马鞭草总黄酮对HepG-2细胞增殖及侵袭力影响

目的探讨马鞭草总黄酮(TFV)对肝癌HepG-2细胞增殖和侵袭力的影响。方法实验设对照组、TFV 50、100、200 mg/L组,噻唑蓝法检测人肝癌HepG-2细胞增殖率,Hoechest 33342染色检测HepG-2细胞凋亡情况,Transwell法检测HepG-2细胞侵袭力变化,ELISA法测定HepG-2细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果各剂量TFV均能明显抑制HepG-2细胞生长,呈现剂量依赖性(P0.05);与对照组比较,TFV 50、100、200 mg/L组HepG-2细胞凋亡率[分别为(10.31±0.51)%、(16.02±0.63)%、(35.05±1.12)%]明显增加,透膜细胞数[分别为(119.2±17.1)、(98.5±13.5)、(54.8±6.4)个]明显下降,差异均有统计学意义(P0.05);与对照组比较,TFV 50、100、200 mg/L组HepG-2细胞MMP-9和VEGF表达水平[分别为(7.81±0.48)、(6.28±0.41)(3.08±0.35)和(0.87±0.07)、(0.63±0.04)、(0.45±0.06)]明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论马鞭草总黄酮可明显抑制人肝癌HepG-2细胞增殖、降低HepG-2细胞侵袭力,其机制可能与下调HepG-2细胞内MMP-9和VEGF表达水平有关。     

穿心莲内酯诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其机制

目的:明确穿心莲内酯诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其机制.方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞株,经穿心莲内酯处理后MTS法检测细胞的增殖情况,荧光显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡水平变化,蛋白印迹(Western blot)方法检测内质网应激相关蛋白CHOP、凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达变化.结果:穿心莲内酯可以剂量依赖地抑制HeLa细胞的增殖(P＜0.05),引起细胞凋亡相关的形态学变化,诱导细胞凋亡(P＜0.05),引起CHOP蛋白的表达上调,活化Caspase-3和Caspase-9蛋白.结论:穿心莲内酯可以通过内质网应激途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡.     

裙带菜多糖诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的研究

目的:检测裙带菜多糖(UPPS)对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,并探讨其诱导细胞凋亡和抗肿瘤作用的关系。方法:采用MTT法、流式细胞术检测UPPS对HepG-2细胞生长的抑制作用和诱导细胞凋亡的作用;采用免疫细胞化学染色,观察Bax和Bcl-2表达水平的变化。结果:UPPS能抑制HepG-2细胞增殖,明显高于对照组(P<0.01)。诱导细胞凋亡作用发生在UPPS处理24～48h;UPPS处理HepG-2细胞后,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达下调。结论:UPPS对HepG-2的抑制作用是通过诱导细胞凋亡实现的,可能与Bcl-2和Bax表达水平的变化有关。     

原花青素对宫颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响

目的 探讨原花青素对官颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响.方法 将按照不同终浓度原花青素(0,37.5μmol/L,75.0 μmol/L,150.0μmol/L,300.0μmo/L和600.0 μmol/L)处理宫颈癌HeLa细胞,分别纳入对照组(空白对照),37.5μmol/L PC组,75.0μmol/L PC组,150.0μmol/L PC组,300.0 μmol/L PC组和600.0 μmol/L PC组.继续培养24 h,收集细胞进行实验.采用RT-PCR检测Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA表达变化.采取Western blot检测caspase-3和survivin蛋白表达的变化.采用比色法检测caspase-3相对活性.结果 随着原花青索浓度增加,Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平逐渐增加,而Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平逐渐减少;随着处理官颈癌HeLa细胞原花青素浓度升高,caspase-3相对活性逐渐增加,且差异有显著意义(P＜0.05),在原花青素为600.0/μmol/L 时,活性最大.结论 原花青素可剂量依赖性地增加Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平及caspase-3活性,并且可剂量依赖性减少Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平.     

