注射用重组人成纤维细胞生长因子-21食蟹猴药动学研究

目的 研究注射用重组人成纤维细胞生长因子-21（FGF-21）在食蟹猴体内单次和多次皮下给药后的药代动力学特征。方法 采用随机、平行和剂量递增设计,18只食蟹猴分别单次sc150、300和600 μg/kg的FGF-21或多次sc 300 μg/kg的FGF-21,按设计采集动态血清样本。采用双抗体夹心ELISA法检测血清中药物浓度的动态变化,采用DAS 3.2.4药动程序拟合并计算药动参数。结果 食蟹猴单次sc FGF-21后,各剂量组峰浓度C_max和药时曲线下面积AUC_（0-24h）、AUC_（0-∞）均随给药剂量的增加而增大,C_max、AUC_（0-24h）和AUC_（0-∞）三者均与剂量呈线性相关,各剂量组t_1/2Z、T_max、CL_z和V_z均较为一致。与单次给药相比,食蟹猴多次sc给药后的t_1/2z有所延长但其他主要PK参数（T_max、V_z和CL_z等）均较为一致,多次给药后,体内药物无蓄积倾向。结论 食蟹猴单次sc FGF-21后,在150~600 μg/kg剂量范围内呈现线性动力学特征。单次与多次sc给予FGF-21后,两者的PK行为特征基本一致,无明显药物蓄积。     

食蟹猴sc重组人干扰素β-1a注射液30 d安全性评价

目的 研究重组人干扰素β-1a （rhIFN β-1a）注射液的毒副反应靶器官及其恢复情况,预测可能引起的临床不良反应,为临床用药提供参考。方法 食蟹猴sc重复给予rhIFN β-1a注射液3.9、13.2、45.0 μg/kg,连续30 d,每组6只动物,雌雄各半,停药后恢复16 d。观察药物对一般体征、饮食、肛温、体质量的影响,同时进行尿液分析、血液学、血液生化、心电图、眼科检查、骨髓涂片、免疫学指标、免疫原性检查,在给药结束和恢复结束进行大体剖检并进行组织病理学检查。结果 45.0 μg/kg rhIFN β-1a组动物出现一过性肛温升高,以及活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）延长,血浆纤维蛋白原（FIB）浓度降低,该变化在给药期内能恢复。其余一般指标、心电图、血液生化、尿液生化、骨髓检查、大体解剖、脏器质量及系数、组织学检查、免疫学指标检查未见异常。免疫原性试验可见给药20 d后绝大部分动物开始出现抗体,给药30 d时所有动物均出现抗体,各剂量组绝大多数产生结合抗体的动物血清可检测到具有中和rhIFN β-1a注射液活性的抗体,结合抗体以及中和抗体的滴度均与剂量呈非相关性关系,具有随给药时间延长抗体强度增强的趋势。结论 食蟹猴连续sc重复给予rhIFN β-1a注射液30 d,无可见有害作用水平（NOAEL）为13.2 μg/kg,该剂量为人临床拟用剂量0.135 μg/kg的97.8倍。rhIFN β-1a注射液对食蟹猴具有一定的免疫原性。     

食蟹猴静脉注射抗HER2人源化抗体急性毒性研究

目的 评价抗HER2 人源化抗体的急性毒性。方法 将食蟹猴随机分为4 组,包括溶媒对照和抗HER2 人源化抗体75、150 和250 mg/kg 组,单次iv 溶媒对照组或供试品,进行各项毒理学指标检测。结果 给药后各组动物临床症状、体质量、摄食量、体温、心电图、血压和血液学检测均未见明显异常;血清生化结果显示,150 mg/kg 组与250 mg/kg 组动物给药后血清IgG 水平出现一过性增加;各组动物均未见大体病理学改变。结论 食蟹猴单次iv 抗HER2 单抗,总体上动物具有良好的耐受性,最大耐受剂量可达250 mg/kg,这些结果为进一步临床前评价抗HER2 人源化单克隆抗体的安全性奠定了基础。     

