RRM1与非小细胞肺癌的研究进展

肺癌,尤其是非小细胞肺癌是造成癌症患者死亡的重要原因,目前通过分子标志物指导临床个体化化疗是治疗非小细胞肺癌的新趋势。本文综合介绍核苷酸还原酶亚基1(rebonucleotide reduc-tase M 1,RRM1)在非小细胞肺癌的研究现状及前景。     

非小细胞肺癌中Bmi-1表达情况的初步研究

背景与目的B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插人位点-1(B-cell-specific Moloney leukemia virus insertion site-1,Bmi-1)基因决定着细胞的定向分化与增殖,因此在细胞的恶性转化中发挥着重要的作用。本研究的目的是通过研究Bmi-1在非小细胞肺癌中的表达水平,初步分析其与非小细胞肺癌发生发展的可能相关性。方法采用免疫荧光和逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,对25例非小细胞肺癌及其相应癌旁正常肺组织中的Bmi-1进行检测。结果免疫荧光结果显示:Bmi-1在76%(19/25)的肺癌组织中癌细胞胞核部位呈阳性表达,癌旁组织均不表达Bmi-1。RT-PCR结果显示:Bmi-1在肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。结论在非小细胞肺癌中,Bmi-1的表达升高可能与肺癌的发生发展有密切关系。     

KiSS-1、KiSS-1受体GPR54及基质金属蛋白酶-9与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的:研究KiSS-1、KiSS-1受体GPR54及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在非小细胞肺癌组织中的表达及其与非小细胞肺癌侵袭转移的关系,探讨三者在非小细胞肺癌侵袭转移中是否具有相关性。方法:选择98例原发性非小细胞肺癌癌组织及30例癌旁肺组织的标本,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物免疫组化法(S-P法)检测组织中KiSS-1、GPR54及MMP-9的表达情况。结果:KiSS-1在非小细胞肺癌组织中的表达显著低于癌旁肺组织(P<0.01);MMP-9在非小细胞肺癌组织中的表达显著高于癌旁肺组织中的表达(P<0.01)。KiSS-1在有淋巴结转移的非小细胞肺癌中的表达显著低于无淋巴结转移者(P<0.01);MMP-9在有淋巴结转移的非小细胞肺癌组织中的表达显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。KiSS-1与GPR54、MMP-9在肺癌组织中的表达均具有负相关性(P<0.05)。结论:KiSS-1基因表达下调和GPR54、MMP-9蛋白过表达与非小细胞肺癌的侵袭转移密切相关。     

基质金属蛋白酶-1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

的研究基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义. 方法应用免疫组织化学方法和Western blotting检测70例非小细胞肺癌组织中MMP-1蛋白的表达, 并进行图像分析测定电泳条带的吸光度A值. 结果 70例非小细胞肺癌和30例正常肺组织中MMP-1表达阳性的例数分别为33例(47.1%)和7例(23.3%),差别具有显著意义.Ⅲ期肺癌的平均吸光度A值明显高于Ⅰ、Ⅱ期.有淋巴结转移癌的平均吸光度A值明显高于无淋巴结转移的病例,差异具有显著性意义(P<0.05). MMP-1在肺腺癌和鳞癌中的表达无显著性差异(P>0.05). 结论 MMP-1在非小细胞肺癌组织中的表达增多,与非小细胞肺癌分期、淋巴结转移有关.     

SFRP1基因甲基化及其蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的探讨SFRP1基因甲基化及其蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法用免疫组化SP法和甲基化特异性PCR法检测60例非小细胞肺癌组织,21例肺良性疾病肺组织中SFRP1基因甲基化及SFRP1蛋白的表达情况。结果肺癌组织SFRP1基因甲基化阳性高于肺良性疾病肺组织,差异有显著性(P=0.001);SFRP1基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);非小细胞肺癌中SFRP1蛋白阳性率低于肺良性疾病肺组织,差异有显著性(P=0.004);SFRP1蛋白表达与非小细胞肺癌临床分期、细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);SFRP1甲基化和SFRP1蛋白表达缺失存在相关性(P=0.002)。结论 SFRP1基因甲基化可能是导致SFRP1蛋白表达降低的重要机制,进而导致非小细胞肺癌的发生发展。     

