LC-MS/MS测定比格犬血浆中的醉茄素A及其生物利用度研究

醉茄素A(WA)是植物南非醉茄中的主要生物活性成分,具有抗肿瘤和抗肥胖等药理作用。虽然南非醉茄提取物的口服保健产品已上市多年,但WA的口服生物利用度仍不清楚。本研究首先建立灵敏、高效的WA血浆样品LC-MS/MS分析方法,然后在比格犬分别进行静脉注射和口服灌胃WA的两周期药代动力学实验。实验结果表明,WA在比格犬的口服生物利用度较高(42.2%±6.4%),吸收快,而且具有较长的半衰期[(18±4.6)h]和较大的表观分布容积[(67.5±8.9) L/kg],有利于药物长时间在体内发挥药效。因此,WA总体上具有良好的药代动力学性质,可作为口服候选药物,进一步评估成药性和进行临床前开发,为临床应用提供依据。     

醉茄素A对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的 探讨醉茄素A(WA)对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及其分子机制。方法分别采用WA 0、2、4、6、8μmol/L处理肝癌细胞株HepG2,MTT法检测细胞增殖，筛选出最佳作用浓度。再将HepG2细胞分为WA 0μmol/L组、WA 8μmol/L组和SP600125组[c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125 20μmol/L预孵育1 h,再加入WA 8μmol/L],继续作用24或48 h。采用流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell实验检测侵袭细胞数，反转录-聚合酶链反应和Western blot法分别检测磷酸化JNK(p-JNK)、JNK、Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白表达。结果 与WA 0μmol/L组比较，WA 8μmol/L组HepG2细胞凋亡率增加，侵袭细胞数减少，p-JNK、Bax mRNA和蛋白表达升高，Bcl-2的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);而预孵育SP600125后，上述作用被逆转(P<0.05)。结论 WA能够抑制HepG2细胞增殖和侵袭，促进细胞凋亡，可能通过丝裂原活化蛋白激酶/JNK信号通路来实现。     

Wentilactone A抑制小细胞肺癌系NCI-H1688细胞的迁移研究

目的 探讨小分子化合物Wentilactone A (WA)抑制小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞系NCI-H1688细胞迁移的机制。方法 采用划痕实验、噻唑蓝[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]实验检测小分子化合物WA对细胞迁移和增殖能力的影响。免疫荧光实验检测化合物WA作用后SCLC细胞系NCI-H1688细胞中ATF3蛋白的表达。Western blot验证ATF3/Nrf2/AKR1C1信号通路的关键蛋白。结果 小分子化合物WA抑制SCLC细胞系NCI-H1688细胞的迁移和增殖,加入化合物WA 24 h组与48 h组的IC₅₀分别为(1.03±0.30)和(0.46±0.18) μmol/L。WA作用组NCI-H1688细胞的相对迁移距离为(8.73±1.06) mm,低于对照组的(15.63±3.11) mm,过表达AKR1C1基因后NCI-H1688细胞迁移距离为(24.37±0.90) mm,过表达AKR1C1基因并且WA作用后NCI-H1688细胞的迁移距离为(14.17±1.31) mm,差异有统计学意义(P<0.05)。ATF3是AKR1C1基因的负性调节因子,化合物WA作用后,ATF3蛋白表达水平升高,抑制Nrf2与ARE结合,从而抑制AKR1C1蛋白的表达。结论 WA通过ATF3/Nrf2/AKR1C1信号通路抑制SCLC细胞系NCI-H1688细胞的迁移和增殖。     

