格尔德霉素与抗肿瘤药物的协同作用(英文)

目的　研究格尔德霉素 (Geldanamycin ,GDM)对人肝癌BEL 74 0 2细胞周期的影响及顺铂和丝裂霉素C等药物联用GDM后的体外体内抗肿瘤作用。方法　用MTT法检测药物对肝癌BEL 74 0 2细胞的生长抑制作用 ;流式细胞术分析细胞周期 ;小鼠移植性肝癌 2 2模型研究药物的体内抗肿瘤作用。结果　MTT法测得GDM对BEL 74 0 2细胞的生长抑制作用IC50 为 0 2 8μmol·L-1。GDM 0 1,1 0和 10 μmol·L-1处理BEL 74 0 2细胞 ,引起S期细胞比例下降和G2 M期的明显阻断。在较低浓度 ,GDM 0 1μmol·L-1和 0 2 μmol·L-1均增强一系列化疗药物包括顺铂、丝裂霉素C、阿霉素和阿糖胞苷对BEL 74 0 2细胞的细胞毒作用。小鼠移植肝癌 2 2模型中 ,GDM 0 38mg·kg-1增强顺铂和丝裂霉素C的抗肿瘤作用。协同作用十分显著 ,CDI <0 7。结论　这些结果提示GDM作为以抑制热休克蛋白 90 (Hsp90 )功能为靶点的生化调节剂可能应用于肿瘤联合化疗的前景     

丹酚酸A抑制核苷转运并增强化疗药物的抗肿瘤作用丹酚酸A抑制核苷转运并增强化疗药物的抗肿瘤作用

目的观察丹酚酸A(SAA)的抑制核苷转运活性及其抗肿瘤作用。方法用3H-TdR和3H-UR转运测定法,克隆生成测定法以及小鼠移植性肉瘤180模型。结果SAA抑制艾氏腹水癌细胞的胸苷和尿苷的转运,其IC₅₀分别为18.1和17.1 μmol·L^-1。SAA能明显增强5-FU、丝裂霉素C、MTX对KB细胞、肝癌BEL-7402细胞的细胞毒性。体内试验,SAA 200 mg·kg^-1和5-FU 10 mg·kg^-1单独使用的抑瘤率分别为41%和27%;SAA和5-FU联合使用的抑瘤率为63%(CDI=0.86)。结论SAA有抑制肿瘤细胞核苷转运的活性,可增强5-氟尿嘧啶等药物的抗肿瘤作用,有可能用于肿瘤联合化疗。     

抗癌抗生素C1027与单克隆抗体Fab片段偶联物的抗肝癌作用

抗人肝癌单克隆抗体(单抗)3A₅用木瓜蛋白酶消化得到Fab片段。单抗3A₅和Fab片段分别与抗癌抗生素C1027偶联,偶联物经克隆生成法测定对肝癌细胞有很强的杀伤作用,C1027,Fab-C1027和3;3A₅-C1027的IC₅₀分别为6.5×10^-16,8.6×10^-16和4.2×10^-14mol·L^-1;Fab-C1027偶联物对非靶细胞(KB)的IC₅₀值为1.4×10^-13mol·L^-1,与靶细胞(BEL-7402)的IC₅₀值相比,两者相差160倍。说明Fab-C1027的杀伤活性强于3A₅-C1027,并对靶细胞呈选择性杀伤作用。给皮下移植人肝癌的裸鼠iv剂量0.1 mg·kg^-1,结果C1027和Fab-C1027的抑瘤率分别为59和85%,说明Fab片段与C1027偶联物比游离C1027的疗效更高。     

真菌产生的新核苷转运抑制剂增强药物的抗肿瘤活性

从南极土壤中分离的一株真菌所产生的抗生素C3368-B(CB)有较强的核苷转运抑制活性。CB显著抑制艾氏腹水癌(EAC)细胞的胸苷和尿苷转运,IC₅₀分别为7.5和9.6μmol·L^-1。用克隆生成法测定,CB在本身无明显细胞毒性剂量下,能显著增强氨甲蝶呤(MTX)、5-氟脲嘧啶(5FU)和丝裂霉素C(MMC)等抗癌药物对人口腔鳞癌KB细胞和人肝癌BEL-7402细胞的杀伤。生长抑制法结果显示,CB还能部分逆转小鼠白血病L1210/MDR细胞对长春新碱(VCR)和放线菌素D(ACD)的抗药性。结果提示新核苷转运抑制剂CB可能应用于肿瘤联合化疗的前景。     

