基质金属蛋白酶-2和-9在宫颈癌的表达及其相关性研究

目的　探讨基质金属蛋白酶 - 2和 - 9(MMP- 2和 MMP- 9)在宫颈癌组织中的表达及其与癌浸润和转移的相关性。方法　采用免疫组化 L s AB法检测 6 2例宫颈浸润癌、5例原位癌、10例正常宫颈以及 10例转移淋巴结中 MMP- 2和 MMP- 9蛋白的表达。结果　 MMP- 2和 MMP- 9在宫颈浸润癌细胞及癌旁间质细胞中表达显著高于原位癌及正常宫颈上皮 (P<0 .0 5 ) ,MMP- 9与 MMP- 2有弱相关性 ,MMP- 9的阳性表达显著强于 MMP- 2 (P<0 .0 1) ;MMP- 2和 MMP- 9的表达与临床分期、组织学分级、病理类型均无相关性 (P>0 .0 5 ) ;MMP- 9的表达与宫颈癌淋巴转移有关。结论　基质金属蛋白酶 MMP- 2和 MMP- 9在宫颈癌组织中的高表达与宫颈癌的侵袭性行为有关 ,MMP- 9与宫颈癌的侵袭性行为关系更密切 ,可能成为判断早期宫颈癌预后的指标之一。     

CD44v7-8在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中的表达及临床意义

目的　探讨CD44v7 8在宫颈鳞状上皮内瘤样病变 (CIN)及宫颈鳞状癌中的表达及临床意义。方法　采用免疫组化S-P法对 10例正常宫颈、16例鳞状上皮CIN (其中轻度 5例、中度 5例、重度 6例 )、10例原位癌及 30例宫颈浸润癌标本中CD44v7 8的表达进行检测。结果　正常宫颈组织中 ,CD44v7 8无阳性表达。轻、中、重度CIN阳性表达率分别为 2 0 %、40 %及 6 6 .6 7%,各组间有极显著差异 (P <0 .0 1)。从鳞状上皮CIN→原位癌→宫颈浸润癌中 ,CD44v7 8阳性表达呈上升趋势 ,但原位癌与浸润癌间无显著差异 (P >0 .0 5 )。CD44v7 8阳性表达率与宫颈癌临床分期呈正相关 (P <0 .0 1) ,与病理分级无关(P >0 .0 5 )。有淋巴结转移者CD44v7 8阳性表达明显高于无淋巴结转移者 (P <0 .0 1)。结论　CD44v7 8阳性表达对宫颈癌的发生发展及评估预后有重要意义。     

VEGF-C在浸润性宫颈癌中的表达及意义

目的 :检测血管内皮生长因子 ( VEGF- C)在宫颈癌组织中的表达及其与宫颈癌各病理、临床参数的关系 ,为预测宫颈癌转移、评价预后及合理治疗提供科学依据。方法 :应用免疫组织化学法对 5 7例浸润性宫颈癌、1 0例正常宫颈组织、1 2例宫颈原位癌、8例宫颈上皮不典型增生患者分别检测 VEGF- C的表达情况。结果 :VEGF- C在浸润性宫颈癌、宫颈原位癌和上皮不典型增生、正常宫颈组织中的表达率分别为 5 0 .9%、1 5 %、1 0 % ;VEGF- C的阳性表达率在有淋巴结转移组中为 85 % ,无淋巴结转移组中为 32 .4% ,差别有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;在有深肌层浸润组的宫颈癌中 ,VEGF- C阳性表达率为 68.7% ,浸润深度未达到深肌层者的表达为 40 .6% ,二者间存在显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 :VEGF- C的表达与浸润性宫颈癌淋巴结转移、间质浸润明显相关 ,而与临床分期、病理类型、病理分级、瘤体大小、患者年龄等无关 ;VEGF- C表达异常可作为评估宫颈癌浸润深度、淋巴结转移状况、选择治疗方案及判断预后的有用指标     