生物标志物、CT评价咳嗽变异性哮喘气道重塑的研究

目的探讨诱导痰神经生长因子（NGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及高分辨CT在评价咳嗽变异性哮喘（CVA）患者气道重塑中的作用。方法将50例确诊为CVA的患者设为CVA组,20例健康体检者设为正常对照组（N组）,受试者行肺通气功能、诱导痰及胸部高分辨CT（HRCT）检查,应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测诱导痰中NGF、MMP-9浓度,计算气道壁的厚度（T）、气道壁面积（WA）、气道壁面积占气道总截面积的百分比（WA%）,并应用体表面积（BSA）对T、WA进行校正。结果与N组比较,CVA组诱导痰NGF、MMP-9浓度升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。CVA组与N组相比,肺通气功能（FEV1、FVC、MMEF）差异无统计学意义（P〉0.05）。CVA组T/BSA、WA/BSA、WA%测定值与N组相比,差异有统计学意（P〈0.05）。CVA咳嗽患者诱导痰NGF浓度与WA/BSA、WA%和T/√BSA呈正相关（r=1.103、0.846、0.917,均P〈0.05）;诱导痰MMP-9浓度与WA/BSA、WA%和T/√BSA呈正相关（r=0.742、1.020、0.694,均P〈0.05）。结论诱导痰NGF、MMP-9可作为评价CVA气道重塑的生物标志物,HRCT检查可作为无创手段更广泛用于气道重塑的评估。联合生物标志物及高分辨CT可更全面评价CVA患者气道重塑情况,从而更好地指导临床治疗。     

微小核糖核酸?155、骨桥蛋白、嗜酸性粒细胞趋化因子水平与支气管哮喘病儿气管重塑的关系

目的 探讨微小核糖核酸-155(miRNA-155)、骨桥蛋白(OPN)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)水平与支气管哮喘病儿气管重塑的关系及其联合检测对病情诊断的价值.方法 选择成都市温江区人民医院于2016年5月至2018年12月期间收治的160例急性发作支气管哮喘病儿,根据高分辨率螺旋CT诊断结果是否发生气管重塑分为重塑组54例、非重塑组106例,纳入该院同期住院的其他呼吸系统疾病病儿60例为对照组.对入组病儿气管重塑指标、肺功能、miRNA-155、OPN及Eotaxin检测并对比.结果 各组气管重塑指标和肺功能均有明显差异,其中对照组气管壁面积占气管总横断面积面积百分比(WA)(48.65±2.21)％,非重塑组WA(70.62±3.79)％,重塑组WA(86.44±5.02)％;重塑组miRNA-155低于非重塑组,对照组最高,均差异有统计学意义(P<0.05).各组miRNA-155、OPN、Eotaxin指标均有明显差异,miRNA-155与WA呈负相关性,与一秒率(FEV1/FVC)、一秒用力呼气容积(FEV1)呈正相关;OPN、Eotaxin与WA呈正相关,与FEV1/FVC、FEV1呈负相关.结论 联合检测miRNA-155、OPN、Eotaxin水平对支气管哮喘病儿气管重塑及病情严重程度评估具有一定的临床意义.     

自发性高血压大鼠心肌内小冠脉重构与炎症关系的观察

目的观察自发性高血压大鼠（SHR）心肌内小冠脉重构（IMSAs）与巨噬细胞、肥大细胞及细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的关系,以及替米沙坦对血管重构及炎症影响的干预作用。方法12周龄的自发性高血压大鼠,随机分为无干预的SHR组（SHR）、高剂量替米沙坦组（Tel—H）和低剂量替米沙坦（Tel-L）组,对照组为周龄、性别、体重配对的WKY大鼠（WKY）,每组均为10只;Tel—H组和Tel—L组每日分别予替米沙坦8mg／kg、0．8mg／kg灌胃;SHR组和WKY组予2mL蒸馏水灌胃。实验进行18周。实验开始和结束时进行血压测定。取大鼠左心室切片经苦昧酸一天狼猩红（Sirus—red）染色。利用计算机辅助成像系统计算IMSAs的血管壁面积（WA）、血管腔面积（LA）和血管壁面积百分比（％WA）。免疫组化染色以识别巨噬细胞及细胞问粘附分子一1等。甲苯胺蓝染色显示心肌肥大细胞。结果30周龄时SHR组血压（200．50±14．15）mmHg比WKY组（116．30±9．38）mmHg明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）;Tel一14组血压（119．40±14．69）mmHg明显低于SHR组（P〈0．01）,而与WKY组差异无统计学意义（P〉0．05）;Tel—L组血压（193．30±15．19）mmHg与SHR组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。SHR组IMSAs与WKY组IMSAs相比,WA及％WA显著增高,LA明显减小（P均〈0．01）;Tel—H组IMSAs与SHR组IMSAs相比,WA与％WA显著减小（P〈0．01）,而LA增大（P〈0．05）;Tel—H组与WKY组WA无显著差异,LA减小（P〈0．05）,而％WA增大（P〈0．01）。SHR组心肌组织中巨噬细胞和肥大细胞数量明显多于WKY组（P均〈0．01）;Tel—H组和Tel—L组巨噬细胞和肥大细胞数量均显著少于SHR组（P〈0．01）。SHR组心肌的ICAM-1光密度（IOD）显著高于WKY组（P〈0．01）,Tel—H组和Tel—L组心肌ICAM-1的IOD均显著低于SHR组（P〈0．01）。结论30周龄SHR心肌内小冠脉重构与心肌组织中的巨噬细胞、肥大细胞数量及ICAM—l的表达相关,替米沙坦治疗能明显减轻SHR心肌内小冠脉重构,减少心肌组织中的巨噬细胞、肥大细胞数量及ICAM-1的表达。     

