维生素C和芦丁对力竭运动小鼠组织自由基代谢的影响

目的:观察注射维生素C和芦丁后,急性疲劳性游泳运动小鼠机体各组织自由基代谢的变化情况。方法:实验于2004-09/12在泰山医学院基础医学研究所完成,选择雄性小鼠32只,随机分为4组,分别为生理盐水组、芦丁组、维生素C组和维生素C+芦丁组,每组8只。生理盐水组每天注射等量生理盐水,芦丁组注射芦丁5mg/d,维生素C组注射维生素C8mg/d,维生素C+芦丁组每天注射芦丁5mg和维生素C8mg,持续15d。各组小鼠进行池中游泳至力竭,力竭标准:动物不能在水中保持上浮,开始下沉,取出后尾部受刺激逃避呈踉跄步态,身体不能保持平衡,但呼吸心跳存在。麻醉后断头处死,测定小鼠脑、心、肝、肾和骨骼肌中丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性分别采用硫代巴比妥酸比色法和氮蓝四唑光还原法。结果:所有小鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组小鼠运动耐力比较:芦丁组、维生素C组及维生素C+芦丁组小鼠的耐力时间显著长于生理盐水组[(52.51±8.97,50.50±7.23和60.15±9.54,42.10±6.32)min(χ2=18.48～19.11,P<0.01)]。②各组小鼠各组织丙二醛/超氧化物歧化酶比值比较:芦丁组、维生素C组和维生素C+芦丁组小鼠心、肾、肝和肌组织中比值均显著低于生理盐水组(χ2=14.20～16.00,P<0.05),但维生素C+芦丁组的比值显著低于芦丁组和维生素C组(χ2=18.50～20.13,P<0.01)。结论:维生素C和芦丁均可降低丙二醛/超氧化物歧化酶比值,减少力竭运动后因脂质过氧化而产生的自由基,延长机体过度运动的耐力,但两者混合使用效果更好。     

独蒜兰乙酸乙酯萃取物通过内源性线粒体通路诱导白血病K562细胞和HL-60细胞凋亡

目的:探讨独蒜兰乙酸乙酯萃取物对人慢性粒细胞白血病K562细胞和急性髓性白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响以及诱导凋亡的途径。方法:采用XTT法、台盼蓝拒染法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和Western blot法研究不同浓度独蒜兰乙酸乙酯萃取物对上述2种白血病细胞增殖、凋亡、细胞周期和凋亡相关蛋白表达等方面的影响。结果:独蒜兰正丁醇萃取物对K562细胞活力几乎没有抑制作用,而乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞的活力和增殖。乙酸乙酯萃取物对于HL-60细胞作用24 h的半数抑制浓度(IC_(50))为(42.14±2.54)mg/L,对于K562细胞的IC_(50)为(51.28±3.12)mg/L。Annexin V-FITC/PI和DAPI染色结果显示,乙酸乙酯萃取物呈剂量依赖性诱导2种细胞凋亡,且50 mg/L的乙酸乙酯萃取物作用后K562细胞的凋亡率为33.1%,而HL-60细胞的凋亡率为63.1%,说明HL-60细胞对乙酸乙酯萃取物更加敏感,伴有典型的细胞核凋亡形态学改变。PI染色结果显示HL-60细胞和K562细胞都被阻滞于G_2期。Western blot结果显示,随着药物浓度的升高,细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达降低,而促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3和活化的多腺苷二磷酸核糖聚合酶的表达逐渐升高,内源性线粒体凋亡的特征胞浆中细胞色素C和凋亡诱导因子表达也逐渐升高。结论:独蒜兰乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞增殖,并通过触发内源性线粒体凋亡通路诱导这2种细胞凋亡。     