宫颈癌组织NDRG1与P16蛋白表达及其意义

目的研究N-Myc下游调节基因1(NDRGl)蛋白与P16蛋白在宫颈癌组织的表达及其意义。方法采用免疫组化方法测定30例正常宫颈组织及120例宫颈癌组织NDRG1与P16蛋白表达水平。结果 NDRG1蛋白在宫颈癌组织阳性表达率明显低于正常宫颈组织(χ2=24.885,P<0.05);宫颈癌组织中NDRG1阳性表达与病人病理分化程度、FIGO分期、病理类型、有无淋巴结转移无明显相关性。P16蛋白在宫颈癌组织阳性表达率明显高于正常宫颈组织(χ2=36.587,P<0.05)。P16蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达与病理分化程度、FIGO分期、病理类型无明显相关性,而与有无淋巴结转移有明显相关性(χ2=4.166,P<0.05)。结论 NDRG1蛋白在宫颈癌组织中的低表达及P16蛋白的高表达与宫颈癌的发生发展有关,两者联合检测对宫颈癌的早期诊断以及治疗方法的选择有重要参考价值。     

CD44v6在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中的表达

目的 :探讨 CD44v6在宫颈癌中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化 S- P法对 1 0例正常宫颈上皮、1 6例宫颈上皮内瘤样病变 ( CIN)、1 0例原位癌及 30例宫颈浸润癌标本中 CD44v6的表达进行检测。结果 :正常宫颈组织中 ,CD44v6无阳性表达。在宫颈CIN→原位癌→宫颈浸润癌中 ,阳性表达呈上升趋势。CD44v6阳性表达率与临床分期、病理分级呈正相关 ,有淋巴结转移者 CD44v6阳性表达明显高于无淋巴结转移者。结论 :CD44v6阳性表达与淋巴结转移密切相关 ,可作为评估预后的生物学指标。     

血管内皮生长因子在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

①目的了解血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达及其临床意义.②方法应用LSAB免疫组织化学技术,检测42例宫颈癌及13例正常宫颈组织标本中VEGF的表达.③结果宫颈癌组织中VEGF的阳性表达率为54.8%(23/42),而正常宫颈组织中VEGF均为阴性表达;肿瘤直径≥4cm或间质浸润≥1/2的宫颈癌病人VEGF阳性表达率明显高于肿瘤直径＜4cm或间质浸润＜1/2者(X2＝4.52、4.00,P＜0.05).有宫颈旁浸润或盆腔淋巴结转移者VEGF的阳性表达率显著高于无宫颈旁浸润和淋巴结转移者(X2＝4.48、7.27,P＜0.05).④结论 VEGF表达与宫颈癌的局部浸润和转移有关,可作为判断宫颈癌生物学行为的指标之一.     

CD44V6、CD44V7-8在宫颈癌中的表达

目的 :探讨CD4 4V6和CD4 4V7 8在宫颈癌中的表达及临床意义 .方法 :采用免疫组化S P法对 10例正常宫颈上皮、16例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)、10例原位癌及 30例宫颈浸润癌标本中CD4 4V6和CD4 4V7 8的表达进行检测 .结果 :正常宫颈组织中 ,CD4 4V6、CD4 4V7 8均无阳性表达 .在宫颈CIN→原位癌→宫颈侵润癌中 ,阳性表达均呈上升趋势 ,两者呈正相关 (r =0 .96 3,P <0 .0 5 ) .CD4 4V7 8阳性表达早于CD4 4V6 .CD4 4V6阳性表达率与临床分期、病理分级呈正相关 (r=1.0 0 ,P <0 .0 5 ) ,有淋巴结转移者CD4 4V6阳性表达明显高于无淋巴结转移者 .结论 :CD4 4V7 8阳性表达是一个较早的分子事件 ,对宫颈癌的发生可能起重要作用 ,可作为早期诊断宫颈癌的潜在指标 ;CD4 4V6阳性表达与淋巴结转移密切相关 ,可作为估计预后的生物学指标 .联合检测CD4 4V6、CD4 4V7 8,对宫颈癌的早期诊断、免疫治疗和评估预后具有重要意义 .     