重组人干扰素β-1a注射液的安全药理学研究

目的 研究重组人干扰素β-1a注射液对实验动物中枢神经系统、呼吸系统、心血管系统以及消化系统的影响,观察药物潜在的对生理功能的不良影响,为临床实验提供依据及参考。方法 小鼠单次sc重组人干扰素β-1a注射液5.5、22.0、88.0 μg/kg,观察小鼠自主活动,进行平衡协调能力和协同睡眠实验,研究药物对动物中枢神经系统的影响;食蟹猴单次sc重组人干扰素β-1a注射液1、4、16 μg/kg,观察食蟹猴的心电、血压、呼吸频率、呼吸幅度,研究药物对动物呼吸系统和心血管系统的影响;小鼠单次sc重组人干扰素β-1a注射液5.5、22.0、88.0 μg/kg,进行胃肠推进实验,研究药物对胃肠消化系统的影响。结果 小鼠单次sc重组人干扰素β-1a注射液,5.5、22.0、88.0 μg/kg剂量组动物自主活动、平衡运动能力未见明显变化、未见与阈下剂量戊巴比妥钠协同睡眠作用,且未见胃肠推进的明显变化;食蟹猴单次sc重组人干扰素β-1a注射液,1、4、16 μg/kg剂量组动物未见明显剂量或时效相关性的心血管、呼吸系统影响。结论 重组人干扰素β-1a注射液对实验动物的中枢神经系统、呼吸系统、心血管系统及消化系统均未见明显药物影响。     

重组抗CD52单克隆抗体的食蟹猴单次静脉注射毒性研究

目的：开展食蟹猴静脉注射重组抗CD52人源化单克隆抗体注射液单次给药毒性研究,考察动物体内耐受性、给药后出现的毒性反应及严重程度和药物毒性作用靶器官,评价其安全性。方法：首先应用流式细胞术检测方法,筛选出8只红细胞表面CD52抗原阴性食蟹猴,用于单次给药毒性研究。将动物随机分成4组,包括溶媒对照组和3、10、30 mg·kg^-1剂量组,每组2只,雌雄各半。采用静脉推注给药,给药1次。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每周称量1次体质量。分别在给药第2、 8、15 d采集动物外周血液进行临床病理检查,包括血液学(含凝血)、血清生化(含电解质)。分别在给药第2、6、8、15、21 d采集动物外周血液进行T淋巴细胞及亚群和B淋巴细胞的分类计数。于给药第 22 d解剖动物并进行大体病理学检查。结果：动物给药后,在10 mg·kg^-1和30 mg·kg^-1剂量下,会引起白细胞总数、淋巴细胞、单核细胞数量和比例、T淋巴细胞数量及其亚群细胞数量下降,这些变化与药物的免疫抑制作用相关。受试物还会引起血红蛋白浓度下降,网织红细胞数量和比例和总胆红素升高。 结论：给予食蟹猴单次静脉注射3、10、30 mg·kg^-1重组抗CD52人源化单克隆抗体注射液后,动物耐受良好,最大耐受量是30 mg·kg^-1。本研究的给药剂量以及与药物相关的毒性发现,为后续开展长期毒性研究提供了参考。     

精蛋白重组人胰岛素注射液生物类似药非临床安全性评价

目的 通过小鼠单次给药毒性试验、Beagle犬重复毒性及免疫原性试验和豚鼠全身主动过敏试验,考察精蛋白重组人胰岛素注射液（Insulin NPH）的毒副反应、毒性靶器官或靶组织,为开展临床试验提供依据。方法 ①小鼠单次给药毒性试验：采用最大给药量法分别sc生理盐水、溶媒和Insulin NPH（2092~2488 IU/kg）,监测给药后小鼠一般状态、体质量、脏器异常。②Beagle犬重复毒性试验：sc溶媒、原研对照药（Humulin NPH,1.5 IU/kg）,低、中和高剂量（0.5、1.0和1.5IU/kg）的Insulin NPH,每天1次,连续30 d,停药恢复14 d;在给药期和恢复期内观察动物的一般体征和注射部位的局部刺激性,进行体质量、肛温、血糖及心电图检查,测定血液学、血清生化、尿液常规等指标,并进行脏器质量及组织病理学检查;免疫原性试验采用间接ELISA法检测不同给药期Beagle犬血清中抗药结合抗体。③豚鼠主动全身过敏试验：分别sc低和高剂量（4和12 IU/kg）的Insulin NPH、生理盐水和溶媒,另设卵清白蛋白为阳性对照,使用以上剂量进行5次致敏试验后,iv 3倍致敏剂量进行激发试验,观察豚鼠过敏症状。结果 小鼠sc 165倍临床常用剂量的Insulin NPH后,未见明显毒性反应;Beagle犬重复毒性试验中1.0 IU/kg是Insulin NPH的无毒反应剂量（NOAEL）,该剂量相当于临床拟用剂量的2倍,免疫原性试验各剂量组均未发现抗药结合抗体;豚鼠主动全身过敏试验中未见明显过敏症状。结论 在本试验条件下未观察到Insulin NPH明显毒性反应。     

