作用最强，而Ma无此作用。细胞周期分析结果显示，维A酸和TTNPB均可增加G1／G0期细胞百分比，其中以TTNPB的作用最强，而Ma无此作用。维A酸和TTNPB均可上调Bax表达并下调Bcl-2表达，TUNEL检测显示．维A酸和TTNPB均可诱导Tca8113细胞凋亡，同对照相比均有显著性差异（P〈0．05），而Ma与对照组相比，无显著性差异（P〉0．05）。活性caspase-3分析显示，除了Ma外，所有试剂均不同程度地上调caspase-3的表达，以TTNPB的作用最强（P〈0．05）。结论维A酸能够抑制Tca8113细胞的增殖，并诱导凋广-RXR的活化与这些作用无关，而RAR的活化则与这些作用可能有关。此外，维A酸诱导Tca8113细胞凋广涉及到caspase-3途径。     

紫杉醇对黑色素瘤细胞Bcl-2／Bax基因和蛋白水平影响及机制研究

目的检测紫杉醇对黑色素瘤细胞B16-F10细胞凋亡相关因子Bcl-2／Bax基因和蛋白水平的影响,探讨紫杉醇治疗黑色素瘤的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR和westernblot法检测紫杉醇对B16一F10细胞Bcl-2／Bax基因和蛋白水平的改变,以p—actin作为内参照。结果4pM紫杉醇对B16一F10细胞24h的Bcl-2／Bax基因和蛋白水平表现出明显的改变。与对照组相比,紫杉醇组Bcl-2基因mRNA水平相对量由（0．43土0．09）下降到（0．27士0．08）,两组有显著性差异（P〈0．05）。Bax基因mRNA水平相对量由（O．25士0．06）增加到（O．57士0．05）,两组差异有统计学意义（Pd0．01）。紫杉醇时B16-F10细胞Bcl-2蛋白相对表达量由（O．64士0．03）下降到（0．35士0．04）,两组差异有统计学意义（P〈O．05）。Bax蛋白的相对表达量由（O．41士0．02）增加到（O．73±0．03）,两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论紫杉醇对可通过改变Bcl-2／Bax基因和蛋白水平发挥促进凋亡的作用。紫杉醇可能作为黑色素瘤治疗的策略之一。     

维A酸治疗瑞尔氏黑变病临床疗效观察

目的：临床应用前景广阔维A酸治疗瑞尔氏黑变病临床疗效观察。方法：治疗组服用阿维A胶囊10mg，维生素C片0．2g，每日3次，连服4周为1疗程；对照组口服维生素C片0．2g，每日3次，连服4周为1疗程，均外用0．1％他扎罗汀乳膏。结果：实验组与对照组的有效率分别为87．5％，12．5％，两组间有效率差异有显著性（X^2=10．333，P〈0．05）。结论：维A酸治疗瑞尔氏黑变疗效显著，安全可靠。     

非小细胞肺癌Bcl-2及Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

①目的探讨非小细胞肺癌Bcl-2、Bax蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系。②方法采用SABC免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织Bcl-2、Bax蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平；用TUNEL法检测细胞凋亡情况。③结果肺癌组织Bcl-2蛋白的表达显著高于癌旁肺组织（x^2=4．74，P〈0．05）；肺癌组织Bax蛋白的表达显著低于癌旁肺组织（x^2=5．65，P〈0．05）；肺癌组织中细胞凋亡指数（AI）和增殖指数（MI）均明显高于癌旁正常肺组织（t=8．28、9．62，P〈0．01）；Bcl-2蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显低于表达阴性组（t=2．41，P〈0．05）；Bax蛋白表达阳性的肺癌组织AI明显高于表达阴性组（t=2．62，P〈0．05）；Bcl-2、Bax蛋白的表达均与MI无关（t=0．70、0．22，P〉0．05）。④结论Bcl-2蛋白具有抑制肺癌细胞凋亡作用，而Bax蛋白具有促进肺癌细胞凋亡作用，因肺癌组织存在Bcl-2蛋白表达上调，Bax蛋白表达下调，导致细胞增殖和凋亡失衡，在肺癌发生、发展过程中可能具有重要作用。     