端粒酶在宫颈癌中的表达及意义

目的　探讨端粒酶与宫颈癌及与淋巴结转移的关系。方法　采用银染色端粒酶重复扩增法(TRAP)检测各类宫颈组织中端粒酶活性。结果　正常宫颈、慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变组织端粒酶的阳性表达率分别为 6 .6 7%、8.5 7%、2 6 .32 % ,与宫颈癌组织阳性表达率 (78.85 % )比较具有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ;宫颈癌组织无或有淋巴结转移其端粒酶活性阳性表达率分别为 6 9.70 %、94 .74 % ,两者之间比较亦有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　端粒酶活性在宫颈癌组织中增高且与淋巴结转移相关     

HPV-16、HSV-2、EBV感染及PCNA表达与宫颈癌关系研究

[目的 ]探讨HPV - 16、HSV - 2、EBV感染及增殖细胞核抗原表达与宫颈癌的关系。[方法 ]采用免疫组化SP法分别检测 5 4例宫颈癌和 2 0例正常宫颈的HPV - 16、HSV - 2、EBV蛋白及PCNA表达情况。 [结果 ]HPV - 16、HSV - 2、EBV蛋白在宫颈癌组织和正常宫颈表达率分别为 5 7.4 %、38.9%、5 5 .6 %和 5 %、5 %、10 % (P <0 .0 5 ) ;PCNA在宫颈癌和正常宫颈表达率为81.5 %和 15 % (P <0 .0 5 ) ,而且随着宫颈癌病理分级的增高 ,其表达的阳性率也增高 ,强度增强 ;HPV - 16阳性组的PCNA表达高于阴性组 (P <0 .0 5 ) ,HSV - 2、EBV阳性组和阴性组的PCNA表达无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;3种病毒混合感染者的PCNA表达均为阳性。 [结论 ]HPV - 16、HSV - 2、EBV感染会促进宫颈癌的发生     

上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中Ki67、P16的异常表达

目的　研究宫颈癌前病变及癌活检标本中Ki6 7、P16蛋白的异常表达 ,探讨其与宫颈癌变的关系及作为早期癌变生物学标志物的可能性。方法　对正常宫颈黏膜上皮、宫颈上皮内肿瘤性病变 (CIN)及宫颈鳞癌活检组织共 6 2例 ,应用免疫组化技术对宫颈癌变过程中Ki6 7、P16蛋白的异常表达进行研究。结果　宫颈癌Ki6 7阳性表达率 90 .5 %,其表达与组织学分级呈正相关 (P <0 .0 1)。P16在宫颈癌中阳性表达率 5 7.1%,而在正常宫颈黏膜上皮表达率为 90 .4%,其表达与宫颈癌组织学分级有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　Ki6 7、P16蛋白异常表达与宫颈癌显著相关 ,提示将二者联合起来作为筛选癌前病变高危个体的生物指标可能会更有意义。     

