内毒素对脐静脉内皮细胞分泌功能的影响

目的 探讨内毒素对脐静脉内皮细胞分泌功能的影响。方法 选择体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）为研究对象，分别用内毒素，L－左旋精氨酸和硝基左旋精氨酸进行处理，并检测上清液中内皮素－1（ET－1）和一氧化氮（NO）含量。结果 内毒素使ET－1和NO含量增加；NO则使ET－1的含量降低。结论 内毒素能导致人脐静脉内皮细胞损伤，使ET－1和NO的合成和释放增加；NO则抑制ET－1的合成和释放。     

内毒素对脐静脉内皮细胞分泌功能的影响

目的　探讨内毒素对脐静脉内皮细胞分泌功能的影响。方法　选择体外培养的人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)为研究对象 ,分别用内毒素、L -左旋精氨酸和硝基左旋精氨酸进行处理 ,并检测上清液中内皮素 - 1(ET - 1)和一氧化氮 (NO)含量。结果　内毒素使ET - 1和NO含量增加 ;NO则使ET - 1的含量降低。结论　内毒素能导致人脐静脉内皮细胞损伤 ,使ET - 1和NO的合成和释放增加 ;NO则抑制ET - 1的合成和释放     

内皮素对肝血流量影响的实验研究

选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，随机分为对照组、内皮素１（ＥＴ１）组、ＥＴ１＋硝基左旋精氨酸组和ＥＴ１＋前列环素＋消炎痛组，每组５只。采用氢气清除法观察ＥＴ１对肝血流量的影响以及一氧化氮（ＮＯ）和前列环素（ＰＧＩ２）对ＥＴ１生物学效应的调节作用。结果显示：ＥＴ１能使肝血流量迅速降低，并且持续时间较长；ＮＯ及ＰＧＩ２可部分拮抗ＥＴ１的生物学效应。表明内皮细胞源性血管因子对肝血流量有一定调节作用     

内皮素—1在内毒素灌注大鼠原位肝脏中的作用

应用肝脏原位灌注模型，探讨了内皮素１（ＥＴ１）在内毒素所致肝损伤中的作用。选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只，分为对照组、ＥＴ１组、内毒素组、内毒素＋ＥＴ１抗体组。观察了肝组织中ＥＴ１、一氧化氮（ＮＯ）、前列环素（ＰＧＩ２）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、丙二醛（ＭＤＡ）、三磷酸腺苷（ＡＴＰ）和肝组织学变化。结果显示：内毒素能使肝组织ＥＴ１含量增加；内毒素和ＥＴ１均能使细胞脂质过氧化物形成和酶的漏出，还能使肝细胞浊肿变性；ＥＴ１抗体能部分拮抗内毒素所致的肝损伤。结果表明：ＥＴ１参与了内毒素所致的肝损伤作用。     

梗阻性黄疸兔血浆内毒素和内皮素1含量与血流动力学改变的关系

研究梗阻性黄疸内毒素血症对血管内皮细胞产生内皮素１（ＥＴ－１）的作用及ＥＴ－１与梗阻性黄应时血流动力学改变的关系。方法用肝总管结扎法建立梗阻性黄疸（ＯＪ）兔模型,偶氮显色法定量测定血内毒素含量,特异性放射免疫分析法测定血浆ＥＴ－１,生理记录仪和电磁血流计测定心率（ＨＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、心输出量（ＣＯ）、肝动脉血流量（ＨＡＢＦ）、门静脉血流量（ＰＶＢＦ）、门静脉压力（ＰＶＰ）及内脏血管阻力（ＳＡＲ）。结果ＯＪ组血浆内毒素含量明显高于正常对照（ＮＣ）组;血浆ＥＴ－１低于ＮＣ组。ＯＪ组血浆内毒素与血浆ＥＴ－１含量呈负相关;ＯＪ组血浆ＥＴ－１含量与ＭＡＰ、ＨＡＢＦ、ＰＶＢＦ及ＳＡＲ呈正相关。结论梗阻性黄疽时血浆ＥＴ－１水平降低,内毒素血症不能刺激血管内皮细胞产生ＥＴ－１,血浆ＥＴ－１水平下降在系统血流动力学改变中起一定的作用。     

