ELISA法与免疫层析法检测抗EV71-Ig M抗体的结果对比分析

目的：比较ELISA法和胶体金免疫层析（GICA）法检测抗EV71-IgM抗体的结果。方法用ELISA法和GICA法分别对96例发病初期手足口病患儿进行抗 EV71-IgM抗体的实验室检测,并对结果进行比较。结果当 ELISA 法 A≥0．150时,GICA法阳性率为92．3％;GICA法的检测阳性率明显高于ELISA 法,两者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论对于手足口病初期患儿,GICA法检测阳性率高于ELISA法,将该法应用于日常诊断更可取。     

捕获ELISA法测定抗EV71-IgM抗体用于EV71感染早期诊断

目的探讨捕获ELISA法测定抗肠道病毒71型(EV71)IgM抗体在EV71感染所致手足口病(HFMD)早期诊断中的价值。方法以实时荧光RT-PCR检测89例临床初诊为HFMD患儿的粪便、疱疹液、咽拭子或肛拭子的肠道病毒RNA。用40例排除HFMD的5岁以下儿童血清为抗EV71-IgM抗体阴性对照,以捕获ELISA法检测患儿不同发病期血清中抗EV71-IgM抗体。结果经实时荧光RT-PCR检测,89例HFMD患儿粪便、疱疹液、咽拭子或肛拭子中EV71感染28例,柯萨奇病毒A16(CA16)感染43例,非EV71和CA16的肠道病毒感染14例,非肠道病毒感染4例。EV71感染者发病1～3 d、4～6 d及>6 d的血清抗EV71-IgM抗体阳性率分别为81.3%、100%和100%;CA16感染者分别为10.0%、26.4%和65.7%;非EV71和CA16的肠道病毒感染者及非肠道病毒感染者在发病1～3 d和4～6 d无1例阳性;阴性对照组无1例阳性。抗EV71-IgM抗体在EV71感染的早期(急性期)的诊断敏感性和特异性分别为81.3%和92.9%。结论 EV71感染者与CA16感染者血清抗EV71-IgM抗体在发病4 d后存在较明显的交叉反应。抗EV71-IgM抗体可用作EV71感染早期诊断的血清学标志物。     

手足口病相关肠道病毒感染血清IgM抗体交叉反应及动态变化

目的分析手足口病相关肠道病毒间IgM抗体交叉反应及动态产生过程,评价抗体捕获法检测肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇病毒A组16型(CA16)感染的早期诊断价值。方法收集广州市妇女儿童医疗中心319名手足口病患者及疑似患者咽拭子319份、血标本565份。荧光定量PCR检测咽拭子标本,血清中和试验检测配对血清,结合两法结果为判断标准,将手足口病患者分为EV71、CA16及其他肠道病毒感染组;以捕获ELISA法检测不同发病时间EV71-IgM抗体及CA16-IgM抗体。结果发病第一天均能检测出EV71-IgM抗体及CA16-IgM抗体,阳性率分别为33.0%和25.0%,检出率分别在第5天和第7天达到100%,抗体可持续检出时间达数月。EV71感染血清CA16-IgM捕获ELISA法交叉反应率为25.0%,CA16感染血清EV71-IgM捕获ELISA法交叉反应率为28.0%。EV71-IgM和CA16-IgM抗体存在严重交叉反应,通过两者450 nm处吸光度(A450 nm)比值可以成功诊断97.1%EV71感染和93.0%CA16感染。同一天采集的肛拭子及血清标本检测结果表明,荧光定量PCR与ELISA法诊断EV71及CA16感染的结果差异无统计学意义。结论 EV71及CA16抗体捕获ELISA法是一种简单、有效的诊断方法,联合两种方法检测可以有效提高诊断特异性。     

荧光聚合酶链式反应与酶联免疫吸附法筛查肠道病毒71型病原感染的比较研究

目的比较肠道病毒71型（EV71）核酸与EV71-IgM抗体检测两种方法对临床诊断手足口患儿的意义。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法对2011年4月20日-9月10日诊治的1 379例临床诊断为疑似手足口患儿进行肛拭子EV71核酸检测,同时用酶联免疫吸附法对血清标本进EV71-IgM抗体水平检测。结果 1 379例患儿EV71核酸的阳性为79例,阳性率为5.73%,EV71-IgM抗体阳性为82例,阳性率为5.95%,两者均阳性为32例。两检测方法一致率为95.2%,两者之间的阳性检出率差异无统计学意义（χ2=0.093,P=0.761）。结论应用EV71核酸及EV71-IgM抗体检测的两种联合监测,能更有效地提高手足口病患儿感染的诊断水平,对预防及对诊断手足口病有积极意义。     