重组三价人乳头瘤病毒疫苗的急性毒性研究

目的 评价重组三价人乳头瘤病毒（HPV）疫苗的急性毒性。方法 将Wistar大鼠随机分成2组：阴性对照组和HPV疫苗组,每组20只,HPV疫苗组单次sc 3倍人用剂量（1.5 mL）HPV疫苗,阴性对照组注射等体积的生理盐水。观察动物临床状态;检测动物体质量变化;给药后第15天,解剖大鼠,进行大体病理学检查。结果 动物单次给药大剂量HPV疫苗后,临床症状均未见明显异常;与对照组比较,给药组动物体质量增长未见显著性差异;病理学检查未见与供试品相关的明显异常。结论 Wistar大鼠单次sc重组三价HPV疫苗总体耐受性良好,未见明显毒性反应,为进一步临床前评价HPV疫苗的安全性奠定了基础。     

利用无创遥测技术开展伴随重复给药毒性试验的食蟹猴安全药理学研究

目的 应用食蟹猴重复给药毒性伴随安全药理学研究的实例,探究利用无创遥测技术进行伴随于重复给药毒性试验的心血管、呼吸系统安全药理学研究的可行性。方法 重复给药毒性试验取食蟹猴40只（雌雄各半,其中32只进行安全药理学研究）,分为4组,即空白对照组、佐剂对照组和四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）低、高剂量组,分别为不给任何受试物,每次im佐剂对照品1 mL（2人份）/猴、四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）0.5 mL（1人份）/猴和1 mL（2人份）/猴,每4周给药1次,共给药4次。食蟹猴经穿脱马甲和猴椅固定的适应性训练后开始正式试验;安全药理学试验数据的采集安排在首次与第3次给药时,使用马甲式遥测系统采集给药后0~24 h的呼吸、心电、体温等相关参数,并增加采集给药后0~2、5~6、23~24 h时间段的血压数据（将猴保定在猴椅上）。结果 单次及3次给予四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）低、高剂量以及佐剂对照品对食蟹猴呼吸、心电、血压、体温等各项指标均未见明显影响。部分时段的指标波动均属猴正常的应激（受束缚状态下）变化或昼夜生理节律性变化。结论 在本试验剂量条件下,单次及多次im四价重组诺如病毒疫苗（毕赤酵母）,对食蟹猴呼吸系统、心血管系统均未见明显影响;利用马甲式无创遥测系统结合重复给药毒性试验进行安全药理学研究（心血管、呼吸系统）具有良好的可行性,符合动物福利3R原则,尤其适合于重复给药后的安全药理学研究。     

4-甲基环十五烷酮单次给药毒性试验研究

目的 研究单次灌胃给予4-甲基环十五烷酮（4-methylcyclopentadecanone,4-MCPC）对Beagle犬和小鼠产生的毒性。方法 采用经典的半数致死量法（LD₅₀法）和最大给药量法分别进行小鼠和Beagle犬单次给药毒性试验,动物分组后灌胃给予不同剂量的4-甲基环十五烷酮,给药1次,给药后观察动物毒性反应,检测动物体重、死亡率、血液学、血液生化学等指标,药后14 d观察结束剖检,检查主要脏器的病变。结果 小鼠单次给予4-甲基环十五烷酮的LD₅₀为9.41 g·kg^-1,死亡鼠急性毒性症状主要为水样便、竖毛、俯卧不动、翻正反应消失继而死亡。Beagle犬单次给予4-甲基环十五烷酮的最大给药量为18.40 g·kg^-1,最大耐受量为1.56 g·kg^-1,Beagle犬毒性症状主要为稀便、呕吐、精神萎靡、厌食、活动减少等反应。临床检验结果显示18.40、12.24 g·kg^-1剂量下Beagle犬凝血酶时间（TT）明显延长,谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（CR）显著升高。结论 4-甲基环十五烷酮对小鼠和Beagle犬的急性毒性较小,安全范围较大。     