新药介绍

一、抗过敏药甲哌蒽醇某些过敏症与组胺和5-羟色胺都有一定关系,因之,在某种情况下,如甲哌二苯并环庚三烯(Cyproheptadine)化学名:4-(二苯并[a,e]-5-环庚三烯)-1-甲基-哌啶之类的药品往往比单纯的抗组胺药更有效果。G.Engelhardt等(Arznei.Forsch.,25,1723,1975)对此作了进一步的探索,发现:9,10-二氢-10-(1-甲基-4-哌啶叉)-9-蒽醇(代号WA335)的活性范围非常特殊。它极易与5-羟色胺及组胺受体部位紧密结合,且有阿托品型的某种抗胆碱能作用。     

支气管哮喘大鼠肺内Th1/Th2失衡及雾化吸入地塞米松的影响

目的观察支气管哮喘大鼠肺组织内T辅助细胞两个亚群(Th1/Th2)的功能状态及地塞米松对其的影响。方法通过卵白蛋白腹腔注射与雾化吸入建立大鼠哮喘模型,并分为哮喘组(A组)、雾化吸入地塞米松组(B组)、正常对照组(C组)。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测地塞米松对哮喘大鼠肺组织IL-4、IL-5以及IFN-γ的mRNA表达的影响,并用光镜观察肺组织支气管壁厚度(WA/Pi)、支气管平滑肌厚度(SMC-A/Pi)及支气管黏膜及黏膜下嗜酸粒细胞(Eos)、淋巴细胞(L)、中性粒细胞(Neu)数量。结果A组肺组织中IL-4、IL-5的mRNA表达及WA/Pi、SMC-A/Pi、支气管黏膜及黏膜下Eos、L、Neu浸润程度显著高于C组(均P<0.001),但在B组中表达降低、浸润程度减轻(与A组相比,P<0.001);B组与C组比较差异也有显著性。A组肺组织中IFN-γ的mRNA表达低于C组(P<0.001),B组与A组比较,IFN-γ的mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。肺组织内IL-4、IL-5mRNA的表达与WA/Pi、SMC-A/Pi的改变以及Eos、L、Neu的浸润呈正相关(P均<0.05),IFN-γ的mRNA表达与上述改变以及Eos、L、Neu的浸润呈负相关(P均<0.05)。结论支气管哮喘大鼠存在Th1/Th2失衡;地塞米松主要通过降低哮喘大鼠肺组织中Th2类细胞因子IL-4和IL-5的基因转录,发挥其抗气道重塑和气道炎症的作用。     

俄雷冈桤木中的抗肿瘤成分

作者从美国加里佛尼亚州获得桦木科俄雷冈桤木(Alnus oregona)~*的茎皮,将其氯仿提取物,用Sprague大鼠作试验,结果对肌肉型瓦克氏256癌肉瘤(5 WA 16)有抗肿瘤作用。氯仿提取物经Ⅲ级中性氧化铝柱层析共分离得六个部分,其中C和F部分成分单一。C部分经熔点、质谱、核磁共振、红外、旋光等分析鉴定为羽扇醇(Lupeol)。 F部分及其二乙酸酯衍生物,经熔点、核磁共振、红外等分析鉴定为白桦酯醇(Betulin)。E部分主要由β-谷甾醇组成,因已知β-谷甾醇对5WA 16肿瘤只有临界活性,故未再试验。     

