特布他林影响水通道蛋白4在大鼠急性肺损伤肺水代谢的作用

目的 油酸造成急性肺损伤(ALI) 初期,特布他林气管滴入治疗,根据肺损伤程度及测定血管外肺水的大小,评估病理状态下特布他林对肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ) 水通道蛋白4(AQP-4 )转运水能力的影响.方法 血气分析、肺组织病理学评分、透射电镜检测肺损伤程度;重力法测定血管外肺水(EVLW)含量;免疫组化法分析肺组织AQP-4的表达,急性分离纯化ATⅡ细胞,电子显微镜观察超微结构;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 检测肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-4的mRNA 表达.结果 血气分析、光镜下肺损伤评分说明油酸致大鼠急性肺损伤,显微镜下ATⅡ细胞的数量较对照组无明显减少,但电镜下细胞的超微结构如板层小体排空,线粒体损伤等改变;特布他林治疗后血气分析、病理评分、电镜下细胞等损伤明显减轻(P<0.05);EVLW三组间有显著性差异(P<0.05),治疗组肺水下降明显;肺组织免疫组化观察到损伤后肺泡上皮细胞AQP-4表达增强,呈阳性,特布他林组表达呈强阳性;ATⅡ细胞AQP-4的mRNA 表达治疗组、油酸组较对照组有显著性差异(P<0.05),两者之间无显著性差异(P＞0.05).结论 特布他林可能通过上调肺泡上皮细胞和Ⅱ型细胞上AQP-4的表达,介导水转运减轻肺损伤时肺泡腔水肿.     

生长激素对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡抑制作用的观察

目的：观察不同剂量生长激素（GH）对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT－Ⅱ）凋亡的影响。方法：建立体外培养的大鼠AT－Ⅱ细胞盐酸损伤模型（pH值6．0－6．2）,加入不同剂量的GH,采用流式细胞仪（FCM）检测AT－Ⅱ细胞凋亡率和坏死率,并以2,3－二苯基溴化四唑（MTT）染色记数法绘制活细胞生长曲线。结果：盐酸可导致AT－Ⅱ细胞损伤,表现为AT－Ⅱ细胞坏死和凋亡发生率增高;GH能促进AT－Ⅱ细胞增殖并降低其凋亡率,在10－500mg/L范围内其抗凋亡和促增殖作用呈剂量依赖性增强。结论：GH对盐酸所致的AT－Ⅱ细胞凋亡有直接的抑制作用。     

肺泡Ⅱ型上皮细胞形态与功能的研究进展

肺泡 型上皮细胞 (type alveolarepithelial cell or type pneumocyte,AT )是一种多功能细胞 ,对维持肺泡结构和功能有重要意义。其主要功能有 :1增殖功能 :它是 型、 型上皮细胞的祖细胞 〔1 ,2〕,在正常细胞更新和损伤修复过程中 ,AT 可以分化为 型细胞 ,也可通过有丝分裂补充自身的数量 ,因此被认为是肺泡上皮的干细胞〔3,4〕 ;2合成和分泌肺表面活性物质 (pulm onarysurfactant,PS) ;3维持肺泡内外液体平衡 ;4近年还发现 AT 具有免疫调节的作用 〔5〕。AT 的位置比较特殊 ,容易受到来自空气和血液两方面的损害。空气中的各种有…     

生脉饮对内毒素诱导急性肺损伤大鼠一氧化氮及其合酶的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)和诱生型一氧化氮合酶(iNO S)在脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(AL I)中的作用及生脉饮对其的影响。方法:雄性W istar大鼠按随机数字表法分为对照组、AL I组、生脉饮组、地塞米松组。舌下静脉注射LPS复制AL I模型。观察大体标本、组织病理以及肺湿/干重比、支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞比、蛋白含量、肺毛细血管通透性和肺泡通透性指数等生物学指标。测定血浆NO和肺组织匀浆iNO S活性。结果:与对照组比较,AL I组肺组织病理显示肺间质及肺泡有明显的损伤和细胞浸润,各生物学指标及NO和iNO S显著升高(P<0.05或P<0.01);与AL I组比较,地塞米松组和生脉饮组肺组织病理明显减轻,各生物学指标及NO、iNO S也相应下降(P<0.05或P<0.01)。结论:地塞米松和生脉饮两种药物对LPS诱导的AL I具有保护作用,其机制可能是通过抑制NO水平和iNO S活性实现。     