甘精胰岛素注射液的临床前安全性评价

目的 通过Beagle犬长期毒性试验及其伴随的免疫原性试验,观察甘精胰岛素注射液的毒性反应,确定未观察到临床不良反应的剂量水平（NOAEL）,为临床不良反应监测及防治提供参考。方法 健康Beagle犬40条,随机分为甘精胰岛素注射液低、中和高（0.5、1.0、2.0 IU/kg）剂量组、溶媒对照组及原研对照组（来得时,2.0 IU/kg）,每组8只动物,雌雄各半。连续sc给药30天,停药恢复16天。试验期间进行一般体征观察、进食量、体质量、肛温、全血血糖及心电图检查;测定血液学常规与凝血指标、血清生化、尿液常规等指标;进行骨髓细胞形态学检查、大体剖检检查以及组织病理学检查。采用间接ELISA法检测不同时期动物血清抗药的结合抗体;采用体外生物活性HPLC法检测产生抗药抗体的阳性血清的中和活性。结果 在给药期的第8和10天,原研对照组和高剂量组各有1只雌性动物在给药后5～6 h出现抽搐和流涎等由低血糖所致的异常症状,其中高剂量组的该异常动物于次日死亡;给药期第11天的心电图检查发现高剂量组的T波倒置比例略高于溶媒对照组（5/7 vs 1/8）,停药后恢复正常;其余存活动物的体质量、肛温、进食量、尿常规、血液学、血清生化和组织病理学等均未见毒理学意义的异常改变。免疫原性结果显示,仅有高剂量组1只雄性动物于给药期第12天产生抗药抗体,抗体滴度为1:16,阳性率为14.3%,产生结合抗体的血清样品经检测为非中和活性抗体。结论 在本试验条件下,Beagle犬sc重复给予甘精胰岛素注射液的NOAEL为1.0 IU/kg,该剂量相当于临床拟用剂量的2倍。该药在高剂量下可能对个别Beagle犬具有较弱的免疫原性。     

含硼小分子固醇调控元件结合蛋白抑制剂的合成及其体外抗肿瘤活性研究

目的设计、合成固醇调控元件结合蛋白(SREBP)抑制剂BF-175的衍生物,并对其稳定性和体外抗肿瘤活性进行研究。方法以水杨醛为起始原料,通过6步反应合成了一系列含硼小分子SREBP抑制剂,通过高效液相色谱法分析其稳定性,并采用RT-PCR实验评价其抗肿瘤活性。结果合成了9个含硼小分子SREBP抑制剂,并通过NMR和MS对其进行表征。其药学稳定性均优于BF-175。RT-PCR检测表明目标化合物可以抑制人子宫内膜腺癌细胞(AN3CA)中SREBP靶基因硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)的表达,其中化合物7g的活性高于BF-175。结论含硼小分子SREBP抑制剂具有较好的抗肿瘤活性,为此类药物的作用机制研究奠定了基础。     

甘蓝强骨片急性毒性和长期毒性试验

目的 研究甘蓝强骨片对小鼠单次给药以及对大鼠重复给药的毒性试验,为临床安全用药提供依据.方法 采用单次给予小鼠最大剂量的甘蓝强骨片33.86 g·(kg·d)-1,给药后观察14 d动物的一般临床症状、体重、摄食量、饮水量和剖检进行大体病理学检查.采用大鼠进行重复给药毒性试验研究,80只动物分为甘蓝强骨片22.50、1...     

活络效灵丹颗粒对大鼠的长期毒性试验研究

目的 研究连续ig给予活络效灵丹颗粒对SD大鼠产生的毒性反应。方法 活络效灵丹颗粒高、中、低剂量（以生药计22.75、16.25、9.75 g/kg）连续ig给药26周,整个实验期间观察大鼠的一般状态,测定体质量和摄食量,分别于给药13、26周及停药恢复4周取部分大鼠进行血液学指标、血清生化学指标、脏器系数和组织病理学检查。结果 临床症状观察未见因给药引起的全身毒性反应,但高、中剂量组大鼠在给药中后期体质量增长缓慢,高剂量组大鼠在给药初期摄食量下降;血液学检查中,活络效灵丹颗粒可使血小板（PLT）水平、凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（APTT）增高,红细胞分布宽度（RDW）降低,原因与该药活血化瘀作用有关;血清生化学检查中,活络效灵丹颗粒可降低天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平,增加血糖（GLU）、总胆红素（TBIL）、碱性磷酸酶（ALP）和总胆固醇（CHO）水平;活络效灵丹颗粒可使肝脏、肾脏和肾上腺系数增高;停药后上述指标均可恢复至正常范围;组织病理学检查未见明显病变。结论 活络效灵丹颗粒（9.75~22.75 g生药/kg）对大鼠长期给药,未见明显毒性反应。     

Predicting pharmacokinetic profile of therapeutic antibodies after iv injection from only the data after sc injection in cynomolgus monkey

1.?The number of developed therapeutic monoclonal antibodies (mAbs) has increased in this decade. This study aims to predict their pharmacokinetic profiles after intravenous (iv) injection using only the data taken after subcutaneous (sc) injection in cynomolgus monkey.

