橙皮素的大鼠血浆蛋白结合率研究

目的测定橙皮素的大鼠血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法结合高效液相色谱法(HPLC)对橙皮素与大鼠血浆的血浆蛋白结合率进行测定。结果在0.5、2.5和10μg/m L浓度水平橙皮素与大鼠血浆的血浆蛋白结合率分别为(93.5±4.2)%,(94.3±5.6)%和(93.9±3.8)%,三个浓度水平之间的血浆蛋白结合率差异无统计学意义(P≥0.05)。结论橙皮素与大鼠血浆蛋白高度结合。     

水杨酸在不同血浆中的蛋白结合率测定

目的研究水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中水杨酸的含量进行测定,计算水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果水杨酸低、中、高(0.6,1,3μg/ml)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(91.1±1.4)%,(90.2±2.5)%,(90.7±3.1)%;比格犬血浆蛋白结合率分别为(82.5±2.1)%,(81.3±1.8)%,(83.1±2.3)%;人血浆蛋白结合率分别为(96.5±2.7)%,(97.2±3.0)%,(96.4±1.6)%。结论水杨酸与血浆蛋白具有高强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。     

雷公藤红素在不同血浆中的蛋白结合率测定

目的:研究雷公藤红素与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法:采用血浆平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中雷公藤红素的含量进行测定,计算雷公藤红素与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果:雷公藤红素低中高(0.25,0.5,1.0μg.mL-1)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(78.5±1.6)%,(77.3±2.2)%,(76.4±2.9)%,比格犬血浆蛋白结合率分别为(69.6±4.7)%,(71.1±3.4)%,(68.0±2.1)%,人血浆蛋白结合率分别为(85.6±2.7)%,(84.0±4.7)%,(83.1±2.8)%。结论:雷公藤红素与血浆蛋白具有中等强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。     

荆芥内酯大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的:研究荆芥内酯与大鼠血浆蛋白的结合情况。方法:采用平衡透析法测定体外荆芥内酯对大鼠血浆蛋白的结合率,以HPLC法测定透析袋两侧溶液中荆芥内酯的质量浓度,计算其血浆蛋白结合率。结果:荆芥内酯与内标完全分离,血浆中其他成分无干扰,在0.05～50.3μg.mL-1浓度范围内线性关系良好。日内、日间精密度及提取回收率均符合方法学要求。低、中、高(0.08,0.63,6.30μg.mL-1)质量浓度下,荆芥内酯在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(62.23±1.25)%,(62.71±0.04)%和(63.99±0.79)%。结论:该方法操作简便、快速、准确,灵敏度高,能满足生物样品的分析要求。荆芥内酯具有中等强度的蛋白结合率,蛋白结合率与透析液的药物浓度无关。     

蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的：测定蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白的结合率。方法：采用平衡透析法模拟蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白的结合过程,建立HPLC-UV法测定蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白的结合率。结果：在透析24 h后,蟛蜞菊内酯在低（0.62μg·mL-1）、中（3.10μg·mL-1）、高（9.92μg·mL-1）3个质量浓度下与大鼠血浆蛋白的结合率分别为（87.9±2.1）%、（84.7±2.5）%、（83.8±1.9）%。结论：蟛蜞菊内酯与大鼠血浆蛋白有较强的结合作用。     

TJ0711盐酸盐的血浆蛋白结合率及其在大鼠体内的组织分布

目的:建立生物样品中TJ0711盐酸盐的浓度的测定方法,测定TJ0711盐酸盐在人标准血浆和大鼠血浆中的蛋白结合率,考察其在大鼠组织中的分布特性。方法:用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,用高效液相-荧光检测法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度。大鼠灌胃给予TJ0711盐酸盐30 mg.kg-1,测定10,25,60,180 min TJ0711盐酸盐在各组织中的含量。结果:当TJ0711盐酸盐的血药浓度为0.5,2.0,4.0,8.0μg.mL-1时,其在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(88.7±2.3)%,(87.8±1.0)%,(85.8±2.0)%和(86.8±0.9)%,在人血浆中的蛋白结合率分别为(92.1±0.8)%,(89.8±1.4)%,(90.4±1.0)%和(90.4±1.7)%。药物在大鼠体内以肾、肝、肺中分布较多,脑和脂肪组织也能检测到药物,绝大多数组织的药物含量在给药后10 min或25 min最高1,80 min后药物含量显著下降。结论:TJ0711盐酸盐在人和大鼠血浆中的蛋白结合率均属于高度结合(>80%),且不随药物浓度的增加发生变化,但在人和大鼠血浆中的蛋白结合率差异具有显著性(...     

