单倍体相合骨髓移植中急性移植物抗宿主病预防新方案的临床研究

目的　探讨骨髓移植 (BMT)供者应用G CSF和受者接受连续免疫抑制剂及加CD2 5单克隆抗体 (单抗 )预防急性重度移植物抗宿主病 (GVHD)的单倍体移植方案的可行性。方法　 38例白血病患者接受单倍体相合未去T细胞BMT ,供者应用G CSF动员 7d后采集骨髓 ;受者应用连续免疫抑制剂预防急性GVHD ,临床观察移植结果。结果　所有患者均取得三系造血重建 ,移植后粒细胞 >0 .5×1 0 9 L及血小板 >2 0× 1 0 9 L的中位时间分别为第 1 9天和 2 3天 ,植入直接证据检测证实完全供者造血 ,发生Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD 4例 ,发生率为 1 0 .5 % ,无病存活大于 6个月可评价慢性GVHD 2 8例 ,均发生慢性GVHD ,表现轻微和局限 ,其中广泛性慢性GVHD 3例 ,发生率为 1 0 .7%。免疫功能恢复的结果显示 ,在移植后 1 8个月内动态观察免疫细胞计数的变化 ,CD3+、CD8+、CD1 9+、CD56+细胞在 1 2个月内可恢复至正常水平 ,CD4+细胞在移植后 1 8个月内恢复。随访中位时间 1 2个月 (6～ 2 6个月 ) ,死亡 1 2例 ,Kaplan Meier生存分析 ,2年估计无病生存率为 (68.4± 6 .0 ) % ,存活病例Karnofsky评分大于 90 %。结论　经G CSF动员的骨髓与连续免疫抑制剂的应用 ,特别是CD2 5单抗应用于未去T细胞单倍体相合BMT急性重度GVHD的预防 ,对移植物植入、免疫     

单倍体相合骨髓移植后CD4~+CD25~+ T细胞免疫恢复的临床研究

本研究探讨单倍体相合骨髓移植后CD4+CD25+T细胞免疫恢复及其与移植物抗宿主病(GVHD)和复发的关系。采集27例单倍体相合骨髓移植患者在移植后不同时间内的外周血标本,用流式细胞仪检测分析CD4+CD25+T细胞百分比和绝对数,同时比较该细胞亚群恢复与GVHD和白血病复发的关系。结果表明:经过G-CSF动员后供者外周血中CD4+CD25+细胞百分比明显增高(p0.05)。移植后30天CD4+CD25+细胞恢复到正常水平的20%,但在移植后3个月内恢复颇为缓慢,直到180天才恢复到正常水平的50%。CD4+CD25+细胞恢复与急性GVHD的发生无关,但是在慢性GVHD组CD4+CD25+显著增高。移植后1年内未发现复发与CD4+CD25+细胞绝对计数有关。结论:在骨髓移植后给予抗CD25抗体预防GVHD的治疗模式下,CD4+CD25+细胞恢复与急性GVHD的发生无关,但与慢性GVHD的发生似乎有关,而与白血病的复发的关系不明确。     

抗CD25单克隆抗体治疗耐激素的急性移植物抗宿主病疗效分析

本研究探讨抗CD25单克隆抗体在单倍体相合骨髓移植术（hiBMT）后耐激素的急性移植物抗宿主病（aGVHD）治疗中的作用。对15例单倍体相合BMT后出现耐激素的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的患者给予巴利昔单克隆抗体20mg，第1、4天静脉点滴，未达到疗效的病人间隔1周后重复本治疗。结果显示：完全有效8例（53．33％），其中4例无病生存，2例生存伴局限性cGVHD，2例死于肺部感染；3例部分有效（20％），其中1例无病生存，1例死于aGVHD及感染，1例死于肺部感染；4例无效（26．67％）死亡，死亡原因有GVHD、肺部感染、心力衰竭。总有效率73．33％，总生存率46．67％。该药应用安全，未发现输注相关的毒副作用。结论：抗CD25单克隆抗体对单倍体相合BMT后耐激素的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD具有较好的疗效，但总的生存率仍然较低，感染仍然是导致该类患者死亡的主要原因，因此加强环境保护，预防感染极为重要。     

