RNA干扰技术在肿瘤基因治疗方面的研究进展

RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)在哺乳动物细胞中是利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)诱导特异性基因表达抑制。其具有基因抑制效果确切、抑制具有严格的序列特异性、作用迅速等特点,故与基因替代、反义寡核苷酸治疗、细胞因子基因治疗等传统的肿瘤基因治疗方法相比,RNAi技术有着无可比拟的优势。本文对RNAi技术的作用机制及在肿瘤基因治疗方面的实验研究进展作一综述。     

利用RNA聚合酶Ⅲ依赖的启动子实现条件性RNA干扰

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指由双链RNA引发的同源mRNA特异性降解过程，目前已成为功能基因组学研究的有力工具，并广泛应用于肿瘤基因治疗研究领域。载体介导的RNAi是向细胞内引入小干扰RNA(small interference RNA)的经济、有效的方法，然而由于用来引导siRNA表达的U6、H1等RNA聚合酶Ⅲ依赖的启动子均没有可诱导性或组织特异性，所以在研究特定基因功能和在基因治疗中的应用均受到一定限制。最近研究表明使用顺页式／反式转录调控元件对PolⅢ启动子进行修饰或通过Cre—LoxP系统控制PolⅢ启动子或shRNA的结构可实现可诱导性、组织特异性等条件性RNAi。这些方法的建立不仅拓宽了RNAi技术的应用范围，而且大大提高了基于RNAi技术的肿瘤基因治疗的安全性，具有良好的临床应用前景。     

siRNA介导的血管内皮生长因子基因沉默对膀胱癌T24细胞增殖的影响

我们应用RNA干扰技术,以血管内皮生长因子(VEGF)为靶点,对人膀胱癌T24细胞进行研究,初步探讨VEGF特异性小干扰RNA(siRNA)作为膀胱癌基因治疗手段的可能.现报告如下.     

SiRNA在泌尿系统肿瘤中的应用进展

RNA干涉(RNA interference,RNA i)是生物体内通过双链RNA(doub le-stranded RNA,dsR-NA)抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的一种自然机制。21~25nt大小的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)作为RNA i过程中关键效应分子,在哺乳动物细胞能够高特异性、高效性地抑制基因的表达,因而在研究基因功能、表达调控、信号传导通路和基因药物开发方面显示其显著的优越性。这项技术也被应用于泌尿系统肿瘤的研究,主要针对泌尿系统肿瘤的发生、发展机制及治疗等方面进行探讨。本文就siRNA在泌尿系统肿瘤领域内的应用研究作一综述。     

RNA干扰技术及其在肾癌基因治疗中的进展

RNA干扰（RNAi）是指生物体内由双链RNA（dsRNA）介导同源序列mRNA的特异性降解，从而导致基因沉默的现象。近年来，随着对RNAi研究的不断深入，其作用机制逐步阐明；同时作为阻断基因表达的新手段，RNAi技术也日趋成熟。它具有高效性和特异性，为RNAi在肿瘤基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文对RNAi技术及其在肾癌基因治疗研究中的进展作一综述。     

Survivin基因与RNAi在病理性瘢痕中的研究进展

Survivin是新近发现的凋亡抑制蛋白,在细胞凋亡、增生、细胞周期的调控以及与血管的形成中起重要的作用,在正常组织中不表达而在病理性瘢痕组织中高表达.RNA干扰(RNAi)可特异性地结合癌基因的mRNA,干扰其翻译、转录形成蛋白质的功能.针对Survivin这些特性,应用新的基因治疗技术一RNA干扰技术降低Survivin的表达可对瘢痕组织的凋亡和增生产生影响,应用RNA干扰技术,针对Survivin靶位降低其表达有望成为今后病理性瘢痕基因治疗的方向.     

Survivin基因与RNAi在病理性瘢痕中的研究进展

Survivin是新近发现的凋亡抑制蛋白,在细胞凋亡、增生、细胞周期的调控以及与血管的形成中起重要的作用,在正常组织中不表达而在病理性瘢痕组织中高表达.RNA干扰(RNAi)可特异性地结合癌基因的mRNA,干扰其翻译、转录形成蛋白质的功能.针对Survivin这些特性,应用新的基因治疗技术一RNA干扰技术降低Survivin的表达可对瘢痕组织的凋亡和增生产生影响,应用RNA干扰技术,针对Survivin靶位降低其表达有望成为今后病理性瘢痕基因治疗的方向.     