ROS1融合基因在非小细胞肺癌诊疗中的进展

近年来,随着分子生物学的快速发展,肺恶性肿瘤的治疗策略发生了巨大变化,既往传统一线化疗方案不再是非小细胞肺癌的首选,而随着基因突变、融合、重排在肺恶性肿瘤发病机制中的进一步阐明,针对晚期非小细胞肺癌精准靶向治疗逐渐被重视.其中,新发现的基因c-ros原癌基因1酪氨酸激酶(ROS1)在非小细胞肺癌的诊疗中具有重要意义,与非小细胞肺癌的发病、复发及预后有着密切联系.现就ROS1基因的生物学特性、与非小细胞肺癌的关系及其在非小细胞肺癌的诊疗新进展做一综述.     

WT1在非小细胞肺癌中的表达及其与肺癌细胞增殖的关系

目的:探讨人非小细胞肺癌及其相应癌旁组织中WT1基因(Wilms' tumor gene 1,WT1)的表达,体外研究其与肺癌细胞增殖的关系.方法:应用实时荧光定量PCR法检测79例非小细胞肺癌组织及其相应癌旁组织中WT1 mRNA的表达情况.构建重组质粒pLV-GFP-WT1,并通过脂质体LipofectAMINE 2000将其瞬时转染至非小细胞肺癌H1299细胞中,应用蛋白质印迹法检测转染后H1299细胞中WT1蛋白的表达,CCK-8 (cell counting kit-8)法检测细胞的增殖情况.结果:非小细胞肺癌组织中WT1 mRNA的表达水平高于相应的癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.01).重组质粒pLV-GFP-WT1成功构建,并将其成功转染至H1299细胞中;转染后的H1299细胞中,WT1蛋白的表达水平上调;在pLV-GFP-WT1转染后24、36和48 h时,过表达WT1的H1299细胞增殖率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:WT1 mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于相应癌旁组织,高表达WT1基因能促进非小细胞肺癌H1299细胞的增殖,提示WT1在非小细胞肺癌中扮演癌基因的角色.     

晚期非小细胞肺癌原发灶和转移灶ROS1融合基因表达差异分析

目的分析ROS1(c-ros oncogene 1,receptor tyrosine kinase)融合基因在晚期非小细胞肺癌原发灶和转移灶中的差异表达。方法选取非小细胞肺癌原发灶162例,其中配对转移灶139例。采用实时荧光定量PCR检测ROS1融合基因的表达,并分析其在晚期非小细胞肺癌原发灶和转移灶中的表达差异。结果晚期非小细胞肺癌原发灶ROS1融合基因表达阳性率4.3%(7/162),配对原发灶ROS1融合基因表达阳性率2.6%(5/139),配对转移灶融合基因表达阳性率2.2%(3/139);原发灶较转移灶ROS1融合基因检出阳性率显著增高,差异具统计学意义(χ~2=13.517,P=0.000);ROS1融合基因阳性表达在原发灶和转移灶一致性好(κ=0.479,P=0.000)。非小细胞肺癌原发灶中ROS1融合基因表达与病理类型存在密切关系(χ~2=5.195,P=0.031),与患者性别、年龄等不存在明显相关性(P>0.05)。非小细胞肺癌配对原发灶以及转移灶中ROS1融合基因表达与患者性别、年龄、吸烟以及病理类型不存在明显相关性(P>0.05)。结论晚期非小细胞肺癌ROS1融合基因的阳性表达在原发灶中与病理类型有关,其在配对原发灶和转移灶中阳性表达一致性较好,可作为检测ROS1融合基因的备选手段。     