宫颈癌组织中c-myc、bcat1的表达及其临床意义

目的 探究c-myc、bcat1表达与宫颈癌发生发展及临床特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法半定量检测30例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变（CIN）组织、80例宫颈癌组织（40例宫颈鳞癌、40例宫颈腺癌）中c-myc及bcat1蛋白的表达情况,并进行Spearman秩相关分析,分析两者表达水平与宫颈癌临床病理因素间的关系。结果 c-myc在正常宫颈组织、CIN组织、宫颈癌组织中的阳性表达率分别为16.7%（5/30）、43.3%(13/30)、73.8%(59/80);bcat1阳性表达率分别为10.0%（3/30）、23.3%(7/30)、52.5%(42/80);c-myc与bcat1在宫颈鳞癌及腺癌组织中的秩相关系数r_s分别为0.773（P=0.000）、0.369(P=0.019);c-myc阳性表达率与癌组织病理类型（腺癌/鳞癌）、癌组织分化程度、间质浸润深度、有无脉管浸润有关(P<0.05);bcat1阳性表达率与癌组织分化程度、有无脉管浸润及Ki67指数有关(P<0.05)。结论 c-myc的高表达可能促进宫颈癌的侵袭及转移,bcat1的高表达可能促进宫颈癌的增殖、侵袭与转移,两者可能在宫颈癌致病过程中存在协同作用。     

P21及CDK6与宫颈鳞状细胞癌的关系

目的 观察P21、CDK6在宫颈鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其与宫颈鳞状细胞癌的关系.方法 采用免疫组织化学ABC法检测100例宫颈鳞状细胞癌、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)及20例正常宫颈组织中P21及CDK6的表达情况,分析他们与癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期的关系.结果 宫颈鳞状细胞癌组织的P21及CDK6表达率均明显高于CIN组及正常组;P21的低表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期(P＜0.05)有关,与肿瘤分化程度(P＞0.05)无关;CDK6的高表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期(P＜0.05)均有关.结论 P21及CDK6表达异常可能在宫颈鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用;且二者对判断宫颈鳞状细胞癌的预后有一定意义.     

VHL基因和HIF-1α表达与子宫颈癌相关性研究

目的：探讨VHL基因和HIF-1α蛋白表达水平对子宫颈癌临床病理因素的影响。方法用免疫组织化学SP法检测VHL基因和HIF-1α在85例子宫颈癌和32例子宫颈正常粘膜组织中的表达水平,并分析它们表达与子宫颈癌分化程度、临床分期、转移及预后的相关性。结果85例子宫颈癌组织中有39例VHL基因呈阳性表达（45．88％）,32例子宫颈正常粘膜中有30例阳性表达VHL基因（93．75％）（P＜0．01）。在85例子宫颈癌组织中HIF-1α蛋白阳性表达67例（78．82％）,在32例子宫颈正常粘膜中HIF-1α蛋白阳性表达7例（21．88％）（P＜0．01）;子宫颈癌的分化程度、临床分期、转移及预后与VHL基因的阴性表达和HIF-1α蛋白的阳性表达密切相关（P＜0．05）。结论VHL基因表达下调和HIF-1α蛋白表达上调是子宫颈癌的侵袭生长与扩散转移过程中的重要生物学事件。     

子宫颈鳞癌组织中MMP-7和CK20的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和细胞角蛋白20(CK20)在子官颈鳞癌中的表达特点及其相互关系,以及它们在子官颈鳞癌侵袭转移中的作用.方法 采用RT-PCR法检测33例子宫颈鳞癌和12例正常宫颈组织中MMP-7 mRNA和CK20 mRNA的表达水平,分析其表达水平与临床病理特征的关系.结果 MMP-7 mRNA在子宫颈鳞癌组织中的表达水平显著高于正常宫颈组织(P＝0.018),与子宫颈鳞癌分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与临床分期、年龄等因素无关(P>0.05);CK20 mRNA在子宫颈鳞癌组织中的表达水平高于正常宫颈组织(P=0.002),与子宫颈鳞癌分期、分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与年龄等因素无明显相关(P>0.05).在子宫颈鳞癌中MMP-7mRNA与CK20 mRNA的表达之间存在正相关关系(r=0.42735,P=0.0262).PCR法检测MMP7和CK20mRNA阳性率显著高于免疫组化法(P<0.05).结论 MMP-7 mRNA及CK20 mRNA的高表达与子宫颈鳞癌的侵袭转移有关,可作为检测早期官颈鳞癌淋巴转移的生物学指标.     