钙通道与急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的研究进展北大核心CSCD

急性肺损伤（ ALI）是重症监护病房最常见的急危重症,由肺内外各种因素引起肺泡上皮细胞（ AEC）和肺毛细血管内皮细胞损伤,造成急性肺水肿,导致顽固性低氧血症,甚者并发严重呼吸衰竭。近年来研究发现,钙离子在细胞凋亡中发挥着重要的作用,本文就钙离子与ALI肺泡Ⅱ型上皮细胞（ AECⅡ）凋亡作以下论述。     

氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及Bax和p53的表达变化

目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)凋亡的变化规律及Bax和p53表达的变化.方法 用过氧化氢(H2O2,500 μmol/L)处理不同时间模拟机体活性氧攻击损伤ATⅡ细胞的体内情况,建立氧化损伤性细胞模型;用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Bax和p53的蛋白表达变化.结果 与对照组比较,随H2O2刺激时间延长,ATⅡ细胞存活率明显下降(F=85.211,P＜0.05),线粒体膜电位也明显下降(F=72.453,P＜0.05),凋亡率却明显增加(F=54.002,P＜0.05);同时发现Bax蛋白和p53蛋白表达均明显增加(F1=28.118,F2=43.456,P均＜0.05).结论 氧化应激能损伤ATⅡ细胞,使细胞线粒体膜电位下降,细胞凋亡率增加、存活率下降,Bax和p53可能参与了ATⅡ细胞的凋亡.     

急性肺损伤时肺泡上皮Na+通道研究的进展

急性肺水肿是急性肺损伤(ALI)的重要特征,肺泡上皮主动液体清除功能是影响ALI肺水肿的重要环节[1].研究表明肺泡上皮细胞钠离子通道(ENaC)是肺泡内液体主动转运的重要机制.肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)通过ENaC对肺泡腔的液体平衡进行调节[2-3].ALI导致肺水肿时,肺泡中的液体成分主要通过ENaC、Na+-K+-ATP酶(NKA) 和肺血管内皮细胞的水通道蛋白(AQP)重吸收.现主要对ALI时肺泡上皮ENaC的研究进展进行回顾.     

急性肺损伤易感基因的筛选与克隆

急性肺损伤 (acute lung injury,AL I)可以由外源刺激直接作用 ,也可以由严重创伤后继发性损伤而引起。对AL I的病理机制的研究虽然已非常深入 ,但是临床上急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrom e,ARDS)的病死率仍然达 5 0 %左右。近年来的研究表明 ,与 AL I相关的细胞介质超过 6 0多个 ,主要包括一些细胞因子、蛋白水解酶、活性氧或氮物质等炎性细胞介质 ,这些介质与 AL I的关系大多通过临床研究的候选基因法来鉴定 〔1〕。然而 ,随着这种相关介质不断地被筛选出来 ,人们不禁要问 :它们中谁与 AL I的关系更 (最 …     

细胞凋亡在烫伤鼠肺组织损伤中的作用及其机制的实验研究

目的 :探讨细胞凋亡在烫伤鼠肺组织损伤中的作用及基因调控机制 ,为进一步阐明烫伤鼠肺组织损伤机制和在细胞凋亡水平防治烧伤后脏器损伤提供理论依据。方法 :采用原位末端标记 (TUNEL)法及免疫组织化学技术观察烫伤鼠肺组织细胞凋亡及肺组织 Fas/Fas L、核因子κB(NFκB) /IκB和 Bcl 2基因表达、鼠烫伤后肺组织通透性及 VE 钙黏附分子表达 ;电镜扫描肺组织血管内皮细胞连接的变化。结果 :1烫伤鼠肺组织细胞发生凋亡 ,尤其是肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡增加明显 ;2烫伤鼠肺组织对 99锝标记的亚锡喷替白蛋白通透性明显增加 ,同时肺组织血管内皮细胞 VE 钙黏附分子表达下降 ,与肺组织细胞凋亡呈平行关系 ;3烫伤鼠肺组织 Fas/Fas L 表达明显上调 ,Bcl 2表达明显下调 ,Fas/Fas L 表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系 ;4NFκB/IκB的表达与 Fas/Fas L表达相一致 ;5电镜扫描见肺组织血管内皮细胞连接增宽。结论 :鼠烫伤后肺泡上皮和肺血管内皮细胞发生凋亡 ,细胞凋亡参与了烫伤鼠肺组织损伤、通透性增加及内皮细胞连接损伤的发生过程 ;鼠烫伤后肺组织 Fas/Fas L、NFκB/IκB和 Bcl 2系统活化 ,可能参与了烫伤后肺脏损伤的机制及肺组织细胞凋亡的信号转导     

Janus激酶/信号转导和转录激活因子3对重症急性胰腺炎大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的体外作用研究