何首乌提取物对人乳腺癌细胞脂肪酸合酶的抑制研究

目的 研究何首乌提取物对人乳腺癌MCF7细胞脂肪酸合酶(fatty acid synthase，FAS)的抑制作用。方法 MTT法测定人乳腺癌MCF7细胞增殖速度，采用超速离心技术部分纯化人乳腺癌MCF7细胞FAS。不同浓度何首乌提取物与FAS相互作用不同时间后，加入底物，用分光光度法观察何首鸟提取物对FAS的抑制作用。结果 何首鸟提取物对人乳腺癌MCF7细胞的增殖有一定的抑制作用。人乳腺癌MCF7细胞FAS被部分纯化，三种浓度何首乌提取物(0．1，0．5，1g／L)与FAS在催化前相互作用0、5和10min，对FAS活性的抑制率分别为24．60％、27．30％、and42．75％(0．1g／L)；43．50％、50．30％、and94．03％(O．5g／L)；98．60％、97．30％ and97．05％(1g／L)。结论 何首乌提取物对人乳腺癌MCF7细胞FAS具有抑制作用；作用强度既依赖于抑制剂浓度，又依赖于抑制剂与酶相互作用时间。     

致肠出血性EH297整合酶基因(int)的克隆与分析

目的克隆并分析致肠出血性埃希氏大肠杆菌0157：H7菌株EH297的整合酶基因。方法采用加接头的步移PCR方法，从溶源性噬菌体φ297的染色体DNA上类似于噬菌体933W的整合酶基因的一个40个核苷酸开始的，进行了克隆、亚克隆、测序和序列分析等分子生物学研究。结果得到了噬菌体(297编码的整合酶基因(int)的完整序列，它的长度是1287bp，编码了428个氨基酸的Int蛋白质。将它们的序列与λ噬菌体的整合酶家族的其它成员进行了比较。发现噬菌体φ297的整合酶基因(int)与噬菌体VT1-Sakai的整合酶基因有79％的相似性，噬菌体φ297的Int蛋白与噬菌体、VT1-Sakai的Int蛋白在氨基酸序列上有82％的相似性。N-末端的氨基酸区域是完全保守的，而中心区和C-末端则显示出高度的变异。结论噬菌体φ297属于入噬菌体或它们的int基因来源于同一基因池。     

银杏叶提取物对人乳腺癌MCF7细胞脂肪酸合酶的抑制作用

目的研究银杏叶提取物对人乳腺癌：MCY7细胞脂肪酸合酶(fatty acid synthase，FAS)的抑制作用。方法MTT法测定人乳腺癌MC177细胞增殖速度，采用超速离心技术部分纯化人乳腺癌MCF7细胞FAS，不同浓度银杏叶提取物与FAS相互作用不同时间后，加入底物，用分光光度法观察银杏叶提取物对FAS的抑制作用。结果银杏叶提取物对人乳腺癌MCF7细胞的增殖有一定的抑制作用。人乳腺癌MCF7细胞。FAS被部分纯化，三种浓度银杏叶提取物(0．1，0．5，1g/L)与FAS在催化前相互作用0、5和10min，对FAS活性的抑制率分别为14．60％、20．30％和32．75％(0．1g/L)；33．50％、40．30％和84．03％(0．5g/L)；90．60％、88．30％和88．05％(g/L)。结论银杏叶提取物对人乳腺癌MCF7细胞FAS具有抑制作用；作用强度既依赖于抑制剂浓度，又依赖于抑制剂与酶相互作用时间。     

