碳化硅冶炼烟尘对NIH/3T3细胞的影响

以小鼠肺成纤维细胞(NIH/3T3)为靶细胞,以某碳化硅冶炼车间沉降尘为受试物,采用中性红染料滞留(neutral red dye retention)实验和噻唑蓝(MTT)实验检测碳化硅冶炼烟尘对NIH/3T3细胞活性与增殖的影响。碳化硅冶炼烟尘未使细胞生长受到抑制,随染毒浓度的增加,作用时间的延长,细胞相对存活率逐渐升高,呈剂量-反应和时间-反应关系。中性红实验作用48 h,800μg/ml浓度组的细胞相对存活率达到最大值164.23%。MTT实验作用48 h,12.50μg/ml浓度组的细胞相对增殖率达到最大值155.48%;MTT实验1 600.00μg/ml浓度组的吸光度值与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。提示碳化硅冶炼烟尘对NIH/3T3细胞的毒性较弱,对NIH/3T3细胞的增殖有影响。 更多还原     

镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞毒性作用的实验研究

目的 观察镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞(CHL）的毒性作用。方法 以我国某镍冶炼厂电炉烟道尘为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测CHL细胞活性。结果 不同浓度下的镍冶炼烟尘(6．25、12．50、25．00、50．00、100．00μg／ml)作用一定时间后,CHL细胞存活率下降,呈现出时间．剂量．反应关系。接触受试物36h,细胞生长半数抑制浓度IG50为21．36μg／ml。同时镜下观察细胞形态也发生改变。结论 镍冶炼烟尘可以抑制CHL细胞生长,降低线粒体代谢活性。     

二甲双胍对镍精炼烟尘诱导Beas-2B细胞炎性损伤的干预作用

目的 研究镍精炼烟尘对人正常肺上皮(Beas-2B)细胞的毒作用及炎性损伤,并探讨二甲双胍是否对其具有保护作用。方法 CCK-8法检测Beas-2B细胞活力;Western blot法检测不同浓度镍精炼烟尘(0.00、 6.25、 12.50和25.00μg/ml)和二甲双胍干预后Beas-2B细胞炎症相关蛋白NLRP3、IL-1β和TNF-α表达水平。结果 Beas-2B细胞存活率随着镍精炼烟尘浓度的增加而降低(F=156.7,P<0.05)。与对照组相比,不同浓度镍精炼烟尘处理细胞后炎症相关蛋白NLRP3、 IL-1β和TNF-α表达水平显著升高,且随着镍精炼烟尘浓度升高,表达水平呈一定的剂量反应关系(F=206.9、158.9、294.0,P<0.05)。不同浓度二甲双胍均可提高镍精炼烟尘暴露后细胞的相对活力,5 mmol/L二甲双胍的保护作用最为显著(F=163.7,P<0.05)。与对照组相比,25.00μg/ml镍精炼烟尘染毒组NLRP3、 IL-1β和TNF-α蛋白表达水平显著升高。与25.00μg/ml镍精炼烟尘染毒组相比,二甲双胍预处理显著降低NLR...     

镍精炼烟尘对NIH/3T3细胞NF-κB表达及iNOS、NO分泌的影响

将镍精炼烟尘配制成终浓度分别为0.00、12.50、25.00、50.00、75.00、100.00μg/ml的混悬液,处理小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)24 h。CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性,免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达水平,分光光度法检测细胞上清液中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)的含量。NIH/3T3细胞的生存率随镍精炼烟尘染毒浓度的增加而降低,差异有统计学意义(P0.05)。镍精炼烟尘诱导NIH/3T3细胞NF-κB蛋白表达高于对照组,诱导NIH/3T3细胞iNOS和NO分泌量增加,且随染毒浓度的增加而增加,差异均有统计学意义(P0.05)。提示镍精炼烟尘会致NIH/3T3细胞NF-κB活性增加,进而诱导炎性因子iNOS和NO分泌量增加,参与炎症的调控过程。     