全反式维甲酸对前列腺癌PC-3细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨全反式维甲酸（ATRA）对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖的抑制作用及其Bel-2和Bax表达的影响。方法以不同浓度的ATRA处理PC-3细胞，甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制情况；流式细胞仪和免疫细胞化学法检测PC-3细胞Bax和Bcl-2的表达。结果ATRA浓度为（10^-6～10^-4）mol／L时，可明显抑制PC-3细胞的增殖（P〈0．01），并具有时间-剂量依赖性。ATRA处理后PC-3细胞Bcl-2表达下调，Bax表达上调。随ATRA浓度增加，Bcl-2／Bax的比值不同程度地下降（P〈0．05）。结论ATRA对PC-3细胞具有明显的增殖抑制作用，并且与ATRA下调Bcl-2表达、上调Bax表达有关。     

参附注射液对大鼠肺缺血再灌注损伤时肺细胞凋亡的影响

目的探讨参附注射液对大鼠肺缺血再灌注损伤时肺细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。方法30只雄性SD大鼠随机分为3组，即假手术（Sham，n=10）组、缺血再灌注（IR，n=10）组、参附治疗（SF，n=10）组。制作大鼠单肺原位热缺血再灌注模型，进行肺损伤组织学定量评价指标（IQA）检测；采用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测肺组织细胞凋亡，并计算凋亡指数（apoptosis index，AI）；免疫组化法检测肺组织细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果Sham组几乎未见凋亡细胞，IR组、SF组的IQA、AI值均较Sham组明显升高（P〈0．01或P〈0．05）；SF组的IQA、AI值明显低于IR组（P均〈0．01）；与Sham组相比，IR组Bcl-2、Bax蛋白表达明显上调（P均〈0．01），而Bcl-2／13ax比值下降护〈0．01）；与IR组比较，SF组Bax蛋白水平显著下降护〈0．05），而Bcl-2蛋白、Bcl-2／Bax比值显著升高（P〈0．01或P〈0．05）。IQA与AI呈显著正相关（r=0．912，P〈0．01），而AI与Bcl-2／Bax比值呈显著负相关（r=0．847，P〈0．01）。结论参附注射液可能通过抑制Bax的表达、上调Bcl-2的表达，使Bcl-2／Bax比值增加，从而减少细胞凋亡，减轻肺缺血再灌注损伤。     

全反式维甲酸对恶性黑素瘤A375细胞VEGF表达的影响

目的研究全反式维甲酸（ATRA）对体外培养恶性黑素瘤A375细胞VEGF表达影响。方法应用Real-time PCR检测A375细胞VEGF-B在基因水平的表达。应用ELISA法检测A375细胞上清中VEGF蛋白水平的表达。结果ATRA可降低A375细胞培养上清的VEGF的mRNA表达和血清浓度,与对照组相比有统计学意义（P〈0.05）。结论ATRA可在mRNA和蛋白水平下调A375细胞VEGF的表达,且这种抑制作用呈时间剂量依赖关系。     

Comparison between synthetic retinoid CD437 and acitretin inhibiting melanoma A375 cell in vitro

Objective:To investigate the effects of synthetic retinoid CD437 and acitretin on cell proliferation,apoptosis,cycle arrest and Bax/Bcl-2 protein expression of melanoma A375 cell.Methods:MTT assay was used to determine the anti-proliferative effects of CD437 and acitretin on melanoma A375 cell.Flow cytometry was performed to investigate the influence of CD437 and acitretin on cell cycle and cell apoptosis.SABC immunocytochemistry was employed for detection of Bax/bcl-2 protein expressions.Results:10-5 mol/L CD437 was more effective than acitretin in inhibiting proliferation and inducing apoptosis of A375 cell after 24 h treatment,growth inhibiting ratio and apoptosis ratio(58.6%vs43.25% and 28.03%vs17.13%,P < 0.05 respectively).CD437 promoted G0/G1 arrest in melanoma A375 cell,however acitretin could not.CD437 and acitretin could up-regulate the expression of Bax protein and down-regulate the expression of bcl-2 protein(P < 0.05).Conclusion:CD437 is more effective than acitretin in inhibiting proliferation and inducing apoptosis and cycle arrest on A375 cell.CD437 may have more potentialities than acitretin for subsidiary treatment of melanoma.Mitochondrial apoptosis pathway is partially involved in two drugs inducing apoptosis on A375 cell.     