一次性和连续性灌服乙醇所致实验动物空间辨别和记忆获得障碍及亚力克的预防效应

目的：观察具有抗氧化作用的亚力克对一次性灌服和连续灌服乙醇所致实验动物空间辨别和记忆获得障碍的预防作用。方法：实验于2004—06／08在泰山医学院基础医学研究所完成。①Morris水迷宫法：取SD大鼠40只，随机分为生理盐水组、乙醇组、亚力克高、中和低剂量组5组，每组8只。生理盐水组和乙醇组腹腔注射等量生理盐水；亚力克高、中和低剂量组分别腹腔注射亚力克[由α-亚麻酸、L-赖氨酸、维生素和维生素C（432：187：18：8）组成11．6，0．8．0．4mL/kg，连续给药11d，在第11天给药前除生理盐水组外其余4组一次性灌服体积分数为0．5的乙醇5mL/kg后立即给药，给药后1h测试逃避潜伏期和目标区逗留的时间比值.②Y型电迷宫法：取昆明种小鼠40只，随机分为生理盐水组、乙醇组、亚力克高，中和低剂量组5组，每组8只.生理盐水组灌服生理盐水；其余4组连续30d灌服体积分数为0．5的乙醇0．06ml/kg：测试小鼠每天的错误次数和反应时间.③避暗法：取昆明种小鼠40只，分组及给药方法同②．测试小鼠的避暗潜伏期，错误次数和受电击时间。结果：40只大鼠和80只小鼠均进入结果分析，无脱落。①亚力克对一次性灌服乙醇所致大鼠空间辨别障碍的预防作用：乙醇组在目标区逗留的时间占总时间的比值显著低于生理盐水组、亚克高、中、低剂量组（0．22&;#177;0．02，0．40&;#177;0．08，0．32&;#177;0．03，036&;#177;0．11，0．31&;#177;0．04）。②亚力克埘连续灌服乙醇所致小鼠空间辨别障碍的治疗作用：亚力克高剂量组的错误次数少于亚力克中、低剂量组和乙醇组[（1．9&;#177;1.3．3．1&;#177;1.2.3．7&;#177;2.0.5．8&;#177;1．7）次]，亚力克高剂量组的反应时间短于亚力克中、低剂量组和乙醇组[（2．7&;#177;1．3，3．7&;#177;1．5,2．6&;#177;2．7，12．8&;#177;4．6）s]。③亚力克对连续灌服乙醇所致小鼠记忆获得障碍的治疗作用：亚力克高剂量组的错误次数少于亚力克低剂量组和乙醇组[（1．7&;#177;1．1，23&;#177;1．5，4．2&;#177;2．2）次]，亚力克高剂量的电击时间短于亚力克中、低剂量组和乙醇组[（1．2&;#177;0．9,1．4&;#177;0．6，1．6&;#177;0．4，3．0&;#177;0．8）s]，结论：①一次性灌服乙醇可明显干扰大鼠的空间学习及记忆再现能力，预先给予亚力克能明显减轻乙醇对此的损害作用：②连续灌服乙醇可造成小鼠空间学习能力下降和避暗作业中的记忆获得障碍，亚力克对记忆障碍有明显改善，且具有量效关系，最高剂量组治疗效果最好．     

食品中铬元素的含量分析

目的：了解常见食品中铬的含量，指导人群合理摄取铬元素，对糖尿病、动脉粥样硬化、冠心病患者的合理膳食提供理论依据。方法：用石墨炉原子吸收分光光度法测定25种食品中铬含量。选用357．9μm波长，采用二步干燥。测定回收率为92．6％--98．1％，相关系数r＝0．9987，回归方程Y＝0．0l19C 0．0766。结果：肉、蛋类中铬含量在102—532μg/kg之间，谷、豆和坚果类铬含量在104．1—355μg/kg之间，蔬菜、水果类铬合量在35．8—214．7μg/kg之间。结论：铬含量以动物性食品最高，谷类食物居中，蔬菜、水果较低。     

血管内皮细胞功能障碍与动脉粥样硬化

<正> 内皮功能障碍(ED)是指血管内皮细胞对非适应性功能状态所作的有限调整,通常是内皮功能特征的改变或功能的部分缺失[1,2]。早期实验发现,去除内皮细胞可使乙酰胆碱(ACh)的血管舒张作用转为收缩效应,说明Ach诱导的舒张血管反应具有内皮依赖性。内皮细胞可以通过合成多种舒张和收缩因子作用于平滑肌,使其舒张或收缩,这些物     

泰山白花丹参干叶片高质量DNA的提取

目的为了从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较了4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。CTAB-freeBuffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和VC防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNAA260/A280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。