疏血通注射液抗栓、溶栓作用机制的研究

目的:探讨疏血通注射液对在体和体外培养的脑组织微血管内皮细胞(brain microvascular endothelialcell,BMEC)分泌组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogeon activator,tPA)的影响。方法:①在体实验中大鼠随机分为3组:假手术组、局灶脑缺血组、疏血通注射液治疗组。治疗5 d后取脑组织标本,用RT-PCR测脑组织tPA mRNA的表达,发色底物法测脑组织tPA的活性;②体外实验:培养鼠脑微血管内皮细胞,分实验组和对照组,试验终点,收集细胞及细胞上清液,用RT-PCR方法检测培养细胞中tPA mRNA的表达,发色底物法测细胞上清液中tPA的活性。结果:疏血通治疗组脑组织和疏血通干预组细胞tPA mRNA的表达及tPA的活性均明显高于对照组。结论:疏血通注射液可促进脑组织及BMEC分泌tPA,增强纤溶活性。     

3种他汀药物调控纤溶活性抑制人血管平滑肌细胞增殖与迁移

 目的 探讨3种常用他汀药物(普伐他汀、辛伐他汀和氟伐他汀)介导纤溶酶原激活物及其抑制剂对体外培养人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法 采用四唑盐(MTT)比色法测定VSMC增殖活性,刮伤实验和改良Transwell chamber装置测定细胞迁移能力;用RT-PCR分析细胞tPA,uPA和PAI-1 mRNA表达;采用发光底物法测定细胞分泌tPA和PAI-1蛋白含量。结果 辛伐他汀和氟伐他汀可通过下调细胞PAI-1 mRNA表达和上调tPA mRNA表达,抑制10％胎牛血清诱导VSMC增殖和迁移,不同他汀药物对纤溶活性的调控时相不尽相同。普伐他汀在指定时间对基因转录活性无影响,随培养时间延长对tPA和PAI-1蛋白分泌伴有轻度增加和抑制。结论　他汀类药物抑制VSMC增殖和迁移可能与非调脂性抗动脉粥样硬化作用机制有关,辛伐他汀和氟伐他汀通过上调tPA mRNA和下调PAI-1 mRNA基因转录活性,而普伐他汀可能与tPA和PAI-1通过翻译后修饰或与辅助因子相互作用而调控纤溶酶及其抑制物活性,进而促进纤溶,抑制细胞增殖和移行。     

2型糖尿病合并脑梗塞患者纤溶酶原激活剂抑制物-1活性变化及临床分析

目的：为探讨2型糖尿病(2DM)合并脑梗塞患者、2DM患者及非糖尿病脑梗塞(脑梗塞)患者的血浆纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)的活性变化及临床分析。方法：对2DM合并脑梗塞、2DM、脑梗塞三组患者用发色底物法测定PAI-1和组织型纤溶酶原激活荆(tPA)活性作对照比较。结果：2DM合并脑梗塞患者血浆PAI-1活性水平显著高于梗塞患者(P＜0．01)，亦高于2DM患者(P＜0．01)；2DM患者与脑梗塞患者血浆PAI-1活性相比较无显著性差异(P＞0．05)。在各组间tPA活性水平无显著性差异。结论：2DM合并脑梗塞患者的纤溶活性低于脑梗塞和2DM患者，说明与PAI-1活性水平增高有关；从中可以指导临床治疗和预防。     

肾乐胶囊对大鼠5/6肾切除肾衰模型作用机理的实验研究

目的 :通过对大鼠 5/6肾切除 (5/6NX)所致肾衰模型的研究 ,探讨中药复方肾乐胶囊治疗慢性肾衰的作用机理。方法 :采用纤维蛋白原平板溶环法 ,检测尿中纤溶酶原激活物PA的活性 ;用半定量法分析残肾组织中组织型纤溶酶原激活物 ,尿激酶型纤溶酶原激活物 /纤溶酶原激活物抑制物 (tPA ,uPA/PAI-1)的染色强度和面积 ;用Northernblot来观察转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达。 结果 :模型对照组大鼠尿PA活性下降 ,肾组织tPA ,uPA表达下降 ;而肾组织中PAI-1和TGF-βmRNA表达增高。肾乐胶囊治疗后 ,尿PA的活性升高 ,肾组织中tPA ,uPA的表达增强 ;而肾组织中PAI-1和TGF-βmRNA的表达却下降。 结论 :肾乐胶囊可以通过调节 5/6NX模型大鼠尿PA的活性 ,肾组织tPA ,uPA/PAI-1,TGF-βmRNA的表达 ,延缓肾小球硬化和间质纤维化病变的进展。     