2',4'-二羟基-3'-甲基-3-甲氧基查耳酮上调p21抑制人肝癌HepG2细胞的生长

目的 探讨2'',4''-二羟基-3''-甲基-3-甲氧基查耳酮(C20)对人肝癌HepG2细胞的体外抗肿瘤作用及其潜在的作用机制。方法 通过CCK-8法、集落形成实验、5-乙炔基-2''-脱氧尿苷(EdU)染色法检测C20对人肝癌HepG2细胞增殖的影响;通过彗星实验检测C20(10 μmol·L^-1)对HepG2细胞DNA损伤的影响;通过流式细胞术检测C20(5、10 μmol·L^-1)对HepG2细胞周期阻滞的影响;通过Hoechst染色和流式细胞术检测C20(5、10 μmol·L^-1)对HepG2细胞凋亡的影响。借助Western blotting法检测C20(5、10 μmol·L^-1)处理对HepG2细胞中与凋亡、DNA损伤、细胞周期阻滞相关蛋白表达水平的调控作用。结果 与对照组比较,C20显著抑制HepG2细胞的活力(P<0.001),给药48 h的半数抑制浓度(IC₅₀)为7.937 μmol·L^-1;5 μmol·L^-1 C20能够显著抑制HepG2细胞的集落形成能力(P<0.01);EdU染色结果显示5、10 μmol·L^-1的C20能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖能力;5、10 μmol·L^-1的C20显著诱导HepG2细胞G₂/M期阻滞(P<0.001);5、10 μmol·L^-1的C20显著促进HepG2细胞凋亡(P<0.001),并显著上调Caspas-3、Caspase-9以及PARP的剪切水平(P<0.01);10 μmol·L^-1的C20能够诱导HepG2细胞发生DNA损伤,并且5、10 μmol·L^-1的C20显著上调γH2AX、p21的蛋白水平(P<0.01)。结论 C20能够造成HepG2细胞发生DNA损伤,上调p21蛋白水平,导致细胞G₂/M期阻滞,并进一步诱发凋亡,发挥体外抗肝癌作用。     

四肽FMRFa对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换的抑制

目的　研究四肽FMRFa对大鼠单个心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换的作用。方法　用膜片钳全细胞记录法测定成年大鼠心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流(I_Na⁺/Ca²⁺)和其他离子通道电流。结果　FMRFa对大鼠心室肌细胞I_Na⁺/Ca²⁺呈浓度依赖性抑制,100μmol·L^-1浓度时抑制内向和外向I_Na⁺/Ca²⁺密度分别达60.1%和56.5%,对内向电流及外向电流的IC₅₀分别为20μmol·L^-1和34μmol·L^-1。FMRFa5μmol·L^-1抑制I_Na⁺/Ca²⁺内向和外向电流密度分别为38.7%和34.9%,但FMRFa5μmol·L^-1及20μmol·L^-1对L型钙电流、钠电流、瞬时外向电流和内向整流钾电流均无显著抑制作用。结论　FMRFa对大鼠心室肌细胞是一个特异性Na⁺/Ca²⁺交换抑制剂。     

粉防己碱、颅通定对兔窦房结动作电位及豚鼠心室肌单细胞钙电流的协同作用

采用标准微电极技术和膜片钳记录技术,分别研究了粉防己碱(Tet)和颅通定(rotundine)对家兔窦房结动作电位及豚鼠心室肌单细胞钙电流的影响。结果表明:Tet1～200μmol·L^-1,rotundine3～300μmol·L^-1能浓度依赖性地降低兔窦房结动作电位的APA,Vmax和SP₄,延长SCL。Tet0.3μmol·L^-1与rotundine1μmol·L^-1合用亦有作用。在膜片钳实验中Tet0.1μmol·L^-1和rotundine1μmol·L-1合用能有效抑制豚鼠心室肌单细胞钙电流,抑制率为19.2%。提示,两种植物源性抗钙剂有良好的协同效果。     