动脉硬化闭塞症与血管内皮细胞活性因子关系的研究

目的　探讨动脉硬化闭塞症（ＡＳＯ） 与内皮素１（ＥＴ１） 、一氧化氮（ＮＯ） 等血管内皮细胞活性因子的相互关系。方法　选择９６ 例ＡＳＯ 患者，采用密度梯度法检测循环内皮细胞计数（ＣＥＣ），采用放射免疫测定法检测血浆ＥＴ１ 、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６酮前列腺素Ｆ１α（６ＫＰＧＦ１α） ，降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ） 、血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），采用酶联免疫检测细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）、Ｐ选择素（ＰＳ）。采用Ｇｒｉｓｓ 法检测血浆ＮＯ水平。结果　所有患者均存在高ＥＴ１、ＴＸＢ２ 、ＡＴⅡ、粘附分子、ＣＥＣ血症，存在低ＮＯ、ＣＧＲＰ、６ＫＰＧＦ１α血症，且以Ⅲ期病人最明显。结论　ＡＳＯ 的发生发展同血管内皮细胞活性因子密切相关，ＥＴ１、ＮＯ 等血管活性因子的检测有助于ＡＳＯ发病机制的探讨和病情严重程度的判别。     

一氧化氮对伤段脊髓兴奋性氨基酸含量动态变化的影响及其意义

目的：为了探讨一氧化氮（ＮＯ）在继发性脊髓损伤中的作用机制。方法：本实验通过微透析技术及反相高效液相色谱荧光法动态地观测了ＮＯ对急性脊髓压迫伤后伤段脊髓局部兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量动态变化的影响。结果：脊髓伤前３０ｍｉｎ蛛网膜下腔注射左旋精氨酸（ＬＡｒｇ）明显升高了伤段脊髓组织谷氨酸（ＧＬＵ）及天门冬氨酸（ＡＳＰ）的浓度,而蛛网膜下腔注射亚硝基左旋精氨酸甲酯（ＬＮＡＭＥ）则降低了其上升的幅度。结论：急性脊髓损伤早期ＮＯ的产生能促进ＥＡＡ的释放,从而加重继发性脊髓损伤。     

一氧化氮,内皮素在急性坏死性胰腺炎肠道损伤中的作用

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）,内皮素１（ＥＴ１）在急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）肠道损伤中的作用。方法制成犬ＡＮＰ模型。分别于术后第１,２,４,７ｄ测定血浆ＮＯ,ＥＴ１水平和二胺氧化酶（ＤＡＯ）活性,并对肠粘膜超微结构和肠道细菌移位情况进行观察。结果ＡＮＰ组犬血浆ＮＯ和ＥＴ１水平显著高于对照组,均以发病后第１,２ｄ最为明显（Ｐ＜０．０１～Ｐ＜０．０５）;血中细菌移位率为１００％,亦以发病后第１,２ｄ为最高（６／８,５／８）;肠粘膜微绒毛出现破损和部分脱落,面积减少。结论ＮＯ和ＥＴ１是导致ＡＮＰ时肠道损伤的重要因素,抑制ＥＴ１的产生和减少早期ＮＯ的超量释放,可减轻ＡＮＰ对肠道的损伤作用。     

肢体创伤对机体释放内皮素1及断肢血流量的影响

目的观察肢体创伤对内皮细胞合成与释放内皮素１（ＥＴ１）及断肢血流量的影响，探讨肢体创伤后血管痉挛的原因。方法采用放射免疫检测法及激光多普勒血流仪，对１８例患者手术前后的血浆及８０只断肢大鼠股动脉壁ＥＴ１含量进行检测，同时对断肢残端血流量进行观察。结果手术创伤患者术后血浆ＥＴ１浓度明显升高，术后４小时达峰值，约为对照组的３倍；断肢大鼠股动脉壁ＥＴ１含量也明显增高，断肢后２小时达高峰，比对照组增高５３９％，以后逐渐下降；断肢残端的血流量也相应降低，断肢后２小时最低，仅为对照组的２５％，股动脉壁ＥＴ１含量与断肢血流量呈负相关（ｒ＝－０８３）。结论肢体创伤刺激内皮细胞合成和释放ＥＴ１，可能是创伤后血管痉挛的重要原因之一。     