大连市手足口病患儿血清病毒抗体及心肌酶检测结果分析

目的探讨肠道病毒71型抗体（EV71IgM）检测对手足口病（HFMD）患儿的诊断价值以及血清心肌酶谱在手足口病患儿中的变化。方法收集2010年6-9月HFMD住院患儿的血清。用酶免疫测定法（EIA）检测标本中的EV71-IgM、柯萨奇病毒抗体（CoxIgM）、埃可病毒抗体（ECHOIgM）;同时常规检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及肌酸激酶同工酶（CK-MB）。结果HFMD患儿血清EV71IgM阳性率为78．340A（123／157）;CoxIgM阳性率为5．39％（28／519）;ECHOIgM阳性率为5．20％（27／519）;AST、LDH、CK及CK-MB异常比率分别为33．3％、71．54、8．99％、35．6％。结论2010年本地区HFMD患儿以Ev71感染为主,监测手足口病患儿心肌酶谱具有重要意义。     

胶体金免疫法对手足口病分型检测的研究

目的 建立胶体金免疫法(CGIA)对手足口病(HFMD)分型的检测方法.方法 用双抗体夹心检测原理建立CGIA对HFMD分型检测方法,分别检测136例HFMD患儿和30例健康儿童粪便中柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠病毒71型(EV71),以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)为金标准,评价CGIA检测性能.结果 CGIA 与RT-PCR检测136例HFMD患儿粪便EV71阳性率分别为27.2%和28.6%;CGIA与RT-PCR检测136例手足口病患儿粪便CA16阳性率分别为33.8%和35.3%;以RT-PCR为金标准,CGIA检测手足口病患儿粪便EV71的敏感性89.7%,特异性89.7%,阳性预测值94.5%,阴性预测值95.9%,准确度95.5%;CGIA检测手足口病患儿粪便CA16的敏感性85.4%,特异性94.3%,阳性预测值89.1%,阴性预测值92.2%,准确度91.1%.结论 CGIA法操作简单、方便、快速,特异性和敏感性好,为HFMD病原学早期分型诊断提供了一个有效的检测手段.     

2015年杭州市手足口病肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型构成变化与联合检测方法分析

目的 采用肠道病毒核酸和抗体检测,分析2015年杭州市手足口病肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（Cox A16）构成变化及检测方法学评价。方法 收集2015年4-8月手足口病患儿663例,采用荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肠道病毒核酸,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清EV71-IgM、Cox A16-IgM。结果 663例手足口病患儿通用核酸阳性组58.52%（388/663）,EV71组19.16%（127/663）,与2014年比较,通用核酸阳性组比例（2=166.306,P=0.000）,EV71组比例（2=134.418,P=0.000）差异有统计学意义。手足口病患儿轻症487例,占73.45%,以通用核酸阳性组65.91%（321/487）为主;重症176例,占26.55%,EV71组43.75%（77/176）、通用核酸阳性组38.07%（67/176）位居前2位。不同组别出现重症的比例（2=98.395,P=0.000）差异有统计学意义,EV71出现重症比例最高,为60.63%（77/127）。病毒核酸检测和血清抗体检测阳性率比较差异有统计学意义（2=44.487,P=0.000）。其中,127例EV71阳性患儿,核酸和抗体检测双阳性率为59.85%（76/127）,单阳性率为40.15%（51/127）;64例Cox A16阳性患儿,核酸和抗体检测双阳性率为9.38%（6/64）;单阳性率为90.62%（58/64）。以核酸定量RT-PCR为标准,EV71/Cox A16-IgM抗体特异度86.61%,敏感度69.49%。结论 2015年与2014年比较,杭州市手足口病病原学流行特征有明显变化。采用病毒核酸和抗体联合检测,可提高实验室的检测阳性率,临床分型有助于辅助指导临床治疗;通用型重症病例增多,需寻找更适合的联合检测方法。     