大黄素逆转肿瘤细胞多药抗药性的作用

目的：研究中药成分大黄素的核苷转运抑制活性和对肿瘤细胞多药抗药性的逆转作用。方法：采用［³H］-胸苷掺入法测定核苷转运抑制作用, 采用MTT法检测细胞毒作用, 采用流式细胞术测定P-糖蛋白的功能和表达。 结果：大黄素能抑制小鼠艾氏腹水癌细胞对［³H］-胸苷的跨膜转运,其IC₅₀为9.9　μmol.L^-1。大黄素能增强抗癌药物5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和氨甲蝶呤对人肝癌BEL-7402细胞的细胞毒作用并能部分逆转人乳腺癌细胞MCF-7/Adr对阿霉素的抗药性。大黄素增加罗丹明123在MCF-7/Adr细胞中的蓄积并减少其外排,长时间作用降低了P-糖蛋白的表达。结论：大黄素逆转抗药性的作用与抑制核苷转运、降低P-糖蛋白的功能和表达相关。大黄素作为抗肿瘤生化调节剂用于逆转肿瘤细胞多药抗药性的作用值得进一步研究。     

甲基莲心碱对Saos-2细胞体外增敏作用的研究

目的　探讨甲基莲心碱(Neferine ,Nef)对骨肉瘤细胞(Saos-2cells)的体外化疗增敏作用。方法　以人骨肉瘤细胞株(Saos-2cells)为研究对象,MTT法测定药物的细胞生长抑制率,流式细胞仪(FlowCytometry ,FCM)检测细胞凋亡。结果　Nef(5,10μmol·L^-1)分别为与阿霉素(ADM) ,5-氟尿嘧啶(5-Fu) ,顺铂(CDDP) ,鬼臼乙叉苷(VP16 )合用,可增加它对Saos 2细胞的生长抑制率,q >1。Nef(10 μmol·L^-1)可增强不同浓度ADM诱导Saos 2细胞凋亡。结论　Nef对Saos-2细胞有化疗增敏作用。     

前胡丙素对培养乳鼠心肌细胞自发性收缩及动作电位的影响

用倒置显微镜闭路电视系统及细胞内标准微电极法,记录培养心肌细胞的自发性收缩及动作电位,结果发现:应用Pra-C5min后,心肌细胞收缩频率及细胞边缘运动的速度同时下降。Pra-C10,30和100μmol·L^-1剂量依赖性的方式抑制心肌细胞的收缩速度,分别抑制24%,43%和50%。pra-C(10和30μmol·L^-1)显示了抑制心肌细胞收缩频率的作用,分别抑制13%和19%。Nif3μmol.L^-1分别缩短APD₅₀和APD₉₀14%及17%,但同样浓度的verapatmil则抑制APA27%,缩短APD₅₀8%,分别延长APD90及SCL10%和43%。Pra-C10,30和100μmol·L^-1缩短APD₅₀7%,14%和18%。Pra-C100μmol·L^-1有抑制APA及延长SCL的作用。结果提示,Pra-C对心肌细胞收缩及动作电位的作用可能与其阻滞Ca²⁺通道有关。     

力达霉素抗肝癌作用的实验研究

目的观察力达霉素(LDM)在体外、体内对肝癌的抑制作用。方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法测定力达霉素和丝裂霉素C对人肝癌BEL-7402细胞及小鼠肝癌22细胞的增生抑制作用。以小鼠移植性肝癌22模型观察不同剂量力达霉素的治疗效果。结果力达霉素和丝裂霉素对人肝癌BEL-7402细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(0.0030±0.0006)nmol/L和(150±27)nmol/L。力达霉素对小鼠肝癌22细胞的IC50为0.025nmol/L。体内试验:力达霉素静脉给药1次及延迟静脉给药3次对小鼠移植性肝癌22细胞的生长均有显著抑制作用。当通过静脉给予1次力达霉素剂量为0.025、0.05和0.1mg/kg时对肝癌22细胞抑瘤率分别为62%、72%和85%。结论力达霉素在体外对肝癌细胞增生有强烈的抑制作用,动物试验有显著疗效     

