临床标本金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布及耐药性

目的 了解临床分离的金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布及耐药情况。 方法 对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定。采用聚合酶链反应检测肠毒素基因 (SEA~SEE),采用K-B法进行药敏试验。 结果 共收集到138株金黄色葡萄球菌,其中74株分离自痰液标本,占53.62%;从年龄≥50岁患者中分离得到102株菌株,占73.91%;金黄色葡萄球菌中肠毒素阳性为120株,检出率为86.96%,SEA、SEB、SEC和SEE阳性率分别为63.33%、46.67%、45.00%和37.50%,未检测出SED基因,分离自痰液标本菌株以携带SEA和SEC为主,而分离自创面分泌物菌株则以携带SEB和SEE为主;药敏 结果 显示金黄色葡萄球菌对青霉素（96.67%）、红霉素（81.67%）、氯霉素（74.17%）、四环素（71.67%）耐药较为严重,对呋喃妥因（6.67%）、复方磺胺甲恶唑（16.67%）、阿莫西林/克拉维酸钾（4.17%）则比较敏感,所有菌株对万古霉素、替考拉宁均敏感。 结论 临床分离的金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带率较高;不同标本来源的金黄色葡萄球菌携带肠毒素基因型存在差异,对于临床金黄色葡萄球菌的感染治疗应根据药敏结果选择合理的抗生素。     

致食物中毒葡萄球菌生物学特性研究

目的：研究致食物中毒葡萄球菌的生化特征以及产肠毒素与不产肠毒素的金黄色葡萄球菌在性质上的差异。方法：将患者呕吐物和剩余食品分离培养、纯菌种生化特性试验和毒力试验。结果：在患者呕吐物、剩余食品中分离出金黄色葡萄球菌4株(2个生化型)，第1生化型对幼猫有强烈致病性，第2型则致病性较弱，且前者精氨酸双水解酶阴性而后者为阳性；分离出家畜葡萄球菌byicus亚种3株，有2株对幼猫有弱致病性。结论：金黄色葡萄球菌和家畜葡萄球菌能产生毒力不同的耐热肠毒素。     

一起金黄色葡萄球菌引起食物中毒的病原溯源

目的分离鉴定病原菌,查明食物中毒原因;运用基因分型技术对分离菌进行溯源性分析。方法采用传统细菌学检测方法分离、鉴定病原菌,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肠毒素分型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因分型,用Bio Numerics软件进行聚类分析和病原溯源。结果此次食物中毒共分离到4株金黄色葡萄球菌,从患者肛拭样中分离出3株,从餐厅从业人员肛拭样中分离出1株,均携带同种金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE),PFGE分型为同一带型,属同一克隆。结论此次食物中毒是由产SEA型肠毒素的同一克隆株金黄色葡萄球菌引起。     

副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌混合感染引起的食物中毒分子流行病学研究

目的查明一起食物中毒暴发原因,追溯感染来源和感染途径。方法制定病例定义进行病例搜索,开展现场流行病学和卫生学调查。对病例肛拭子、呕吐物、可疑中毒场所剩余食品/半成品、厨工/服务员样本及环境样本开展常规致病菌检测。对检出的副溶血性弧菌菌株进行血清分型和PFGE检测,金黄色葡萄球菌菌株进行肠毒素检测,并对肠毒素进行分型。结果 3例病例的肛拭子均检出副溶血性弧菌,血清型分别为O1∶K1、O3∶K6、O10∶K12;3份环境样本副溶血性弧菌阳性,分别为餐厅A半成品冰柜内壁(O3∶K6)、小炒位荷台(O1∶K1)和餐厅B砧板(O5∶K17)。病例和环境样本来源的2株O3∶K6菌株PFGE带型一致,2株O1∶K1菌株带型基本一致。1例病例的呕吐物检出金黄色葡萄球菌,经培养产E型肠毒素。3份厨工样本金黄色葡萄球菌阳性,分别为餐厅A厨工咽拭子2份(产B型肠毒素)和餐厅B厨工肛拭子1份(产E型肠毒素)。结论副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌混合感染导致了这起食物中毒的发生,建议监管部门加强对餐饮服务单位的监测和监管指导。     