异基因造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血

目的 研究异基因造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血的临床效果。方法 确诊为重型β地中海贫血患儿15例，年龄1—10岁(中位年龄3．5岁)，其中男8例，女7例；Pesaro中心地中海贫血分度Ⅰ—Ⅱ度12例，Ⅲ度3例。对低体重供使用G-CSF动员后采集骨髓 外周血造血干细胞。HLA相合同胞骨髓移植10例，外周血造血干细胞移植2例，脐带血移植3例。随访时间为6—54个月。结果15例中9例长期无病生存，8例HLA人相合同胞骨髓移植Ⅰ—Ⅱ度患儿7例无病生存；2例母亲供髓HLA人不相合移植，1例无病生存，1例末植入。2例外周血造血干细胞移植，其中1例立即接受骨髓移植并获成功。2例无关供脐带血移植均末长期植入。15例患中发生Ⅰ度和Ⅲ度GVHD分别为3例和1例；4例并发间质性肺炎，所有长期无病生存无后期合并症。结论 Ⅰ—Ⅱ度β地中海贫血患儿骨髓移植成功率较高(87．5％)。对低体重供使用C—CSF动员后采集骨髓 外周血造血干细胞方法是确保植入的有效办法。但有增加急性和慢性GVHD和植入综合征的倾向。     

异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征6例报告

本研究探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）治疗骨髓增生异常综合征（MDS）的可行治疗方案及疗效。1999年9月-2007年2月采用清髓性预处理allo—HSCT治疗6例骨髓增生异常综合征患者,4例接受同胞HLA配型全相合的异基因外周血干细胞移植（allo—PBSCT）,2例接受单倍体相合异基因骨髓移植（hi—alloBMT）。预处理清髓方案为：全相合移植采用Bu＋Cy,单倍体相合并基因骨髓移植采用Cy4-TBI＋Ara—C。移植物抗宿主病（GVHD）采用联合免疫抑制剂的方法预防,全相合移植应用环胞菌素A和短程氨甲碟呤,单倍体相合并基骨髓移植除以上药物外还加用抗胸腺细胞球蛋白、CD25单克隆抗体及霉酚酸酯。结果表明,全部患者移植后均有造血重建,中性粒细胞数〉0．5×10^9／L及血小板数〉20×10^9／L的平均时间分别为15（11—20）天及20．3（12—28）天,植入证据检测证实为完全供者造血。仅1例发生急性1度皮肤移植物抗宿主病,其他患者未发生急性或慢性GVHD,1例移植后20个月死于疾病复发,1例移植后18个月死于肺部并发症,其余4例无病生存,中位存活时间51．8（18—108）个月。总之,allo—HSCT治疗MDS可行、有效,提高了年轻MDS患者疾病治愈及长期生存的机会。     

猕猴单倍体相合非清髓造血干细胞联合间充质干细胞移植的实验研究

目的 用非清髓预处理建立猕猴单倍体相合造血干细胞移植(HSCT)模型，研究间充质干细胞(MSC)在单倍体相合移植中的作用。方法采用健康、单倍体相合的猕猴亲子配对，受非清髓性预处理用氟达拉滨 环磷酰胺 ^60Co(200cGy)全身照射 兔抗人胸腺细胞球蛋白，移植物抗宿主病(GVHD)预防用环孢菌素A、霉酚酸酯、抗CD25单抗。实验分为单纯造血干细胞(HSC)移植组和HSC联合MSC移植组；检测供受体嵌合水平，观察造血恢复、GVHD等情况。结果单倍体相合的子代猕猴采用非清髓预处理方案，可获稳定植入?比较了单纯非清髓HSC移植组和HSC联合MSC移植组的造血恢复，发现造血恢复时间主要与嵌合状态有关；MSC可促进植入；相同条件下，HSC联合MSC移植组更容易形成供受混合嵌合；GVHD的发生率低。结论成功建立了猕猴非清髓性单倍体相合HSCT的模型，非清髓HSCT联合MSC可能在单倍体相合移植中有较好效果。     