Effects of ATRA, Acitretin and Tazarotene on Growth and Apoptosis of Tca8113 Cells

Summary：To investigate the effects of ATRA, acitretin and tazarotene on the growth and apoptosis of human tongue squamous cell carcinoma cell line Tca8113. The effect of retinoids on growth of Tca8113 cells in vitro was examined by MTT assay and Trypan blue exclusion assay. Cell cycle analysis, early apoptosis analysis with double staining with Annexin V-FITC and PI, and active caspase-3 analysis with the staining of FITC-conjugated monoclonal rabbit anli-active caspase-3 antibody were made by flow cytometer. Streptavidin-biotin complex （SABC） immunocytochemical assays were employed for the detections of Bax/Bcl-2 proteins expressions. Our results showed that the retinoids inhibited growth of Tca8113 cells in a dose-and time-dependent manner with maximal inhibition 24 h after treatment of 10 5 mol/L. 10^-5 mol/L retinoids altered cell cycle distribution of Tca8113 cells, revealing an increase in G0/G1-phase population, a decrease in S-phase population and the inhibition of G1/S switching. 10^-5 mol/L retinoids significantly induced apoptosis of Tca8113 cells （all P〈0.05）, elevated the cells population with detectable active caspase-3 （P〈 0.05 for all）, increased the number of cells forming Bax and decreased the number of cells forming Bcl-2 significantly （all P〈0.05）. Acitretin played a most prominent role among the retinoids. It is concluded that the inhibition of cell cycle progress of Tca8113 cells by ATRA, acitretin and tazarotene is one of the possible mechanisms for proliferation arrest of TcaS113 cells elicited by the retinoids. The retinoids mediate apoptosis in TcaS113 cells that may be caspase-dependent through mitochondria pathway. High concentration retinoids inhibit growth of Tca8113 cells in vitro by interfering with proliferation and inducing apoptosis of cells. Acitretin may be an alternative medicine for the prevention and treatment of tongue squamous cell carcinoma.     

Effects of histamine on growth and apoptosis of human melanoma cells A375

Histamine,as a biogenic amine,exists in bod-ies diffusely.Like other neural transmitters,his-tamine can play various physiological roles whencombining with special receptors on plasma mem-brane of target cells.Previous studies suggestedinconsistent results that histamine promoted or in-hibited growth of primary or metastatic melanomacells.The mechanism has not been elucidated ful-ly.The present research is aimed at investigatingwhether histamine has effects on growth and apop-tosis of human me…     

二甲双胍对糖基化终末产物诱导的成纤维细胞凋亡及相关蛋白caspase-3、Bax及Bcl-2表达的影响

目的探讨晚期糖基化终末产物（AGEs）对原代人皮肤成纤维细胞凋亡的影响,以及二甲双胍（Metformin）对原代皮肤成
纤维细胞凋亡是否存在保护作用。方法取对数生长期的皮肤成纤维细胞,分为空白组,BSA对照组（300 μg/mL）,AGEs刺激组
（100、200、300 μg/mL）,药物组（AGEs 300 μg/mL+Metformin 1 mmol/L）,采用CCK-8检测24、48、72 h细胞凋亡情况;Western
Blot检测细胞培养72 h后凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Bcl-2表达情况。结果CCK-8结果显示AGEs诱导皮肤成纤维细胞凋
亡呈浓度及时间依赖性,AGEs 300 μg/mL诱导72 h后可见细胞凋亡明显增多（0.72±0.02 vs 1±0.04,P<0.05）,加入二甲双胍后可
对成纤维细胞起一定保护作用（0.98±0.02 vs 0.72±0.02,P<0.05）。Western Blot显示AGEs 300 μg/mL刺激成纤维细胞72 h后,
caspase-3、Bax 蛋白表达增加（P<0.05）,而Bcl-2 蛋白表达下降（P<0.05）,Bcl-2/Bax 比值下降（P<0.05）,二甲双胍作用后
caspase-3、Bax蛋白表达水平较刺激组明显下降（P<0.05）,而Bcl-2及Bcl-2/Bax比值则明显上升（P<0.05）。结论AGEs可诱导
人皮肤成纤维细胞凋亡增加,二甲双胍可以通过调控caspase-3、Bax及Bcl-2表达,从而起到抗凋亡作用。
     