镍冶炼烟尘对NIH/3T3细胞吞噬活性的影响

目的 研究镍冶炼烟尘对NIH/3T3细胞的毒性.方法 以我国某镍冶炼厂的镍冶炼炉前沉降尘和镍精矿车间沉降尘为受试物,观察NIH/3T3细胞对其的吞噬活性,并用噻唑蓝(MTT)比色的方法检测细胞活性.结果 两受试物均可被NIH/3T3细胞吞噬,在200 μg/ml时的吞噬率分别为100.0%、83.0%;100 μg/ml时的吞噬率为77.0%、58.8%;50 μg/ml时的吞噬率为59.8%、30.5%,差异均有统计学意义(P<0.05);且随作用时间增长,细胞生长受到抑制程度也随之增加.接触24 h,两受试物细胞半数抑制浓度分别为19.86、30.15 μg/ml.结论 两受试物均可诱导NIH/3T3细胞吞噬活性,可以降低细胞的成活率,为镍冶炼烟尘的致癌危险性以及镍冶炼工肺癌病因学研究提供新的实验依据.     

镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞毒性和细胞间隙连接通讯的影响

目的探讨镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞（CHL）毒性和细胞间隙连接通讯（GJIC）的影响。方法以CHL细胞为靶细胞，采用噻唑蓝（MTT）颜色反应法，检测2份镍冶炼烟尘对CHL细胞的毒性作用。采用划痕标记染料示踪技术（scrape-loading and dye transfer，SLOT）检测镍冶炼烟尘对CHL细胞GJIC的影响。结果2份受试物各剂量组在作用6、12h时，CHL细胞增殖情况与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），作用36h时，所有剂量组细胞存活率均降低，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），并呈现剂量-反应和时间-反应的关系。2份受试物作用CHL细胞36h时IC50分别为21．36、23．07μg／ml。镍冶炼烟尘在25．00、50．00、100．00μg/／ml时，荧光黄（LY）由伤沿列传向邻近细胞的列数减少，与溶剂对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），细胞间隙连接通讯能力降低。结论镍冶炼烟尘对体外培养的CHL细胞可产生毒性作用。抑制细胞生长。一定浓度的镍冶炼烟尘能够抑制CHL细胞的GJIC。     

镍冶炼烟尘诱导哺乳动物细胞遗传物质损伤作用的研究

目的 研究2种镍冶炼烟尘致细胞毒性和DNA损伤的作用及其差异.方法 以某镍冶炼厂的镍冶炼炉前沉降尘和镍精炼车间沉降尘为受试物,用噻唑蓝(MTT)染色的方法 检测(受试物浓度分别为100.00、50.00、25.00、12.50、6.25、0.00μg/ml)作用6、12、18、24、36、48 h的细胞相对存活率;单细胞凝胶电泳技术检测(受试物浓度分别为100.0、50.0、25.0、12.5、0.0μg/ml))作用2、4、8 h其致细胞的DNA损伤.结果 随着染毒时间的延长和染毒剂量的增加,细胞存活率下降;2种冶炼烟尘引起的细胞拖尾率、尾矩和细胞尾部DNA含量增加.在浓度为100.00μg/ml的2种烟尘作用细胞48 h后,细胞的存活率仅为24.5%和26.5%;镍冶炼炉前沉降尘的各浓度组在不同时间诱导的细胞拖尾率和尾部DNA含量均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),镍精炼车间沉降尘除12.5μg/ml各作用时间组和50.0μg/ml作用2 h组外的各实验组在不同时间诱导的细胞拖尾率和尾部DNA含量均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 镍冶炼烟尘可以降低细胞的相对存活率,并不同程度地致NIH/3T3细胞的DNA损伤.     