单倍体相合骨髓移植白血病患者造血重建的临床研究

为研究未去除T细胞的单倍体骨髓移植后造血重建的特点 ,对 15例HLA 2 - 3个位点不匹配骨髓移植亲属供者使用G CSF 3- 4 μg/ (kg·d) ,连续 7天后采髓。预处理方案采用大剂量阿糖胞苷联合环磷酰胺和全身照射。应用环孢菌素A和氨甲喋呤、抗胸腺细胞球蛋白及霉酚酸酯 (MMF)预防移植物抗宿主病。移植后观察血像、骨髓像、行染色体分析及HLA位点鉴定。移植后分别于 3,6和 12个月及 2年追踪鉴定植入状态。结果发现 ,15例患者全部移植物植入 ,移植后中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L和血小板 >2 0× 10 9/L的时间分别为 18(13- 2 3)天及 2 2 (16- 32 )天。骨髓像显示各系造血均恢复。 7例应用染色体检查 ,8例应用HLA位点 ,4例应用血型 ,1例应用DNA指纹检测 ,植入鉴定结果除 1例复发患者于移植后 2个月骨髓复发植入鉴定为供、受者嵌合外 ,其他患者均呈持续全部稳定植入。移植后发生I度急性GVHD 8例 ,II-IV度GVHD 5例 ,可评价的慢性GVHD共 8例。结论 :供者应用G CSF后采髓 ,加大预处理剂量 ,联合应用作用机理不同的多种免疫抑制剂进行HLA单倍体的骨髓移植 ,可跨越人类HLA多样性屏障。     

非血缘HLA相合供者造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的临床分析

本研究旨在评价HLA不全相合的亲属供者或HLA相合非血缘供者造血干细胞移植在治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效和安全性。在2005年11月至2011年5月期间采用非血缘供者或者单倍体相合供者造血干细胞移植治疗SAA患者20例,其中亲缘HLA不合单倍体相合供者14例,非血缘HLA相合供者6例。预处理采用氟达拉滨(FLU)、环磷酰胺(CTX)和抗胸腺细胞球蛋白(ATG)方案,移植物抗宿主病(GVHD)预防方案为经典的环孢素A(CsA)联合短程甲氨蝶呤(MTX)及霉酚酸酯(MMF)。对单倍体相合供者采集经G-CSF动员的骨髓及外周血干细胞联合应用;非血缘供者单纯采集外周血干细胞。结果表明:所有患者均获供者型造血重建,粒细胞植活中位时间14(11-20)d,血小板植活中位时间17(13-31)d,2例取得完全供者植入后2个月发生排斥,其中1例进行母亲单倍体相合供者二次移植,达到完全供者持久植入;移植后发生Ⅱ度急性GVHD 4例,慢性GVHD发生7例,其中1例为慢性广泛性GVHD;14例无病生存,所有存活患者最少随访时间在8个月以上,中位随访时间为48个月,血象完全恢复,Kaplan-Meier计算的累积无病生存率为68.9%。结论:采用FLU、CTX和抗淋巴细胞免疫球蛋白进行预处理,用HLA不全相合的亲属供者或HLA相合非血缘供者造血干细胞移植治疗SAA,植入率高,感染发生率降低,获得良好的长期生存疗效。     