石蒜碱诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡机制研究

目的 探讨石蒜碱诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡及机制。方法 不同浓度的石蒜碱处理体外结肠癌HT-29 细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪和Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;Real time PCR实验检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA水平;Western blot方法检测Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的水平。结果 48h时石蒜碱对HT-29 细胞IC50为8.878μmol/L;与对照组比较,1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L石蒜碱能诱导细胞凋亡(P<0.05),上调Caspase-3、Bax的mRNA和Caspase-3、Bax蛋白水平,下调Bcl-2的mRNA和Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 石蒜碱能通过调节Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达水平,抑制结肠癌HT-29 细胞生长,诱导细胞凋亡,具有明显的体内抗肿瘤作用。     

蛇葡萄素对大肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响

目的研究蛇葡萄素在体外对人大肠癌细胞株SW480增殖及凋亡的影响。方法采用不同浓度的蛇葡萄素处理SW480细胞后,利用MTT法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,Western-blot检测Bcl-2蛋白水平。结果不同浓度的蛇葡萄素均能抑制SW480的细胞的增殖,低浓度与高、中浓度组对细胞增殖抑制情况有显著性差异(p<0.05),而中、高浓度组间无显著性差异(p>0.05)。低、中、高浓度蛇葡萄素均能有效诱导SW480细胞凋亡,低浓度与高、中浓度组对细胞诱导效果有显著性差异(p<0.05),而中、高浓度组间无显著性差异(p>0.05),Western-blot显示Bcl-xL的表达显著下调(p<0.05);Bax、Bid、Caspase-3、p-Capase-9及Caspase-9的表达显著上调(p<0.05)。结论蛇葡萄素能抑制结肠癌SW480细胞增殖,诱导其凋亡,其对凋亡的诱导作用主要是通过Bcl-2家族蛋白实现的。     

土荆芥种子总黄酮提取物通过诱导细胞凋亡、自噬和周期阻滞抑制人肝癌SMCC-7721细胞增殖

目的探究土荆芥种子总黄酮提取物对肝癌细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用AO/EB染色法观察细胞的凋亡情况;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;电镜观察细胞的亚显微结构;利用高通量测序技术分析细胞转录组的变化,Western blotting检测自噬和凋亡相关蛋白;线粒体膜电位探针试剂盒检测线粒体膜电位的的变化;活性氧(ROS)测定试剂盒检测活性氧的水平。结果土荆芥种子总黄酮提取物以剂量依赖性方式抑制SMCC-7721细胞的增殖(t=44.014,P0.05),并使细胞周期停滞在G2期(t=77.071,P0.01)。电子显微镜观察到细胞核膜皱缩,出现核碎裂,核内染色质聚集,线粒体肿胀、嵴断裂,细胞内出现许多自噬体和自噬溶酶体。转录组测序后,进行DEG富集分析,显示细胞凋亡相关基因Caspases-3、Caspases-4表达水平上调,Caspases-9的表达水平下调,细胞周期蛋白P21、CDK、Cyclin明显上调(P0.01);GO分析主要富集在自噬反应生物学过程;KEGG分析主要富集在自噬、凋亡、细胞衰老和铁死亡信号通路。Western blotting结果表明SMMC-7721细胞中随着土荆芥种子总黄酮浓度的上升凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9和Bad蛋白的表达均上调,Bcl-2蛋白表达下调均具有统计学差异(t=7.624,P0.01;t=32.071,P0.01;t=9.383,P0.01;t=11.832,P0.01);自噬相关蛋白AMPK、Beclin-1蛋白的表达上调,LC3-I向LC3-II的转化量也逐渐增加,而mTOR蛋白的表达下调(t=9.280,P0.01;t=4.577,P0.05;t=17.007,P0.01;t=7.96,P0.01)。细胞内线粒体膜电位降低(t=20.585,P0.05)。ROS含量上升(F=14.925,P0.01)。结论土荆芥种子总黄酮提取物通过诱导细胞凋亡、自噬和周期阻滞抑制人肝癌SMCC-7721细胞增殖。     