抗癌抗生素力达霉素诱导人肝癌BEL-7402细胞死亡的特征

目的　研究抗癌抗生素力达霉素(LDM)诱导人肝癌BEL-7402细胞死亡的特征。方法用荧光染料Hoechst 33342和PI联染;琼脂糖凝胶电泳检测;流式细胞术检测等。结果　LDM1μmol.L^-1处理该细胞后6h,可观察到一种有别于典型凋亡的染色质凝集方式：核膜一直保持完整,细胞仍贴壁,无凋亡小体形成;琼脂糖凝胶电泳检测到DNA梯带。流式细胞术检测到的G1亚峰,仅在LDM处理BEL-7402细胞后24h出现。LDM处理BEL-7402细胞后6h,caspase-3,6的活性分别增高5,4倍。染色质开始凝集的时间比caspase-6活性达到高峰的时间早。结论　力达霉素诱导人肝癌BEL-7402细胞死亡的特征有别于典型的凋亡,此结果可能有助于解释其极高活性地杀死肿瘤细胞的分子机制。     

力达霉素增强顺铂诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及机制研究力达霉素增强顺铂诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及机制研究

目的 研究抗肿瘤抗生素力达霉素与顺铂的体外协同抗肿瘤作用及其机制。方法 采用克隆形成法、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33342和PI双荧光染色法、Western blot等方法。结果 力达霉素与顺铂联合对人肝癌BEL-7402细胞有很强的协同杀伤作用;可以使BEL-7402细胞的DNA 出现明显的梯状断裂；可以使阻滞于S期的BEL-7402细胞减少而使凋亡细胞比例明显增多；联合用药后BEL-7402细胞核出现明显的凋亡形态变化；使BEL-7402细胞内Bcl-2的表达显著降低。结论 力达霉素可以增强顺铂的抗肿瘤作用，提示力达霉素与顺铂联合有望应用于肿瘤联合化疗。     

氧化吲哚类化合物Z24的体内抑瘤活性及其血管生成抑制作用(英文)

目的　从抗血管生成活性的角度 ,寻找新的抗肿瘤药物 ,研究Z2 4的体内抑瘤活性及其对血管内皮细胞的选择性抑制作用。方法　MTT法检测不同浓度的Z2 4作用 72h时对人肝癌细胞系BEL 74 0 2及正常人胚肺二倍体细胞 2BS的生长抑制作用 ,并从浓度 抑制率曲线求出IC50 ;台盼蓝拒染计数法检测不同浓度的Z2 4作用 72h时对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的生长抑制作用 ,从浓度 抑制率曲线求出IC50 ;小鼠S180 ,H2 2和裸小鼠皮下移植性人肝癌BEL 74 0 2模型研究Z2 4的体内抑瘤作用。鸡胚尿囊膜 (CAM )血管生成模型检测Z2 4的血管生成抑制活性。结果　MTT法测得Z2 4对BEL 74 0 2生长抑制作用的IC50 为 10 6 μmol·L- 1,对 2BS生长抑制作用的IC50 为 116 μmol·L- 1。台盼蓝拒染计数法测得Z2 4对HUVEC生长抑制作用的IC50 为 6 .4 4μmol·L- 1。Z2 4可明显抑制鸡CAM新生血管的形成Z2 4 10 0mg·kg- 1可使S180 ,H2 2和裸小鼠人肝癌BEL 74 0 2模型的肿瘤重量较对照组分别下降 5 2 .5 %(n =10 ,P <0 .0 1) ,4 1.5 % (n =10 ,P <0 .0 1)和5 3.4 % (n =6 ,P <0 .0 1)。Z2 4可显著抑制CAM的血管生成。结论　Z2 4对多种肿瘤动物模型均具有显著的体内抑瘤活性 ,对血管内皮细胞有选择性抑制作用 ,并明显抑制CAM新生血管的生成?     

姜黄素Ⅲ与丝裂霉素联用抑制肝癌细胞BEL-7402的实验研究

目的研究姜黄素Ⅲ联合丝裂霉素抑制体外人肝癌细胞BEL-7402生长增殖的效果。方法体外培养人肝癌细胞BEL-7402,以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测2种药物对癌细胞的抑制率及联合用药时的抑制率。结果姜黄素Ⅲ、丝裂霉素均能抑制体外肝癌细胞增殖并呈时间与剂量依赖性。姜黄素10、20、40、80μmol／L与丝裂霉素1、2μmol／L联合用药24、48、72h的抑制率显著高于单独用丝裂霉素、姜黄素Ⅲ（P〈0．05）,两者呈现出相加的抗癌效果。结论姜黄素Ⅲ能有效抑制体外人肝癌BEL-7402细胞增殖．联合丝裂垂素用药时能提高丝裂霉素对人肝癌BEL-7402细胞的敏感性。     