ROC曲线评价CEA、CYFRA21-1对非小细胞肺癌的诊断价值

目的:应用ROC曲线评价CEA、CYFRA21-1对局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)诊断的价值。方法:采用电化学发光法测定局部晚期非小细胞肺癌组、良性肺病组、正常对照组血清CEA、CYFRA21-1表达水平。应用ROC曲线对各指标的诊断效能进行分析和评价。结果:局部晚期非小细胞肺癌患者血清CEA和CYFRA21-1的浓度明显高于良性肺病组和健康体检组(P<0.05);局部晚期非小细胞肺癌患者血清CEA和CYFRA21-1的敏感性均明显高于良性肺病组和健康体检组(P<0.05)。二者联合检测的敏感性为74.11%,明显高于单项检测。CEA、CYFRA21-1的ROC曲线下面积分别为0.848、0.878。结论:CEA、CY-FRA21-1对非小细胞肺癌的诊断有一定的临床价值。二者联合可提高检测的敏感性。     

肺癌患者FLK-1、LRP和MDR1的表达与临床研究

目的:探讨血管内皮生长因子受体 (Flk 1),肺耐药蛋白 (LRP)基因以及多药耐药基因 (MDR1)蛋白与肺癌患者临床及病理指标的关系。方法:用免疫组化技术(ABC法)对原发性肺癌组织中三种基因的表达进行检测。结果: 70例肺癌中,非小细胞肺癌MDR1阳性率 49. 2% (29 /59),明显高于小细胞肺癌 (SCLC) 18. 2% (2 /11)(P<0. 05);非小细胞肺癌LRP阳性率 69. 5% (41 /59),明显高于小细胞肺癌 27. 3% (3 /11) (P<0. 05)。腺癌中MDR1与LRP的表达明显高于鳞癌(P<0. 05)。LRP与Flk 1在NSCLCs中共同表达 49. 2% (29 /59),LRP的表达与肺癌的组织学分级相关,MDR1和LRP的表达与肺癌的组织学类型有关,Flk 1与TNM分期相关,均有统计学意义(P<0. 05)。Flk 1 LRP均阳性、FLK 1 LRP MDR1均阳性、中药治疗、复发与患者的生存率有关(P<0. 05)。结论:FLK 1、LRP和MDR1基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对非小细胞肺癌体外生长及侵袭能力和TFPI-2基因mRNA表达的影响

目的 探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干预对非小细胞肺癌(nonsmallcell non cancer, NSCLC)细胞株A549生长增殖及其组织因子途径抑制物2(tissue factor pathwayinhibitor-2,TFPI-2)基因表达的影响,同时探讨5-Aza-CdR能否通过恢复TFPI-2基因表达抑制非小细胞肺癌A549细胞侵袭能力。方法 用不同浓度的5-Aza-CdR处理A549细胞株,MTT法检测药物处理24、48、72 h后的细胞增殖活性,流式细胞仪(fl ow cytometry, FCM)法检测药物处理72 h后细胞周期分布,Real-time PCR技术检测药物处理72h后A549细胞TFPI-2基因mRNA的表达,Transwell小室法测定药物处理24h后A549细胞体外侵袭能力的变化。 结果 MTT检测显示不同浓度5-Aza-CdR处理A549细胞24、48、72h后,细胞的生长受到抑制,且抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性。FCM检测分析显示0、1、5、10 μM 5-Aza-CdR处理A549细胞72 h 后,细胞增殖指数逐渐降低,分别为（30.43±0.99)%、（23.89±0.83)%、（16.19±0.34)%、（6.49±0.55%（P＜0.05）。Real-timePCR检测显示0、1、5、10 μM的5-Aza-CdR处理A549细胞72 h后,相对mRNA表达水平分别为（1±0)、（1.49±0.14)、（1.86±0.09)、（5.80±0.15)（P<0.05）,TFPI-2 基因mRNA表达呈明显的上升趋势,且随着药物浓度增加而增加。Transwell小室法检测显示每一高倍镜下平均穿膜细胞数分别为（316.15±18.7)、（84.15±12.14)、（28.85±7.13)、（14.35±3.33),均明显低于对照细胞（P<0.05）。结论 5-Aza-CdR能通过降低TFPI-2基因的甲基化而恢复其在非小细胞肺癌细胞株A549细胞中的表达,并抑制A549细胞的增殖和侵袭。     