黄芪总皂苷对缺氧性肺动脉高压作用探讨

目的　探讨黄芪总皂苷（AST）对缺氧性肺动脉高压（HPH）病理进展的抑制作用及相关机制。方法　28只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、HPH组、HPH+AST15［15 mg/（kg·d）］组、HPH+AST45［45 mg/（kg·d）］组,每组7只。采用间断式常压低氧建立大鼠HPH模型。实验28 d后,检测大鼠右心室收缩压力（RVSP）;计算右心室（RV）和左心室+室间隔（LV+S）的比值RV/（LV+S）;HE染色及免疫荧光染色观察大鼠肺动脉结构重建,计算肺动脉厚度百分比（WT）、面积百分比（WA）,并测量肺动脉α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的光密度（OD）值;分光光度法检测大鼠肺组织及血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及丙二醛（MDA）水平;Western blot法检测大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶Nox2和Nox4蛋白表达情况。结果　与对照组比较,HPH组大鼠RVSP、RV/（LV+S）、WT、WA、α-SMA均增高（P＜0.05）,肺组织及血清中的SOD、CAT水平明显降低,而MDA水平增高（P＜0.05）,肺组织中Nox2和Nox4蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与HPH组比较,HPH+AST15组和HPH+AST45组大鼠RVSP、RV/（LV+S）、WT、WA、α-SMA均降低（P＜0.05）,肺组织及血清中的SOD、CAT水平升高,MDA水平降低（P＜0.05）,肺组织中Nox2和Nox4蛋白表达水平均降低（P＜0.05）,其中HPH+AST45组WT、WA、α-SMA及肺组织MDA水平、Nox2和Nox4蛋白表达水平均较HPH+AST15组更低（P＜0.05）。结论　黄芪总皂苷可抑制大鼠HPH的病理进展,其机制可能与提高大鼠体内SOD和CAT水平并抑制Nox2和Nox4表达有关。     

新型KATP开放剂iptakalim对豚鼠哮喘模型气道反应性及其结构的影响

目的 :研究新型KATP 通道开放剂 (KATPCO )iptakalim对哮喘豚鼠气道重塑、气道高反应性的作用。方法 :卵蛋白 (OA)制作哮喘模型 ,地塞米松组在吸入OA前先给予地塞米松 ;iptakalim高剂量治疗组和低剂量治疗组每天吸入OA前分别灌胃给Ipt0 .75mg·kg-1和 1.5mg·kg-1。用多道生理记录仪记录豚鼠气管螺旋条对不同浓度组织胺的收缩反应性 ;用图像分析仪测定细支气管内周长 (PI)、管壁面积 (WA)、管壁平滑肌面积 (SA) ,PI对WA、SA进行标准化 ,分别以WA PI、SA PI表示。结果 :组织胺可使各组豚鼠气管螺旋条产生剂量依赖性收缩。哮喘组豚鼠气管螺旋条对组织胺的收缩反应明显高于正常组 (P <0 .0 5 ) ;iptakalim(灌服 ) 0 .75、1.5mg·kg-1均具有同雾化吸入地塞米松相似的降低气管螺旋条收缩反应效果 (P >0 .0 5 )。对无软骨且平滑肌成环的细支气管图像分析显示 ,哮喘组豚鼠支气管壁面积 (2 9.8± 4 .5 μm2 ·μm-1)及支气管平滑肌面积(11.7± 4 .7μm2 ·μm-1)较正常对照组 (13.2± 5 .7,4 .4± 2 .1μm2 ·μm-1)增大 (P <0 .0 1) ,iptakalim使豚鼠管壁厚度和平滑肌厚度明显下降 ,与正常组比较差异不显著 (P >0 .0 5 )。结论 :口服新型KATP 通道开放剂iptakalim可抑制哮喘豚鼠气道高反应性和气道壁的重构。     

