阻塞性黄疸大鼠小肠中组织细胞间粘附分子-1的表达

目的　探讨组织细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )在阻塞性黄疸小肠粘膜损伤中的表达及其作用。方法　建立阻塞性黄疸模型 ,于胆管结扎 7、1 4d两个时相点分别检测小肠组织中I CAM 1表达、髓过氧化物酶 (MPO)变化 ,观察小肠组织结构的病理改变。结果　在 7、1 4d两个时相点 ,阻黄组 (BDL组 )MPO活性明显增强 (2 .851± 1 .2 2 0 ,4.92 7± 1 .371 ,P <0 .0 5) ,肠粘膜结构明显受损 ;ICAM 1表达主要在小肠粘膜上皮细胞 ,其表达强度随梗阻时间延长而增强 (P <0 .0 5) ,与MPO变化、病理结构改变一致。结论　在阻塞性黄疸大鼠中 ,ICAM 1表达增强与小肠粘膜损伤的发生有关。     

大鼠阻塞性黄疸小肠组织中细胞间粘附分子-1和肿瘤坏死因子-α的表达及其意义

目的　探讨大鼠阻塞性黄疸小肠组织中细胞间粘附分子 1(ICAM 1)和肿瘤坏死因子 α(TNF α)的表达及意义。方法　选SD大鼠 2 4只 ,用随机排列表法均分成假手术组 (SO组 )和阻塞性黄疸组 (BDL组 ) ,每组术后再随机分设 7d和 14d两个时相点。应用免疫组化的方法观察小肠组织中ICAM 1表达的变化 ,采用双抗体夹心ELISA法测定TNF α含量 ,同时检测小肠组织中髓过氧化物酶 (MPO)活性、小肠组织和血浆中二胺氧化酶 (DAO)活性。结果　胆总管结扎后 7d、14d ,ICAM 1表达主要在小肠粘膜上皮细胞 ,且表达逐渐增强 (P<0 .0 5 ) ;小肠粘膜TNF α的含量逐渐上升 ,分别为 ( 14 .2 5± 1.0 1)ng/ g和 ( 2 3.83± 1.4 3)ng/ g(P<0 .0 1) ;小肠DAO的活性逐渐降低 ,分别为 ( 1.70± 0 .36 )U/mg和 ( 1.2 2± 0 .4 1)U/mg(P <0 .0 1) ;血浆DAO活性逐渐升高 ,分别为 ( 6 .4 4± 1.74 )U/ml和 ( 8.93± 1.2 9)U/ml(P<0 .0 1) ;MPO活性逐渐增高 ,分别为 ( 2 .85± 1.2 2 )U/mg和 ( 4 .93± 1.37)U/mg(P<0 .0 1)。结论　阻塞性黄疸时小肠组织的ICAM 1表达显著上调和小肠粘膜TNF α含量显著升高 ,参与了中性粒细胞介导的小肠粘膜损伤。     

阻塞性黄疸致肠粘膜损害与组织细胞间粘附分子-1的关系

组织细胞间粘附分子 1(ICAM 1)是目前研究较深入和较引人注目的一种细胞粘附分子 ,其在细胞表面表达量的增加与多种疾病的发生有关。本研究旨在观察阻塞性黄疸致肠粘膜损害与ICAM 1的关系。一、材料和方法1.模型制备 :ICAM 1抗体由SantaCruz公司提供 ,健康SD鼠 2 4只 ,雌雄不拘 ,体重 2 5 0～ 330mg ,随机分成 2组 :假手术对照组 (SO组 ) ,阻黄组 (BDL组 )。每组术后再随机分设 7、14d两个时相点 ,每个时相点 6只。SO组仅解剖胆总管 ,BDL组结扎并切断胆总管。2 .检测指标和方法 :( 1)小肠组织I CAM 1蛋白表达的测定 :用免疫组…     

