灵芝三萜类化合物对AD大鼠学习记忆能力和ACh含量的影响

目的:探讨灵芝三萜类化合物(ganoderma lucidum triterpenoids,GLT)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的防治作用及其机制.方法:将自然衰老模型大鼠60只随机均分为6组,模型组(NS 10 mL·kg-1)、GLT低、中、高剂量组(0.25,0.5,1.0g·kg-1)、阳性对照组(健脑胶囊0.38 g·kg-1)及溶媒对照组(食用油10 mL·kg-1);5月龄大鼠10只为正常对照组(NS 10 mL·kg-1).连续ig给药60 d后,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;光化学法检测脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性.结果:自然衰老模型大鼠逃避潜伏期延长、搜索距离增加,探索时间及探索距离百分比减少,显示学习记忆障碍,脑组织AChE活力升高、ChAT活力降低.自然衰老模型大鼠用GLT ig 60 d后,学习记忆成绩明显提高,AChE活力降低、ChAT活力升高.结论:GLT对AD有防治作用,其作用机制可能和提高脑内乙酰胆碱(ACh)含量有关.     

补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响

目的研究补益脾胃元气方药人参、大补元煎、洗心汤对快速老化痴呆模型(SAMP8)小鼠空间学习记忆能力、海马区形态功能和皮层胆碱能系统的影响,探讨其治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法 3月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、人参组、洗心汤组、大补元煎组,以雄性抗快速老化型(SAMR1)小鼠为对照组。除对照组和模型组ig蒸馏水外,其余各组ig药物(10 mL/kg),1次/d,连续3个月。实验结束后采用Morris水迷宫实验检测小鼠空间学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA3区突触超微结构,免疫组化法检测CA1区神经元密度、脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)水平,生物化学法检测海马胆碱乙酰基转移酶(Ch AT)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)的活性。结果补益脾胃元气方药各组小鼠逃避潜伏期平均值明显下降,在目的象限游泳时间、穿过平台次数显著增加(P0.05、0.01);各组小鼠Aβ阳性细胞数目显著降低(P0.05、0.01),神经元特异核蛋白(Nue N)阳性细胞密度有上升趋势,但无显著差异;各组小鼠Ch AT活性升高(P0.05、0.01),人参、洗心汤组小鼠ACh E活性降低(P0.05)。结论补益脾胃元气方药对SAMP8小鼠空间识别和学习记忆能力有明显改善作用,其机制可能与影响小鼠海马突触结构、促进海马神经元修复、降低小鼠脑内Aβ表达、调节海马胆碱能系统有关。     

更年春方对切除卵巢大鼠学习记忆能力和海马胆碱能系统的影响

目的 观察中药更年春方对卵巢切除大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其对海马胆碱能系统的调节作用。方法 选择10～12月龄SD雌性大鼠,切除双侧卵巢建立学习记忆能力下降的模型,分别用生理盐水、更年春方（高、低剂量）和尼尔雌醇灌药12周后行Morris水迷宫实验（MWM）,化学发光法测血清雌二醇（E2）水平,Real-time PCR 法测定海马乙酰胆碱酯酶（AChE）mRNA的变化,免疫组化的方法测定海马乙酰胆碱（ACh）、AChE和乙酰胆碱转移酶（ChAT）的活性。结果 大鼠切除卵巢后,血E2水平和Morris水迷宫测定的学习记忆能力显著下降（P<0.01,P<0.05）。尼尔雌醇和高剂量更年春方可以改善大鼠切除卵巢后学习记忆能力下降的症状,提高海马ACh、AChE和ChAT的活性（均P<0.05）。结论 更年春方可以改善卵巢切除大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能是通过调节海马胆碱能指标而发挥作用的。     

葡萄内酯对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及其机制研究

目的探讨葡萄内酯对快速老化小鼠学习记忆能力的影响及其机制.方法以SAMP8小鼠为研究对象,给予葡萄内酯,连续灌胃45 d.采用Morris水迷宫方法测定小鼠学习记忆能力,用比色法测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力、丙二醛(MDA)和谷氨酸(Glu)含量.结果 葡萄内酯中、高剂量组到达平台的时间明显缩短,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);葡萄内酯剂量组AChE活性、MDA和Glu含量明显降低,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论葡萄内酯可以明显改善SAMP8小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与抑制脑组织AChE活性有关.     