不同的造血干细胞移植方式对重型再生障碍性贫血治疗效果的影响

目的:比较异基因外周造血干细胞移植(Allo-PBSCT)、异基因骨髓移植(Allo-BMT)及Allo-PBSCT和Allo-BMT混合移植3种不同的移植方式治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的临床效果。方法:37例SAA患者接受了同胞人类白细胞抗原(HLA)全相合异基因干细胞移植,其中Allo-PBSCT组11例,Allo-BMT组14例,混合移植组12例。观察所有患者移植近期中性粒细胞(Neu)和血小板的造血时间、短小片段重复序列(STR)植入状况、粒细胞缺乏(粒缺)合并感染的发生率、急慢性移植物抗宿主病(GvHD)发生率,以及远期3年植入失败率、病死率和无病生存率。结果:Allo-PBSCT组、Allo-BMT组、混合移植组的Neu造血时间分别为(13.5±2.3)d、(21.2±3.5)d和(14.7±2.4)d,血小板造血时间分别为(24±4)d、(22±5)d和(23±5)d,Allo-PBSCT组和混合移植组的Neu造血时间均短于Allo-BMT组(P均<0.05),而3组间血小板平均造血时间比较差异无统计学意义。3组所有患者在移植后第28日时检测STR均证实为完全供者嵌合体。Allo-PBSCT组和混合移植组粒缺合并感染发生率分别为9%和17%,均明显低于Allo-BMT组的57%(P均<0.05);Allo-PBSCT组GvHD总发生率(包括急性和慢性)为36%,与均无GvHD发生的Allo-BMT组及混合移植组比较差异具统计学意义(P均<0.05);Allo-PBSCT组3年的植入失败率、病死率和无病生存率分别为36%、9%和64%,混合移植组和Allo-BMT组所有患者3年内均无病生存、STR均表现为稳定植入,Allo-PBSCT组3年植入失败率高于混合移植组和Allo-BMT组(P均<0.05),3年无病生存率低于混合移植组和Allo-BMT组(P均<0.05)。结论:在上述3种不同的移植方式中,混合移植同时具有Neu重建快、粒缺合并感染发生率低、GvHD发生率和植入失败发生率低、无病生存率高等优点,临床上可以优先考虑采用此方式进行治疗。     

G-CSF预处理供者的HLA相合同胞异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病研究

为了评价供者应用G-CSF的骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病的临床疗效,用HLA相合的、混合淋巴细胞培养阴性的同胞供者骨髓,对单一病种慢性粒细胞白血病行移植治疗。供者应用G-CSF 250微克/天,连用7天后供髓的32例为研究组,对照组18例常规采髓移植,在预处理方案,GVHD预防和支持治疗方法相同的情况下,比较研究组和对照组移植后在加速造血重建,降低GVHD发生和延长无病生存的疗效。移植结果显示,供者应用G-CSF在慢性粒细胞白血病移植中造血重建加速,中性粒细胞>0.5×10~9/L和血小板>20×10~9/L的中位天数分别是第15(10-22)天和第17.5(13-28)天,对照组是第21和24天(P<0.01),研究组发生急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD 2例(6.3％),对照组5例(27.8％),通过比较,两组差异有显著性(P<0.05),慢性GVHD发生分别是24％和33.3％(P>0.05)。研究组移植相关死亡、复发和无病生存与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:使用G-CSF动员供者的HLA相合的异基因骨髓移植,造血重建加快和重度急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD减轻,有可能提高CML移植的无病生存率。     

白血病患儿接受父/母单倍相合未去T细胞骨髓移植的临床观察

为探讨单倍相合未去T细胞的骨髓移植治疗儿童白血病的临床疗效及可行性,对8例白血病儿童（1.9岁-9岁）接受父/母单倍体相合骨髓移植疗效进行了评价。对5例患儿采用了含全身照射（TBI）的预处理方案,它包括阿糖胞苷＋环磷酰胺＋全身照射（Ara-C/CTX/TBI）;对另外3例不加TBI,单用马利兰＋阿糖胞苷＋环磷酰胺（Bu/Ara-C/CY）预处理方案。移植物抗宿主病（GVHD）的预防措施包括供者用粒细胞集落刺激因子（G-CSF）及受者接受环孢菌素A（CsA）、氨甲蝶呤（MTX）、抗胸腺细胞球蛋白（ATG）、CD25单克隆抗体和霉酚酸酯（MMF）联合治疗。结果显示：8例患者移植后均获得造血重建,中性粒细胞数大于0.5×109/L的平均天数是16天,血小板数大于20×109/L的平均天数是17天,骨髓植活的直接证据检测证实为完全供者造血。移植后急性重度GVHD的发生率低,仅1例发生急性肠道Ⅱ-Ⅲ度GVHD（1/8）;5例出现慢性GVHD,其中4例为局限性慢性GVHD,1例为泛发性（合并有肺部GVHD）。在180天内无移植相关死亡,期间无致死性严重感染发生,髓系造血和免疫功能恢复较快。中位随访33个月（范围7-56月）,2例死亡,均死于白血病复发,其中1例移植后22月死于供者源复发。结论：对儿童白血病进行单倍相合未去T细胞骨髓移植时采用上述预处理方案和GVHD预防措施是安全、可行、有效的。     