非酒精性脂肪肝痰瘀证与纤溶状态的关系

目的 探讨非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver,NAFL)痰瘀证与纤溶状态的关系。方法 将符合NAFL诊断的患者辨证分为痰瘀证组18例与非痰瘀证组52例,并设健康人对照组28名,比较各组纤溶酶原(plasminogen,PLG)、组织纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA)、1型纤溶酶原激活物抑制物(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、D-二聚体的变化。结果 NAFL患者t-PA活性明显低于健康人对照组(P<0．01),PLG、PAI-1活性明显高于健康人对照组(P<0．05);与非痰瘀证组比较,痰瘀证组患者t-PA活性明显降低,PLG、PAI-1活性明显升高(P<0．01),而D-二聚体差异无显著性(P>0．05)、结论 NAFL痰瘀证患者纤溶活性明显降低,存在不同程度的微循环障碍或高黏状态,采用化痰散瘀治疗有积极意义。     

丹参酮治疗老年冠心病的疗效及对血脂和血清tPA、PAI-1的影响

目的探讨丹参酮治疗老年冠心病的疗效及对血脂和血清组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平的影响。方法将110例老年冠心病患者采用随机数字表法分为对照组和观察组各55例,对照组行常规西医治疗,观察组在对照组治疗基础上给予丹参酮治疗,治疗21 d后评估治疗效果,检测治疗前后血脂水平及血清tPA、PAI-1水平,统计2组不良反应发生情况。结果观察组治疗总有效率明显高于对照组(P0.05);2组治疗后血清tPA、PAI-1水平以及血脂TG、TC、LDL-C和HDL-C水平均有明显改善(P均0.05),其中观察组各项指标改善效果更明显(P均0.05);2组治疗后中医证候积分均比治疗前有所降低(P均0.05),且观察组降低幅度更显著(P均0.05);观察组不良反应发生率明显低于对照组(P0.05)。结论丹参酮治疗老年冠心病不仅能够有效降低血脂和血清tPA、PAI-1水平,同时可改善患者临床症状,降低不良反应发生率,值得推广应用。     

针刺对急性脑梗死患者血浆t—PA和PAI-1含量的影响

目的观察针剌对急性脑梗死患者血浆组织型纤溶酶原激活物（t—PA）及纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）含量的影响。方法将93例患者随机分为针剌治疗组55例与西药对照组38例，针剌治疗组予以针刺百会、水沟，西药对照组给予川芎嗪注射液及脑复康注射液，检测两组患者治疗前后血浆t—PA、PAI-1含量；另选20例健康体检者作为正常对照组。结果脑梗死患者治疗前血浆t—PA、PAI-1含量显著增高；治疗后两组血浆t—PA、PAI-1含量均呈下降趋势，但针剌治疗组下降更明显，且接近正常值水平。结论针剌能显著降低急性脑梗死患者血浆t—PA、PAI-1含量，调节机体纤溶系统活性。     