高良姜提取物对小鼠学习记忆能力及胆碱能神经系统功能的影响

目的:研究高良姜不同提取物对小鼠学习记忆能力及胆碱能神经系统功能的影响,探讨其作用机制。方法:采用小鼠跳台法、小鼠Morris水迷宫法考察高良姜不同提取物对东莨菪碱所致记忆获得障碍小鼠的学习记忆能力的影响;紫外分光光度计检测小鼠大脑组织中乙酰胆碱转移酶(ChAT)及乙酰胆碱酯酶(TChE)的活力;HE染色观察海马组织形态学改变。结果:高良姜水及乙醇提取物组小鼠跳台潜伏期均显著延长(P0.05),错误次数均显著减少(P0.01),Morris水迷宫实验游泳潜伏期均显著缩短(P0.05),TchE活力均显著降低(P0.05),ChAT活力均显著增强(P0.05),显著改善海马神经元的变性、脱落。结论:高良姜水及乙醇提取物均对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍有显著改善作用,且高良姜水提取物的改善作用强,其作用机制可能与降低TchE活力、提高ChAT活力,增强中枢胆碱能神经系统功能有关。     

地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠学习记忆及海马AChE,ChAT的影响

目的:探讨地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶(AChE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响。方法:采用双侧颈总动脉结扎制作大鼠慢性脑缺血模型,通过Morris水迷宫试验测定地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠学习记忆功能改善情况,并测定大鼠海马脑组织AChE,ChAT的含量。结果:地黄饮子组(10,20 g.kg-1)与模型对照组比较,Morris水迷宫试验逃避潜伏期缩短,跨越平台次数增加,海马AChE和ChAT含量显著升高(P<0.05)。结论:地黄饮子能改善慢性脑低灌注大鼠学习记忆功能,可能与保护胆碱能系统有关。     

淫羊藿苷改善快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能及与血清雌激素水平相关性研究

目的:研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能的影响及与血清雌激素水平相关性。方法:按体重随机挑选10只6月龄抗快速老化小鼠SAMR1和40只同龄快速老化小鼠SAMP8,并将SAMP8随机分为4组(模型组、己烯雌酚组和ICA75mg·kg^-1、150mg·kg^-1组),灌胃给药,3个月后,用Morris水迷宫法检测SAMR1和SAMP8的学习记忆能力;放射免疫法检测血清雌二醇(Estradiol,E₂)水平;处死称量子宫湿重,计算子宫系数。结果:ICA可以改善SAMP8定位航行和空间搜索学习记忆障碍,提高血清E₂水平,但对子宫系数影响不明显;Pearson相关系数分析发现ICA对SAMP8Morris水迷宫潜伏期的影响与血清E₂水平呈负相关的关系(R=-0.64,P=0.003)。结论:ICA可以改善SAMP8的学习记忆能力,其作用机理可能与升高血清雌激素水平有关。     

参乌胶囊对微泵恒速灌注叠氮钠致痴呆大鼠行为学及胆碱能系统的影响

该研究的目的是利用线粒体细胞色素C氧化酶抑制剂叠氮钠致痴呆动物模型,观察参乌胶囊对模型大鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制.应用SD大鼠皮下埋植Alzet微泵,连续恒速给予叠氮钠(1 mg· kg-1·h-1)共30 d造模.手术后24 h开始给药,参乌胶囊低、中、高剂量组(干粉0.45,0.9,1.8g· kg-1)每日灌胃给药1次.应用水迷宫、避暗试验检测动物学习记忆能力.放射免疫法测定大脑皮层和海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性,羟胺比色法检测乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,放射配基结合试验测定M-胆碱能受体结合力.结果显示,微泵恒速灌注叠氮钠导致模型大鼠水迷宫游出时间及距离延长,避暗潜伏期缩短、错误次数增加.模型大鼠大脑皮层和海马ChAT活性降低,海马区AChE活性升高,皮层和海马M-胆碱能受体结合力明显下降.参乌胶囊灌胃给药能够明显减少模型大鼠水迷宫游出时间及距离,延长避暗潜伏期、减少错误次数;并且降低模型大鼠脑内AChE活性,升高ChAT活性及M-胆碱能受体结合力.实验结果表明,参乌胶囊明显改善线粒体缺陷致痴呆模型大鼠学习记忆能力,其药理作用机制与改善脑内胆碱能系统功能相关.提示参乌胶囊可干预线粒体缺陷这一AD早期的病理改变,进而拮抗其后出现的AD特征性病理变化,对于AD的治疗具有重要的应用价值.     