同一供者外周血单个核细胞输注治疗单倍相合骨髓移植后白血病复发

本研究探讨同一供者外周血单个核细胞输注（DMNCI）治疗单倍相合骨髓移植后白血病复发的疗效和安全性。3例单倍相合骨髓移植后白血病复发患者接受G-CSF动员的DMNCI治疗,其中例1和例2骨髓移植前分别为ph＋急性淋巴细胞性白血病伴中枢神经系统侵犯部分缓解及慢性粒细胞性白血病急性变部分缓解,在骨髓移植后这两例均血液学复发,各接受单次DMNCI,单个核细胞剂量分别为8.25×10^8/kg和5.24×10^8/kg;CD3^＋细胞剂量分别为1.87×10^8/kg和1.14×10^8/kg。第3例骨髓移植前为CML急性变,治疗后并达缓解。移植后分子水平复发,接受逐渐提高单次细胞数量的分次输注,首次DMNCI剂量为2.0×10^7/kg,CD3^＋细胞剂量为1.1×10^7/kg。同时观察3例患者输注后白血病缓解情况及并发症。结果显示,3例患者均出现不同疗效,2例血液学复发患者骨髓均暂时缓解,但分别于DMNCI后41、48天死于严重移植物抗宿主病（GVHD）、复发及衰竭。分子水平复发患者分次接受DMNCI,输注2次后达分子水平缓解,STR-PCR测定证实为供者基因型。3例均发生急性GVHD,2例接受单次剂量输注者发生Ⅳ度以上GVHD,1例接受分次输注患者发生Ⅰ度GVHD。3例均未发生明显骨髓抑制,分子水平缓解者随访半年无病生存。结论：DMNCI可能具有抗白血病作用,可用于单倍相合骨髓移植后白血病复发的治疗,对分子水平复发者的疗效较对血液学复发者好;输注MNC为×10^8/kg后GVHD严重。DMNCI起始剂量×10^7/kg并逐渐提高单次剂量的分次输注方法更为安全。     

异基因外周血干细胞移植治疗恶性血液病

目的　探讨异基因外周血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗血液系统恶性疾病。方法　 5 1例恶性血液病患者 ,中位年龄 34(5 .5～ 5 2 .0 )岁 ,接受了HLA配型相合或 1个位点不合的同胞供者PBSCT ,其中急性白血病 (AL) 31例 ,第 1次完全缓解 (CR1 )期 13例 ,第 2次完全缓解 (CR2 )期及以上 7例 ,未缓解或复发 11例 ,包括 2例异基因骨髓移植 (allo BMT)后复发 ;慢性粒细胞白血病 (CML) 12例 ,慢性期 5例 ,加速期 2例 ,急变期 4例 ,allo BMT后复发 1例 ;骨髓增生异常综合征 (MDS) 7例 ,RAEB及RAEB t各 1例 ,转为AL 5例 ;Burkitt淋巴瘤Ⅳ期 1例。采用全身照射 (TBI)或改良白消安预处理方案 ,预防移植物抗宿主病 (GVHD)采用经典环孢菌素 (CsA)加甲氨蝶呤 (MTX)方案。结果　所有患者均植活 ,中性粒细胞数恢复至≥ 0 .5× 10 9 L和BPC≥ 2 0× 10 9 L的中位时间分别为移植后第 14和 11天。发生Ⅱ度及以上急性GVHD 2 0例 (39% ) ,其中Ⅲ～Ⅳ度 2例 (4% )。 5 2 %的患者诊断慢性GVHD。死亡14例 ,8例死于移植相关合并症 ,6例死于复发。 37例长期存活 ,中位随访时间为 399(75～ 2 176 )d ,34例持续CR ,另 3例复发。 2年总生存率、无病生存率及复发率分别为 6 4 % ,6 1%及 2 4 %。结论　allo PBSCT治疗恶性血液病安全可靠     