下调ZEB2对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的分析下调E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法用ZEB2 siRNA慢病毒和siRNA对照慢病毒感染乳腺癌细胞,应用real-time PCR和Western blot法测定ZEB2水平,应用CCK8法检测细胞增殖活性,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况,应用Western blot检测细胞中糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、钙激活中性蛋白酶2(Calpain 2)及剪切型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平。结果对照组和siRNA对照组ZEB2 mRNA和蛋白水平,24、48、72及96 h的OD值比较差异均无统计学意义(均P0.05)。ZEB2 siRNA组ZEB2 mRNA和蛋白水平,24、48、72及96 h的OD值均显著低于对照组(均P0.05)。对照组和siRNA对照组乳腺癌细胞凋亡率,乳腺癌细胞中GRP78、CHOP、Calpain 2及Cleaved Caspase-3蛋白水平比较差异均无统计学意义(均P0.05),ZEB2 siRNA组乳腺癌细胞凋亡率,乳腺癌细胞中GRP78、CHOP、Calpain 2及Cleaved Caspase-3蛋白水平均显著高于对照组(均P0.05)。结论下调ZEB2可以通过内质网途径诱导乳腺癌细胞凋亡,抑制乳腺癌细胞的增殖活性,为ZEB2治疗乳腺癌的临床应用提供了依据,为研究ZEB2在乳腺癌发生中的作用机制奠定了基础。     

硒甲基硒代半胱氨酸联合紫杉醇通过内质网应激诱导乳腺癌细胞凋亡的分子机制

目的探讨硒甲基硒代半胱氨酸(Se-MSC)联合紫杉醇通过内质网应激诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期;Western blot法检测蛋白表达水平,实时qRT-PCR法检测mRNA的表达水平。SPSS 19.0软件进行统计分析。结果MTT法显示Se-MSC和紫杉醇抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖;Se-MSC 50μmol/L和紫杉醇10nmol/L作用24h对HUVECs无抑制作用,但对MDA-MB-231细胞具有抑制作用;两种药物联合效果较单独使用增强,Se-MSC联合紫杉醇将MDA-MB-231细胞抑制于G1期(P<0.05)。Se-MSC和紫杉醇联合刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231可上调Bax、活化Caspase-9和Caspase-3表达,下调Bcl-2、前体caspase-3表达和Bcl-2/Bax比值(P<0.05),并激活内质网应激,上调GRP78、Caspase-4和CHOP的mRNA表达。结论Se-MSC联合紫杉醇通过抑制MDA-MB-231细胞增殖,上调Bax、Caspase-9和Caspase-3表达,下调Bcl-2、Pro caspase-3并激活内质网应激,可推测Se-MSC联合紫杉醇诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,但需要进一步验证。     

蛇床子素体外对人肝癌细胞的杀伤效应及机制

目的探讨蛇床子素体外对人肝癌细胞的杀伤效应及机制。方法将人肝癌细胞系Hep G2和Huh7用蛇床子素治疗后,采用MTT法检测蛇床子素对这2种肝癌细胞系的抑制率,采用流式细胞术检测蛇床子素对Hep G2细胞凋亡的影响,采用Western blot法检测蛇床子素对Hep G2细胞Cleaved caspase-3、Bcl-2和Bax的表达。结果 MTT试验结果表明,不同浓度的蛇床子素均能抑制Hep G2细胞的细胞活力;流式细胞实验结果表明,高、低剂量的蛇床子素均能诱导Hep G2细胞发生凋亡,且高、低剂量蛇床子素组与对照组相比差异均有统计学意义(P0.05);与相同剂量蛇床子素组比较,z VAD-fmk可有效抑制蛇床子素对Hep G2细胞的凋亡诱导效应,差异有统计学意义(P0.05);蛇床子素能显著降低Hep G2细胞Bcl-2的表达水平,差异有统计学意义(P0.05),但对Bax表达无影响。结论蛇床子素诱导肝癌细胞进入Cleaved caspase-3依赖的凋亡过程,其机制可能为蛇床子素可显著降低Bcl-2表达,从而降低Bcl-2/Bax比例。     

LL-37诱导人鼻黏膜上皮细胞凋亡的潜在机制研究

目的 研究抗菌肽LL-37对人鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响,并探讨其潜在的作用机制。 方法 体外培养人鼻黏膜上皮细胞,用不同浓度的LL-37处理细胞后,CCK-8法鼻黏膜上皮细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved caspase-9)和Bax蛋白表达水平,ELISA法检测细胞培养上清中细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)的分泌量。 结果 与0 μg/ml组细胞比,添加LL-37能够抑制鼻黏膜上皮细胞增殖,且呈浓度依赖性,诱导鼻黏膜上皮细胞发生凋亡,上调鼻黏膜上皮细胞中cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白的表达,有效降低鼻黏膜上皮细胞中TNF-α、IL-6、IL-8的分泌,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 LL-37能够在体外抑制鼻黏膜上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,其可能的作用机制与上调cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白水平,促进细胞中TNF-α、IL-6、IL-8的分泌有关。     