嗅三针对痴呆大鼠海马胆碱能系统功能影响

目的:探索嗅三针对拟痴呆大鼠脑海马区胆碱能系统功能的影响作用。方法:测定大鼠脑海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)。结果:迷宫学习记忆能力测试表明,嗅三针组成绩优于模型组(P<0.01);嗅三针组海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)活性明显高于模型组(P<0.01)。结论:嗅三针可以增强中枢神经胆碱能系统的功能,并且由此对痴呆大鼠产生治疗作用。     

山楂叶总黄酮对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马AChE, ChAT活性的影响

目的:探讨山楂叶总黄酮(total flavone of Hawthorn leaf,TFHL)对血管性痴呆大鼠空间学习记忆障碍的治疗作用及机制。方法:健康雄性SD大鼠64只,随机分为假手术组(sham control group)、模型组(model group)、TFHL 70,140 mg·kg-1及银杏叶片组(3.5 mg·kg-1),每组16只。采用永久性双侧颈总动脉结扎法制备血管性痴呆大鼠模型,TFHL 70,140 mg·kg-1组连续给药36 d。采用Morris水迷宫评价大鼠的空间学习学习记忆能力,分光光度比色法检测大鼠海马乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性。结果:与假手术组比较,血管性痴呆模型组大鼠学习记忆能力显著降低,大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),穿越平台区次数显著减少(P<0.05),平台象限游泳距离百分比显著降低(P<0.05);ChAT活性明显降低(P<0.05),AChE活性显著增强(P<0.05)。TFHL及银杏叶片能改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力,缩短大鼠逃避潜伏期(P<0.05),增加大鼠穿越平台次数及平台象限游泳距离百分比(P<0.05),增强ChAT活性(P<0.05),降低AChE活性(P<0.05)。结论:TFHL可通过提高海马ChAT活性、降低AChE活性改善血管性痴呆大鼠海马胆碱能神经系统的功能,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆功能。     

六味地黄丸对APP/PS1小鼠学习记忆能力及胆碱能系统的影响

目的:探讨六味地黄丸对APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力以及胆碱能系统的影响。方法:将40只APP/PS1双转基因小鼠随机分为APP/PS1模型组,六味地黄丸低、中、高剂量(0.59,1.18,2.36 g·kg^-1·d^-1)组,西药布洛芬(0.04 g·kg^-1·d^-1)组,每组8只。相匹配的3月龄野生型(WT)小鼠8只,作为正常组。ig给药3个月,通过Morris水迷宫检测学习记忆能力。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠大脑皮层乙酰胆碱(ACh)含量,乙酰胆碱转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果:与正常组相比,APP/PS1模型组小鼠在各时期找到平台所需的时间(潜伏期)均延长(P<0.05),在平台所在象限停留时间,百分比,穿越平台次数均降低(P<0.05),ACh含量及ChAT活性均降低(P<0.05)。六味地黄丸低、中、高剂量组和布洛芬组与APP/PS1模型组相比潜伏期缩短(P<0.05),在平台所在象限停留时间,百分比,穿越平台次数均增高(P<0.05),ACh含量及ChAT活性均增高(P<0.05),AChE活性无统计学差异。结论:不同剂量的六味地黄丸可通过提高脑内ChAT活性,增加ACh含量影响中枢神经胆碱能系统,从而改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力。     