内皮素及NO在严重烧伤早期胃肠粘膜缺血中的作用

目的　采用３０ ％ Ｔ Ｂ Ｓ Ａ 烧伤小型猪模型,系统观察内皮素及一氧化氮（ Ｅ Ｔ／ Ｎ Ｏ） 在胃肠缺血中的作用,并通过应用 Ｎ Ｏ 供体 Ｃ８７３７５４ 对胃肠缺血防治机制进行探讨。方法　小型猪１８只,随机分为对照组（ Ｃ 组） 、烧伤组（ Ｂ 组） 及 Ｎ Ｏ 供体组（ Ｎ 组） 。 Ｃ 组只手术不致伤,其余各组伤后按 Ｐａｒｋｌａｎｄ 公式进行复苏。 Ｎ 组在复苏同时给予 Ｃ８７３７５４（００１２５ ｍｇ·ｋｇ － １ ·ｍｉｎ － １） 。结果　烧伤后 Ｂ 组在肠道血流量下降的同时,门脉血及肠道组织中的 Ｅ Ｔ 含量迅速升高,于伤后１ｈ 达到峰值,伤后７２ｈ 未能恢复到伤前水平;而同时 Ｎ Ｏ 含量呈相反变化,二者呈显著负相关。 Ｎ 组能使肠道血流量在伤后２４ｈ 内恢复较快,同时发现能升高门脉血及肠道组织内 Ｎ Ｏ 含量。 Ｎ Ｏ Ｓｄ Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 染色也发现肠组织内密度明显较 Ｂ 组增加。结论　①胃肠道血流量下降与 Ｅ Ｔ／ Ｎ Ｏ 变化有关。② Ｎ Ｏ 供体能通过释放 Ｎ Ｏ,有效地改善胃肠组织血流灌注,对防治胃肠缺血有积极意义。     

内皮素、NO与自体静脉移植再狭窄的关系

目的　探讨内皮素、 Ｎ Ｏ 同自体静脉移植后狭窄的关系。方法　对２６ 例自体静脉移植后狭窄并进行２ 次手术者以及正常对照组２６ 例,利用放射免疫测定、 Ｇｒｉｓｓ 方法检测血浆内皮素和 Ｎ Ｏ 水平,利用反转录聚合酶链反应检测狭窄血管组织内皮素和一氧化氮合酶（ Ｎ Ｏ Ｓ） 基因表达水平。结果　所有患者均存在高内皮素、低 Ｎ Ｏ 血症,存在狭窄血管组织内皮素基因高表达、 Ｎ Ｏ Ｓ 基因低表达状态。结论　内皮素、 Ｎ Ｏ 同自体静脉移植再狭窄密切相关。     

一氧化氮、内皮素-1在内毒质所致肝脏损伤中的作用机制研究

目的 探讨一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）在内毒素所致肝脏损伤中的作用机制。方法 Waster大鼠40只随机分成对照组，内毒素组、内毒素组、内皮素受体拮抗剂组和左旋精氨酸组，观察各组大鼠血浆NO和ET-1水平，肝脏功能变化，在光镜下观察肝细胞损伤程度，在电镜下观察肝脏超微结构改变。结果 大鼠投予内毒素12h后，血浆NO和ET-1水平明显下升，血浆转氨酶水平增加，肝细胞明显水肿，变性和坏死，肝筛的数量和直径明显减少，左旋精氨酸和内皮素受体损坏抗剂均能明显减轻肝脏功能和结构的损伤，结论 在内毒素所致肝损伤中，NO起保护性作用，而ET-1则起促进作用，二者在肝脏中的作用可能是通过作用于肝筛而引起的。     