L-硒-甲基硒代半胱氨酸和亚硒酸钠对大肠癌Lovo细胞生长及凋亡的影响

目的通过有机硒—L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methylselenocysteine,L-SeMSC)和无机硒—亚硒酸钠(sodium selenite,SS)对大肠癌Lovo细胞的作用,研究不同硒对Lovo细胞活力、生长及凋亡相关蛋白的影响。方法将不同硒与Lovo细胞作用24h后,MTT法测定细胞活力,Western blot测定细胞生长相关蛋白CDK2、CDK4、CyclinD1及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9蛋白的表达量。结果两种硒均能抑制Lovo细胞活力,且相同浓度L-SeMSC与SS相比,对细胞活力抑制作用更强(P0.05);两种硒均能降低CDK4及CyclinD1蛋白表达,且L-SeSMC能降低CDK2表达,但0.2mg/LSS却提高CKD2表达;两种硒均能提升Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9的表达,相同浓度(0.1mg/L与0.2mg/L)L-SeMSC与SS相比,对Caspase-3和Caspase-8提升作用更显著(P0.05)。结论与SS相比,L-SeMSC对Lovo细胞具有更强的活性抑制作用和促凋亡作用。     

丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的：探讨丹参酮ⅡA对肝癌细胞中凋亡抑制蛋白XIAP的影响。方法：通过MTT实验、流式细胞术、细胞形态观察检测丹参酮ⅡA对细胞增殖和凋亡的影响,通过蛋白免疫印迹的方法检测丹参酮ⅡA对细胞中凋亡抑制蛋白XIAP、凋亡蛋白caspase-3以及PARP蛋白的影响。结果：MTT、细胞形态结果显示丹参酮ⅡA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用成时间和剂量依赖性,免疫印迹结果显示,0.5μg/mL丹参酮ⅡA作用肝癌细胞24 h后,caspase-3前体、凋亡抑制蛋白XIAP表达明显下调,活化的caspase-3、剪切形式的PARP含量显著增加。结论：丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP,活化caspase-3,促进PARP剪切诱导肝癌细胞凋亡。     

内皮抑素对异位子宫内膜细胞的作用及机制

目的探讨内皮抑素诱导人异位子宫内膜细胞凋亡的效果及作用机制。方法选取2014年2-12月湖北省人民医院妇产科收治的子宫内膜异位症患者共18例,收集异位子宫内膜标本进行原代分离和培养,分别用10、50和100μmol/L的内皮抑素处理作为实验组,等体积磷酸盐缓冲液(PBS)处理作为对照组。采用流氏细胞术检测细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的变化;采用蛋白印记技术检测细胞色素C及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、Caspase-8、Caspase-9的表达水平。结果内皮抑素体外能够诱导人腺上皮细胞和间质细胞发生凋亡,且呈明显的药物浓度依赖性,100μmol/L的内皮抑素作用48 h后,凋亡率分别为24.89%及29.23%。内皮抑素诱导胞质中细胞色素C、Caspase-9、Caspase-3、Caspase-8表达上调,线粒体跨膜电位崩溃。结论内皮抑素能诱导异位子宫内膜细胞发生凋亡,其机制可能与上调细胞色素C基因的表达,激活前体Caspase-9(Pro Caspase-9)、Pro Caspase-3、Pro Caspase-8,最终经线粒体信号转导途径诱导细胞凋亡有关。     