RNA干扰技术简介

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double—stranded RNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。近几年来RNAi研究取得了突破性进展，被((Science))杂志评为2001年的十大科学进展之。一，并名列2002年十人科学进展之首。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。     

壳聚糖及其衍生物分子治疗研究进展

天然来源的高分子化合物壳聚糖(chitosan)以较好的生物相容性在药物控制释放和组织工程中有一定应用,作为非病毒载体在基因治疗领域也是研究热点,然而较低的转染效率一直成为研究及应用的瓶颈.近年随着RNA干扰技术的兴起,学者们将目光转移到该技术在基因治疗中的应用.分子量较大、脱乙酰度较高的壳聚糖比较适合与小干扰RNA进...     

RNA干扰技术在前列腺癌病因学研究及治疗中的应用

RNA干扰技术(RNAi)是一种双链RNA分子在mRNA水平上诱发的转录后基因沉默机制。它在分析和研究基因功能、抗肿瘤及抗病毒研究方面发挥了重要作用。本文综述其在前列腺癌病因学研究及前列腺癌的基因治疗中的应用。     

小干扰RNA在肝癌治疗中的应用

小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是21～23 nt的短双链RNA,将哺乳动物细胞内特异基因的mRNA特异性降解而使基因失活,引起转录后沉默该基因的作用.siRNA技术在人类恶性肿瘤的基因治疗有特异而强烈的作用,具有非常广阔的情景,但其稳定性是有待解决的新问题.本文针对siRNA在肝癌治疗中的研究现状进行综述.     

RNA干扰技术在肝细胞癌治疗方面的研究现状及进展

RNA干扰(RNAi)是生物进化过程中高度保守且借助双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发,高效特异性降解同源mRNA的现象。近来研究发现RNAi技术可高度特异地剔除或关闭目的靶基因,从而操控其表达。目前该技术广泛应用于研究靶基因功能、治疗部分疾病特别是恶性肿瘤的基因治疗。肝癌在我国高发,严重威胁患者的生命,针对肝癌的早期诊断、治疗和预后评估一直是外科肿瘤学领域的研究重点。近年,将RNAi技术与肝癌分子生物学机制方面的研究相结合,呈现出很多令人期待、值得深入的研究成果。对此领域的近期研究成果做扼要综述。     

锤头状核酶对短片段雄激素受体 mRNA的体外切割作用

目的 研究锤头状核酶对雄激素受体(AR)mRNA片段的体外切割活性，探讨抗雄激素基因治疗的新途径。方法 计算机模拟AR mRNA片段二级结构，选择第1018位GUC为核酶切割位点，设计特异性切割AR的锤头状核酶(RZ)，合成含T7启动子的核酶和底物模板链，体外转录RNA，37℃条件下行核酶体外切割反应。结果 核酶在体外37℃反应1h，可将98％的底物RNA(255nt)切割为168nt和87nt2个片段。结论 特异性切割AR的锤头状核酶在体外对底物RNA有良好的切割活性，为应用核酶阻断雄激素受体基因表达奠定了基础。     

RNAi 在大肠癌基因治疗中的应用策略和展望

目的 探讨RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术在大肠癌基因治疗研究中的应用。方法复习近几年的相关文献并进行综述。结果RNAi能够高效特异地沉默同源基因表达，可在大肠癌发生、发展多个环节发挥重要作用。结论RNAi技术为大肠癌基因治疗研究开辟了新的途径。     

基因沉默技术在膀胱癌治疗中的应用进展

基因沉默技术早期一般指反义核酸技术,它是将特定的序列导入细胞后,在转录或翻泽水平阻断某些基因的异常表达,以达到治疗疾病的目的.基因沉默技术既是一种筛选、研究癌基因的有效方法,也是一种极具潜力的抗肿瘤治疗方法.其中包括反义RNA技术、核酶技术、三链技术及干扰RNA技术等.随着反义RNA技术的进展、干扰RNA技术的发现、成熟,以反义技术为核心的研究策略日益受到科研工作者的重视,反义人工核酸的应用成为基因治疗中的重要研究方向,利用反义技术进行研究取得了令人兴奋的成果.本文概述了近期已经研究完成的关于通过反义寡(脱氧)核苷酸(AS-ODNs)和小干扰RNA分子(siRNAs)阻断潜在的膀胱癌与异种移植物细胞靶基因的相关研究以及应用反义人工核酸预处理对不同化疗下杀伤膀胱癌细胞的加强效果.     