一起金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒的流行病学分析

目的对一起疑似食物中毒事件进行流行病学调查分析和病原菌检验以确定致病因子。方法对患者呕吐物、肛拭子、剩余食物以及厨房用具进行实验检测。结果中毒场所、中毒餐次、中毒食品与发病在流行病学上存在强关联,采集的病人吐泻物和剩余食物中4件样品检出金黄色葡萄球菌,且肠毒素检测均为阳性。结论该起食物中毒事件为金黄色葡萄球菌肠毒素污染肉圆食品所致。     

一起食物中毒的金黄色葡萄球菌肠毒素检测

目的 对一起食物中毒样品进行致病菌检测,准确分析食物中毒原因,为食物中毒的处理提供依据.方法 依据《食品卫生微生物学检验》国家标准GB4789.10-2010、GB 14938-94《食物中毒诊断标准及技术处理总则》和WS/T80-1996《葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则》方法对采集的12份食物中毒样品进行病原菌金黄色葡萄球菌检测;应用荧光定量PCR法对检出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素检测.结果 在12份样品中检出5株金黄色葡萄球菌,分别来自患者呕吐物4份,砧板棉拭子1份,全部检出A型肠毒素,未检出其他病原菌.金黄色葡萄球菌总检出率为41.7％.结论 金黄色葡萄球菌A型肠毒素是此次食物中毒的病原体.实时荧光PCR快速检测方法适用于金黄色葡萄球菌肠毒素的基因分型.     

一起由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒

目的：为了及时查清引起食物中毒发生的原因,追查致病菌污染食物来源,为监督执法提供执法依据。方法：根据GB 4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》;GB 4789.5-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验》;GB 4789.6-2003《食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》;GB 4789.8-2008《食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验》;GB 4789.10-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》的方法[1]和有关的参考资料,对可疑食品进行致病性肠道杆菌、致病性球菌、致病性弧菌检测。结果：经数天培养后,从烧鸡及患者的呕吐物、肛拭子中分离到3株金黄色葡萄球菌,并进行了幼猫腹腔接种试验,证实了该菌株有肠毒素产生。结论：根据病原学检验结果和流行病学调查确认,这是一起由烧鸡受金黄色葡萄球菌污染而引起的食物中毒。     

PCR法检测葡萄球菌肠毒素A基因

目的 建立PCR方法快速检测葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)基因.方法 根据SEA基因的序列,设计PCR引物特异性扩增靶基因片段,对1株产SEA金黄色葡萄球菌和9株对照菌株进行PCR检测,评价其特异性和敏感性.另检测30株金黄色葡萄球菌SEA基因的携带情况.结果 建立PCR方法快速检测SEA基因,扩增产物长度为439bp.PCR反应体系中有29cfu的产SEA金黄色葡萄球菌即可检出SEA基因,30株分离的金黄色葡萄球菌中有10株携带有SEA基因.结论 PCR法可以快速、敏感地检测SEA基因,为金黄色葡萄球菌食物中毒诊断提供依据.     

金黄色葡萄球菌食物中毒病原检测及方法比较

目的:可疑金黄色葡萄球菌食物中毒事件病原学检测,传统的分离培养与荧光PCR检测方法的方法比较。方法:本实验采用国家标准方法对食物中毒标本进行金黄色葡萄球菌分离培养,并对食物中毒标本及分离的阳性菌株作肠毒素定性测定;用荧光PCR(FQ-PCR)方法对可疑食品及患者呕吐物标本进行金黄色葡萄球菌快速检测。结果:用国标方法,9份呕吐物标本中7份分离出金黄色葡萄球菌,阳性率77.78%,荧光PCR快速法检测相同标本,9份呕吐物均呈阳性,阳性率100%,食品卤香干检出金黄色葡萄球菌,8个阳性菌株C型肠毒素检出率100%。结论:该中毒确诊为金黄色葡萄球菌C型肠毒素中毒,中毒食品为卤香干。荧光PCR检测法快速、灵敏,尤其适用于药后患者标本及已加热杀菌的可疑中毒食品的检测,作为初筛、辅助诊断手段,在食物中毒病原检测中值得广泛推广。     