党参远志散微乳对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的研究党参远志散微乳对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织中乙酰胆碱(Ach)和乙酰胆碱酯酶(AchE)水平及脑组织中AchE和乙酰胆碱转移酶(ChAT)蛋白表达的影响,运用胆碱能学说分析作用机制。方法小鼠随机分为对照组、模型组、生物相容性微乳组、脑复康组、党参远志散水提液组和党参远志散微乳组,每组15只。除对照组外,其余组均ip D-半乳糖(D-gal)和Na NO2制备AD小鼠模型,分别ig蒸馏水、生物相容性微乳、脑复康、党参远志散水提液和党参远志散微乳6周。采用水迷宫实验进行行为学考察;酶联免疫分析测定脑组织中Ach和Ach E水平;HE染色光镜观察海马CA1区和皮层的病理变化;免疫组织化学染色法检测海马CA1区和皮层的Ch AT、Ach E蛋白表达。结果与模型组比较,党参远志散微乳组小鼠学习记忆能力明显提高(P0.05),脑组织中Ach水平明显升高(P0.01),Ach E水平明显降低(P0.01),海马CA1区和皮层的病理结构改变明显改善,Ch AT的蛋白阳性表达明显上升(P0.01),Ach E蛋白阳性表达明显下降(P0.01)。结论党参远志散微乳可通过上调小鼠海马CA1区和皮层中Ch AT表达和抑制Ach E表达而发挥抗AD作用。     

Anti-amnesic effect of Chong-Myung-Tang on scopolamine-induced memory impairments in mice

Aim of the study

Chong-Myung-Tang (CMT) consisted of Acorus gramineus Soland, Polygala tenuifolia Willdenow, and Poria cocos Wolf is one of the traditional Korean herbal medicines used for the therapy of learning and memory improvement. The present study was investigated the effect of CMT on learning and memory functions in SCOP-induced memory deficits mice.

Materials and methods

The cognitive-enhancing effect of CMT on amnesic mice induced by SCOP was investigated by assessing the passive avoidance test and the Morris water maze test. In order to confirm the underlying mechanisms of memory enhancing effects of CMT, activities of AChE, choline acetyltransferase (ChAT), and antioxidant enzymes were measured.

Results

Administration of CMT significantly restored memory impairments induced by SCOP in the passive avoidance test and also reduced escape latency during trial sessions in the Morris water maze test. The increased AChE activity produced by SCOP was significantly inhibited by CMT. CMT significantly enhanced ChAT activity. Moreover, treatment with CMT to the amnesic mice induced by SCOP considerably decreased malondialdehyde levels and restored activities of superoxide dismutase and catalase to the control values.

Conclusions

These results suggest that CMT may be useful for the cognitive improvement via regulation of cholinergic marker enzyme activities and the antioxidant defense system.     

二苯乙烯苷对鹅膏蕈氨酸致痴呆大鼠模型脑内胆碱能系统的影响

 目的研究何首乌有效成分二苯乙烯苷(2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,简称TSG)对胆碱能损伤致痴呆大鼠的保护作用。方法采用鹅膏覃氨酸(IBO)基底前脑注射造成模型大鼠脑内胆碱能系统损伤,模拟老年性痴呆动物模型。实验分为假手术、模型、阳性对照药盐酸多奈哌齐(多奈哌齐1.2mg·kg^-1)、TSG小剂量(30mg·kg^-1)、中剂量(60mg·kg^-1)和大剂量(120mg·kg^-1)组,灌胃给药1个月后,取脑分区测定皮层和海马胆碱乙酰基转移酶、乙酰胆碱酯酶活性,M-胆碱能受体结合力。胆碱乙酰基转移酶活性测定用放射化学法,乙酰胆碱酯酶活性测定用羟胺比色法,M-胆碱能受体结合力测定用放射配基结合实验。结果IBO模型大鼠皮层和海马胆碱乙酰基转移酶活性降低,M-胆碱能受体结合力明显下降;皮层乙酰胆碱酯酶活性下降。TSG小剂量可提高模型大鼠皮层和海马胆碱乙酰基转移酶活性;对于M-胆碱能受体结合力的下降,TSG各剂量组均有明显的改善作用;对于皮层乙酰胆碱酯酶活性的下降,TSG中、大剂量组有一定提升作用。结论TSG可明显改善模型动物胆碱能系统的损伤,对于老年性痴呆的治疗有重要意义。