HLA半相合未去除T细胞骨髓移植治疗白血病的初步观察

目的探索半相合未去除T细胞骨髓移植治疗白血病的可行性.方法15例白血病患者接受HLA2～3个位点不匹配亲缘骨髓移植.用阿糖胞苷、环磷酰胺和γ射线全身照射进行预处理,供者应用G-CSF250μg/d,连用7d后采髓,移植物抗宿主病(GVHD)预防除用环孢菌素A(CsA)和甲氨蝶呤(MTX)外,在移植前第4天～第1天用抗胸腺细胞球蛋白ATG5mg@kg-1@d-1,移植后第7天开始加用霉酚酸酯1.0g/d.结果患者移植后均获得造血重建,中性粒细胞＞0.5×109/L和血小板＞20×109/L的中位时间分别是19d(13～23d)和21d(16～32d).5例(33.3%)发生急性Ⅱ～Ⅳ度GVHD,其中急性Ⅱ度肠道GVH2例,急性Ⅲ度肠道GVHD2例,急性肠道和肝脏Ⅳ度GVHD1例.可评价的9例患者中8例发生慢性GVHHD,无一例发生广泛性慢性GVHD.中位随访时间395d(110～690d),死亡6例,其中死于急性GVHD3例,死于感染2例,复发死亡1例.无病存活9例,其中6例存活在1年以上.结论供者应用G-CSF后采髓,多种免疫抑制剂联合应用的HLA半相合未去除T细胞骨髓移植,在治疗自血病过程中,有效地降低了急性重症GVHD发生,提高了无病生存,对拓宽供髓来源有重要实用价值.     

Peripheral blood stem cell collection from healthy donors for allogeneic transplantation

There is great interest in the use of peripheral blood stem cells (PBSC) for allogeneic transplantation, based on the good results seen with autologous PBSC infusion. Reasonable caution exists regarding the use of allogeneic PBSC for transplantation because of donor toxicities due to rhG-CSF administration and the risk of graft-versus-host-disease (GVHD) in the recipient because of the large number of T-cell infused. We present preliminary data on allogeneic PBSC collections and transplantation in ten patients affected by advanced leukemia (eight patients), severe aplastic anemia (one patient) and sickle cell anemia (one patient). Seven donors were HLA-identical siblings, while the other three were mismatched for three, two and one locus, respectively. All donors received rhG-CSF at a dose of 12 micrograms/kg for a mean of 5 days. Leukaphereses were performed with the aim of collecting a minimum of 5 x 10(6)/kg (recipient's weight) CD 34+ cells. Collection timing was determined by monitoring CD 34+ cells in the donor's peripheral blood from the second day of rhG-CSF therapy. The PBSC collections yielded a mean of 10.05 x 10(8) MNCs/kg and of 10.48 x 10(6) CD 34+ cells/kg (recipient's weight). PBSC were immediately infused after collection in patients given myeloablative therapy. Engraftment was observed in each patient at a mean of 13.2 days for an absolute neutrophil count (ANC) more than 0.5 x 10(9)/L and of 26.5 days for a platelet count of more than 20 x 10(9)/L. Eight patients experienced no or moderate acute GVHD, whereas two patients died of grade 4 GVHD, notwithstanding GVHD prophylaxis with cyclosporine and prednisone. Two other patients died of viral and fungal infections, respectively, despite prophylaxis. The remaining six patients are alive between 58 and 430 days after transplant. Our results document that allogeneic PBSC are capable of engraftment after a myeloablative regimen. Controlled trials are necessary to compare the potential benefits of this approach with the results obtained in allogeneic bone marrow transplantation.     