目的 探讨Janus激酶/信号转导和转录激活因子3(JAK/STAT3)信号转导通路在重症急性胰腺炎(SAP)肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用.方法 用牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型,取血清备用.将经原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞随机分组,对照组加入不含SAP大鼠血清的Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)培养液;SAP组加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液;SAP+AG490组用JAK激酶抑制剂AG490预处理细胞,加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液.用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测STAT3活化状态;逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测蛋白水平;流式细胞技术检测肺泡表面活性物质相关蛋白C(SP-C)表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡.结果 与对照组比较,SAP组STAT3活性增强,STAT3 mRNA和蛋白表达均增强,SP-C蛋白表达下降(2 h SP-C荧光指数0.69±0.02比1.02±0.03,P＜0.01),肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[(11.55±1.10)%比(5.30±0.36)%,P＜0.053;与SAP组比较,SAP+AG490组STAT3活性减弱,STAT3 mRNA和蛋白表达减弱,SP-C蛋白表达下降(2 h SP-C荧光指数0.48±0.10比0.69±0.02,P＜0.01),肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[(13.92±0.82)%比(11.55±1.10)%,P＜0.053.结论 提示JAK/STAT3信号转导通路参与了SAP肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的病理生理过程.     

白介素6对过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响

目的:研究白介素6(IL-6)在过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞凋亡中的作用及其机制。方法:以人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549细胞株为实验对象,MTT法检测IL-6对A549细胞增殖活性的影响,TUNEL检测法检测IL-6对A549细胞凋亡率的影响,Westernblot观察caspase-3和caspase-9蛋白量的变化。结果:IL-6能够增加A549细胞的增殖活性,减少其凋亡。与模型组相比,IL-6干预组的caspase-3和caspase-9的蛋白表达量明显降低,有统计学意义。结论:IL-6能够抑制过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞凋亡,并且与caspase-3和caspase-9蛋白的表达量下降有关。提示IL-6对肺泡上皮细胞的保护作用可能是通过抑制细胞凋亡相关蛋白来实现的。     

肺泡上皮细胞功能特性与内毒素性急性肺损伤

大量的研究表明，内毒素(LPS)是存在于革兰阴性细菌细胞壁外膜中以脂多糖为主的成分。LPS可以引起急性肺损伤(acute lung injury，ALI)／急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)，其病理变化为肺泡上皮细胞的弥散性损害，肺泡表面活性物质(pulmonary surfactant，PS)减少，大量多形核白细胞(polymorphonuclear leukocyte，PMN)聚集于肺循环，造成肺脏实质细胞损伤和肺间隙水肿，肺泡上皮细胞和血管内皮细胞受损导致大量PMN和蛋白渗漏到肺泡腔内，支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中蛋白含量和PMN显著升高。     

青蒿琥酯诱导人急性白血病原代细胞凋亡、胀亡的作用机制研究

目的:探讨青蒿琥酯诱导人急性白血病(AL)原代细胞凋亡、胀亡作用的可能机制。方法:提取11例急性白血病患者骨髓液进行原代细胞培养,以对数生长期细胞为干预点,将不同浓度青蒿琥酯作用于细胞,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测青蒿琥酯对人AL原代细胞增殖的影响;透射电子显微镜观察青蒿琥酯作用后细胞的形态变化;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白。结果:与对照组比较,青蒿琥酯对人AL骨髓原代培养细胞有抑制作用;青蒿琥酯具有诱导人AL骨髓原代细胞凋亡和胀亡的作用,青蒿琥酯可下调凋亡抑制蛋白Bcl-2含量,同时促进凋亡蛋白Bax、细胞色素C的释放。结论:青蒿琥酯可诱导人AL原代细胞凋亡和胀亡,线粒体途径可能是青蒿琥酯诱导白血病细胞死亡的主要途径。     

Caspase 3与肺炎链球菌引起的肺泡上皮细胞凋亡的关系

目的:通过肺炎链球菌体外感染肺泡上皮细胞探讨凋亡蛋白caspase 3的活性和肺泡上皮细胞凋亡率的变化及凋亡蛋白caspase 3对肺泡上皮细胞凋亡的作用.方法:体外培养肺泡上皮细胞A549,用肺炎链球菌R6体外感染A549,TUNEL法检测A549细胞凋亡,RT-PCT法检测caspase 3基因转录强度,化学荧光测定法检测caspase 3.结果:肺炎链球菌能时间依赖性地诱导A549凋亡;Caspase 3的基因翻译强度与蛋白活性随感染时间延长呈上升趋势,而且与A549细胞凋亡变化同步.结论:Caspase 3在肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡过程中起重要作用.     