L-精氨酸对阻塞性黄疸大鼠单核吞噬细胞系统功能的影响

目的：探讨L－精氨酸（L－Arg)对阻塞性黄疸大鼠单核吞噬细胞系统（MPS）吞噬功能的影响。方法：将SD雄性大鼠54只随机分为3组：假手术对照组（SO）;胆总管结扎组（BDL）;胆总管结扎＋L－精氨酸组（BDL＋L－Arg),每组术后又分设7,14,21d3个时间点检测MPS和枯否细胞（KC）的吞噬功能,并测定肝组织丙二醛（MDA）和NO2^-/NO3^-含量。结果：与SO组比较,BDL组各时间点MPS吞噬功能（P＜0．01）和KC吞噬功能（P＜0．05）明显减弱。BDL＋L－Arg组在胆管结扎7,14d时MPS和KC吞噬功能明显强于BDL组（P＜0．05）,21d时两组MPS和KC吞噬功能差异无显著性（P＞0．05）,但与SO组相比,BDL＋L－Arg组各时间点MPS吞噬功能仍明显降低（P＜0．05）。BDL L-Arg组在胆管结扎7,14d时血清转氨酶和肝组织MDA含量显著低于BDL组（P＜0．05）,而NO2^-/NO3^-含量显著高于BDL组（P＜0．01）。结论：L－精氨酸有减轻阻塞性黄疸时肝脏损伤和增强MPS,KC吞噬功能的作用,但存在一定时效关系。     

加味大柴胡汤加用L-精氨酸对阻黄大鼠血浆内毒素的影响

目的　探讨L 精氨酸、加味大柴胡汤及两者合用对保护阻塞性黄疸大鼠的肝功能、抑制脂质过氧化损伤、缓解内毒素血症的作用。方法　制作急性阻塞性黄疸大鼠模型 ,分为 7、14及 2 1d 3个时段 ,每个时段分为 5组 ,每组 6只大鼠。在各时相点 ,检测内毒素和NO2 -/NO3 -的含量。结果　门静脉血浆内毒素的含量 :胆管结扎 7d后 ,门静脉血浆内毒素含量BDL NS组明显高于其他组 (P <0 .0 1)。而BDL L Arg 中药组与BDL L Arg及BDL 中药组间比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。胆管结扎 14d ,门静脉血浆内毒素含量BDL L Arg 中药组与BDL L Arg及BDL 中药组比较差异也有显著性 (P <0 .0 5 )。但在 2 1d时段门静脉内毒素含量BDL L Arg组与BDL NS组比差异无显著性 ,而BDL 中药组及BDL L Arg 中药组门静脉内毒素含量较上述两组差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　在阻塞性黄疸发病早、中期 ,采用加味大柴胡汤加L Arg治疗对保护肝功能与缓解内毒素血症作用较佳     

a-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢保护作用及机制

目的 探讨α-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢的保护作用及其机制. 方法 将72只SD雄性大鼠随机分为对照组（SO组）,胆总管结扎＋0.9%氯化钠溶液组（BDL＋NS组）,胆总管结扎α-硫辛酸组（BDL＋LA组）.分别于术后7 d、14 d和2l d检测肝细胞线粒体内MDA、SOD、ATP、ADP和AMP含量并计算总腺苷酸（TAN）和能荷（EC）. 结果 BDL＋NS组各时间点肝细胞线粒体内MDA、ADP、AMP含量明显升高,而SOD、ATP、EC含量却明显降低.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内MDA含量BDL＋LA组比BDL＋NS组低,差异有统计学意义（P＜0.01）;2l d时,AMP、MDA含量BDL＋NS组和BDL＋LA中都更进一步升高,但两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内SOD含量、ATP含量BDL＋LA组比BDL＋NS组下降程度有显著性差异（7 d,P＜0.01;14 d,P＜0.05）;21 d时,两组肝细胞线粒体内SOD含量都进一步下降,但差异无统计学意义（p＞0.05）. 结论 α-硫辛酸在阻塞性黄疸早、中期有保护线粒体能量代谢作用,减轻了阻塞性黄疸时肝的损伤.     

活血清下中药对大鼠缺血-再灌注小肠凋亡蛋白酶活化因子-1表达的影响

目的：利用小肠缺血-再灌注动物模型,观察中药对小肠黏膜细胞凋亡的干预作用及对肠屏障的影响。方法：选用健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型组、承气合剂治疗组、复方丹参合剂治疗组、活血承气合剂（承气合剂＋复方丹参合剂）治疗组。对动物模型再灌注6h、24h、72h时血浆内毒素、小肠黏膜上皮细胞凋亡情况、凋亡蛋白酶活化因子-1（Apaf-1）的表达分别进行检测和观察。结果：与模型组比较,各治疗组对于肠黏膜上皮细胞凋亡均有不同程度的抑制作用,其中活血承气治疗组各观察指标降低明显（P〈0.01）,效果最佳。结论：小肠缺血-再灌注早期肠黏膜上皮细胞凋亡是造成血中内毒素明显升高、肠屏障功能损伤的主要原因之一。活血清下法可以通过抑制Apaf-1表达来减弱肠黏膜上皮细胞的凋亡,从而达到降低内毒素水平,保护肠屏障功能的作用。     