不同方法检测肠道病毒71型IgM抗体在手足口病诊断中的意义

目的：研究免疫层析法（ICA）和酶联免疫吸附法（ELISA）检测肠道病毒71型（EV71）IgM 抗体在手足口病诊断中的意义。方法采集135例手足口病确诊患儿和44例排除手足口病诊断的患儿血清标本,采用ICA及ELISA检测EV71 IgM 抗体。结果135例手足口病患儿,ICA、ELISA 检测 EV71 IgM 抗体阳性率分别为21．48％（29/135）和20．74％（27/135）;44例非手足口病患儿,ICA、ELISA检测EV71 IgM抗体阳性率均为0．00％（0/44）。结论ICA或ELISA检测EV71 IgM抗体阳性者均可确诊为手足口病,但检测结果为阴性者,不能排除手足口病的可能性,应结合临床表现进行诊断。     

手足口病血清EV71抗体检测分析

目的 对手足口病患者血清EV71抗体进行检测分析,以了解常州市手足口病患者肠道病毒EV71的感染情况.方法 采集272 例手足口病(其中10例重症病例)患者急性期的血清标本,用ELISA法检测其EV71-IgM抗体.结果 272例血清标本中125例检出EV71-IgM抗体阳性,检出率为46.0%,10例重症病例均为EV...     

ELISA检测血清EV71-IgM诊断手足口病价值的Meta分析

目的系统评价酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肠道病毒71型IgM抗体(EV71-IgM)诊断手足口病(HFMD)的价值。方法检索PubMed、Embase、Web of Science、Cochrane、维普、万方、中国知网以及中国医学生物文献数据库中有关用ELISA检测EV71-IgM诊断HFMD的文献,检索时限从建库至2015年1月。对符合纳入标准的文献进行资料提取、方法学质量评价,采用Meta-disc 1.4软件进行Meta分析。结果共纳入文献8篇,合计4 126例,其中HFMD患者1 484例,非HFMD患者2 642例。Meta分析结果显示,各研究间存在非阈值效应引起的异质性,合并灵敏度、特异度和诊断比值比分别为84%、90%、28.77;拟合综合受试者特征曲线(SROC)下面积为0.906 8。结论 ELISA检测血清EV71-IgM诊断HFMD有较高的诊断价值,但因纳入研究存在一些方法学缺陷,该结论尚需进一步开展高质量的诊断性试验来进行验证。     

实时荧光定量PCR快速诊断肠道病毒71型感染

目的探寻快速准确早期诊断肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)感染的方法。方法手足口病患儿871例,采用实时荧光定量PCR检测患儿咽拭子或疱液的EV71感染情况,实时荧光定量PCR检测EV71阳性患儿采用ELISA法检测血清EV71-IgM和EV71-IgG。结果871份标本中,RT-PCR检测EV71感染阳性率为17.91%,其中5月份检测阳性率(24.44%)最高,12月份检测阳性率(4.17%)最低;随机抽取64例RT-PCR检测阳性患儿外周血,EV71-IgM阳性率为51.56%,EV71-IgG阳性率为14.06%。结论 RT-PCR能快速准确诊断EV71早期感染。     

2012年杭州地区手足口病病原体流行特征分析及临床意义

目的对2012年4月至9月手足口病（HFMD）流行期间对449例HFMD患儿的临床特点及病原学流行特征进行分析,旨在为手足口病的防治工作提供依据.方法收集449例手足口病患儿资料,用荧光定量RT-PCR法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）定量分型.结果449例HFMD临床诊断病例中,肠道病毒通用型阳性数为331例,包含203例EV71型和109例CA16型,肠道病毒总阳性率为69.5%（331/476）,其中EV71占42.6%（203/476）,CA16占22.9%（109/476）,EV71/CA16两者兼有者占3.8%（18/476）,非EV71、CA16的其他肠道病毒占4.6%（22/476）.2012年送检标本中EV71与CA16检出率的差异无统计学意义（χ^2=1.432,P=0.231）.结论2012年HFMD患儿以EV71型和CAl6型流行为主.而重症手足口病多发生于年龄〈3岁的儿童,且重症患儿基本为EV71型感染.故小年龄组HFMD患儿应成为HFMD流行期间重点监测对象,并给予积极治疗,以防止成为重症HFMD患儿,从而降低重症HFMD病死率.     