急性冠脉综合征患者纤溶活性与脂蛋白（a）的关系探讨

目的通过测定急性冠脉综合征（ACS）患者血浆中组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI～1）抗原含量及脂蛋白（a）[Lp（a）]的水平，探讨纤溶活性与Lp（a）对冠脉血栓形成的影响及相互关系。方法选取54例发病1h～8h以内的ACS患者作为病例组，并据病情分为不稳定型心绞痛（UAP）组及急性心肌梗死（AMI）组；42名健康体检者作为对照组。用ELISA法检测研究对象血浆t—PA、PAI—1抗原含量，用免疫透射比浊法检测Lp（a）的浓度，比较两组中各指标的变化。结果UAP组及AMI组血浆t—PA、PAI-1含量较对照组明显升高（P〈0．05或P〈0．01），t—PA在UAP组与AMI患者之间无统计学意义，而AMI组PAI-1含量较UAP组明显增高。UAP组及AMI组血浆Lp（a）浓度较对照组明显升高，AMI组又较UAP组明显升高。血浆Lp（a）水平与PAI-1含量存在着显著的正相关，而与t—PA含量之间无显著的相关关系。结论冠脉血栓疾病发生时，血浆纤溶活性下降，t—PA、PAI-1抗原含量增加，以PAI-1增加为明显；血浆Lp（a）水平增高。Lp（a）促进PAI-1的分泌，抑制t-PA的分泌，减弱t—PA活性，打破了t—PA与PAI-1的动态平衡。     

心病血瘀证与纤溶系统活性的相关性

目的:从纤溶系统活性探讨心病血瘀证及其不同证型的病理机制。方法:随机选择72例心病血瘀证患者、20例心病非血瘀证患者与20例健康人,采用ELISA法检测血浆组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及抑制物(PAI-1)。结果:①心病血瘀证组的t-PA显著低于健康对照组和心病非血瘀证组(P<0.01),PAI-1、PAI-1/t-PA显著高于健康对照组和心病非血瘀证组(P<0.01)。②心病血瘀证不同证型组的t-PA均较健康对照组显著降低(P<0.01),PAI-1、PAI-1/t-PA均较健康对照组显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论:纤溶系统活性降低是心病血瘀证形成的重要因素。综合分析t-PA、PAI-1、PAI-1/t-PA的水平对心病血瘀证的诊断有一定意义。     

急性脑梗死纤溶系统活性与CRP的临床研究

目的 通过观察急性脑梗死患者血浆t-PA、PAI-1和血清CRP水平变化,探讨CRP与急性脑梗死纤溶系统活性的关系,明确急性脑梗死纤溶系统异常与炎症反应有关. 方法 选择急性脑梗死患者87例,用双抗体夹心固相酶联免疫吸附法测定血浆t-PA和PAI-1含量,用免疫速率比浊法测定血清CRP含量,并以健康者30例为正常对照组.所有数据处理采用统计学软件进行分析. 结果 急性脑梗死患者血浆t-PA、PAI-1及血清CRP水平均明显升高；t-PA/PAI-1比值明显降低. 结论 急性脑梗死纤溶系统活性降低与炎症反应程度升高有一定相关性,血清CRP可反映急性脑梗死纤溶系统活性异常的程度.     

狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理及局部凝血纤溶的相关性分析

目的 研究狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理及局部凝血纤溶的相关因素.方法 采用电镜及免疫组化方法对30例狼疮性肾炎热瘀证与30例狼疮性肾炎非热瘀证肾脏病理分型、肾组织活动指数(AI)及慢性化指数(CI)、肾组织纤维蛋白原相关抗原(FRA)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)和1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)进行对比分析.结果 狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理分型无相关性;热瘀证组肾脏病理的AI显著高于非热瘀证组(P<0.01);热瘀证组肾组织FRA沉积程度明显强于非热瘀证组(P<0.05);热瘀证组tPA、PAI-1阳性强度平均积分显著高于非热瘀证组(P<0.05).结论 狼疮性肾炎热瘀证与肾脏病理活动及肾脏局部高凝和纤溶低下有一定相关性.     

