RP-HPLC法同时测定不同品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定不同品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分含量的方法。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为270nm,柱温为30℃,同时测定淫羊藿药材中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的含量。结果:5种成分均能达到基线分离,线性良好。不同品种淫羊藿药材中5种主要黄酮类成分的含量差别较大。结论:建议在考察淫羊藿药材的质量时,不能只考察淫羊藿苷,应建立多种黄酮类成分测定指标,以全面控制淫羊藿药材的质量。     

RP—HPLC法测定巫山淫羊藿中4种成分的含量

目的:用 HPLC 梯度洗脱法测定巫山淫羊藿中4种主要成分的含量,考察了淫羊藿属苷 A、双藿苷 A、朝藿定 C 和淫羊藿苷在巫山淫羊藿不同部位中的分布。方法:采用 RP-HPLC 法测定,以 BECKMAN COULTER_(TM)-C_(18)(10μm,4.6 mm×250mm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0 min,乙腈-水比例为20:80;5 min,比例为30:70;10 min,比例为50:50),流速为1 mL·min~(-1),检测波长270 nm。结果:淫羊藿属苷 A 在0.188μg～1.880μg,淫羊藿苷在0.214μg～2.140μg,双藿苷 A在0.240μg～2.400μg,朝藿定 C 在0.282μg～2.820μg范围内呈良好线性关系;重复性实验的 RSD 分别为1.2%,1.3%,1.2%,1.2%。巫山淫芋藿不同部位双藿苷 A 和朝藿定 C 的含量较大,同一植株的不同部位中朝藿定 C 的分布为根>叶>茎。双藿苷 A 的分布为根>茎>叶,淫羊藿属苷 A 和淫羊藿苷含量较少。结论:巫山淫羊藿根中的化学成分以朝藿定 C 为最高,双藿苷 A 为次,而巫山淫羊藿叶中也以朝藿定 C 含量为最高。     

不同方法炮制对巫山淫羊藿中主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的影响

目的:研究不同方法炮制对巫山淫羊藿中主要成分朝藿定C及淫羊藿苷的影响。方法:采用RP-HPLC法,使用Shim-pack VP-ODS(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱,以乙腈-水(25∶75)流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温30℃,比较不同炮制品中朝藿定C及淫羊藿苷含量的变化。结果:巫山淫羊藿不同炮制品中活性成分淫羊藿苷含量均有较大程度的上升;而朝藿定C变化则比较复杂,除羊脂油炙巫山淫羊藿中朝藿定C含量有较大的下降外,其余均有较小程度的上升。结论:加热炮制可能促使巫山淫羊藿中的其他成分分解或转化为淫羊藿苷;羊脂油炙巫山淫羊藿中朝藿定C含量有较大的下降,提示朝藿定C可能不是淫羊藿中的助阳成分;不同方法炮制对巫山淫羊藿主要成分影响较大,提示巫山淫羊藿在临床应用时必须选择合适的炮制方法。     

不同采收季节的淫羊藿中朝藿定C和淫羊藿苷的含量比较

目的比较3个贵州主流产淫羊藿药材在不同采收季节中朝藿定C和淫羊藿苷的含量。方法用高效液相色谱（HPLC）法测定粗毛淫羊藿、巫山淫羊藿、黔岭淫羊藿中朝藿定c和淫羊藿苷的含量。采用EliteSinoChromODS—AP柱（250mm×4．6mm,5．0Ixm）,流动相为乙腈（A）一水（B）梯度洗脱（0—22rain,27％_29％A;22～23rain,29％_÷100％A;23～34rain,100％A;34～36rain,loO％一27％A;36～50min,27％A）。结果朝藿定c和淫羊藿苷进样量分别在13．22～396．6Ixg（r=0．9999）和3．026～151．3斗g范围内与峰面积均呈良好线性关系（r=0．9999）,平均回收率均在98．0％一105．O％范围内;粗毛淫羊藿中朝藿定c和淫羊藿苷的含量分别为0．516％～2．973％,0．096％～0．216％;黔岭淫羊藿中朝藿定C和淫羊藿苷的含量分别为0．071％～0．185％,0．081％～0．164％;巫山淫羊藿含朝藿定c和淫羊藿苷中朝藿定c和淫羊藿苷的含量分别为1．015％～4．219％,0．080％～0．190％。结论巫山淫羊藿中朝藿定c和淫羊藿苷的含量最高,其次为粗毛淫羊藿、黔岭淫羊藿,说明不同产地、不同品种的淫羊藿药材中朝藿定c和淫羊藿苷的含量差异较大．     