大鼠急性肠缺血后血浆D-乳酸的变化及其与肠粘膜损害的关系

目的观察肠缺血再灌注时门、体循环Ｄ－乳酸的动态变化及其与肠粘膜损害的相关性。方法采用大鼠肠系膜上动脉阻断７５分钟后松夹进行重灌注的模型，分别于术前，阻断末，松夹后０．５，２，６小时活杀动物，观察门静脉和体循环Ｄ－乳酸水平、血浆内毒素含量及小肠病理形态学改变。结果肠缺血７５分钟后大鼠门静脉Ｄ－乳酸水平较伤前值显著上升（Ｐ＜０．０５），再灌注后呈进一步持续升高趋势。外周血Ｄ－乳酸的改变与门脉血基本一致，各时相点与门脉血含量相比差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。相关分析结果显示，门静脉血浆Ｄ－乳酸含量与肠粘膜损伤评分值呈显著正相关（ｒ＝０．４１５，Ｐ＜０．０１）。与此同时，大鼠肠缺血７５分钟门静脉内毒素含量迅速上升，再灌注后２小时达峰值。结论急性肠缺血再灌注可致肠粘膜屏障破坏，使门、体循环Ｄ－乳酸水平显著升高，其含量与小肠粘膜损害密切相关。因此，Ｄ－乳酸可作为新的血浆标志物应用于急性肠粘膜损害的早期诊断     

p38丝裂原活化蛋白激酶在肠缺血再灌注损伤大鼠炎性反应中的作用

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）在肠缺血再灌注损伤大鼠炎性反应中的作用。方法健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组（n=10）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）和p38MAPK抑制剂SB203580组（SB组）。采用夹闭肠系膜上动脉（SMA）的方法制备肠缺血再灌注损伤模型。I/R组和SB组夹闭SMA 1 h再灌注6 h,SB组缺血前30 min经股静脉注射p38MAPK特异性抑制剂SB203580 100μg/kg。于再灌注6 h时,处死大鼠,测定血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度、双胺氧化酶（DAO）活性及小肠组织TNF-α含量、p38MAPK、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）表达水平,在光镜下观察小肠组织病理学,并进行小肠组织损伤程度评分。结果与S组比较,I/R组血浆TNF-α浓度、DAO活性及小肠组织p38MAPK、ICAM-1表达、TNF-α含量、小肠组织损伤程度评分升高,SB组血浆DAO活性、小肠组织ICAM-1表达、TNF-α含量及小肠组织损伤程度评分升高（P〈0.05）;与I/R组比较,SB组血浆TNF-α浓度、DAO活性及小肠组织p38MAPK、ICAM-1表达和TNF-α含量、小肠组织损伤程度评分降低（P〈0.05）。结论p38MAPK参与了肠缺血再灌注损伤大鼠炎性反应。     

体外循环时心肌细胞上粘附分子的变化及抑肽酶对其表达的影响

目的：观察行心脏瓣膜置换术的病人在体外循环（CPB）前，后心肌细胞间粘附分-1(ICAM-1）及血管细胞间粘附分子－1（VCAM－1）的表达，并探讨抑肽酶对其表面的影响，方法：20例病人被随机均分为抑肽酶组和对照组，分别于手术开始及结束时取右心房心肌标本，采用免疫组化法检测心肌细胞及心肌血管内皮细胞上ICAM－1及VCAM－1的表达（IOD值）。结果：对照组心脏瓣膜我术病人CPB后心肌细胞上和心肌血管内皮细胞（EC）上ICAM－1及VCAM－1的表达较术前有明显增加（P＜0．05），而在抑肽酶组则无明显变化，组间比较，差异有具有显著意义，P＜0．05，结论：CPB时心肌细胞及心肌血管EC上ICAM－1及VCAM－1的表达增高，抑肽酶可通过抑制这些粘附分子的表达而减轻CPB所致的炎症反应。     

L-精氨酸对大鼠阻塞性黄疸肝细胞线粒体内Ca2+的保护作用及其机制

目的 探讨L-精氨酸(L-Arg)对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内Ca^2 保护作用及其机制。方法 将72只SD雄性大鼠随机分为对照组(SO组)，胆总管结扎 生理盐水组(BDL NS组)，胆总管结扎 L-Arg(BDL L-Arg组)。分别于术后7、14和21d检测肝细胞线粒体内MDA、SOD、Ca^2 含量。结果 BDL NS组各时间点肝细胞线粒体内Ca^2 、MDA含量明显升高，而SOD含量却明显降低。胆总管结扎7、14d时，肝细胞线粒体内Ca^2 、MDA含量BDL L-Arg组比BDL NS组低，差异有统计学意义(P＜0．01)；21d时，肝细胞线粒体内Ca^2 、MDA含量BDL NS组和BDL L-Arg中都更进一步升高，但两组比较差异无统计学意义(P＞0．05)。胆总管结扎7d时，肝细胞线粒体内SOD含量BDL L-Arg组比BDL NS组高(P＜0．05)；14、21d时，两组肝细胞线粒体内SOD含量都进一步下降，但差异无统计学意义(P＞0．05)。结论 L-Arg在阻塞性黄疸早、中期有保护线粒体作用，减少Ca^2 内流，不引起钙超载，减轻了阻黄时肝的损伤。     

