甲状腺激素对血清脂类、脂蛋白胆固醇及~(125)I-LDL清除率的影响

观察了不同甲状腺功能状态下血清脂类、脂蛋白水平及对LDL清除率的影响。甲状腺素组的T-C,(VLDL+LDL)-C,TG及(VLDL+LDL)-C/HDL-C降低,HDL-C升高,~(125)I-LDL清除率增加。他巴唑组的T-C,(VLDL+LDL)-C,HDL-C,TG,及(VLDL+LDL)-C/HDL-C均升高,~(125)I-LDL清除率有下降趋势。提示体内甲状腺激素水平的变化对血清脂类及脂蛋白胆固醇的代谢有明显影响     

HDL对LDL和AcLDL渗入家兔主动脉壁的影响

本实验通过静脉注入大剂量人 HDL,人 LDL 到正常和高 Ch 血症家兔体内;大剂量人 HDL,人 AcLDL 到正常家兔体内;探讨 HDL 对 LDL 及 AcLDL 渗入家兔主动脉壁的影响。灌注大剂量~(131)I-LDL 后,各组实验兔较对照免血浆放射活性均增加,半衰期延长,高 Ch 血症尤为明显。对照兔主动脉壁标记脂蛋白渗入率:高 Ch 血症组>AcLDL 组>LDL 组。HDL 对~(131)I-LDL 及~(131)I-AcLDL 在家兔主动脉壁渗入率的影响:LDL 组减少18.660%,高 Ch 血症组减少48.280%,AcLDL 组减少63.320%。主动脉壁组织自显影显示:HDL 减少~(131)I-LDL 及~(131)I-AcLDL 渗入主动脉壁。标记脂蛋白在主动脉弓、胸腹段的渗入率,实验兔均低于对照兔。以上结果揭示主动脉内皮细胞表面有类似AcLDL 受体的存在,当 HDL 浓度异常高时可以阻止 LDL 及 AcLDL 渗入完整主动脉内皮层进入内膜。     

人低密度脂蛋白~(125)I标记——一氯化碘法

本文报告了利用-氯化碘法对人血清低密度脂蛋白(LDL)进行~(125)Ⅰ碘化标记,结果表明,~(125)Ⅰ-LDL的比放射性为(61～185)×10~(-6)μCi/ng LDL,脂质标记率<1%,游离~(125)Ⅰ含量在0.43～1.90%之间,~(125)Ⅰ-LDL浓度为0.5～1.0mg/ml.~(125)Ⅰ-LDL的生物活性经受体实验证实与天然脂蛋白无差异,基本符合用于脂蛋白代谢研究的要求.本法具有反应温和,不易损伤脂蛋白,脂质标记率低,设备简单等优点,为进一步进行脂蛋白受体的研究提供了可行的方法.     

糖基化低密度脂蛋白受体途径代谢与动脉粥样硬化关系的实验研究

本文旨在观察低密度脂蛋白(LDL)糖基化对其受体途径代谢的影响。以密度梯度超速离心法分离人血清LDL,经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定纯度后用一氯化碘法将其标记成~(125)I-LDL。在培养的人成纤维细胞上进行LDL放射受体分析并检测细胞内总胆固醇含量。该受体最大高亲和性结合(Bmax)为47ngLDL/mg细胞蛋白,亲和常数(Km)为9.4μg/ml。糖基化LDL的受体结合、摄入和降解值显著低于对照LDL(P<0.01),而糖基化LDL孵育的细胞,其总胆固醇含量却明显增高(P>0.01)。结果提示,LDL糖基化可能是糖尿病人易患脂代谢障碍和动脉粥样硬化的重要机制。     