冬凌草甲素在不同种属血浆中蛋白结合率的HPLC法测定

目的:建立冬凌草甲素在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白中蛋白结合率的测定方法,并计算不同种属血浆蛋白的相关参数。方法:采用HPLC法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度,应用平衡透析法测定蛋白结合率。结果:大鼠血浆中冬凌草甲素高、中、低3个浓度的血浆蛋白结合率分别为(69.66±12.8)%,(59.62±12.6)%,(57.94±4.1)%;人血浆中冬凌草甲素高、中、低3个浓度的血浆蛋白结合率分别为(78.15±3.6)%,(77.92±8.8)%,(76.72±7.3)%;牛血清白蛋白中冬凌草甲素高、中、低3个浓度的血浆蛋白结合率分别为(35.58±7.2)%,(34.59±10.8)%,(32.03±6.0)%。结论:在体外冬凌草甲素与大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白属中等结合型药物,且蛋白结合率随着药物血浆浓度的增加无明显的浓度依赖性。     

微透析法测定虎杖苷的体外血浆蛋白结合率及与超滤法的比较

目的 采用微透析技术研究虎杖苷的体外血浆蛋白结合率,并与超滤法比较。方法 微透析探针依次浸入含虎杖苷20,60,200μg·mL1的大鼠、人血浆中,灌注器以2.5μg·min1的流速依次灌注含虎杖苷0,10,30,100,300μg·mL1的生理盐水,每15min收集1次样品,HPLC分析虎杖苷浓度。以灌注液与透析液中虎杖苷的浓度差对灌注液浓度进行线性回归,计算血浆中游离虎杖苷的浓度,进而计算虎杖苷的血浆蛋白结合率,并与超滤法进行比较。结果 微透析测定虎杖苷与大鼠、人血浆蛋白结合率平均值分别为86.15%,89.08%,超滤法分别为85.60%和87.24%,两种方法结果比较接近。结论 虎杖苷与大鼠、人血浆蛋白有较高的结合率,微透析法和超滤法结果一致。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中伊马替尼浓度及其药动学

目的建立大鼠血浆中伊马替尼的高效液相色谱测定方法,研究伊马替尼在大鼠体内的药动学特征。方法血浆经高氯酸沉淀,以ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈:0.1%TFA:水=20:36:44(V/V/V),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为282 nm。测定10只雄性SD大鼠单剂量伊马替尼50 mg/kg(-1),检测波长为282 nm。测定10只雄性SD大鼠单剂量伊马替尼50 mg/kg^(-1)灌胃后的血药浓度经时过程。由DAS2.0程序处理计算药动学参数。结果伊马替尼浓度在0.10(-1)灌胃后的血药浓度经时过程。由DAS2.0程序处理计算药动学参数。结果伊马替尼浓度在0.10²0.00μg·mL20.00μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),定量下限为0.10μg·mL(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),定量下限为0.10μg·mL^(-1),日内、日间RSD均小于10%,回收率均大于85%,伊马替尼在大鼠体内峰值浓度p_(max)为(11.8±2.0)μg·mL(-1),日内、日间RSD均小于10%,回收率均大于85%,伊马替尼在大鼠体内峰值浓度p_(max)为(11.8±2.0)μg·mL^(-1),达峰时间t_(max)为(3.0±0.7)h,AUC_(0-∞)为(126±28)μg·mL(-1),达峰时间t_(max)为(3.0±0.7)h,AUC_(0-∞)为(126±28)μg·mL^(-1),AUC_(0-∞)为(128±28)μg·h·mL(-1),AUC_(0-∞)为(128±28)μg·h·mL^(-1),t_(1/2α)为(2.4±0.8)h,t_(1/2β)为(7.8±0.9)h。结论本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆伊马替尼浓度的测定及其药动学研究。     