基于化学发光肠道病毒71型IgM抗体检测试剂的研制及初步应用

目的在肠道病毒71型(EV71)重组外壳蛋白VP1的基础上建立以化学发光为基础的IgM抗体检测技术,并与普通TMB显色酶联免疫吸附法比较,评价其临床应用前景。方法采用抗IgM单克隆抗体及辣根酶标记的重组VP1抗原,在此基础上建立EV71-IgM捕获法化学发光检测技术,并对比化学发光检测技术与普通酶联检测技术在45份EV71抗体阳性和30份阴性血清中的反应情况。结果化学发光法、普通酶联免疫吸附法、市售EV71-IgM检测试剂分别能与38份、19份、26份EV71抗体阳性血清发生阳性反应,灵敏度分别为84.4%、42.2%和57.8%;化学发光法灵敏度显著高于其他两种,差异有统计学意义(P<0.05);3种检测方法与阴性血清均无阳性反应。结论在EV71-VP1重组抗原的基础上建立的EV71-IgM捕获法化学发光检测技术具有很高的灵敏度,并有很好的临床应用前景。     

不同方法检测乙型肝炎血清标志物结果评价分析

目的 探讨胶体金标记免疫层析技术(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、电化学发光免疫分析(ECLIA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)、乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)等乙型肝炎病毒(HBV)血清学标志物结果的一致性.方法用GICA、ELISA、TRFIA、ECLIA分别检测145例HBV感染患者以及70例正常体检者的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc,以ELISA为参考方法,评价GICA、ELISA、TRFIA等3种方法与ECLLA检测HBV血清学标志物结果之间的一致性.结果 GICA、ELISA、TRFIA等3种方法的检测结果与ECLIA的检测结果具有高度或者极强的一致性,TRFIA与ECLIA检测结果的一致性最佳,ELISA次之,GICA最差.结论 GICA、ELISA、TRFIA、ECLIA等4种方法检测HBV血清学标志物具有较好的一致性,TRFIA、ECLIA适用于HBV感染患者的疗效判断,ELISA适用于HBV感染患者的初筛.     

ELISA、GICA与MEIA法检测新生儿TORCH-IgM抗体的比较

目的比较ELISA、GICA与MEIA法对新生儿TORCH-IgM抗体的检测效果。方法选择120例疑似TORCH感染的新生儿作为研究对象,分别采用ELISA、GICA与MEIA三种方法检测血清TORCH-IgM抗体,比较三种方法对新生儿TORCH-IgM抗体检测的阳性率、符合率、灵敏度以及特异性。结果以MEIA法为金标准,ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体的灵敏度和特异性比较,ELISA法检测中的RV-IgM、HSV-IgM以及CMV-IgM检测的灵敏度均高于GICA法(P<0.01),两组的TOX-IgM检测比较无显著性差异(P>0.05);ELISA法检测中的CMV-IgM检测的特异性高于GICA法(P<0.01);ELISA法和GICA法检测TORCH-IgM抗体阳性预测值和阴性预测值比较,ELISA法中CMV-IgM检测的阳性预测值和阴性预测值均高于GICA法(P<0.05),尤其是阴性预测值(P<0.01);与MEIA法检测总符合率均在90%以上。结论 ELISA法检测新生儿TORCH-IgM抗体,具有特异性强、敏感性高、可信度高、简单易行等优点,是一种比较可靠的新生儿TORCH感染筛查的检测方法。     

三种化学发光法检测新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体试剂盒的临床应用评价

目的 评价三种新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体化学发光试剂盒的检测性能,研究SARS-CoV-2 抗体检测的临床应用价值。方法 采用37 例临床确诊新型冠状病毒肺炎（COVID-19）患者恢复期血清样本和100 例对照患者血清样本,对三个不同厂家的化学发光新型冠状病毒抗体检测试剂盒进行评估。绘制ROC 曲线分析三种试剂的检测性能。利用Kappa 统计分析三种试剂的检测一致性。结果 对于IgM 抗体检测,试剂A 和试剂B 具有非常好的检测性能,尤其是试剂B 性能最优,临床敏感度为56.76%,临床特异度为99%;对于IgG 抗体检测,三种试剂均具有非常好的检测性能,三种试剂的临床特异度均为97.00%,而试剂C 的临床敏感度最高,为97.29%。对于IgM 抗体检测,试剂A 与试剂B 检测结果具有中度一致性（Kappa=0.508,P<0.05）,试剂C 与试剂B 检测结果仅具有微弱一致性（Kappa=0.065,P ≥ 0.05）;对于IgG 抗体检测,试剂A 与试剂C 检测结果具有高度一致性（Kappa=0.654,P<0.05）,试剂A 与试剂B 检测结果为弱一致性（Kappa=0.102,P ≥ 0.05）。结论 三种化学发光法SARS-CoV-2 IgM 和IgG 抗体检测试剂盒均具有一定的临床敏感度和特异度,但各厂家产品的检出一致性相差较大,因此产品性能的标准化和工艺标准化亟待解决。     