多不饱和脂肪酸对金黄地鼠血脂和肝LDL受体的影响

研究了多不饱和脂肪酸对金黄地鼠血脂和肝LDL受体的影响,以探讨多不饱和脂肪酸降低血清脂质的机制。将雄性金黄地鼠30只随机分为对照组和多不饱和脂肪酸组,前者喂基础饲料加0.12%胆固醇,后者再加喂20%的玉米油,5周后测血脂和肝脏LDL受体。结果表明,与对照组相比,多不饱和脂肪酸组血清TC,TG,LDL-C,VLDL-C均明显下降,而HDL-C则明显升高。体外实验发现,多不饱和脂肪酸组金黄地鼠肝匀浆与~(125)I-LDL特异结合位点显著高于对照组,而~(125)I-LDL与两组动物肝匀浆结合的亲和力无明显差别,提示多不饱和脂肪酸降低血脂与肝LDL受体增加密切相关。     

氚-胆固醇标记血浆脂蛋白方法的研究

本研究用~3H-胆固醇标记血浆脂蛋白,血浆经3.75％PAGE,可将脂蛋白分成HDL、LDL和VLDL。分别测定各脂蛋白的每分钟计数(cpm),并计算放射化学纯度。HDL、LDL和VLDL的放射化学纯度分别为99％、96％和94％。本法标记的脂蛋白具有一定的化学稳定性,不改变生物活性和其他理化性质等优点。可通过制备性PAGE纯化~3H-胆固醇标记的脂蛋白。该方法操作简单,~3H-胆固醇半衰期长,可广泛应用于血浆脂蛋白代谢的研究。     

大槐合剂对高胆固醇血症大鼠血浆LDL清除的两种途径影响

应用放射性同位素双标记示踪方法(~(131)Ⅰ-LDIL,~(125)Ⅰ-GLC-LDL),测定了大槐合剂对高胆固醇血症大鼠LDL 清除的受体与非受体途径的影响。结果表明,与正常组相比,造型组大鼠LDL 经受体与非受体途径的部分清除率(FCR)分别下降了51.7%和42.4%。大槐合剂则显著提高LDL 经受体和非受体途径的清除速率。与造型组相比,受体与非受体途径的FCR 分别增加了53.5%(P<0.01)和65.5%(P<0.05)。~(125)Ⅰ-LDL 和~(131)Ⅰ-GLC-LDL 的T1/2明显缩短。提示大槐合剂降血浆LDL-C 水平的作用在于促进血浆LDL 自受体与非受体途径的清除。     

人胚肝低密度脂蛋白受体的提纯和鉴别

报道了用两步法快速分离人胚肝低密度脂蛋白受体的方法。肝细胞膜用非离子型去污剂TritonX-100溶解后,经DE52纤维素离子交换层析和LDL偶联的Sepharose 4B亲和层析,将受体纯化了500倍。纯化后的低密度脂蛋白受体具有完整细胞和粗制细胞膜上受体的所有特征:(1)能与~(125)I-LDL高亲和性结合,并呈现明显的剂量效应;(2)与LDL的结合需要Ca~(2+),EDTA可阻断其结合;(3)能与抗LDL受体的单克隆抗体相互作用;(4)分子量为130kd。     

~(125)碘标记载脂蛋白CⅢ在小鼠血浆中清除及体内分布的研究

用~(125)碘标记人载脂蛋白CⅢ对载脂蛋白CⅢ在小鼠血浆中的清除及体内的分布进行了研究。发现静脉注射~(125)碘标记人载脂蛋白CⅢ在小鼠血浆的分数清除率为0.19/h,血浆半寿期为3小时,肝脏是结合~(125)碘标记载脂蛋白CⅢ的主要器官。     

339例老年住院病人血脂及脂蛋白分析

由于老年人对脂质的吸收和对胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)的合成及代谢能力减低,容易引起血脂增高,且血浆脂蛋白中的低密度脂蛋白(LDL)随年龄增长而不断增高。高脂蛋白血症在老年人中比较常见,而且常与其他老年病如冠心病(CHD)、糖尿病(DM)等合并存在,并且相互影响,故对老年人的危害极大。1994年8月～1997年11月观察了339例老年住院病人血脂和血脂蛋白分布情况。现将观察结果报告如下。     