血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1对肥胖相关疾病的影响机制

血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1（plaminogen activator inhibitor-1,PAI-1）是丝氨蛋白酶抑制剂家族成员之一,是组织型和尿激酶型纤溶酶原激活剂的特异性抑制剂。遗传因素、脂肪含量、细胞因子以及肾素-血管紧张素-醛固酮系统等可调控PAI-1的表达,肥胖患者血浆PAI-1水平普遍增高,从而导致纤溶系统失衡,易引发肥胖相关的代谢紊乱及心血管疾病。     

水蛭注射液对小鼠血栓形成及血浆纤溶酶原激活物及抑制物的影响

目的：研究水蛭注射液对小鼠体内血栓形成和血浆纤溶酶原激活物（t-PA)及抑制物（PAI）的影响。方法：给不同组小鼠分别注射不同剂量水蛭注射液，用角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成，发色底物法测定血浆，t-PA及PA1活性，结果：水蛭组与血栓对照组相比，尾部血栓形成长度百分数明显缩短，PA1明显降低（P＜0．05），结论：水蛭注射液具有抗栓作用，其作用机理可能主要与减少血浆PAI的释放有关。     

常通口服液对兔术后肠粘连的预防作用

目的:观察常通口服液对兔术后肠粘连的预防作用.方法:选取36只雄性新西兰白兔随机分为6组(n=6).除正常对照组外,其余各组均制成肠粘连模型.正常对照组及模型对照组予以蒸馏水灌胃(20ml/kg);四磨汤组以10ml/kg灌胃给药;常通口服液低、中、高剂量组分别按2.15、4.30、8.60g/kg剂量灌胃给药.术后第3天兔耳缘静脉取血,测定血浆中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及其抑制因子(PAI-1)活性;术后第9天进行粘连程度肉眼分级.结果:常通口服液能明显减轻肠粘连的程度,增加肠粘连兔血浆中tPA活性,而抑制PAI-1活性.结论:常通口服液能够预防术后肠粘连形成.     

黑地黄丸联合川芎嗪对慢性肾衰竭大鼠模型血浆ET-1、t-PA、PAI-1和主动脉的基质金属蛋白酶MMP-9表达的影响

目的:观察黑地黄丸联合川芎嗪对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠血浆中内皮素-1(endotheline-1,ET-1)、组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)和主动脉基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨黑地黄丸对于CRF并发心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)的治疗机制。方法:将通过5/6肾切除造模成功的64只大鼠随机分为模型组、黑地黄丸组、川芎嗪组、黑地黄丸联合川芎嗪组,另设10只空白组。采用黑地黄丸灌胃联合川芎嗪腹腔注射治疗结束后,酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)测定大鼠血浆中ET-1、t-PA和PAI-1含量,免疫组织化学染色法(Immnohistochemistry,IHC)检测实验大鼠主动脉MMP-9的表达。结果:模型组ET-1、PAI-1以及MMP-9表达较空白组增高(P 0. 05),t-PA降低(P 0. 05),治疗后,单用黑地黄丸或者川芎嗪能够不同程度的降低血浆ET-1、PAI-1和升高t-PA(P 0. 05),川芎嗪能降低MMP-9在主动脉内皮的表达(P 0. 05),联合应用后各项指标均显著改变(P 0. 01),与川芎嗪组对比有统计学意义(P 0. 05)。结论:黑地黄丸联合川芎嗪对CRF动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)有确切疗效,其机制可能与减少内皮素,促进纤溶活性以及降低MMP-9的表达有关。     

不同条件下香烟提取物对血管内皮细胞纤溶平衡的影响

目的研究不同条件下香烟提取物（CSE）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）组织型纤溶酶原激活物（t—PA）和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）含量的影响。方法选用第4代～6代HUVECs，接种于24孔培养板中，分为3组：①对照组；②不同浓度（5％、10％、20％）同一时间点CSE组：6h后收集各组细胞上清液；③同一浓度不同时间点CSE组：5％CSE刺激HUVECs，于不同时间点（4h、6h、8h、12h、24h）分别收集细胞上清液，采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析（ELISA）法测定各组上清液中t—PA和PAI-1的抗原浓度。结果与对照组相比，不同浓度（5％、10％、20％）同一时间点CSE组中，6h后各浓度CSE组PAI-1含量均显著增高（P〈0．05），但各组间差异无统计学意义，10％与20％CSE组t—PA含量变化明显降低，而5%CSE组t—PA含量变化无统计学意义。同一浓度不同时间点CSE组中，5％CSE组PAI-1含量较对照组升高，且呈时间依赖性；t—PA含量变化无统计学意义。结论CSE可直接损伤血管内皮细胞，并抑制其纤溶活性，从而增加血栓痛的发生。     