休克期切痂对血浆内皮素及NO水平的影响

目的观察烧伤休克期切痂和休克期后切痂对血浆内皮素及一氧化氮水平的影响。方法利用小型猪制成３５％Ⅲ度烧伤动物模型，分为两组，休克期切痂组（Ｓ组）于伤后２４小时切痂，对照组（Ｃ组）于伤后９６小时切痂，分别检测血浆内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ），并计算ＥＴ／ＮＯ。结果两组ＥＴ及ＮＯ均高于伤前，伤后９６小时开始Ｓ组ＥＴ明显低于Ｃ组；而ＮＯ水平Ｓ组明显高于Ｃ组；ＥＴ／ＮＯ亦显示伤后２４小时开始Ｓ组明显低于Ｃ组。结论休克期切痂可减轻内皮细胞损伤，减轻渗出与水肿，减少组织缺氧，改善微循环     

Differential expression of inducible nitric oxide synthase in septic shock

During cardiopulmonary bypass (CPB), the septic patient has markedly decreased peripheral vascular resistance as a consequence of endotoxin release from microorganisms. This decrease in peripheral vascular resistance is the result of endotoxin-induced nitric oxide (NO) produced by inducible nitric oxide synthase (iNOS) and endothelial nitric oxide synthase (eNOS). iNOS and eNOS are responsible for the synthesis of NO because of various stimuli, including the bacterial endotoxin, lipopolysaccharide (LPS). We tested the hypothesis that a differential expression of iNOS among human endothelial cells and murine macrophage is dependent upon exposure to endotoxin and various pro-inflammatory cytokines. Using a human endothelial cell line, ECV-304 and murine macrophage cell line, RAW 264.7, we quantified the expression of iNOS with specific FITC-conjugated antibodies using fluorescence activated cell sorter (FACS) and NO production with a Bioxytech nitric oxide spectrophotometric assay. This in vitro septic model utilized LPS supported with species-specific interferon-gamma, interleukin-1 beta, and tumor necrosis factor-alpha. The cell type were stimulated for 8 hours with combinations of the cytokines mentioned. The FACS data demonstrated a significant stimulus-dependent increase in iNOS expression among the macrophage groups; however, the stimulated endothelial cells showed no significant change in iNOS expression. The nitric oxide production data demonstrated significant increases in NO production among macrophage stimulated groups; whereas, endothelial stimulated groups exhibit no significant change. We conclude that NO secreted during septic shock is the result of activated macrophage, not the endothelium. The clinical relevance is that the more severe the infectious process, the lower the PVR may be during CPB because of increased NO production from activated macrophage.     

手术/创伤后外周静脉血内毒素的研究

目的探讨健康成人和创伤病人外周静脉血内毒素水平及其与创伤的关系。方法采用偶氮显色鲎试验检测５０例健康成人及５１例不同手术／创伤病人外周静脉血的内毒素。结果（１）此法检测内毒素可达微量（１０－２Ｅｕ／ｍｌ,ｎ＝５）,重复性较好（ＣＶ＝２．２９％,ｎ＝５）。（２）本法测得健康成人外周静脉血内毒素＜０．０３３Ｅｕ／ｍｌ,与国际水准一致。（３）病人术后３天内毒素升高（Ｐ＜０．０１）。（４）病人外周静脉血内毒素与创伤程度呈正相关,Ｒ２＝０．６６７。结论本法测定血微量内毒素是可行的。外周静脉内毒素水平随创伤程度增加而增加。     