胃癌组织中Pin1和β-catenin的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系

目的:探讨胃癌组织中Pin1与β-catenin的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法:应用S-P免疫组化技术检测50例胃癌组织及30例正常胃组织(对照组)中Pin1、β-catenin蛋白的表达,分析两指标间相关性及其与胃癌临床病理学特征和转移的关系。结果:胃癌组织中Pin1与β-catenin的阳性率表达明显高于对照组,分别为24%,62%。Pin1与β-catenin在胃癌组织中的表达密切相关(r=0.51,P<0.01));Pin1异常表达与胃癌病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);β-catenin异常表达与病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有相关性(P<0.05)。结论:Pin1与β-catenin胃癌组织中存在异常表达,且两指标间呈正相关,其阳性表达与胃癌病理分化程度、临床分期、淋巴结转移有相关性。Pin1与β-catenin有可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用,其阳性表达与胃癌侵袭转移有密切关系,并可能成为判断胃癌转移及预后的指标之一。     

氨肽酶N在乳腺癌中的表达及与MMP-2、MMP-9 的相关性研究

目的 研究氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)在乳腺癌中的表达及临床意义,并观察其与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的关系.方法 收集河北省人民医院病理科2011年7月至2012年9月乳腺癌石蜡标本60例,癌旁正常乳腺组织石蜡标本20例,及患者的临床病理资料.采用免疫组织化学SP法检测APN在80例标本中的表达,并分析APN表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系.检测MMP-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达,及与APN表达的相关性.结果 APN在乳腺癌中的阳性表达率36.7％ (22/60)明显高于癌旁正常乳腺组织0％(0/20)(x2=10.115,P=0.001).APN在乳腺癌中的表达与肿瘤病理类型有关(P =0.035),多表达于浸润性导管癌;与患者绝经状况、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、淋巴结转移状态、ER、PR、Her-2等无关(P＞0.05).乳腺癌组织APN的表达与MMP-2、MMP-9的表达无相关性(P＞0.05).结论 APN在乳腺癌中的表达高于正常乳腺组织,但APN在乳腺癌中侵袭转移的机制有待进一步深入研究.     

人类黑色素瘤相关抗原A9在早期宫颈癌中的表达研究

目的 检测人类黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)在正常宫颈和早期宫颈癌组织中的表达,探讨其在早期宫颈癌中的致病机制及临床病理特征之间的关系.方法 收集宫颈癌组织69例、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织30例和正常宫颈组织标本20例,应用免疫组织化学SP法检测MAGE-A9的表达,应用统计学方法分析其与年龄、FIGO分期、组织病理学分级及淋巴结转移等因素间的关系.另取20例宫颈癌、15例C1N、15例正常的新鲜组织,应用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法检测不同宫颈组织中MAGE-A9基因及其蛋白的表达水平.结果 MAGE-A9在正常宫颈组织不表达,CIN及宫颈癌组织中均有表达,阳性表达率分别为 5.00％、13. 33％、47. 83％,组间差异有统计学意义(P＜0.05).其在早期宫颈癌的表达与FIGO期、组织病理学分级、淋巴结转移有关,与年龄、组织类型无关.RT-qPCR结果提示,宫颈癌组织中的MAGE-A9表达量明显高于CIN及正常组织,宫颈癌组与正常组及CIN组间差异有统计学意义(P＜0. 05),而CIN与正常组织之间差异无统计学意义.结论 MAGE-A9在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中均有表达,阳性表达率随着疾病的进展而增高,提示在宫颈癌的发生发展中MAGE-A9具有重要作用.     