HPLC梯度洗脱联合波长切换法测定龟鹿补肾胶囊中7种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定龟鹿补肾胶囊中的7种成分。方法采用Alltima C18色谱柱;以乙腈-体积分数0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;切换波长检测,检测波长分别为330 nm(麦角甾苷、吉奥诺苷B1)和270 nm(朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷I);流速:0.8 m L·min-1;柱温:30℃。结果 7种成分的质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r>0.999);平均加样回收率及相应的RSD分别为98.7%(1.6%)、97.9%(1.3%)、99.6%(0.8%)、97.7%(0.5%)、99.3%(1.4%)、96.9%(0.8%)和100.3%(0.6%)。结论本文作者建立的HPLC波长切换法同时测定龟鹿补肾胶囊中麦角甾苷、吉奥诺苷B1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I,为龟鹿补肾胶囊质量的全面评价提供了科学依据。     

HPLC同时测定21种淫羊藿中朝藿定C和淫羊藿苷的含量

目的:建立同时测定淫羊藿药材中朝藿定C和淫羊藿苷含量的高效液相色谱方法。方法:采用Elite SinoChrom ODS-AP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0~8 min,27%A;8~30 min,27%A→29%A),流速1 mL.min-1,检测波长270 nm。结果:朝藿定C进样量在0.130~3.89μg,淫羊藿苷在0.0294~1.47μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999);朝藿定C和淫羊藿苷平均回收率(n=9)分别为103.9%,100.0%;淫羊藿药材中朝藿定C和淫羊藿苷的含量分别为0.02%~7.80%,0.01%~1.74%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可作为淫羊藿药材中朝霍定C和淫羊藿苷的含量测定方法。     

淫羊藿属主要资源种类的化学品质比较研究

本文对淫羊藿属主要资源种类药材化学品质进行综合比较研究。应用HPLC法建立不同品种淫羊藿药材中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷I等5种指标成分的含量测定方法,通过紫外-可见分光光度法测定淫羊藿总黄酮含量,并考察样品中水分、灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物等含量,比较不同品种淫羊藿药材化学品质。结果显示,不同品种淫羊藿药材中含有朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷I等异戊烯基黄酮苷类成分的种类及含量各不相同,结合总黄酮含量及水分、灰分等常规理化实验项目测定结果,表明不同品种淫羊藿药材化学品质差异较大。本研究为不同品种淫羊藿药材综合质量评价体系的建立提供理论和实验依据。     

RP-HPLC法测定朝鲜淫羊藿提取物中4种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定朝鲜淫羊藿提取物中淫羊藿苷A、淫羊霍苷、朝藿定B、淫羊藿次苷Ⅱ含量的方法。方法色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水梯度洗脱[0~25 min,w(甲醇)=55%~70%;25~40 min,w(甲醇)=70%~90%;40~45 min,w(甲醇)=90%~55%;45~60 min,w(甲醇)=55%],流速为0.8 mL.min-1,检测波长为270 nm,柱温为25℃。结果淫羊藿苷A、淫羊霍苷、朝藿定B、淫羊藿次苷Ⅱ的线性关系良好,线性范围分别为16.5~82.5、96.0~480.0、30.6~153.0、1.5~7.5 mg.L-1,平均回收率分别为103.7%、100.9%、102.2%、100.1%,RSD分别为1.4%、2.9%、1.2%、2.5%(n=5)。结论该方法可作为朝鲜淫羊藿提取物的含量测定方法 ,为其质量控制提供参考依据。     

HPLC法测定金蚧片中4种淫羊藿黄酮苷类成分的研究

建立同时测定金蚧片中4种淫羊藿黄酮苷类成分的HPLC法。方法：采用CAPCELL PAK C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(25∶75),流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,检测波长270 nm。结果：朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的线性关系、回收率等方法学考察结果良好。结论：该方法可用于金蚧片质量控制。     

HPLC-一测多评法测定参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中的6个黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中朝藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ6个黄酮类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Waters Symmetry C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为270 nm,进样量为10μL。在外标法的基础上分别采用多点校正法及斜率校正法建立各成分与淫羊藿苷(参照物)的相对校正因子(f_(k/s)以计算各成分含量;比较基于HPLC法的外标法与多点校正法及斜率校正法所得4批参芪延肾颗粒样品中6个黄酮类成分含量的差异,验证一测多评法的可行性及准确性。结果:朝藿定A,、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ检测质量浓度线性范围分别为2.03～50.80、4.34～108.60、2.26～56.40、4.14～103.60、4.24～106.00、1.78～44.60μg/mL(r均为0.999 5);检测限分别为65.80、71.49、74.26、68.79、70.56、86.09 ng/mL;定量限分别为196.62、213.63、223.72、208.46、215.96,255.88 ng/mL;精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD<2%(n=6);平均回收率为96.03%～99.04%(RSD为0.65%～1.04%,n=6);采用多点校正法,朝藿定A_1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的fk/s分别为0.837、0.818、0.845、0.831、1.387;采用斜率校正法,朝藿定A_1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的f_(k/s)分别为0.835、0.815、0.851、0.829、1.419。采用一测多评两种校正法与外标法所得含量结果比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:建立的HPLC-一测多评法结果准确,可应用于参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中朝藿定A,、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ6个黄酮类成分的质量控制。     