2.?Two-compartment model parameters, Q, V_c and V_p, were collected from the published data after iv injection in cynomolgus monkey for 21 mAbs (Group A). Bioavailability after sc injection (F), CL and serum/plasma concentration after iv injection of other published 19 mAbs (Group B) were predicted using the estimated geometric means of Q, V_c and V_p in Group A and the serum/plasma concentration after sc injection in Group B.

3.?F and CL of 18 out of 19 mAbs in Group B were successfully predicted within 30% difference of observed value. Moreover, most of the observed serum/plasma concentrations after iv injection of mAbs in Group B were successfully predicted within 2-fold difference. Our approach suggests that iv injection might not be required to evaluate absorption of mAbs after sc injection in cynomolgus monkey. Therefore, our approach might reduce the time and cost of drug development, reduce the burden on resources, and also contribute to animal welfare.     

巴马小型猪植入式遥测动物模型的建立及应用

目的 基于遥测技术建立适用于监测清醒自由活动状态下巴马小型猪心电、血压、体温等生理指标的动物模型,为其在安全药理学研究中的应用提供支持。方法 8只巴马小型猪（雌雄各半）经手术植入植入子,手术后恢复3~4周,经体格检查确认已完全恢复后,采用EMKA遥测系统连续监测至少24 h心电图、血压等生理指标,包括心率、PR间期、QRS间期、QT间期、校正QT （QTcv）间期、体温、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MBP）,并于次周重复监测1次。对巴马小型猪的24 h指标变化进行分析,并与Beagle犬和食蟹猴数据进行种属间比对分析。结果 巴马小型猪的心电数据和血压数据昼夜节律均不明显;体温呈现明显的昼夜节律,白天体温高,夜间体温低;动物的心率、血压和体温均受外界影响比较大,与动物的活动呈现明显的相关性;与Beagle犬和食蟹猴比较,巴马小型猪的心率和人类最为相似,SBP仅稍高于人类。结论 通过体内植入植入子,成功建立了巴马小型猪植入式遥测动物模型;与Beagle犬和食蟹猴比较,巴马小型猪更适合用于药物对心血管系统影响的评价。     

Acute and 13 weeks subchronic toxicological evaluation of naringin in Sprague-Dawley rats

Naringin is widely distributed in plant foods and has not previously been evaluated for safety through standard in vivo toxicological studies. In the present study, acute and subchronic oral toxicity studies of naringin were designed and conducted in Sprague-Dawley (SD) rats. Acute oral administration of naringin was done as a single bolus dose up to 16 g/kg and subchronic toxicity study for 13 weeks was done by oral administration at doses of 0 (control), 50, 250 and 1250 mg/kg in SD rats. There were no mortality, adverse clinical signs, abnormal changes in body weights or food consumption, toxicologically relevant changes in hematology, clinical biochemistry and macroscopic findings during 14 days of the acute toxicity study. During the subchronic oral toxicity study, no mortality and toxicologically significant changes in clinical signs, food consumption, opthalmoscopic examination, hematology, clinical biochemistry, serum sex hormone, macroscopic findings, organ weights and histopathological examination except for slight body weight decrease were noted and attributed to naringin administration. These observations suggest that naringin is practically non-toxic for SD rats in oral acute toxicity study and the no-observed-adverse-effect-level (NOAEL) of naringin in rats is greater than 1250 mg/kg/day when administered orally for 13 consecutive weeks.     

蛞蝓胶囊大鼠长期毒性实验研究

目的 观察大鼠对蛞蝓胶囊的长期毒性反应,为临床研究提供依据。方法 按照成人每日用量,将给药组大鼠分为低剂量组175.0 mg·kg^-1、中剂量组553.0 mg·kg^-1、高剂量组1 750.0 mg·kg^-1和对照组。连续灌胃给药26周,停药恢复4周,对一般情况进行观察,对体质量、进食量进行称量比较,对血液学指标、血液生化指标、尿常规进行检测,对脏器进行病理学检查和脏器系数比较。结果 给药组与对照组比较,大鼠的一般状况、行为活动、进食量、体质量变化、外周血象、尿常规指标、血液生化指标、脏器系数以及病理组织学等均无统计学差异。结论 蛞蝓胶囊大鼠长期毒性实验未见毒性反应,提示临床拟用剂量安全。