α-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢保护作用及机制

目的 探讨α-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢的保护作用及其机制. 方法 将72只SD雄性大鼠随机分为对照组(SO组),胆总管结扎+0.9%氯化钠溶液组(BDL+NS组),胆总管结扎α-硫辛酸组(BDL+LA组).分别于术后7 d、14 d和2l d检测肝细胞线粒体内MDA、SOD、ATP、ADP和AMP含量并计算总腺苷酸(TAN)和能荷(EC). 结果 BDL+NS组各时间点肝细胞线粒体内MDA、ADP、AMP含量明显升高,而SOD、ATP、EC含量却明显降低.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内MDA含量BDL+LA组比BDL+NS组低,差异有统计学意义(P＜0.01);2l d时,AMP、MDA含量BDL+NS组和BDL+LA中都更进一步升高,但两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内SOD含量、ATP含量BDL+LA组比BDL+NS组下降程度有显著性差异(7 d,P＜0.01;14 d,P＜0.05);21 d时,两组肝细胞线粒体内SOD含量都进一步下降,但差异无统计学意义(p＞0.05). 结论 α-硫辛酸在阻塞性黄疸早、中期有保护线粒体能量代谢作用,减轻了阻塞性黄疸时肝的损伤.     

L-精氨酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞能量代谢的影响

目的　探讨L 精氨酸 (L Arg)对阻塞性黄疸大鼠肝细胞能量代谢的影响。 方法　将5 4只SD雄性大鼠随机分为假手术对照组 (SO ) ,胆总管结扎组 (BDL) ,胆总管结扎 +L 精氨酸组(BDL +L Arg)。分别于术后 7、14、2 1d 3个时间点检测肝组织三磷酸腺苷 (ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷 (AMP)及丙二醛 (MDA)和一氧化氮 (NO)含量。结果　BDL组各时间点肝组织ATP、总腺苷酸 (TAN )和能荷 (EC)明显降低 ,而NO、MDA含量显著增加。BDL +L Arg组在胆管结扎 7d时ATP、TAN含量较BDL组高 (P <0 .0 5 ) ,EC维持在接近正常水平。 14d时BDL +L Arg组ATP、TAN与BDL组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但EC仍未明显降低。 2 1d时两组ATP、TAN、EC及MDA含量相接近 ,NO在BDL +L Arg组明显高于BDL组 (P <0 .0 1)。 结论　L Arg在阻塞性黄疸早期可保护肝细胞能量代谢功能 ,减轻肝损伤     

加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠TLR4表达的影响

目的 探讨加味大柴胡汤在临床上辅助治疗阻塞性黄疸的理论机制.方法 制作阻塞性黄疸大鼠模型,分为7、14、21 d共3个时段,每个时段分3组,即:(1)假手术+生理盐水组(SO+NS组);(2)胆总管结扎+生理盐水组(BDL+NS组);(3)胆总管结扎+加味大柴胡汤组(BDL+MMDB组).每组6只SPF级SD大鼠,在各时段取大鼠肝组织及下腔静脉血,检测AST、ALB及TB;用RT-PCR检测,TLR4 mRNA的表达.结果 胆总管结扎7 d时,BDL+MMDB组与BDL+Ns组外周血TB、AST比SO组均上升,且后者明显.BDL+MMDB组与SO组及BDL+NS组相比,差异均有统计学意义(P<0.01).胆总管结扎14、21 d时,BDL+MMDB组与BDL+Ns组外周血TB、AST持续升高,且后者增高更明显.BDL+MMDB组与SO组及BDL+Ns组相比,差异均有统计学意义(P<0.01).正常肝组织中TLR4mRNA的表达不明显.胆总管结扎7、14、21 d时,BDL+MMDB组与BDL+Ns组TLR4 mRNA表达持续显著增加,且后者增加更明显.同时段中BDL+MMDB组与S0组相比、BDL+MMDB组与BDL+NS组相比,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 加味大柴胡汤可以通过降低肝组织中TLR4,从而减轻内毒素所致肝脏的损伤.     