高效液相色谱法对淫羊藿及人参复方产品的定性定量分析

目的　建立一种快速有效的分析方法 ,达到鉴定淫羊藿及人参复方产品中黄酮苷类及人参皂苷类成分 ,并测定各成分含量的目的 ,最终控制复方中淫羊藿及人参的比例。方法　通过反相液相色谱 ,对包括药典所收载的淫羊藿药材及其产品进行分析。淫羊藿中的主要黄酮苷类成分 ,以淫羊藿定A、淫羊藿定B、淫羊藿定C、淫羊藿苷为对照品 ;对主要的人参皂苷类成分 ,以人参皂苷Rg1 、Re、Rf、Rb1 、Rb2 、Rd为对照品。结果　在同一色谱条件下 ,对主要黄酮苷类及人参皂苷类成分均可同时测定且分离良好。结论　该方法适用于淫羊藿、人参及其复方产品中淫羊藿黄酮苷类、人参皂苷类成分的定性、定量分析     

HPLC测定骨松宝颗粒中淫羊藿苷和朝藿定C的含量

目的：建立同时测定骨松宝颗粒中淫羊藿苷和朝藿定 C 含量的高效液相色谱方法。方法：采用 Elite Hypersil ODS2色谱柱（250 mm ×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（25∶75）,流速1 mL/min,检测波长270 nm。结果：朝藿定 C 进样量在0.216～4.303μg,淫羊藿苷在0.042～0.831μg 范围内呈良好线性关系（r =0.9998）;朝藿定 C 和淫羊藿苷回收率（n =3）分别为98.53%～101.92%,97.32%～103.69%;骨松宝颗粒中朝藿定 C 和淫羊藿苷的含量分别为9.48～18.91 mg/g,1.60～3.62 mg/g。结论：该方法简便、快速、准确,重复性好,可作为骨松宝颗粒多成分检测的方法。     

HPLC法测定淫羊藿苷含量研究

目的：研究色谱条件对药品制剂中淫羊藿苷含量测定结果的影响。方法：HPLC，采用C，B色谱柱；分别以甲醇-水（54．5：45.5）、甲醇-水-冰醋酸（54：46：0．5）和乙腈-水（25．5：74．5）为流动相；检测波长为270nm。结果：以甲醇-水（54．5：45．5）、甲醇-水．冰醋酸（54：46：0．5）为流动相时，淫羊藿苷色谱峰和淫羊藿定C色谱峰完全重叠，测得的含量比实际含量高。结论：应对相关国家药品标准进行修订，新建检测方法时，应做好方法学的验证。     

A rapid method for simultaneous determination of 15 flavonoids in Epimedium using pressurized liquid extraction and ultra-performance liquid chromatography

Herba Epimedii (family Berberidaceae), Yinyanghuo in Chinese, is one of commonly used Chinese medicines. Flavonoids are considered as its active components. In this study, a rapid ultra-performance liquid chromatography (UPLC) method was developed for simultaneous determination of 15 flavonoids, including hexandraside E, kaempferol-3-O-rhamnoside, hexandraside F, epimedin A, epimedin B, epimedin C, icariin, epimedoside C, baohuoside II, caohuoside C, baohuoside VII, sagittatoside A, sagittatoside B, 2'-O-rhamnosyl icariside II and baohuoside I in different species of Epimedium. The analysis was performed on Waters Acquity UPLC system with an Acquity UPLC BEH C18 column (50 mm x 2.1mm I.D., 1.7 microm) and gradient elution of 50mM acetic acid aqueous solution and acetonitrile within 12 min. All calibration curves showed good linearity (R2>0.9997) within test ranges. The LOD and LOQ were lower than 0.13 and 0.52 ng on column, respectively. The R.S.D.s for intra- and inter-day of 15 analytes were less than 5.0% at three levels, and the recoveries were 95.0-103.7%. The validated method was successfully applied to quantitatively analyze 15 flavonoids in different species of Epimedium. The results showed there were great variations among the contents of investigated flavonoids. Hierarchical clustering analysis based on characteristics of 15 investigated compounds peaks in UPLC profiles showed that 37 samples were divided into 3 main clusters, which were in accordance with their flavonoids contents. The simulative mean chromatogram of the high content cluster was generated to compare the samples from different species and/or locations of Epimedium. Four flavonoids including epimedin A, B, C and icariin were selected as markers for quality control of the species of Epimedium used as Yinyanghuo.     