镍精炼烟尘对NIH/3T3细胞凋亡及TNF-α、VEGF表达的影响

以镍精炼烟尘染毒,测定细胞的增殖率和凋亡率,检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平。与对照组比较,各染毒剂量组细胞生长增殖率明显降低,细胞凋亡率、TNF-α、VEGF蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。提示镍精炼烟尘可以引发细胞炎症反应,并诱导细胞凋亡。     

番茄原汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用的研究

目的　探讨番茄原汁对人前列腺癌PC -3细胞生长抑制作用及其可能机制。方法　不同浓度的番茄原汁作用于人前列腺癌PC- 3细胞4 8小时;采用噻唑蓝(MTT)法检测番茄原汁对人前列腺癌PC- 3细胞的生长抑制作用,彗星试验检测PC -3细胞DNA损伤作用。结果　番茄原汁能抑制人前列腺癌PC- 3细胞生长,与对照组相比差异有极显著性;引起PC-3细胞DNA单链断裂,出现拖尾的彗星细胞,拖尾率与尾长随着番茄原汁浓度增大而增加,表现明显的剂量反应关系。结论　番茄原汁对PC- 3细胞生长抑制作用的机理可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞DNA损伤的有关     

澳洲茄胺盐酸盐对体外HeLa细胞培养生长抑制作用的研究

[目的]探索SBHL对体外培养HeLa细胞生长抑制影响,了解SBHL抗肿瘤活性. [方法]用细胞生长计数法观察SBHL对HeLa细胞生长抑制作用;MTT法测定SBHL抗肿瘤活性;流武细胞仪检测HeLa细胞DNA合成率和凋亡率. [结果]细胞生长计数法证实SBHL对HeLa细胞生长有抑制作用,且随药物浓度增加给药时间延长,其抑制作用增强;MTT法证实SBHL对HeLa细胞集落形成有抑制作用,并随SBHL浓度增加其抑制率也随之增强;流式细胞仪检测证实不同浓度SBHL对HeLa细胞DNA合成抑制率和凋亡率产生不同影响,且随药物浓度增加和给药时间延长,其抑制作用增强. [结论]SBHL能抑制HeLa细胞生长增殖作用,能抑制HeLa细胞DNA合成和诱导HeLa细胞凋亡.     

2HRZE/4H3R3和2H3R3Z3E3/4H3R3治疗初治涂阳肺结核病社会效果评价

目的 对2HR ZE/4H3R3和2H3R3Z3E3／4H3R3治疗初治涂阳肺结核病患者社会效果评价，为结核病的社会控制提供依据。方法 应用中国卫生部结核病控制项目2HR Z E/4H3R3方案，治疗初治涂阳肺结核病人的监测资料和2003年对《中国结核病控制规划(2001—2010)))阶段评估，抽查“世界银行贷款 中国结核病控制项目”2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗初治涂阳肺结核病人治疗的资料进行分析。结果 在落实较好的全程督导服药治疗下，两方案已达到国家规划目标。目前2H3R3Z3E3/4H3R3未能达到国家规划目标，治愈率明显较强化期每日服药方案低，而失败率、丢失率、副反应停药率明显较高。结论 经费落实不到位导致患者全程督导服药治疗不能很好落实，是影响化疗效果的主要原因。由于全程督导服药治疗不能很好落实，致使全程隔日服药方案不能胜任规划目标的要求，提示结核病控制的方向。     