一起食物中毒中金黄色葡萄球菌的分子特征分析

目的利用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术对一起食物中毒中检出的金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)进行分子分型,了解毒株的肠毒素类型,为金葡菌的分子溯源研究提供实验室数据。方法 mini VIDAS全自动荧光酶标免疫测试仪检测样品中葡萄球菌肠毒素。按照GB 4789.10-2010对样品进行菌株分离和生化鉴定,应用MLST方法对分离出的金葡菌进行基因分型,酶联免疫吸附法对分离株进行葡萄球菌肠毒素分型。结果分别从病人的呕吐物、食堂师傅手涂抹物、厨房刀涂抹物中检出金葡菌,呕吐物中检出葡萄球菌肠毒素;可疑食物中未检出金葡菌,葡萄球菌肠毒素为阴性。中毒毒株MLST分析得到4个ST序列型,ST5、ST15、ST59和ST338,其中ST5型金葡菌产肠毒素C、肠毒素D和肠毒素E; ST15型菌产肠毒素E; ST59型和ST338型菌产肠毒素B和肠毒素C。结论此食物中毒由不同MLST型别的金葡菌引起,毒株产葡萄球菌肠毒素的类别也不同。     

细菌性食物中毒患者病原学情况及微生物检验效果研究

目的 探讨细菌性食物中毒患者病原学情况及微生物检验效果。方法 选取2018年3月至2020年3月在我中心流调过程中接触的细菌性食物中毒患者29例,其中男21例,女8例。对29例患者的粪便、呕吐物、肛拭子、手拭子、食用的食品、食品操作间进行检测。统计检出的病原菌情况及血清病毒类型的分布情况。结果 全部食物中毒患者中,10例患者因致病性大肠埃希菌导致,3例因沙门杆菌导致,5例因变形杆菌导致,4例由副溶血性弧菌导致,4例由于金黄色葡萄球菌导致,2例由于志贺菌导致,1例由于蜡样芽孢杆菌导致。通过对微生物进行检测,肛拭子中测出48株菌株,呕吐物中测出27株菌株,手拭子中测出24株菌株,粪便中测出30株菌株,厨具中测出215株菌株,食品中测出118株菌株,合计462株。病原菌共测出58株,测出率最高的是粪便60.0%(18/30),之后是肛拭子43.8%(21/48),其次是呕吐物14.8%(4/27)。结论 对较多的样品有针对性的进行微生物检验,有助于临床中对细菌性食物中毒患者的病原菌种类和血清病毒类型的判断和治疗。     

细菌性食物中毒患者进行病原微生物检测的临床效果

目的探讨细菌性食物中毒患者进行病原微生物检测的临床效果。方法选取本院2016年7月至2019年12月收治的104例细菌性食物中毒患者,对所有研究对象采用病原微生物检测法进行检测,分析患者病原菌的检出情况和肛门周围检出病原菌的类型情况。结果患者病原菌的总检出率为43.88%,其中呕吐物中的病原菌检出率为15.78%,粪便为72.34%,食物为5.06%,手拭子为7.46%,肛拭子为54.03%;病原菌类型中副溶血性孤菌最为常见,共144株,其次是致泻性大肠埃希菌,共61株。结论对细菌性食物中毒患者采用病原微生物进行检测,可有效提高粪便、肛门周围及呕吐物的检出率,同时还可为临床医生判断病原菌的属性、血清类型提供关键性的指导,利于采取针对性的治疗方式,提高患者的临床效果,改善患者的预后,提高污染源控制效果。     