手足口病患儿机体免疫功能临床研究

目的：探讨手足口病（HFMD）患儿机体免疫功能的变化。方法将236例HFMD患儿分为3组,肠道病毒71型（EV71）感染组（EV71组）99例,柯萨奇病毒A组16型感染110例（CoxA16组）,有严重合并症的患儿27例纳入重症组。另将24例疝气患儿纳入对照组。检测并比较患儿外周血各类淋巴细胞亚群百分比的差异。结果HFMD患儿CD3^＋、CD3^＋CD4^＋亚群百分比较对照组下降,且重症患儿更为明显（P＜0．05）。CD3^＋ CD8^＋亚群百分比仅重症组低于对照组（P＜0．05）。重症组CD3^-CD16^＋ CD56^＋亚群百分比较EV71组、CoxA16组和对照组升高（P＜0．05）。HFMD患儿CD3^-CD19^＋、CD19^＋CD23^＋亚群百分比高于对照组,且EV71组升高更明显（P＜0．05）。HFMD患儿CD4^＋CD25^＋ T亚群百分比高于对照组（P＜0．05）。结论 HFMD患儿存在不同程度的免疫功能紊乱;CD3^＋、CD3^＋CD8^＋和CD3^-CD16^＋CD56^＋亚群百分比检测可用于监测HFMD患儿病情。     

一步法实时RT-PCR快速检测手足口病肠道病毒

目的探讨实时荧光RT-PCR在手足口病(HFMD)肠道病毒快速检测中的应用价值。方法以实时荧光RT-PCR检测64例临床初诊为HFMD患儿标本中总肠道病毒(EV)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71),用RD细胞、Vero细胞和Hep-2细胞进行病毒分离培养,以免疫荧光法鉴别分离培养的EV71。结果64例标本中,EV(+)/EV71(+)为23.4%(15/64)、EV(+)/CA16(+)为48.4%(31/64)、EV(+)/EV71(-)/CA16(-)为10.9%(7/64)、EV(-)/EV71(-)/CA16(-)为17.2%(11/64)。实时荧光RT-PCR检测为EV71且病毒分离培养出现细胞病变效应的培养细胞经抗EV71单克隆抗体免疫荧光检测均为阳性,未发生细胞病变效应或非EV71的培养细胞均为阴性。结论实时荧光RT-PCR检测HFMD病原具有特异和快速等优点,与病毒分离培养具有较高的一致性,可用于手足口病的早期诊断和鉴别诊断。     

手足口病1073例病原检测分析

目的分析手足口病低龄儿童病例的肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）的感染状况。方法采集手足口病（HFMD）疑似病例咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR方法检测患者EV71和CA16感染情况,并分析患者性别、年龄分布情况。结果收集到1 073例HFMD儿童疑似病例的咽拭子标本和临床资料,EV71男女总的阳性检出率为46.04%,CA16男女总的阳性检出率为9.04%。结论本次北京地区HFMD疫情的主要病原体包括EV71和CA16,EV71感染率高于CA16,分析结果可为HFMD防治提供参考。     

ELISA法与免疫膜条法检测抗MDA5抗体、抗TIF1γ抗体的比对分析

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫膜条法检测抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体和抗转录中介因子1γ(TIF1γ)抗体结果的差异性。方法选取日本MBL公司生产的抗MDA5抗体和抗TIF1γ抗体试剂盒(ELISA法)与德国欧蒙公司抗肌炎抗体谱IgG检测试剂盒(免疫膜条法),同时检测180例皮肌炎血清样本中的抗MDA5抗体和抗TIF1γ抗体,比较这两种方法的差异性。结果两种方法检测到的两种抗体阳性率,差异均无统计学意义(P0.05)。两种方法检测结果的一致性有统计学意义(P0.001),但一致性一般(抗MDA5抗体:Kappa值=0.660;抗TIF1γ抗体:Kappa值=0.642)。结论 ELISA法和免疫膜条法检测抗MDA5抗体和抗TIF1γ抗体的一致性程度一般。免疫膜条法有待进一步改善,以提高检测的准确性。