全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成t-PA、PAI-1的影响

目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原活化物抑制剂（PAI-1）、血小板计数（Pt）的变化。方法将50只健康新西兰白兔随机分成5组：空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组（20mg/kg）、全蝎纯化液中剂量组（10mg/kg）和全蝎纯化液小剂量组（5mg/kg）。耳缘静脉注射药物（空白组、模型组注射同等体积的生理盐水）后,采用H2O2损伤新西兰白兔颈总动脉制备血栓模型,造模2h后,采血并取血栓,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血浆t-PA、PAI-1的含量。结果与空白组比较,模型组t-PA明显降低,PAI-1明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组相比,全蝎纯化液各剂量组能明显抑制PAI-1活性,增加t-PA活性,差异均有统计学意义（P〈0.01）,而各组的血小板计数差异无统计学意义（P〉0.05）。结论全蝎纯化液各剂量组可明显促进血浆t-PA的分泌,抑制血浆PAI-1活性,提示全蝎纯化液抗血栓作用机制可能与其促纤溶作用有关。     

脑梗死患者急性期血浆PAI-1与t-PA比值的变化及临床意义

目的研究脑梗死患者急性期（发病7 d内）血浆纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）与血浆组织型纤溶酶原激活物（t-PA）比值的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测67例脑梗死患者急性期血浆PAI-1t、-PA、计算PAI-1/t-PA（P/t）值,并与50名健康对照组作对照。结果脑梗死患者急性期血浆t-pA活性及PAI-1活性均升高,与正常对照组比较有统计学意义（P〈0.05）,P/t值较正常对照组降低（P〈0.05）。结论脑梗死患者急性期体内纤溶活性相对亢进。在判定体内纤溶活性指标中,P/t值较t-PA、PAI-1稳定可靠。P/t值与纤溶活性呈反比关系。     

生药水蛭对残肾大鼠肾组织纤溶酶原激活物蛋白定位表达的影响

目的:探讨慢性进展性肾小球硬化及小管间质纤维化过程中肾组织中组织型纤溶酶原激活物(tPA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)蛋白表达及生药水蛭对其的影响。方法:以7/8肾切除 SD 大鼠为实验动物模型,予水蛭治疗后分别检测大鼠体重、血压、血尿生化、尿纤溶酶原激活物(PA)活性及残肾组织常规病理,用免疫组化染色定性定量评价残肾 tPA、uPA 蛋白表达。结果:于7/8肾切除后,大鼠肾功能进行性丧失,表现为尿蛋白、血压、血 BuN、SCr 及血脂增高,残肾组织出现肾小球硬化和间质纤维化。免疫组化染色提示肾组织 tPA、uPA 表达下降。经水蛭治疗后,大鼠肾功能改善,血压下降,尿蛋白下降,残肾组织 tPA、uPA 蛋白表达增加。结论:水蛭治疗可通过改善7/8肾切除大鼠 PAs 系统的紊乱而干预肾纤维化病变的进展。     

血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1在年青冠心病患者中的表达

目的 研究血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor type-1,PAI-1）分子在年青冠心病患者中的表达以及与冠心病病情的关系.方法 入选患者按照年龄分为年青组和老年组,检测所有入选患者的PAI-1分子含量,年青组患者病情稳定后一月复查PAI-1含量.结果 年青组患者血清PAI-1为（44.27±2.8） mol/L,老年组PAI-1的血清含量为（39.14±3.60） mol/L,两组含量有统计学意义（P〈0.05）;一月后年青组复查PAI-1的血清含量为（33.85±2.4） mol/L,与发病急性期PAI-1分子含量相比,含量有统计学意义（P〈0.05）.结论 PAI-1是年青患者冠心病的独立预测因素之一,且PAI-1含量的高低与冠心病的时期有明显相关性.对于接受冠心病长期规范治疗的患者,PAI-1的血清含量与冠心病的病情相关性还需要进一步研究.