3-羟基-3-甲基戊二酸尿症患儿的临床诊治及3-羟基-3-甲基戊二酰裂解酶基因新突变分析

目的探讨3-羟基-3-甲基戊二酸尿症患儿的主要临床表现、生化特点及3-羟基-3-甲基戊二酰裂解酶(HMGCL)基因突变检测结果。 方法收集2014年12月7日于北京大学第一医院儿科就诊的1例3-羟基-3-甲基戊二酸尿症患儿的临床病历资料为研究对象。采用回顾性研究方法分析该患儿的入院查体及辅助检查结果、诊疗情况;对患儿及父母进行HMGCL基因检测,并于患儿出院后6个月,对其进行随访。本研究遵循的程序符合北京大学第一医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,对患儿及其父母进行基因检测均获得受试对象及受试对象监护人的知情同意。 结果患儿年龄为1岁1个月,男性。因"不明原因腹泻、呕吐,反复呕血,发热2 d,昏迷3 h"收入本院。入院查体及辅助检查结果示：白细胞计数升高、肝功能损害、电解质紊乱、低血糖、凝血功能异常、低蛋白、血氨水平高、代谢性酸中毒;头颅MRI检查结果示：双侧侧脑室旁及双侧额颞顶皮层下异常信号。确诊为3-羟基-3-甲基戊二酸尿症。经限制蛋白质摄入,静脉滴注葡萄糖和左旋肉碱治疗后症状缓解。该患儿HMGCL基因c.509G >T(鸟嘌呤>胸腺嘧啶)发生点突变,c.348＋1G > C(鸟嘌呤>胞嘧啶)发生剪切位点突变,导致外显子拼接错误,其中c.509G >T是来自母亲的杂合突变,c.348＋1G > C是患儿新出现纯合突变,c.348＋1G > C剪切位点突变,导致第170位的半胱氨酸剪切突变为苯丙氨酸。出院后6个月后随访结果示：患儿年龄为1岁7个月,智力运动发育稍落后,但无明显倒退,无抽搐发作,全身情况良好,各项生化指标及尿3-羟基-3-甲基戊二酸水平降低。 结论3-羟基-3-甲基戊二酸尿症系少见的常染色体隐性遗传疾病,通过HMGCL基因检测及HMGCL基因分析不仅有助于诊断该病,对于指导家系遗传咨询及产前诊断亦至关重要。     

STAT3,pSTAT3与TFF3在甲状腺乳头状癌中的临床意义

目的探讨甲状腺乳头状癌(Papillary Thyroid Carcinomas,PTC)STAT3及其磷酸化水平与三叶因子3(Trefoil Factor 3,TFF3)表达及相关性。方法采用免疫组织化学检测31例组织芯片中PTC及癌旁组织STAT3、p STAT3和TFF3阳性率与平均光密度(AOD)值;Western Blot检测6例PTC和癌旁手术标本中相应蛋白的含量,并进行相关分析。结果 (1)免疫组化:TFF3蛋白在PTC中均高表达(P0.001),TFF3阳性率与AOD值在直径2 cm组、淋巴结转移组和临床Ⅲ~Ⅳ病例明显高于直径≤2 cm组、无淋巴结转移组和Ⅰ~Ⅱ期者(χ~2=12.120,P=0.001,χ~2=7.517,P=0.043,χ~2=10.490,P=0.003;AOD值:t=2.810,P=0.0064,t=2.234,P=0.039,t=2.926,P=0.0058);PTC中STAT3阳性率和AOD值与临床资料无关。p STAT3为胞核阳性,阳性率和AOD值在PTC组织低于癌旁组织,直径2 cm组、淋巴结转移组和临床Ⅲ~Ⅳ病例明显低于直径≤2 cm组、无淋巴结转移组和Ⅰ~Ⅱ期者(χ~2=4.963,P=0.046,χ~2=4.882,P=0.033;AOD值:t=2.195,P=0.041,t=2.790,P=0.0068,t=2.018,P=0.042);TFF3与STAT3呈正相关,与p STAT3呈负相关(P0.01)。(2)Western Blot:TFF3和STAT3蛋白在PTC的表达高于癌旁组织(t=2.841,P=0.008,t=2.925,P=0.007),但p STAT3却明显低于癌旁组织(t=2.713,P=0.009)。结论甲状腺乳头状癌TFF3和STAT3高表达、p STAT3低表达对PTC不良预后的预测有指导意义。