Addition of a low fixed number of CD3+ cells to CD34-enriched allografts: effects on engraftment,graft-versus-host disease,and survival after related and unrelated peripheral stem cell transplantation

Despite prophylaxis with immunosuppressive drugs, severe graft-versus-host disease (GVHD) remains a major cause of morbidity and mortality following allogeneic stem cell transplantation. T cell depletion of the graft has decreased incidence and severity of GVHD but has resulted in a higher incidence of graft failure and relapse. To reduce the risk of severe GVHD, but at the same time to maintain the graft-versus-tumor effect, we administered a fixed low number of 1 x 10(5) donor T cells per kilogram of body weight to recipients of CD34(+) cell-enriched allogeneic peripheral blood stem cells (PBSCs). Donor lymphocyte infusions (DLI) were then given in incremental doses when mixed chimerism persisted or signs of relapse occurred. A total of 23 patients receiving allografts from related and unrelated donors were treated according to this protocol after myeloablative or reduced intensity conditioning. One patient did not engraft and 3/20 evaluable patients developed acute (a) GVHD > or = grade II, with a corresponding estimated cumulative incidence of 15.6% (95% CI 0-30.5%). DLI (n = 13) induced aGVHD > or = II in 6 patients, but the severity of the syndrome was reduced. Overall GVHD-related mortality was low (13%). The probability of disease-free survival and overall survival at 2 years was 0.40 (95% CI 0.21-0.75) and 0.36 (95% CI 0.21-0.63). Progression-free survival and overall survival was significantly better in patients with acute or chronic myelogenous leukemia compared to patients with lymphoproliferative disorders (p = 0.002; p = 0.02). We conclude that the combination of allografts with a T cell content of about 1 x 10(5)/kg and escalating doses of DLI is a viable transplant strategy in patients with myeloid leukemias, which results in stable engraftment and a reduction of mortality from aGVHD.     

慢病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦系统抑制移植物抗宿主病的实验研究

目的研究慢病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶／更昔洛韦（HSV-TK／GCV）系统对小鼠异基因骨髓移植（allo—BMT）后移植物抗宿主病（GVHD）的防治作用。方法将转染HSV-TK基因的慢病毒感染供鼠（C57BL／6小鼠）脾脏淋巴细胞，将感染后的淋巴细胞与供鼠骨髓细胞混合，移植给经。Co1射线照射后的受鼠（BALB／c小鼠）。分别于移植后当天、移植后7天（＋7天）和＋12天腹腔注射GCV25mg／kg×7d，观察受鼠生存期、GVHD发生率及严重程度、T细胞亚群（CD3、CD4、CD8）及异基因嵌合等指标。结果HSV-TK／GCV使用0天、＋7天、＋12天组受鼠生存时间分别为（30．10±5．21）d、（36．40±5．28）d、（28．20±4．82）d，三组生存时间均较移植对照组[（15．10±0．43）d]明显延长（P〈0．05）；HSV-TK／GCV＋7天组小鼠50d存活率达60％，高于HSV-TK／GCV0天（40％）和＋12天组（30％）（P〉0．05）。对照组小鼠全部发生Ⅲ～Ⅳ级GVHD，实验组死亡小鼠有Ⅱ～Ⅲ级GVHD病理学改变，而长期生存小鼠仅出现Ⅰ～Ⅱ级GVHD。在＋5，＋10，＋15d，3个时间点实验组小鼠CD4^＋细胞明显高于对照组（P〈0．05），CD8^＋细胞均低于对照组（P〈0．05）。＋30天受鼠异基因嵌合率为100％。结论慢病毒载体介导的HSV-TK／GCV系统能有效控制小鼠allo—BMT后GVHD；＋7天外周血白细胞数开始回升时用GCV控制GVHD效果最佳。