兔胆囊结石形成过程中肝细胞低密度脂蛋白受体变化的研究

In order to study the mechanism of cholesterol gallstone formation through rabbit model which was induced by high cholesterol diet, we investigated the LDL receptor activity of hepatocytes binding to 125I-LDL in different phases, namely 1, 2, 3 week group and 4 week, and in a control group besides. In this animal experiment, cholesterol gallstones were induced at 2 week, 3 week and 4 week groups in 4/10, 6/10, and 7/10 cases respectively. The Bmax values of LDL receptor of hepatocytes binding to 125I-LDL decreased significantly in 3 week and 4 week groups (vs 1 week and control groups, P < 0.05). The kd values became increased in 3 week and 4 week groups (vs 1 week and control group, P < 0.05), which suggested that the activity of LDL receptor decreased gradually. In conclusions owing to the intake of high cholesterol diet with the passage of time, the decreased activity of LDL receptor of hepatocytes would reduce the synthesis of bile acid.     

直接法与Friedwald公式法测定低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的差异

目的：探讨直接法与Friedwald公式法测定低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的差异。方法对该院2015年6-12月门诊方便收集的720份血标本进行血脂检测,包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。根据TG的水平不同,对比分析直接法与Friedwald公式法测定的LDL-C结果,并对血脂水平风险进行评估。结果TG<4.52 mmol/L时,直接法与Friedwald公式法对LDL-C的测定结果差异无统计学意义(P>0.05);TG>4.52 mmol/L时,两种方法对LDL-C的测定结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论Friedwald公式法测定低密度脂蛋白胆固醇适用于TG<4.52 mmol/L的人群,但对于高血脂患者应采用直接法测定LDL-C含量,才能为临床提供可靠的检验数据。     

性激素对血清LDL清除率及脂蛋白组成的影响

采用给予外源性雌激素和切除睾丸的方法,观察性激素对兔血清LDL清除率和血清脂类及脂蛋白组成的影响。结果表明,给予外源性雌激素后,血清LDL清除率提高;血清T-C,(LDL+VLDL)-C,及TG含量降低,而HDL_2-C含量升高。切除睾丸后血清T-C,HDL-C,及HDL_2-C含量升高。提示体内性激素水平的改变可显著影响血清脂类及脂蛋白的代谢。     

血清淀粉样蛋白P与血浆脂蛋白作用机制的研究

目的探讨人血清中淀粉样蛋白P(sAP)与血浆脂蛋白中HDL、VLDL和LDL相互作用机制。方法①Sepharose4B(Pharmacia)亲和层析法提取人血清SAP，DEAE-Sepharose层析纯化。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与标准SAP(Sigma)检测。采用免疫探针生物素化试剂盒(Sigma)以1：10比例接合于生物素氨基己酸-N-羟基一硫琥珀酰亚胺酯。得到生物素一SAP。②VLDL、LDL、HDL用超速离心法分离。③以TMBZ底物试剂盒用固相平板测定法检测SAP与脂蛋白相互结合。结果①生理条件的Ca^2 浓度下，生物素一SAP以剂量依赖方式选择性地与I--IDL、VLDL结合。当SAP浓度分别达到1．5nM和2nM时，SAP与HDL、VLDL的结合达到半饱和，当SAP浓度达到4nM和16nM时，SAP与HDL、VLDL结合达到饱和。②SAP与HDL和VLDL的结合具有Ca^2 依赖性。③EUTA可影响SAP和HDL、VLDL结合。④无论有无Ca^2 和EDTA存在，未发现SAP和LDL间的结合。结论SAP与HDL和VLDL结合而不与LDL结合。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血小板聚集功能的影响