PI3K-Akt-eNOS信号转导通路在吗啡促人脐静脉内皮细胞一氧化氮合成中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶-内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号转导通路在吗啡对促人脐静脉内皮细胞一氧化氮(NO)合成中的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,实验Ⅰ:人脐静脉内皮细胞随机分为4组,每组6孔:C组和M1～3组,C组不予任何处理;M1～3组加入吗啡,终浓度为1 μmol/L,分别孵育3、6和12 h,随后测定NO含量;实验Ⅱ:人脐静脉内皮细胞随机分为4组,每组6孔:C组和M1～3组,C组不予任何处理;M1～3组加入吗啡,终浓度分别为0.01、1和100 μmol/L,孵育6 h,随后测定NO含量;实验Ⅲ:人脐静脉内皮细胞随机分为5组,每组6孔:C组、M组、MW组、MS组和ML组,C组不予任何处理;M组加入吗啡,终浓度1 μmol/L;MW组先加入wortmannin(PI3K特异性抑制剂),15 min后加入吗啡,终浓度分别为5、1μmol/L;MS组先加入SH-5(Akt特异性抑制剂),15 rain后加入吗啡,终浓度分别为10、1 μmol/L;ML组先加入L-NAME(eNOS特异性抑制剂),15 min后加入吗啡,终浓度分别为0.5、1 μmol/L,各组孵育6 h后,测定NO含量.结果 实验Ⅰ结果 :随吗啡孵育时间延长,促脐静脉内皮细胞NO合成的作用增强(P<0.05);实验Ⅱ结果 :随吗啡浓度升高,促脐静脉内皮细胞NO合成的作用增强(P<0.05);实验Ⅲ结果 :与C组比较,M组人脐静脉内皮细胞NO含量升高(P<0.05),MW组、MS组和ML组差异无统计学意义(P>0.05);与M组比较,MW组、MS组和ML组人脐静脉内皮细胞NO含量降低(P<0.05).结论 吗啡促人脐静脉内皮细胞NO合成呈浓度和时间依赖性,其机制可能与激活PI3K-Akt-eNOS信号转导通路有关.     

内毒素引起阻塞性黄疸大鼠肾功能障碍的机制

目的 探讨阻塞性黄疸(obstructive jaundice,OJ)时内毒素引起肾功能障碍的机制.方法 SD大鼠60只,胆总管结扎后,分5 d(B1),10 d(B2),15 d(B3)三组,每组各10只,同时建立相应对照组(A1,A2,A3),另30只胆总管结扎后分3组(SHUD,LAC,NS),每组各10只,分别用2 ml舒胆合剂、乳果糖液、生理盐水灌胃,连用9 d.观察内毒素、血和肾组织中内皮素(endothelin,ET)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性及肝、肾功能的变化.结果 血内毒素与血、肾组织ET含量,ET/NO比值呈显著正相关(P＜0.05,r=0.630,0.438,0.496,0.453),与肌肝清除率(creatinine clearance,Ccr)和肾皮质血流量(renal cortical blood flow,BCBF)呈显著负相关(P＜0.05,r=-0.600,-0.410).血、肾组织ET/NO比值与Ccr,RCBF呈显著负相关(P＜0.05,r=-0.449,-0.558,-0.626,-0.731).血和肾组织内NO水平与内毒素水平呈负相关(P＜0.05,r=-0.518,-0.441),与Ccr、RCBF呈正相关(P＜0.05,r=0.422,0.496,0.400,0.659).SHUD组与LAC血内毒素、ET水平组明显降低,血和肾组织NO,NOS活性以及Ccr,RCBF较NS组明显升高.结论 OJ时内毒素可通过刺激ET的释放,提高ET/NO比值,使肾内缩血管因子与扩血管因子比例失调而损伤肾功能.     

Effects of p-cresol on the proliferation and cell cycle of human umbilical vein endothelial cells

Objective To investigate the effects of p-cresol on human umbilical vein endothelial cells. Methods The effects of p-cresol on endothelial cell growth, cell cycle, cell morphological change and p21 protein were detected by the CCK-8 assay, flow cytometry assay, inverted microscope and Western blotting. Results P-cresol could inhibit the growth of human umbilical vein endothelial cells in dose- and time-dependent manners (all P＜0.05). The human umbilical vein endothelial cells treated with p-cresol became elongated processes, cloudy cytoplasm, and irregular shapes. The p-cresol stopped human umbilical vein endothelial cells at cell cycle G1 and had no effect on cell apoptosis. The p-cresol could increase protein expression of p21 in a dose dependent manner (P＜0.05). Conclusion P-cresol can increase protein expression of p21, induce cell cycle arrest at G1 stage and inhibit the proliferation of human umbilical vein endothelial cells.