曲古抑菌素A阻断Stat3信号通路诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的本实验研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对前列腺癌细胞DU145的抑制作用及其对信号传导与转录激活因子3(Stat3)信号通路的影响。方法采用不同浓度的TSA处理DU145不同时间后,四氮甲基唑蓝比色法测定TSA对细胞活力的抑制效应;流式细胞仪分析细胞周期的改变;蛋白印迹实验检测细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase)家族的Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)及Stat3信号蛋白活性(phospho-Stat3)的变化。结果 TSA时间和剂量依赖性地抑制DU145细胞的增殖,TSA处理细胞24 h和48 h后,细胞生存率分别是85.7%和68.7%;细胞经TSA处理后,细胞形态和细胞周期均发生明显的变化,细胞周期被阻断在G0/G1期,其细胞百分比从55.6%增加到68.5%;Western blot检测结果显示,TSA作用DU145细胞后,Stat3信号蛋白的磷酸化水平下降,同时IL-6对Stat3的刺激诱导作用也被TSA所阻断;Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、PARP等凋亡蛋白被TSA诱导活化,并发生显著剪切。结论 TSA能够通过抑制Stat3信号通路的活性来诱导DU145细胞凋亡。     

左卡尼汀对过氧化氢诱导血管内皮细胞氧化应激损伤的影响

目的研究左卡尼汀(L-Ca)对过氧化氢(H_2O_2)诱导人脐静脉内皮(EA.hy926)细胞氧化应激损伤的影响,为探讨L-Ca的心血管保护作用提供理论和实验依据。方法采用750μmol/L H_2O_2作用12 h建立血管内皮细胞氧化应激损伤模型。实验共分为5组:对照组、模型组(H_2O_2组)及L-Ca低、中、高剂量(0.5、1、2 mmol/L)干预组。采用CCK-8法检测细胞活力,检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,用Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡情况,运用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析细胞凋亡水平,qRT-PCR法分析Caspase-9、Caspase-3 mRNA转录水平;用Western blot法对Bcl-2、Bax及Cleaved Caspase-3蛋白表达水平进行分析。采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析和LSD-t检验。结果与对照组相比,模型组细胞活力较低,上清液LDH含量、细胞凋亡率较高,Caspase-9、Caspase-3 mRNA及Cleaved Caspase-3蛋白表达水平较高,Bcl-2/Bax蛋白比值较低;与模型组相比,L-Ca低、中、高剂量组细胞活力均明显升高,上清液LDH含量、细胞凋亡率均显著降低,Caspase-9、Caspase-3 mRNA相对表达量均明显下降,Bcl-2/Bax比值均升高,Cleaved Caspase-3蛋白表达水平均降低,且均有剂量依赖关系,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论 L-Ca能够减轻H_2O_2对血管内皮细胞损伤,提高细胞活力,减少细胞凋亡,其机制可能与抑制Caspase-9和Caspase-3级联反应,上调Bcl-2/Bax蛋白比值有关。     

自噬紊乱在锰刺激诱导SN4741细胞损伤中的作用与机制研究

目的 通过利用氯化锰刺激SN4741细胞（小鼠多巴胺能细胞）,构建体外锰暴露模型,研究自噬紊乱在锰中毒中的作用,并初步探讨机制。方法 向SN4741细胞培养基中加入400 μmol/L的氯化锰溶液,检测细胞活力通过CCK-8 (Cell Counting Kit-8,CCK-8)试剂盒,分别检测锰作用0 h~48 h的细胞活力;凋亡蛋白Caspase-3和PARP,自噬相关蛋白Atg5和LC3的蛋白表达水平采用蛋白印迹法(western blot)检测;3-MA作为实验干预组抑制自噬紊乱,之后检测上述细胞自噬蛋白水平和损伤指标,采用方差分析进行比较。结果 锰刺激48h后损伤SN4721细胞活力(t=47.42,P=0.0013),凋亡标志蛋白Caspase-3剪切增加,下游分子PARP的剪切水平升高(t=11.96,P=0.019);Atg5和LC3-Ⅱ蛋白表达在锰暴露24h有所升高,48h升高更明显(t=18.72,P=0.012);3-MA干预后降低锰对SN4741细胞损伤(t=3.92,P=0.045),且3-MA干预致Atg5水平下降,Caspase-3蛋白和PARP等标志凋亡的蛋白水平降低(t=10.21,P=0.016)。结论 锰暴露可诱导多巴胺神经元自噬功能异常,继而诱导细胞凋亡,抑制自噬能减少锰暴露引起的细胞凋亡。     