骨髓间充质干细胞在肾缺血-再灌注损伤早期的抗凋亡作用

目的 观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)自体移植对兔肾缺血-再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤早期的治疗作用及其对肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法 骨穿刺抽取新西兰大耳白兔股骨骨髓,分离、培养、扩增MSCs.30只新西兰大耳白兔随机分为移植组、对照组和假手术组,每组10只.移植组夹闭双肾动脉90 min,再灌注后经颈静脉移植BrdU标记的自体MSC8.对照组夹闭双肾动脉90 min,再灌注后经颈静脉注入等量生理盐水.假手术组假手术后经颈静脉移植Brdu标记的自体MSCs.肾I/R后48 h处死兔,比较兔肾功能和肾组织损伤,免疫组化法检测肾组织MSCs来源细胞,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡.用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,肾功能和肾小管细胞凋亡比较用ANOVA单因素方差分析;肾损伤指数比较用非参数的Kruskalwallis检验,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 移植组较对照组肾功能明显改善(24 h,BUN:F=7.483,Scr:F=15.091;48 h,BUN:F=17.741,Scr:F=61.865;P<0.05),肾损伤明显减轻(F=12.658,P<0.01).移植组肾小管上皮细胞凋亡明显减少(F=135.495,P<0.01),且差异均具有统计学意义(P<0.05).I/R后48 h,移植组肾组织内可见少量BrdU阳性细胞.结论 MSCs自体移植对急性肾I/R损伤有治疗作用,其可能机制是通过减少肾小管上皮细胞凋亡来减轻肾I/R损伤早期的肾损害.     

急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症的异常凝血纤溶状态

急性肺损伤(ALI)-急性呼吸窘迫综合症(ARDS)是以肺泡上皮细胞和血管内皮屏障损伤、急性炎症反应、富含蛋白的肺水肿为特征的急性肺损伤.     

急性肺损伤发生机制的研究进展

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是指由严重感染、创伤等不同病因所致的肺泡毛细血管内皮细胞、肺泡上皮细胞和肺间质的急性弥漫性损害,其本质是肺部多种炎性细胞如中性粒细胞(PMN)、肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)等所介导的肺部炎性反应及失控的炎性反应所致的肺泡-毛细血管膜损伤[1].本文就PMN、AM、血管内皮细胞(endothelial cell,EC)及肺组织核转录因子(NF-κB)在ALI发生机制的研究进展作一综述.     

氯沙坦介导AngⅡ/AT1R信号通路减轻百草枯诱导肾小管上皮细胞损伤

目的:探讨氯沙坦在减轻百草枯诱导人肾小管上皮细胞损伤的机制和效果。方法:体外培养人肾小管细胞并将其分为对照组、实验组和干预组,以CCK8方法测得百草枯和氯沙坦的半数有效剂量。干预组使用百草枯+氯沙坦干预24小时,制成细胞爬片使用HE、TUNEL染色镜下查看细胞情况;采用RT-PCR技术测定AngⅡ、AT1R、IL-1C、IL-6和TNF-α的变化;采用Westen Blot技术检测AT1R。结果:实验组细胞可见空泡变性与凋亡增加,AngⅡ,AT1R,IL-1胞,IL-6和TNF-胞表达量增加,差异有统计学意义(P0.05);干预组细胞可见空泡变性与凋亡减少,AngⅡ,AT1R,IL-1β,IL-6和TNF-变表达量下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论:氯沙坦可能通过抑制AngⅡ/AT1R的表达,进而减轻百草枯诱导人肾小管上皮细胞的炎症和凋亡。     

急性肺损伤与中性粒细胞凋亡

研究表明 ,急性肺损伤 (ＡＬＩ)是始于有害环境及内源性因子作用下的肺泡壁爆炸性炎症反应。中性粒细胞的增多与激活以及血管内皮细胞的功能受损 ,释放多种炎症介质是ＡＬＩ的主要发病机制 ,其病理组织学表现为肺泡Ⅱ型细胞增生、成纤维细胞增殖及胶原的聚集[1 ] 。传统观念认为 ,急性损伤常引起组织坏死 ,自从 1972年Ｋｅｒｒ等人提出细胞凋亡的概念后 ,细胞凋亡已被证实在许多生物过程中起着重要的调节作用 ,包括炎症反应[2 ] 。有实验显示 ,内毒素、烧伤、缺血与再灌流损伤及脑外伤等均可导致相关脏器的细胞凋亡[3 ] 。本文即是从细胞凋…     

创伤后急性肺损伤的救治

急性呼吸窘迫综合征(acute respirstory distress syndrome,ARDS)是临床上棘手的危重症.急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是各种直接和间接致伤因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤,造成弥漫性肺间质及肺泡水肿,导致的急性低氧性呼吸功能不全.