12种中成药中淫羊藿组分的质量考察

目的:考察12种市售不同剂型含淫羊藿中成药中淫羊藿2个指标成分的含量,为有效控制含淫羊藿的中成药质量提供依据。方法:采用高效液相色谱法分别测定市售12种中成药中朝藿定C和淫羊藿苷的含量。色谱柱为Venusil ASB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0mL·min-1,检测波长为272nm,柱温为20℃。结果:市售大部分含淫羊藿中成药所使用的淫羊藿原料中淫羊藿苷的含量均达不到药典规定的质量标准。结论:应将朝藿定C作为淫羊藿药材及含淫羊藿中成药的评价指标之一。     

朝鲜淫羊藿的化学成分

目的研究朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanumNakai)中的化学成分。方法朝鲜淫羊藿干燥地上部分用水回流提取后,经大孔吸附树脂柱色谱分离,用水及不同体积分数的乙醇洗脱;50%乙醇洗脱部分的浸膏用硅胶柱色谱分离,用氯仿甲醇梯度洗脱,得到的第5、8、10流份用羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱分离、十八烷基键合硅胶柱色谱分离、制备型HPLC纯化后得到化合物1~8;根据化合物的理化性质和核磁共振氢谱、碳谱数据对所得化合物进行结构鉴定,分析确定化学结构。结果从朝鲜淫羊藿水提取物中分离得到8个化合物:淫羊藿苷(icariin,1)、宝藿苷Ⅰ(baohuosideⅠ,2)、箭藿苷B(sagittatoside B,3)、宝藿苷Ⅱ(baohuosideⅡ,4)a、stragalin(5)、3,5,7三羟基4′甲氧基8异戊烯基黄酮3OαL鼠李吡喃糖基(1→2)α鼠李吡喃糖苷(6)、1,2,3,4 tetrahy-dro 3,7 dihydroxy 1(4 hydroxy 3 methoxyphenyl)6 methoxy 2,3 naphthalenedimethanol(7)、朝藿定C(epimedin C,8)。结论化合物7为首次从该属植物中分离得到,化合物8为首次从该种植物中分离得到。     

药典内5种淫羊藿中黄酮类成分的反相高效液相色谱分析

报道了药典规定的5种淫羊藿──淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿、柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿中9种黄酮──淫羊藿甙(icariin)、宝藿甙-Ⅰ(baohuosideI)、宝藿甙-Ⅱ(baohuosideⅡ)、淫羊藿甙A(epimedosideA)、箭藿甙B(sagittatosideB)、朝藿定B(epimedinB)、朝藿定C(epimedinC)、大花淫羊藿甙C(ikarisosideC)和大花淫羊藿甙F(ikarisosideF)的反相高效液相色谱测定。色谱柱为DISK-C_phenlyl,流动相为乙腈-乙酸液(水:36%乙酸=100:4),梯度洗脱,检测波长为272nm。     

陈皮压制饮片的煎煮质量评价

目的:评价陈皮压制饮片的煎煮质量。方法:采用传统煎煮法,以橙皮苷含量和干膏率为评价指标,考察陈皮压制饮片和普通饮片的煎煮溶出情况及二者在中药复方中的煎煮溶出情况。采用高效液相色谱法测定橙皮苷的含量;采用相似因子f2法比较二者溶出曲线的相似性。结果:在单味饮片和复方的煎煮中,压制饮片的干膏率和橙皮苷含量均高于普通饮片,但差异无统计学意义(P>0.05);f2相似因子比较结果f2=82,表明压制饮片和传统饮片溶出行为相似。结论:陈皮压制饮片不影响陈皮的煎煮溶出效果,且有效成分橙皮苷的含量较高,并具有易于运输、贮藏等优点,符合中药现代化的要求。     

HPLC法同时测定淫羊藿药材中的5个黄酮类成分

目的：建立同时测定淫羊藿药材中5种成分的HPLC方法。方法：采用Diamonsil—C18柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：乙腈和甲酸水（pH=3．0）,梯度洗脱;流速：0．9mL／min;DAD检测,检测波长：270nm。结果：淫羊藿药材中5个主要黄酮类成分朝藿定A、朝藿定c、淫羊藿苷、箭藿苷A、宝藿苷1分别在0．7800～83．20μg/mL、2．081～222．0μg／mL、3．288～350．7μg／mL、0．8311～88．65μg／mL、0．3518～37．52μg／mL的浓度范围内呈良好的线性关系,最低检测限分别为0．50、0．75、0．87、0．32、0．12μg／mL。重复性、稳定性实验结果的RSD〈3％;各成分平均回收率均小于107％,RSD〈6％。结论：该方法快速简便、准确可靠,各主要化学成分均能达到基线分离,适用于淫羊藿药材的质量控制。