金黄色葡萄球菌引起食物中毒的分析

目的 探讨以微生物学和分子生物学角度寻找金黄色葡萄球菌引起的食源性疾病的病因。方法 分别以食品卫生微生物检验国家标准（GB/T4789）分离鉴定菌株、K-B法进行药敏试验、mini-VIDAS全自动荧光酶标免疫测试仪进行葡萄球菌肠毒素检测和RiboPrinte全自动微生物基因指纹鉴定系统进行基因分型对一起由金黄色匍萄球菌引起的中毒事件进行分析。结果 从来源于各类共17份样品的菌株中，均检出葡萄球菌肠毒素，对青霉素G100％耐药，对其他10种抗生素耐药率低于30％，RiboPfinter全自动微生物基因指纹鉴定系统结果证实为一起同型金黄色葡萄球菌的爆发。结论 结合微生物学和分子生物学检测结果，确认这起食源性疾病是由产生肠毒素的金黄色葡萄球菌污染食物所引起。     

金黄色葡萄球菌肠毒素的检测和耐药性分析

目的了解临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)产肠毒素(SE)的情况及耐药现状。方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,用K-B法对260株SA进行药物敏感性试验,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测分别用检测头孢西丁及乳胶凝集检测PBP2a方法进行。结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB和SEC为主,分别为19.4%、16.4%和13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%。用头孢西丁及检测PBP2a的方法检测MRSA,检出率无显著意义(P>0.05);SA对临床常用的抗菌素除万古霉素及替考拉宁较敏感(100.0%敏感),其它的抗菌素存在多重耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强。结论临床分离的SA株大部分都携带肠毒素,MRSA的带毒率及耐药性均高于MSSA;临床应重视SA肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素。     

金黄色葡萄球菌SEB基因的克隆及其系统发生分析

目的克隆和测定金黄色葡萄球菌深圳分离株S4070肠毒素B（SEB）基因序列,并作系统发生分析。方法采用PCR法从金黄色葡萄球菌S4070基因组中扩增出SEB基因片段,纯化后与pMD-18T载体连接构建重组子pMD-18T-SEB,并转化E.coli DH5α;阳性克隆质粒经双酶切法鉴定后,采用双脱氧末端终止法作序列测定,并以BLAST和MEGA4软件分析其分子特征。结果从金黄色葡萄球菌基因组DNA中扩增出约704bp的基因片段,阳性克隆质粒鉴定结果与预期一致;序列测定结果显示,所克隆的SEB基因片段含704个碱基,与GenBank中17株金黄色葡萄球菌SEB基因序列比对,无碱基的插入或缺失,同源性均为98%以上;基于SEB基因序列,采用邻位连接法（Neigh bor-joining）构建系统发生树,深圳S4070株与日本分离株NN35、NN37、NN41-F1D、NN41-F1F和NN41-F1G以及印度分离株DQ535901、DQ535902的遗传距离小,同处在一个分支群上。结论实验成功克隆了金葡菌深圳株S4070 SEB基因,不同分离株间SEB基因序列相对保守,本分离株与日本和印度分离株遗传关系较近。     

rDNA图谱在金黄色葡萄球菌引起食物中毒溯源中的应用

目的探讨从分子分型角度对金黄色葡萄球菌引起的食源性疾病进行溯源。方法用食品卫生微生物检验国家标准(GB/T4789)分离鉴定菌株,用mini-VIDAS全自动荧光酶标免疫测试仪进行葡萄球菌肠毒素检测,Ribo-Printer全自动微生物基因指纹鉴定系统进行基因分型,用Bio Numerics软件对图谱数据进行统计分析。结果从来源于各类样品的菌株中检出葡萄球菌肠毒素,28株金黄色葡萄球菌共分为22个核糖型,不同地区的菌株图谱的相似性低,但同一爆发事件分离的菌株基因图谱同源性高。结论RFLP法具备良好的分型能力,rDNA指纹图谱对食物中毒事件溯源效果明显。