大鼠梗阻性黄疽脑内多胺代谢紊乱的实验研究

目的 研究梗阻性黄疽大鼠脑组织多胺代谢变化及临床意义.方法 雄性Wistar大鼠26只,随机分为假手术组(SO组)和胆总管结扎组(BDL组).术后9d门静脉抽血测量血清总胆红素(TBil)水平;取大鼠脑组织,高效液相色谱(HPLC)法测定腐胺、精眯和精胺的含量;比色法测定脑组织多胺氧化酶(PAO)活性水平.结果 BDL...     

Bombesin and neurotensin reduce endotoxemia, intestinal oxidative stress, and apoptosis in experimental obstructive jaundice

OBJECTIVE: To evaluate the effect of bombesin (BBS) and neurotensin (NT) on intestinal histopathology, intestinal oxidative stress, and endotoxemia in experimental obstructive jaundice. SUMMARY BACKGROUND DATA: Obstructive jaundice compromises gut barrier function, resulting in endotoxemia. BBS and NT, exerting various biologic actions on gastrointestinal tissues, preserve gut mucosal integrity in cases of injury or atrophy. METHODS: Seventy male Wistar rats were randomly divided into 5 groups: I = controls, II = sham operated, III = bile duct ligation (BDL), IV = BDL + BBS (30 microg/kg/d), V = BDL + NT (300 microg/kg/d). By the end of the experiment, on day 10, endotoxin was measured in portal and aortic blood. Tissue sections of the terminal ileum were examined histologically, and villus density, mucosal thickness, mitotic activity and apoptosis in crypts were assessed. In addition, ileal mucosa was analyzed for DNA and protein content. To estimate intestinal oxidant/antioxidant equilibrium, lipid peroxidation, protein oxidation, and thiol redox state (reduced glutathione [GSH], oxidized glutathione [GSSG], total nonprotein mixed disulfides [NPSSR], protein thiols [PSH], and protein disulfides [PSSP]) were determined on tissue homogenates from the terminal ileum. RESULTS: BBS or NT administration significantly reduced portal and systemic endotoxemia observed in obstructive jaundice. Both factors reversed obstructive jaundice-induced morphologic features of intestinal atrophy, increasing villus density and mucosal thickness. This effect was accompanied by induction of mitoses and reduction of apoptosis in intestinal crypts. Mucosal DNA and protein content were reduced, although not to significant levels, in BDL animals and restored to control levels after BBS or NT treatment. Moreover, BBS or NT administration protected the intestine in jaundiced rats against oxidative stress, as demonstrated by reduction of intestinal lipid peroxidation, increase of the antioxidant GSH, and decrease of the oxidized forms GSSG and NPSSR, while BBS additionally reduced protein oxidation as well. CONCLUSIONS: Administration of BBS or NT in bile duct-ligated rats exerts beneficial effects on intestinal oxidative stress, cell proliferation, apoptosis, and endotoxemia. This observation might be of potential value in patients with extrahepatic cholestasis.     

PPARs、NF-κB及SOD在梗阻性黄疸大鼠肝脏损害中的作用

目的 检测过氧化体增殖剂激活受体(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARs)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)在梗阻性黄疸大鼠肝脏中的表达,明确其在梗阻性黄疸肝脏损害中的作用及意义.方法 检测血清总胆红素(total bilirubin,TB)、直接胆红素(direct bilirubin,DB)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT).肝脏组织行HE病理切片检查.肝脏组织匀浆后检测组织中总SOD和CuZn-SOD活力,RT-PCR方法检测PPARs在肝脏中的mRNA,以免疫组织化学方法检测PPARs及NF-κB在肝脏中的表达.结果 胆道结扎组(bile duct ligation,BDL)血清TB、DB及ALT明显增高(P＜0.01).肝组织中总SOD和CuZn-SOD活力胆道结扎组较假手术组明显减低(P＜0.01).除7 d组的PPARβ外,胆道结扎组PPARs在肝脏中的mRNA表达较对照组明显下调(P＜0.01),且19 d组较7 d组显著;PPARs在肝脏组织表达明显下降(P＜0.01);NF-κBp65蛋白在胆道结扎组激活并出现核移位,19 d组较7 d组更加显著.胆道结扎组大鼠肝脏总SOD活力与PPARs蛋白表达呈显著正相关(P＜0.01),而NF-κBp65蛋白表达与PPARs蛋白表达呈显著负相关(P＜0.01).结论 PPARs在梗黄大鼠肝脏中,基因和蛋白水平均受到抑制,且随梗阻时间延长而加重;PPARs可能为SOD及NF-κB的上游调控因子,在梗黄肝脏损害中发挥作用.