目的　研究内源性高甘油三酯血症 (HTG)患者血浆极低密度脂蛋白 (VL DL )、低密度脂蛋白 (L DL )及高密度脂蛋白 (HDL )对血小板聚集功能的影响。方法　对 2 1例内源性高甘油三酯血症患者与 2 1例正常对照者用一次性密度梯度超速离心法分离血浆 VL DL、L DL及 HDL。测定这三种脂蛋白的 2 34nm吸光度 (A2 34 )、电泳迁移率 (REM)及硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)含量。分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜血浆构成的反应系统中 ,用血小板聚集仪分别测定 ADP诱导的血小板 5 min最大聚集率。结果　内源性 HTG患者血浆 TG含量平均升高 2 .73倍 ,HDL - C下降 1.71倍 ,同时 L PO升高 1.2 2倍 ;HTG组 VL DL、L DL及 HDL的 REM、A2 34 、TBARS含量均较对照组显著增加 (P<0 .0 1) ,表明内源性 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL均发生了氧化修饰生成Ox- VL DL、Ox- L DL及 Ox- HDL。血小板聚集率在分别加入 HTG组患者的 VL DL、L DL及 HDL后均比加入正常组相应脂蛋白明显增加 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。相关分析表明 ,HTG- L DL及 HTG- HDL A2 34 、REM及 TBARS含量与血小板聚集率呈正相关 (P<0 .0 1)。结论　 HTG患者血浆 VL DL、L DL及 HDL发生了氧化修饰 ,并使血小板聚集增加     

Oxidized low density lipoprotein inhibited tissue factor pathway inhibitor mRNA expression in human endothelial cells

ｅｔｈｏｄｓ　ＬｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｎｏｒｍａｌｈｅｐａｒｉｎｉｚｅｄｂｌｏｏｄｂｙｄｅｎｓｉｔｙｇｒａｄｉｅｎｔｕｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎａｎｄｏｘｉｄｉｚｅｄｂｙＣｕＣｌ2 ＴｏｔａｌＲＮＡｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ (ＨＵＶＥＣｓ)ｅｘｐｏｓｅｄｔｏＬＤＬｏｒＯＸ ＬＤＬ ,ｕｓｉｎｇｔｈｅｇｕａｎｉｄｉｎｉｕｍｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅｍｅｔｈｏｄ Ｔｈｅｑｕ…     

家族性高胆固醇血症(FH)致病基因的研究进展

 家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)的临床特征为血总胆固醇升高,尤其是低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-c)升高,沉积于组织,形成皮肤或肌腱黄色瘤,导致动脉粥样硬化甚至早发冠心病。FH的发病机制为LDL受体(LDL receptor,LDLR)或apoB基因突变引起LDL受体途径功能缺陷,主要为常染色体显性遗传疾患,具有基因剂量效应;部分患者为常染色体隐性遗传,机制为LDL受体衔接蛋白1(LDL receptor adaptor protein 1,LDLRAP1)失功能型突变,导致LDL内化活性降低。罕见的人类枯草溶菌素转化酶9 (proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)发生功能型突变也可引起严重的FH表型。PCSK9通过降解LDLR蛋白间接下调LDL受体途径,其失功能突变可致血浆LDL水平下降。因此PCSK9是目前降脂药物的研究热点。     

血清脂蛋白胆固醇电泳法与传统法的比较

目的 :比较电泳法与传统法在测定血清脂蛋白胆固醇中的优缺点。方法 :电泳法用Helena电泳系统测定 4种脂蛋白胆固醇 ,用磷钨酸 镁沉淀法或直接法测定高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C) ,用F 公式计算低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)。结果 :电泳法可清楚地分离 4种脂蛋白区带 ,6 8份正常人标本中 ,仅 6例可见LP(a)区带 ,占 8.82 %。血清HDL C ,LP(a) C ,VLDL C及LDL C参考值分别为 :1.16～ 2 .19,0～ 0 .2 2 ,0 .0 7～ 0 .4 7及 1.86～ 3.4 6mmol·L-1。电泳法与沉淀法测定HDL C ,二者比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但用F 公式计算LDL C ,则二者比较差异有显著性 (P<0 .0 5 )。电泳法与直接法比较 ,无论是HDL C或LDL C的测定均差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :F 公式计算LDL C不适宜临床应用。电泳法一步直接定量测定 4种脂蛋白胆固醇浓度 ,方法简便 ,适宜常规使用