五味子甲素4℃条件下血浆蛋白结合率的测定北大核心CSCD

目的:建立HPLC测定五味子甲素与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法:采用HPLC法测定大鼠血浆中五味子甲素的总浓度及游离药物浓度,色谱分离采用Agilent Zorbax SB-C18(3.0 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以水-乙腈(40∶60)为流动相,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长225 nm,进样量5μL;应用平衡透析法测定4℃条件下五味子甲素与大鼠血浆蛋白的结合率。结果:低、中、高3种浓度下,五味子甲素的血浆蛋白结合率分别为(76.0±4.7)%、(87.1±3.2)%、(89.1±1.7)%。结论:在体外,五味子甲素与大鼠血浆蛋白结合率较高,不存在浓度依赖性。     

氯化两面针碱与兔血浆的蛋白结合率研究

目的:测定氯化两面针碱与兔血浆蛋白的结合率。方法:通过平衡透析法结合高效液相色谱法测定氯化两面针碱与兔血浆蛋白的结合率。结果:氯化两面针碱与内标(氯霉素)完全分离,血浆中其它成分无干扰;其在0.03188～2.04000μg·mL-1浓度范围内与氯化两面针碱同氯霉素峰面积比线性关系良好;0.125、0.25、0.5μg·mL-1浓度样品的方法回收率均>95%,日内、日间精密度的RSD均<5%;3种药物浓度的血浆蛋白结合率分别为73.21%、72.83%、70.30%。结论:氯化两面针碱与兔血浆蛋白具有中等强度的蛋白结合率。     

超滤法结合液质联用技术测定抗肿瘤化合物CJ-6在不同种属中的血浆蛋白结合率

目的:通过建立测定血浆中抗肿瘤化合物N-(4-((2-(环丙烷甲酰胺)吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-4-甲基-3,5-二氧基-2-苯基-2,3,4,5-四氢-1,2,4-三嗪-6-甲酰胺(CJ-6)的分析方法,测定CJ-6在不同种属(大鼠、猴、人)中的血浆蛋白结合率.方法:采取超滤法测定CJ-6在大鼠、猴、人血浆...     

HPLC测定吉米沙星血药浓度

目的建立高效液相色谱法快速测定人血浆中吉米沙星药物浓度。方法色谱柱为KromasilC18（250min×4．6mm,5μm）;流动相为乙腈-10mmol·L-1醋酸铵缓冲液（pH2．2,含10mmol·L-1高氯酸）（22：78）;柱温40℃;流速1．5mL·min^-1;检测波长为338nm。血浆样品经5％硫酸锌甲醇溶液沉淀蛋白后进样测定。结果本测定方法的线性范围：0．05-5μg·mL-1,r=0．9999。方法回收率93．2％-104．8％,批内RSD为1．8％-5．1％,批间RSD为7．7％-8．5％。吉米沙星的最低检测浓度为0．02μg·mL^-1。结论本方法简单、快速、灵敏、重复性好,适用于吉米沙星生物利用度及人体药动学研究。     

HPLC法测定蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率

目的:建立测定蝙蝠葛碱的高效液相色谱(HPLC)法,并研究蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法,HPLC法测定蝙蝠葛碱的浓度,计算蝙蝠葛碱大鼠及人血浆蛋白结合率。结果:透析外液中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;大鼠血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;人血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系。蝙蝠葛碱在高、中、低浓度下,其大鼠血浆蛋白结合率分别为(69.63±1.30)%、(68.64±1.10)%、(72.54±0.50)%,人血浆蛋白结合率分别为(82.1±1.00)%、(84.96±0.70)%、(78.79±0.60)%。结论:HPLC法用于蝙蝠葛碱生物样品测定具有简便、灵敏与选择性高的特点;蝙蝠葛碱具有较强的血浆蛋白结合率,且大鼠和人血浆蛋白结合率具有种属差异性,人血浆蛋白结合率高于大鼠血浆蛋白结合率(P<0.05)。     