蟾酥脂质体注射液的抗肿瘤作用

目的探讨蟾酥脂质体注射液(CS)的抗肿瘤作用。方法体内实验采用小鼠肝癌H22、肉瘤S180荷瘤小鼠模型,考察CS的抑瘤作用;采用小鼠接种肝癌H22后,用环磷酰胺造成免疫低下模型,考察CS提高机体免疫力作用。体外实验采用MTT法,测CS对人宫颈癌HeLa细胞或人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制率。结果CS(0.2、0.4、0.8 mg.kg-1)对2种荷瘤小鼠肿瘤增长有显著或非常显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01);同时对机体具有明显的免疫调节作用。CS 0.01~3.00 mg.L-1对人宫颈癌HeLa细胞或肝癌BEL-7402细胞增殖有非常显著的抑制作用;CS对人宫颈癌HeLa细胞IC50为0.51 mg.L-1,95%可信限0.213 2~1.214 0 mg.L-1,CS对人肝癌BEL-7402细胞IC50为0.75 mg.L-1,95%可信限0.312 6~1.801 5 mg.L-1。结论蟾酥脂质体注射液体内、体外均有抗肿瘤活性,且具有免疫调节功能。     

咖啡酸钠与丝裂霉素抗肿瘤的协同作用

目的研究咖啡酸钠(CA-Na)与化疗药物丝裂霉素(MMC)抗肿瘤的协同作用。方法用MTT方法、流式细胞法和Western Blotting方法。结果CA-Na与MMC合用对BEL-7402细胞增殖的抑制具有协同作用。MMC与CA-Na合并用药后BEL-7402细胞周期的变化与单用MMC不同。合用CA-Na后胞内Ca²⁺含量明显增加;线粒体膜电位有较大幅度的降低;合用还可协同抑制Bcl-2的蛋白表达、活化caspase-3的表达。CA-Na与MMC合用对移植性小鼠肿瘤的生长有抗肿瘤协同作用。 结论CA-Na和MMC体内外合用均具有抗肿瘤协同作用。     

野木瓜果实总皂苷体外抗肿瘤作用研究

目的 研究野木瓜果实总皂苷对人肺癌细胞A549、人肝癌细胞BEL-7402和人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响.方法 将生长状态良好的A549细胞、BEL-7402细胞和SGC-7901细胞分为7组:阴性对照组,野木瓜果实总皂苷组(40、80、160、320、640 mg·L-1)组和丝裂霉素组(10 mg·L-1),药物作用12、24、48 h后,MTT法测定细胞增殖抑制率.结果 野木瓜果实总皂苷能显著抑制A549细胞、BEL-7402细胞和SGC-7901细胞的增殖,呈一定剂量和时间依赖关系,作用A549细胞12、24、48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为492.38、293.43、141.84 mg·L-1;作用BEL-7402细胞12、24、48 h的IC50分别为427.74、243.91、101.79 mg·L-1;作用SGC-7901细胞12、24、48 h的IC50分别为463.35、256.77、113.22 mg·L-1.结论 野木瓜果实总皂苷有明显抑制A549细胞、BEL-7402细胞和SGC-7901细胞体外增殖的作用,其中BEL-7402细胞对野木瓜果实总皂苷最为敏感.     

正常人肝细胞和肝癌细胞对力达霉素诱导的有丝分裂性细胞死亡的差异

[摘要]目的：探讨力达霉素（lidamycin, LDM）诱导人肝癌BEL-7402和正常人肝L-02细胞出现的有丝分裂性细胞死亡的差异。方法：采用MTT法观察LDM对BEL-7402和L-02细胞生长曲线的影响;使用Giemsa染色和流式细胞术观察有丝分裂性细胞死亡特征;用Western blot法检测蛋白表达变化。结果：LDM抑制BEL-7402和L-02细胞的生长,二者均表现出有丝分裂性细胞死亡的特征,即细胞体积增大、G2/M期阻滞、出现多核化,但BEL-7402细胞对LDM更敏感。在LDM处理的BEL-7402和L-02细胞中,与凋亡相关的Bax和Smac的蛋白表达水平没有增加,caspase-3和caspase-9未被活化,但L-02细胞的Akt通路被激活。结论：人正常L-02细胞对LDM引起的有丝分裂性细胞死亡明显低于人肝癌BEL-7402细胞,对LDM的反应敏感性存在差异的原因可能与Akt信号通路有关。