NRP-1过表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3生物学行为的影响

目的 通过上调乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3中NRP-1的表达,观察NRP-1对细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法 构建pcDNA3.1-NRP-1表达载体,脂质体介导NRP-1 表达质粒转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞,用G418筛选出稳定转染的乳腺癌细胞株。利用RTqPCR、Western blot法分别检测NRP-1基因mRNA及其蛋白表达;CCK-8法、AnnexinⅤ-APC/7-AAD法、Transwell小室分别检测转染细胞增殖率、凋亡率及侵袭、迁移能力。结果 成功构建pcDNA3.1- NRP-1表达载体,转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞并筛选稳定表达系。与对照组相比,过表达组细胞的NRP-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高（均P<0.05）;NRP-1过表达组的细胞较对照组增殖率增加、凋亡率降低、侵袭及迁移能力增强（均P<0.05)。结论 NRP-1在乳腺癌发展、浸润、转移中起着一定的作用,它可促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。     

甘草酸通过调控miR-142/ZEB1 分子轴影响非小细胞肺癌HCC827 和A549 细胞的恶性生物学行为

目的：探讨甘草酸（GA）通过调控miR-142/锌指E 盒结合的同源盒蛋白1（ZEB1）分子轴对非小细胞肺癌（NSCLC）HCC827 和A549 细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法：HCC827 和A549 细胞培养和转染完成后,分成4 组：NC组（未经转染+3mmol/L GA）、miR-142 inhibitor 组（敲降miR-142+3 mmol/L GA）、pcDNA3.1-ZEB1 组（过表达ZEB1+3 mmol/L GA）和pcDNA3.1-ZEB1+miR-142 mimic 组（过表达ZEB1 及miR-142+3 mmol/L GA）。采用qPCR检测不同浓度GA处理后HCC827 和A549 细胞中miR-142 的表达水平,WB实验检测HCC827 和A549 细胞中ZEB1 蛋白的表达水平,采用MTT和Transwell 检测HCC827 和A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力,采用双荧光素酶报告基因检测miR-142 与ZEB1 的靶向关系。结果：GA显著抑制HCC827 和A549 细胞的增殖、侵袭和迁移,且显著上调miR-142 的表达水平（P<0.05 或P<0.01）;miR-142 通过靶向结合ZEB1 的3''-UTR 区域下调ZEB1 的表达水平（P<0.05 或P<0.01）;进一步实验证实,GA通过上调miR-142 抑制ZEB1 的表达水平,进而抑制HCC827 和A549 细胞增殖、侵袭和迁移（P<0.05 或P<0.01）。结论：GA能够抑制NSCLC HCC827 和A549 细胞增殖、侵袭和迁移,其机制为GA通过上调miR-142对ZEB1 的抑制作用,从而抑制HCC827和A549 细胞的恶性生物学行为。     

Linc00704对结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨Linc00704（long non-coding RNA 00704）对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 RT-qPCR检测配对结直肠癌及癌旁正常组织、结直肠癌细胞和正常永生化人结肠上皮细胞系FHC中Linc00704 mRNA的表达。反义寡核苷酸（antisenseoligonucleotide,ASO）转染结直肠癌细胞构建Linc00704低表达细胞模型,慢病毒感染结直肠癌细胞构建Linc00704过表达细胞模型,RT-qPCR检测转染效率;CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力。结果 相比癌旁组织,Linc00704在结直肠癌组织中表达降低（t=4.103,P<0.001）。8种结直肠癌细胞系中有6种细胞系（RKO、HCT15、NCI-H716、SW480、SW1463、SW48）Linc00704的表达较FHC细胞低（F=44.750,P<0.001）。沉默 Linc00704表达可促进Caco-2、DLD-1细胞迁移和侵袭能力（均P<0.01）,但对增殖无明显影响（均P>0.05）。过表达Linc00704可抑制RKO、HCT15细胞迁移和侵袭能力（均P＜0.001）,但对增殖无明显影响（均P>0.05）。结论 Linc00704在结直肠癌组织中呈低表达,过表达Linc00704可抑制结直肠癌细胞迁移和侵袭能力。     