RNAi对基质金属蛋白酶13在兔骨性关节炎中表达的抑制作用

目的 观察RNA干扰技术(RNAi)是否能有效抑制兔OA模型膝关节软骨中基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达.方法 体外化学合成MMP13序列特异性双链RNA与脂质体混合后转染OA模型中软骨细胞,实验分四组,特异性RNAi组:特异性RNAi+Lipofectamine2000,非特异RNAi组:非特异RNAi+Lipofectamine2000,脂质体组:Lipofectamine2000,对照组:无血清DMEM.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测软骨细胞中的MMP13的表达.噻唑蓝(MTT)比色法检测各组的软骨细胞生长情况.结果 RT-PCR显示RNAi组较对照组、非特异性组和脂质体组的MMP13基因的PCR扩增条带明显减弱,免疫组织化学法显示RNAi组中MMP13阳性细胞数比对照组明显减少.与对照组比较,非特异性组、RNAi组、脂质体组软骨细胞的存活率显著降低(P<0.05),但在3组间两两差异无统计学意义.结论 使用RNA干扰技术可有效抑制兔OA模型中膝关节软骨细胞MMP13的表达,RNA干扰技术为基因治疗OA提供了新策略.     

siRNA在糖尿病肾病治疗中的研究进展

随着经济的发展和人均寿命的延长,我国糖尿病的患病率正在急剧增高,预计到2025年,我国糖尿病患者总数可能达到1亿人[1].糖尿病肾病是糖尿病的严重并发症,其发生率可达20％～50％.已有研究表明糖尿病肾病的发生和发展除了与血糖控制及病程相关外,环境因素、遗传因素在糖尿病肾病的发生和发展过程中也具有重要作用.糖尿病肾病相关基因的发现及其功能的阐明将为糖尿病肾病的早期诊断、基因治疗提供有效的手段.1998年Fire等[2]首次在线虫体内发现双链RNA( dsRNA)能使基因表达沉默.后来Elbashir等[3]应用合成的小干扰RNA(small interferin RNA,siRNA)在培养的哺乳动物细胞中实现了序列特异性的基因敲除.自此以后,国内外广泛地开展了对siRNA的研究和应用[3].随着对糖尿病肾病相关基因的研究,敲除或阻断基因表达已经成为一种高效、特异的治疗手段,RNA干扰为糖尿病肾病的基因治疗开辟了一条新途径.现将siRNA技术在糖尿病肾病治疗中的作用综述如下.     

RNA干扰技术及其在泌尿外科研究中的应用

RNA干扰(RNA interfcrence，RNAi)，是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程。近年来，随着对RNAi研究的不断深入，其作用机制正在逐步被阐明；同时作为阻断基因表达的新手段，RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性和特异性，RNAi为泌尿外科研究提供了有力的工具。本文就RNAi技术的有关历史、作用机理及其在泌尿外科研究中的应用作一概述。     

RNA干扰技术及其在泌尿外科研究中的应用

RNA干扰 (RNAinterfcrence ,RNAi) ,是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程。近年来 ,随着对RNAi研究的不断深入 ,其作用机制正在逐步被阐明 ;同时作为阻断基因表达的新手段 ,RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性和特异性 ,RNAi为泌尿外科研究提供了有力的工具。本文就RNAi技术的有关历史、作用机理及其在泌尿外科研究中的应用作一概述     

RNA干扰技术在大肠癌治疗中的研究进展

RNA干扰（RNAi）是近几年发展起来的一种阻抑内源基因表达的新方法,是由双链RNA诱发的发生在转录后水平的基因沉默。RNAi技术在逆基因分析及基因治疗中已有广泛的应用。大肠癌的发生是一种多基因、多因素相互作用的结果,目前对于大肠癌基因治疗的实验研究已经有了很大的突破。RNAi与传统的基因治疗手段相比,具有沉默效果好、作用稳定等优点。