有氧运动对衰老大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的: 研究有氧运动对衰老模型大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法： 建立衰老大鼠模型,随机分为对照组和2组运动组,运动组分别给予6次/周和3次(隔日)/周的游泳训练,每次运动持续90 min,共训练12周,于末次训练48 h后处死动物。TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡,免疫印迹法检测骨骼肌细胞内Bcl-2、Bax的表达,并计算Bcl-2/Bax的比值。结果： 与对照组相比,2组运动组骨骼肌细胞凋亡指数和Bax蛋白表达均显著降低(P均<0.01),而Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax明显升高(P均<0.01);与6次/周运动组比较,3次/周运动组骨骼肌凋亡指数和Bax表达明显降低(P均<0.05),而Bcl-2表达和Bcl-2/Bax明显升高(P均<0.05)。结论： 有氧运动能优化Bcl-2/Bax的比值,降低骨骼肌细胞凋亡指数,有效减少衰老导致的骨骼肌过度凋亡;且隔日有氧运动效果更佳。     

银杏叶提取物EGb761对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探讨EGb761对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:48只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、EGb761低剂量组及EGb761高剂量组,每组12只。应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,TTC染色法测定脑梗死体积,应用TUNEL法检测神经元凋亡,应用Western blot方法检测Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:与模型组比较,EGb761高低剂量组脑梗死体积显著减少(P<0.05),神经元凋亡数显著减少(P<0.01),Bax蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.01);EGb761高剂量组Bcl-2蛋白表达明显增多(P<0.01)。EGb761高低剂量组间Bcl-2/Bax比值差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EGb761能显著增加脑缺血再灌注后Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达,抑制神经元凋亡,减少脑梗死体积,对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用。     

甲硫氨酸饥饿通过抑制程序性死亡配体1诱导胃癌细胞凋亡

目的 研究甲硫氨酸饥饿诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法 TCGA数据库分析胃癌组织中PD-L1的表达;胃癌AGS细胞分为对照组、甲硫氨酸饥饿处理组、siPD-L1处理组、甲硫氨酸饥饿联合siPD-L1处理组,CCK-8检测胃癌细胞活力,AO/EB双染检测胃癌细胞凋亡数目,流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡率,western blotting检测胃癌细胞PD-L1、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达;Starbase数据库分析PD-L1与Bcl-2抗凋亡蛋白家族(BCL2A1,MCL1,BCL2,BCL2L1)之间的联系。结果 PD-L1在胃癌组织中高表达(P=0.0011),PD-L1的表达与胃癌G分级相关(P＜0.05);甲硫氨酸饥饿和siPD-L1能够抑制胃癌细胞存活率(P＜0.05),促进凋亡(P＜0.05),抑制PD-L1和Bcl-2表达(P＜0.05),上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达(P＜0.05);甲硫氨酸饥饿联合siPD-L1处理显示siPD-L1与甲硫氨酸饥饿起协同作用(P＜0.05)。PD-L1与Bcl-2抗凋亡蛋白家族之间存在正相关(P＜0.005)。结论 甲硫氨酸饥饿是通过抑制PD-L1的表达下调抗凋亡蛋白Bcl-2、上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达从而诱导胃癌细胞凋亡。