沉默ERK5对胃癌SGC-7901、BGC-823细胞生物学功能的影响

目的 探讨沉默细胞外信号调节激酶5（extracellular signal regulated kinase 5,ERK5）对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823生物学功能的影响。方法 实时荧光定量PCR法（qRT-PCR）检测人胃癌细胞株和人胃黏膜上皮细胞株ERK5 mRNA的表达水平。应用短发荚RNA（shRNA）干扰技术沉默胃癌细胞SGC-7901、BGC-823中ERK5的表达。CCK-8法检测ERK5沉默后胃癌细胞的生长能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,Transwell 实验检测细胞侵袭和迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布。结果 与胃黏膜上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、AGS、HGC-27中ERK5 mRNA均呈高表达,相对表达量分别为2.696±0.501、1.865±0.185、1.793±0.137和1.530±0.093（P<0.05）。ERK5-shRNA有效沉默胃癌细胞SGC-7901、BGC-823中ERK5的表达水平,沉默效率分别为（74.4±1.5）%和（69.1±3.9）%,差异有统计学意义（P<0.05）。沉默 ERK5的表达能有效抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力（P<0.05）,而促进胃癌细胞凋亡（P<0.05）,并诱导细胞周期阻滞于G0/G1期。结论 沉默ERK5可显著抑制胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的生长侵袭,促进细胞凋亡,ERK5可能是胃癌治疗的潜在靶点。     

miR-211通过靶向下调SATB2表达促进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移与侵袭

目的:探讨miR-211及SATB2基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达情况,探究miR-211在NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用及其相关机制。方法:双荧光素酶报告系统验证miR-211和SATB2的相互作用机制;qRT-PCR检测miR-211和SATB2在NSCLC组织及癌旁组织中的表达情况;向A549细胞中转染miR-211 mimics、miR-211 inhibitor和pcDNA3.1-SATB2,检验转染效率及转染后A549细胞中SATB2 mRNA和蛋白表达水平;采用CCK-8实验和Transwell小室分别检测miR-211和SATB2表达变化对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:双荧光素酶报告系统结果提示SATB2 3' UTR是miR-211直接结合的靶位点。NSCLC组织中miR-211表达上调,SATB2表达下调,两者表达呈线性负相关(P＜0.05)。转染miR-211 mimics显著下调A549细胞中SATB2 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05);转染miR-211 inhibitor和pcDNA3.1-SATB2使A549细胞中SATB2 mRNA和蛋白的表达水平增高(P＜0.05)。CCK-8实验显示,相较于对照组,miR-211过表达组的A549细胞增殖率显著增加(P＜0.05),miR-211抑制组和SATB2过表达组的A549细胞增殖能力下降(P＜0.05)。Transwell小室实验结果显示,与对照组相比,miR-211抑制组和SATB2过表达组的A549细胞迁移和侵袭能力明显降低(P＜0.05)。在miR-211过表达组共转染SATB2过表达,使miR-211介导的对A549细胞增殖、迁移及侵袭的促进作用受到抑制。结论:下调miR-211的表达可以增加NSCLC细胞中SATB2转录及转录后表达水平,从而抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

LncRNA-p21调控Notch信号通路对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨LncRNA-p21调控Notch信号通路对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 pcDNA-lincRNA-p21、空载质粒pcDNA转染A549细胞设为过表达组和空载组;稳定转染过表达组加入Notch信号通路特异性激活剂Jagged1蛋白,设为Notch激活剂组;不作处理细胞为对照组。MTT法、划痕实验和Transwell小室实验检测各组细胞增殖、迁移和侵袭情况。RT-qPCR及Western blot法检测各组Notch1、HES-1、NICD、E-cadherin、Vimentin的mRNA和蛋白表达。结果 过表达组培养24、48和72 h MTT实验A值均低于对照组、空载组和Notch激活剂组,Notch激活剂组低于对照组和空载组（P<0.05）;过表达组48 h细胞迁移率和穿膜细胞数及Notch1、HES-1、NICD、Vimentin mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组、空载组和Notch激活剂组,Notch激活剂组低于对照组和空载组（P<0.05）;过表达组E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和Notch激活剂组,Notch激活剂组高于空载组和对照组（P<0.05）。结论 LncRNA-p21基因过表达可抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭,其调控机制可能与抑制Notch信号通路、阻断A549细胞上皮间质转化有关。     