石榴汁含样血清对肝癌细胞JHH-7凋亡和迁移的影响及机制初探

目的 研究石榴汁含样血清对肝癌细胞JHH-7凋亡与迁移的影响,并探讨其可能的机制。方法 雄性SD大鼠随机分为石榴汁组（灌胃石榴汁20mL/（kg·bw））和空白组（灌胃等量生理盐水）,连续灌胃7d,2次/d。末次灌胃后腹主动脉采血,离心获得含样和空白血清,分别干预肝癌细胞JHH-7,并以胎牛血清作为对照。MTT法检测细胞活性,计算细胞存活率;Annexin V－FITC/PI 双染法检测细胞的凋亡情况,Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3、Cytochrome-c（Cyt-C）和Caspase-9以及迁移相关蛋白MMP2、MMP9和TIMP2的表达;划痕实验检测细胞的迁移能力。结果 与空白血清相比,含样血清可抑制JHH-7细胞的增殖,具有时间依赖性,且空白血清和含样血清对人正常肝细胞LO2未表现出抑制作用;与空白血清相比,含样血清干预JHH-7细胞后,细胞凋亡率显著增加（P<0.05）,激活了Bcl-2家族蛋白,进一步导致线粒体损伤,诱发了线粒体途径诱导的细胞凋亡,相关蛋白p53、Caspase-3、Cyt-C和Caspase-9表达上调,Bcl-2的表达下调,Bax/Bcl-2比值增加（P<0.05）;与空白血清相比,含样血清抑制了JHH-7细胞的迁移,且相关蛋白MMP2和MMP9的表达下调,TIMP2的表达上调,TIMP2/MMP2比值增加（P<0.05）。结论 石榴汁含样血清通过线粒体途经诱导肝癌细胞JHH-7的凋亡,并且通过调节MMP2/TIMP2和MMP9表达的平衡抑制JHH-7的迁移,从而发挥抗肝癌作用。     

Apelin抑制小鼠成骨细胞MC3T3-E1凋亡

目的观察Apelin对小鼠成骨细胞MC3T3-E1凋亡的作用。方法 ELISA和吖啶橙/溴乙啶（AO/EB）染色法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞Bcl-2和Bax表达以及cytochrome c的分泌,通过荧光素（AFC、AMC）标记的底物来检测活性。结果 Apelin抑制无血清饥饿诱导的MC3T3-E1细胞凋亡;Apelin抑制无血清饥饿诱导的cyto-chrome c的分泌和caspase-3、caspase-8c、aspase-9的活化;Apelin抑制地塞米松或肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的MC3T3-E1细胞凋亡。结论 Apelin可抑制成骨细胞凋亡。     

敲减CCDC132表达对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡的影响

目的分析敲减CCDC132表达对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡的影响。方法以CCDC132-shRNA(shCCDC132组)和阴性对照Ctrl-shRNA (shCtrl组)慢病毒感染人宫颈癌HeLa细胞后,采用荧光显微镜观察HeLa细胞感染效率,应用实时荧光定量PCR检测HeLa细胞中CCDC132 mRNA表达水平,应用Western blot检测HeLa细胞中CCDC132蛋白表达水平,应用Celigo细胞计数法检测HeLa细胞生长情况,应用流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡情况,应用Caspase-3活性检测试剂盒检测HeLa细胞Caspase-3活性。结果 shCtrl组宫颈癌HeLa细胞中CCDC132 mRNA和蛋白表达结果分别为(1.00±0.11)和(0.21±0.03),shCCDC132组宫颈癌HeLa细胞中CCDC132 mRNA和蛋白表达结果分别为(0.42±0.03)和(0.05±0.01)。与shCtrl组比较,shCCDC132组CCDC132 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(t=15.261,P 0.001; t=15.179,P 0.001)。与shCtrl组比较,shCCDC132组细胞生长明显受到抑制(均P 0.05)。shCtrl组宫颈癌HeLa细胞凋亡率和Caspase-3相对活性分别为(6.36±1.15)%和(1.00±0.05),shCCDC132组宫颈癌HeLa细胞凋亡率和Caspase-3相对活性分别为(17.54±2.62)%和(3.86±0.12),与shCtrl组比较,shCCDC132组细胞凋亡率和Caspase-3活性均显著升高(t=11.722,P0.001; t=66.000,P0.001)。结论敲减CCDC132表达可抑制宫颈癌HeLa细胞生长,诱导细胞凋亡。