室间隔缺损伴肺动脉高压病人的血浆内皮素、一氧化氮水平与肺细小动脉显微形态指标的变化

为探讨内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)在肺动脉高压(PH)的发生、发展过程中的作用,对40例室间隔缺损(VSD)伴PH的病人,测定了血浆ET-1、NO含量和肺细小动脉显微形态指标。结果表明,随着肺血管病理改变分级的增加,血浆EF-1,mPAP、PVR及肺细小动脉中膜厚度(mMTPA)、血管壁面积/血管总面积(WA/TA)、肌型肺细小动脉数与微动脉的总数的比值(TWPV)逐渐增加,血浆NO、血管腔面积/血管总面积(EA/TA)逐渐减小;血浆ET-1与mPAP、PVR及mMTPA、wA/TA、TWPV呈显著正相关,与EA/TA呈显著负相关;血浆NO与mPAP、PVR及mMIPA、WA/TA、TWPV呈显著负相关,与EA/TA呈显著正相关;血浆ET-1与NO呈显著负相关。结论:ET的增高、NO的减少,ET/NO的动态平衡破坏,参与了PH的发生、发展过程。     

自发性高血压大鼠左室心肌壁内小动脉平滑肌瞬时受体电位通道的表达

目的:探索自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)心肌壁内小动脉重构与瞬时受体电位通道(Transient receptor potential channel,TRPC)蛋白表达的相关性.方法:24周龄雄性SHR(n＝8)为实验组,设同周龄同性别正常血压大鼠为对照组(WKY,n＝8).计算大鼠左室质量指数(Left ventficular mass index,LVMI)评价左室肥厚情况.采用HE染色观察管腔直径为10～69 μm的左室心肌壁内小动脉结构特点并测定管腔面积(Lumen area,LA)、管壁面积(Wall area,WA)、管壁面积/管腔面积(WA/LA).a-平滑肌肌动蛋白(Alphasmooth muscle actin,α-SMA)免疫荧光染色鉴定血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC).免疫荧光染色检测平滑肌细胞TR-PC1、TRPC3、TRPC5、TRPC6蛋白表达强度.结果:SHR组SBP及LVMI均明显高于WKY组[(200±4) vs (118±9)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa;(3.11±0.03) vs (2.42±0.10) mg/g,均P＜0.05];SHR组WA及WA/LA均比WKY组增加[(2951±224) vs (2654±190) μm2;(2.01±0.04) vs(1.53±0.03),均P＜0.05],而LA比WKY组减少[(1469±117) vs(1730±98) μm2,P＜0.05],α-SMA免疫荧光染色阳性表明增厚的血管中层为平滑肌细胞.SHR组心肌壁内小动脉平滑肌细胞TRPC1、TRPC3蛋白表达均明显高于WKY组(分别为65±8 vs 28±3和60±4vs 26±8,均P＜0.05),TRPC5蛋白表达与WKY组无统计学差异(28±7 vs 28±7,P＞0.05);SHR组与WKY组均未表达TRPC6.结论:24周SHR左室心肌壁内小动脉平滑肌表达TRPC1、TRPC3、TRPC5而未表达TRPC6.24周SHR左室心肌壁内小动脉重构与平滑肌TRPC1、TRPC3表达上调相关.     