胃癌组织p16基因蛋白表达的意义

目的　检测 p1 6基因蛋白在胃癌组织、癌旁组织中的表达及其分布特点 ,分析其与胃癌临床病理学特征及预后的关系 .方法　采用 S- P免疫组织化学法对 53例胃癌组织及 35例癌旁组织进行 p1 6蛋白的定位观察 .结果　各病理类型胃癌组织、癌旁组织均有 p1 6基因蛋白表达 .阳性率分别为 62 .3% (33/53)和 88.6% (31 /35) ,阳性细胞的棕黄色颗粒主要位于细胞核 .胃癌 p1 6基因蛋白表达与性别、年龄、肿瘤部位在统计学上无差异 (P>0 .0 5) ;而与组织学类型、病理分级、淋巴结转移、临床病理分期在统计学上有差异 (P<0 .0 5) .p1 6蛋白阳性者 5年生存率 51 .0 %高于 p1 6蛋白阴性者 2 0 .0 % (P<0 .0 5) .结论　 p1 6基因缺失和表达水平的改变与胃癌发生、发展密切相关 ,检测 p1 6基因蛋白表达可作为辅助临床判断胃癌的生物学行为及推测预后的指标     

宫颈鳞状细胞癌中Vimentin、Ki-67蛋白的表达及与临床病理特征的关系

目的 探讨宫颈鳞状细胞癌中波形蛋白(Vimentin)及Ki-67蛋白的表达及与宫颈鳞状细胞癌的临床病理特征关系,进一步分析两者在宫颈鳞状细胞癌中表达的相关性。 方法 采用免疫组化SP法检测57例宫颈鳞状细胞癌组织中Vimentin和Ki-67蛋白的表达情况,结合患者的临床病理资料,进行统计学处理分析。 结果 57例宫颈鳞状细胞癌组织中,Vimentin阳性表达率为75.4%(43/57),平均得分为(2.41±1.52)分;Ki-67阳性表达率高达100.0%,平均得分为(4.48±1.59)分。Ki-67在宫颈鳞状细胞癌组织中的阳性表达率显著高于Vimentin,差异有统计学意义(χ2=15.960,P＜0.01)。Pearson相关性分析表明,宫颈鳞状细胞癌组织中Vimentin与Ki-67表达呈显著正相关(r=0.984,P=0.000)。Ki-67、Vimentin表达均与患者有无局部侵袭、淋巴结转移及肿瘤的分化程度密切相关(P=0.003,0.000,0.017;P=0.001,0.003,0.008),而与年龄、肿瘤大小和分期无关(P＞0.05)。 结论 宫颈鳞状细胞癌组织中Ki-67呈高表达,Ki-67、Vimentin表达与肿瘤的发生、转移和分化程度密切相关,对于宫颈癌的治疗具有重要意义。      

N-cadherin、E-cadherin和P63蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）以及P63蛋白在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其与患者临床病理学特征之间的相关性。方法 采用免疫组化染色法分别检测60例正常肝组织、60例HCC组织及其癌旁组织标本中N-cadherin、E-cadherin以及P63蛋白的表达,并分析HCC组织中三者表达与患者临床病理学特征的关系。结果 N-cadherin在正常肝组织、癌旁组织、肝癌组织中的阳性表达率逐渐升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。而E-cadherin在正常肝组织、癌旁组织、肝癌组织的阳性表达率则逐渐降低,差异均有统计学意义（P<0.05）,正常组织的P63阳性表达率显著高于癌旁组织和HCC组织,差异有统计学意义（P<0.05）,而癌旁组织与HCC组织间比较差异无统计学意义（P>0.05）。N-cadherin的高表达与HCC患者的高病理学分级、门静脉受侵犯、高临床分期等结局有显著相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。E-cadherin的低表达与HCC患者的高病理学分级、门静脉受侵犯、高临床分期等结局有显著相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。P63的低表达与HCC患者的高病理学分级、肿瘤直径、高临床分期等结局有显著相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。P63的表达与E-cadherin的表达呈正相关（r=0.467,P<0.01）,而与N-cadherin的表达呈负相关（r=-0.472,P<0.01）。结论 HCC组织中N-cadherin的高表达和P63蛋白、E-cadherin的低表达可能与肿瘤的发生、发展及转移密切相关。