RP-HPLC法测定人血浆中黄豆苷元的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法。方法:采用甲醇沉淀蛋白法提取血浆中黄豆苷元,色谱柱为Hypersil ODS C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为5%乙酸溶液(用三乙胺调pH值为4)-甲醇(55∶45),检测波长为254nm,流速为1.0mL·min-1,柱温25℃。结果:黄豆苷元血药浓度在1.5～700.0ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995),低、中、高浓度(5.0、16.5、231.0ng·mL-1)的平均回收率分别为(96.95±4.36)%、(101.30±3.32)%和(98.73±2.54)%。结论:本法简单、快速、准确,可用于黄豆苷元的血药浓度测定和人体药动学研究。     

HPLC法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用外标法,以甲醇沉淀法处理血样后进样测定,色谱柱为Intersil ODS-3,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为27℃。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.8～40μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),定量下限为0.5μg·mL-1;平均回收率为(99.35±3.93)%,日内、日间RSD均<5%。20例癫痫患儿拉莫三嗪血药浓度的范围为1.3～15.4μg·mL-1,中位数为4.7μg·mL-1。患儿血浆中拉莫三嗪的血药浓度随年龄的减小,波动范围明显增大。结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于拉莫三嗪的血药浓度监测及其药动学研究。年龄越小的患儿,越需要对拉莫三嗪进行血药浓度监测。     

RP-HPLC法测定盐酸伪麻黄碱的血药浓度及人体药动学研究

目的：建立高效液相色谱法测定盐酸伪麻黄碱（PSE）血药浓度的方法,研究洛芬伪麻片的人体药动学。方法：8名健康男性受试者单剂量口服洛芬伪麻片（含盐酸伪麻黄碱30mg）后,采用高效液相色谱法测定血浆中盐酸伪麻黄碱的浓度,色谱柱：Diamonsil^TM C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相：甲醇-0．02mol·L^-1磷酸二氢钠（舍0．005mol·L^-1辛烷磺酸钠,磷酸调pH3．8）（45：55）;流速：1mL·min^-1;检测波长210nm。结果：线性范围20-1000ng·mL^-1（r=0．9998）,最低检测限为1．2ng,日内精密度（RSD）小于3．26％,日间精密度（RSD）小于4．89％,绝对回收率为75．76％～86．52％,PSE的主要药动学参数为：AUC0-∞为（1．83±0．60）μg·h·mL^-1,Cmax为（279．52±92．46）ng·mL^-1,tmax为（1．32±0．24）h,t1/2为（5．37±0．92）h。结论：本方法简便、快速、准确,可用于盐酸伪麻黄碱的血药浓度测定及药代动力学研究。     

Plasma protein binding of warfarin: methodological considerations

Recent theoretical work has suggested that radiochemical impurities can significantly alter the binding results for highly protein-bound drugs. We compared protein binding of warfarin by ultrafiltration and equilibrium dialysis with 98% radiochemically pure [14C]warfarin. Ultrafiltration and equilibrium dialysis were performed at 37 degrees C and pH 7.45 on the plasma of patients receiving chronic warfarin therapy. Binding to plasma from seven patients were measured in duplicate by both a nonspecific radioisotopic technique and a specific HPLC technique. The nonspecific technique gave percentage of free warfarin values of 1.84 +/- 0.11 (mean +/- SD) and 1.59 +/- 0.14 for ultrafiltration and equilibrium dialysis, respectively. The HPLC procedure yielded a percentage of free warfarin by ultrafiltration of 0.969 +/- 0.203 and a value of 0.690 +/- 0.095 by equilibrium dialysis (p less than 0.05). The HPLC procedure for protein binding was performed on plasma samples from 12 additional patients and yielded a percentage of free warfarin of 1.01 +/- 0.69 by ultrafiltration and 0.44 +/- 0.34 by equilibrium dialysis (p less than 0.05). It can be concluded that radiochemical impurities may lead to significant overestimation of the percentage of free warfarin. Ultrafiltration yielded a higher percentage of free warfarin than did equilibrium dialysis, but the ability to distinguish binding differences among patients was similar.