灯盏花素对慢性低氧大鼠PKC的影响

目的　探讨灯盏花素对慢性低氧大鼠PKC信号途径的影响。方法　将SD大鼠分为 :对照组 (A) ,低氧组 (B) ,低氧 +灯盏花素组 (C) ,低氧时间为 4wk。采用透射电镜、放射活性测定法、免疫组化等方法研究灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉平均压 (mPAP)、左右心室重量比 (RV/LV +S)、肺细小动脉管壁面积 /管总面积 (WA/TA)、中膜平滑肌细胞核密度 (SMC)、肺细小动脉超微结构、肺组织PKC活性、肺细小动脉管壁PKC的影响。结果　 (1)B组mPAP、RV/LV +S明显高于A组 (P <0 0 1) ,C组mPAP、RV/LV +S明显低于B组 (P <0 0 1) ;(2 )光镜下B组WA/TA、SMC明显高于A组 (P <0 0 1) ,C组WA/TA、SMC明显低于B组 (P <0 0 1) ;电镜显示B组肺动脉中膜平滑肌细胞增生 ,胶原纤维丰富 ;C组肺动脉中膜平滑肌细胞、胶原纤维较B组明显减少 ;(3)B组肺组织PKC总活性 (PKCt)、胞膜PKC活性(PKCm)、胞质PKC活性 (PKCc)及胞膜PKC活性 (PKCm)占PKC总活性 (PKCt)的百分比明显高于A组 (P <0 0 1) ,C组PKCt、PKCm、PKCc及PKCm占PKCt的百分比明显低于B组 (P <0 0 1) ;(4 )免疫组化显示B组肺细小动脉 (直径约10 0～ 2 0 0 μm)PKC含量明显高于A组 (P <0 0 1) ,C组较B组明显为低 (P <0 0 1)。结论　灯盏花素抑制PKC信号途径可能是其抑制慢性低氧     

血清TGF-β1、FOXM1 m RNA表达水平与支气管哮喘患儿气道重塑的影响研究

目的 探讨血清转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、叉头框蛋白M1(FOXM1)mRNA表达水平与支气管哮喘(BA)患儿气道重塑的影响。方法 选取2020年8月至2021年9月我院收治的110例BA患儿作为本次研究对象,依据《儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2016年版)》将110例BA患儿分为急性发作组(n=56)和临床缓解组(n=54)。对两组的血清TGF-β₁、FOXM1 mRNA、气道重塑相关指标(T/D、WA)、肺功能相关指标(FEV₁、FEV₁/FVC)水平进行检测并比较。采用Pearson分析急性发作期BA患儿血清TGF-β₁、FOXM1 mRNA水平和肺功能及气道重塑指标的相关性。通过多因素Logistic回归分析方法分析影响BA患儿急性发作的因素,建立风险评估模型,经受试者工作特征曲线(ROC)评估模型诊断效能。结果 与临床缓解组相比较,急性发作组血清TGF-β₁、FOXM1 mRNA水平和T/D、WA水平较高,FEV<...     

胰岛素对慢性心力衰竭有良好的血流动力学作用

慢性心力衰竭的特点是心脏功能障碍、外周循环异常和神经内分泌机制激活。心力衰竭的临床综合征似乎是三者相互作用所致。有学者提示胰岛素抵抗也可能在心力衰竭的病理生理学中有重要作用。有报告表明胰岛素可扩张正常健康人的周围小动脉。 Parsonage WA等进行一项单盲安慰剂对照研究以说明胰岛素对慢性心力衰竭患者的中心和区域部位的血流动力学影响。此项研究对10例稳定的慢性心力衰竭患者应用高     

关于诺氟沙星滴眼液含量测定方法的商榷

《中国药典》1995年版二部诺氟沙星滴眼液的含量测定方法为“精密量取本品适量,加磷酸盐缓冲液(pH7.4)制成每ml中约含5μg的溶液,照分光光度法(附录WA),在273nm的波长测定吸收度;另取诺氟沙星对照品,按上法同样操作,根据二者吸收度比值计算,即得”。而笔者在实际检验工作中发现,本法难以达到含量测定的要求,有以下二点提出来商榷:     