隐丹参酮通过抑制帽子依赖的翻译促进人肺癌细胞A549的凋亡

目的 探索隐丹参酮对人肺癌细胞A549中帽子依赖翻译的影响及帽子依赖翻译在隐丹参酮促A549细胞凋亡中的作用。方法 免疫印迹实验检测隐丹参酮对A549细胞中mTOR及4EBP1磷酸化的影响,随后通过m7GTP pull down实验检测隐丹参酮对A549细胞中eIF4F蛋白复合物形成的影响,最终通过免疫印迹实验、Annexin V和CCK8法检测敲低4EBP1表达前后隐丹参酮对A549细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达、细胞凋亡和存活的影响。结果 隐丹参酮以剂量依赖的方式抑制A549细胞中mTOR及4EBP1的磷酸化、eIF4F蛋白复合物的形成和Bcl-2蛋白的表达。细胞凋亡分析发现,对照组中,隐丹参酮显著地诱导了A549细胞的凋亡[（4.68±0.77）% vs. （31.1±4.1）%, P<0.05],但敲低4EBP1的表达显著抑制了隐丹参酮的促凋亡作用[（31.1±4.1）% vs.（8.85±1.2）%, P<0.05]。CCK8法检测结果发现,隐丹参酮显著抑制了A549细胞的存活[（1±0.09）% vs.（0.43±0.05）%, P<0.05],但敲低4EBP1的表达拮抗了EMD638683的抑存活作用[（0.43±0.05）vs.（0.87±0.06）, P<0.05]。结论 隐丹参酮通过抑制mTOR激酶的活性抑制4EBP1磷酸化,从而抑制A549细胞中帽子依赖的翻译,进而抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达诱发人肺癌细胞A549的凋亡。     

miR-125a-5p通过靶向APAF1 增强非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药性

目的：探讨miR-125a-5p 在诱导非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）细胞吉非替尼（gefitinib，Gef）耐药中的作用及其机制。方法：选用人NSCLC 耐药细胞株A549/GR 和NSCLC细胞株A549，将miR-125a-5p mimic、miR-125a-5p inhibitor、pcDNA3.1-APAF1、空载体pcDNA3.1 转染至A549/GR细胞。用qPCR检测细胞中miR-125a-5p 的表达水平，用MTT法、Transwell 小室法和流式细胞术检测Gef 对细胞增殖、迁移和凋亡的影响。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-125a-5p 与细胞凋亡蛋白酶活化因子1（apoptotic peptidase activating factor 1，APAF1）的靶向关系，用Western blotting检测A549/GR细胞中APAF1蛋白水平，用比色法测定细胞中caspase-3 及caspase-9 表达水平。结果：A549/GR 细胞中miR-125a-5p 表达水平显著高于A549 细胞（P<0.01）。敲降miR-125a-5p 显著增强Gef 对A549/GR细胞增殖、迁移的抑制作用（均P<0.05），并促进细胞凋亡（P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实miR-125a-5p 靶向APAF1，并负调控其表达。进一步实验显示，miR-125a-5p 通过靶向下调APAF1 缓解Gef 对A549/G 细胞增殖、迁移的抑制作用及凋亡的促进作用（均P<0.05），减弱Gef引起的凋亡相关蛋白caspase-3及caspase-9表达的上调（均P<0.05）。结论：miR-125a-5p 促进NSCLC细胞Gef 耐药，其机制是通过靶向APAF1 而促进细胞的增殖、迁移并抑制凋亡。