黄芪甲苷通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠的保护作用

目的：探究黄芪甲苷通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠的保护作用。方法：40只C57BL/6小鼠随机分为5组：常氧对照组、低氧模型组、低氧NF-κB抑制剂组（5 mg·kg^-1）、低氧ASIV低剂量组（40 mg·kg^-1）、低氧ASIV高剂量组（80 mg·kg^-1）。16只calpain-1敲除鼠随机分为2组：常氧calpain-1敲除组、低氧calpain-1敲除组。低氧组置于10% O₂的低氧舱内造模28 d。造模结束后测定小鼠右心室收缩压（RVSP）和右心室肥厚指数（RVHI）;酶联免疫法（ELISA）检测血清中ET-1、IL-6、TNF-α含量;苏木素-伊红（HE）染色观察肺小动脉结构,测量肺小动脉血管面积占总面积的百分比（WA）和血管厚度占血管外径的百分比（WT）;免疫组化（IHC）观察肺组织PCNA蛋白的表达;免疫蛋白印迹法（Western blot）检测肺组织calpain-1、p65、p-p65、PCNA、VCAM1、ICAM1蛋白的表达。结果：与常氧对照组比较,低氧模型组小鼠的RVSP、RVHI、WA和WT升高（P<0.01）,血清中ET-1、IL-6、TNF-α含量升高（P<0.01）,肺组织中calpain-1、p-p65、PCNA、VCAM1、ICAM1蛋白表达升高（P<0.05）;与低氧模型组相比,低氧calpain-1敲除组、低氧NF-κB抑制剂组、低氧ASIV给药组小鼠的RVSP、RVHI、WA和WT明显降低（P<0.05）,血清中ET-1、IL-6、TNF-α含量降低（P<0.05）,肺组织中calpain-1、p-p65、PCNA、VCAM1、ICAM1蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论：黄芪甲苷可能通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠发挥保护作用。     

黄芪多糖对哮喘小鼠气道重构的干预作用

目的：探讨黄芪多糖（astragalus polysaccharide,APS）对哮喘小鼠气道重构的干预作用。方法：60只4～6周龄SPF（Specific PathogenFree）级BALB/c小鼠,随机均分为对照组、哮喘组、APS治疗组和地塞米松（dexamethasone,DXM）阳性对照组;用卵蛋白（ovalbumin,OVA）致敏/激发哮喘;APS治疗组和DXM阳性对照组分别用APS和DXM肌肉注射治疗。采用二步法免疫组化技术对小鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白（smooth muscle actin-α,α-SMA）表达进行检测,采用计算机图像分析系统对气道重塑进行分析。结果：与对照组对比,哮喘组小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fliud,BALF）中白细胞计数显著增加（P〈0.01）,α-SMA强阳性表达,气道壁厚度（d/Pi）、气道壁面积（WA/Pi）、气道平滑肌面积（Wam/Pi）和平滑肌细胞计数（N/Pi）均明显增加（P〈0.05或P〈0.01）;与哮喘组对比,APS治疗组和DXM阳性对照组BALF中细胞计数显著减少（P〈0.001）,α-SMA阳性表达,d/Pi、WA/Pi、Wam/Pi和N/Pi均显著减小（P〈0.05或P〈0.01）。结论：APS可抑制哮喘小鼠的气道重塑,这种抑制作用可能是通过调节α-SMA的表达来实现的。     

慢性阻塞性肺疾病患者HRCT定量指标与肺功能的相关性研究

目的 利用高分辨率CT(HRCT)定量指标分析慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者的肺气肿及气道重塑改变，并探讨上述指标与肺功能的相关性。方法 收集COPD患者（COPD组）109例及正常组33例，COPD组患者根据COPD全球倡议指南，分为GOLDⅠ级组（29例）、GOLDⅡ级组（38例）、GOLDⅢ+Ⅳ级组（42例）。患者均行HRCT和肺功能检查；利用后处理软件自动测量各肺叶HRCT肺气肿定量指标：肺气肿指数（EI）、各肺叶平均肺密度（MLD）；气道定量指标：支气管壁面积（WA）、支气管腔面积（LA）、管壁面积占支气管断面总面积的百分比（WA%）。比较上述参数在正常组和COPD不同严重程度亚组之间的差异。应用Spearman法分析上述CT定量指标与肺功能指标的相关性。结果 与正常组比较，GOLDⅠ级组双肺上叶EI升高，GOLDⅡ级组各肺叶EI均升高，双肺上叶MLD及左肺下叶MLD降低，GOLDⅢ+Ⅳ级组各肺叶EI均升高，MLD降低（P<0.05）。与正常组比较，GOLDⅠ级组5级支气管WA,4～6级支气管WA%升高，5、6级支气管LA降低；与GOLDⅠ级组比较，GOLDⅡ级组仅6...