附子干姜不同药对配伍提取物对小鼠脾细胞增殖的影响

目的:观察四逆汤组方附子和干姜的不同药对配伍提取物对小鼠脾细胞增殖的影响。方法:附子(F)分别与葱白(B)、甘草(C)、猪胆汁(D)、干姜(G)、人参(R)配伍和G分别与B、C、D、R配伍的乙醚、氯仿、水提取物为研究对象,采用小鼠脾细胞为实验模型,MTT法测定细胞内线粒体脱氢酶活性。结果:与对照组比较,乙醚提取物中与附子配伍的FB、FC、FD、FG、FR组均有刺激脾细胞增殖作用(P<0.05,P<0.01),与干姜配伍中只有GR组有刺激脾细胞增殖作用(P<0.05)。氯仿提取物中FG、FR组有刺激脾细胞增殖作用(P<0.05,P<0.01)且刺激作用强于F组(P<0.05)。水提取物中与附子配伍的各组均有刺激脾细胞增殖作用(P<0.05,P<0.01),与干姜配伍各组刺激作用较弱(P<0.05),且FB、FC、FG、FR组刺激作用强于F组(P<0.05,P<0.01)。结论:与附子配伍的药对提取物活性较强,与干姜配伍活性较弱,体现出附子配伍的君药作用。与附子配伍的氯仿、水提取物活性强于附子,揭示药对配伍增效作用。     

3个厂家来源黄芪皂苷提取物对淋巴细胞增殖的影响

目的:考察不同来源黄芪皂苷提取物对体外脾淋巴细胞增殖的影响。方法:MTT法分别检测3批黄芪皂苷提取物对正常脾淋巴细胞、ConA诱导脾淋巴细胞增殖的影响。结果:各批样品对正常脾淋巴细胞增殖均有显著抑制作用,且高质量浓度(166 mg·L-1)抑制作用最强;各批样品对经ConA诱导的脾淋巴细胞,质量浓度为16.6～166 mg·L-1时有显著抑制作用,质量浓度为1.66 mg·L-1时有明显促增殖作用。结论:不同来源黄芪皂苷提取物的免疫活性作用趋势相同,但作用强度存在差异。     

补益脾肾方联合氟尿嘧啶对荷瘤小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的观察补益脾肾方联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对荷瘤小鼠的抑瘤和免疫调节作用。方法建立H22肝癌荷瘤小鼠模型。随机分为4组:模型组、5-Fu组、补益脾肾方(高、低剂量)+5-Fu组,每组8只,造模次日开始治疗。模型组口服和腹腔注射等量生理盐水,5-Fu组腹腔注射5-Fu,补益脾肾方高、低剂量+5-Fu组口服补益脾肾方和腹腔注射5-Fu。用药10 d,停药次日处死小鼠,检测小鼠瘤质量、肿瘤抑制率、体质量、脾指数、脾脏NK细胞杀伤活性、T淋巴细胞增殖活性、T淋巴细胞亚群比例。结果补益脾肾方+5-Fu各组瘤质量明显低于5-Fu组和模型组(P0.05);与模型组相比,5-Fu组体质量、脾指数、脾脏NK细胞杀伤活性、T淋巴细胞增殖活性、CD4/CD8值明显降低(P均0.05),而联合治疗各组体质量、脾指数、脾脏NK细胞杀伤活性、T淋巴细胞增殖活性、CD4/CD8值明显升高(P均0.05)。结论补益脾肾方与5-Fu合用可增强抑瘤作用,对氟尿嘧啶所致的免疫功能损伤具有保护作用。     

11种中药对小鼠淋巴细胞活性及腹腔巨噬细胞功能的影响

目的研究具有免疫调节作用的11种中药水提取物,对小鼠脾淋巴细胞增殖活性以及腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法采用体外检测不同浓度的11种中药水提取物对正常、ConA及LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响,运用中性红法检测巨噬细胞的吞噬功能。结果黄芩水提取物对正常淋巴细胞的增殖活性无明显影响,对ConA及LPS诱导的脾淋巴细胞增殖活性有显著的抑制作用,其IC50分别为16.54,19.00μg/ml;蒺藜及罗布麻水提取物能够显著促进巨噬细胞吞噬功能。结论黄芩水提取物对小鼠脾淋巴细胞增殖活性具有一定的调节作用,蒺藜及罗布麻对巨噬功能有一定的调节作用。     

论少阴阳虚四步方

《伤寒论》载四逆辈汤方颇多,其中对于四逆汤、白通汤、白通加猪胆汁汤以及干姜附子汤所主疾病之轻重议论颇多。通过对经文、方药以及古代伤寒大家的见解做出详细分析,提出少阴阳虚传变干姜附子汤证为始、白通汤类方为渐、四逆汤方为末观点,按疾病的轻重程度排列四方当为干姜附子汤证最轻、白通汤稍重、白通加猪胆汁汤证较重、四逆汤方最重。     

大补阴丸对自身免疫病模型小鼠的免疫药理研究

目的:探讨大补阴丸(汤)(DBYW)试验血清对CJ(Campylobacter jejuni,空肠弯曲菌)致敏的自身免疫病模型小鼠(CJ小鼠)T、B淋巴细胞增殖活性以及T淋巴细胞分泌IFN-γ/IL-4活性的影响及其时间-效应关系。方法:将健康雌性ICR小鼠64只随机分为正常对照组、模型组、模型对照组以及五个时相给药组(30 min、1 h、1.5 h、2h、3 h),共8组。除正常对照组外,其他各组均用空肠弯曲菌免疫小鼠制备自身免疫病模型。从造模第15天起,开始以大补阴丸(汤)(0.4 g生药饮片/ml)给不同时相用药组小鼠灌胃,连续用药10天。并分别于第10次给药后30min、1 h、1.5 h、2 h、3 h取血,分离得试验血清;同时分别取正常组、模型对照组相应对照血清。将上述血清与模型组小鼠的脾细胞体外培养,检测DBYW试验血清对T、B淋巴细胞增殖活性以及T淋巴细胞分泌IFN-γ/IL-4活性的影响,并绘出时效关系变化曲线。结果:大补阴丸(汤)灌胃后1~1.5 h时相试验血清,可明显抑制模型小鼠的T、B淋巴细胞增殖活性,降低细胞培养上清中IFN-γ的水平,升高IL-4水平,其免疫调节作用存在明显的时效关系。结论:大补阴丸(汤)试验血清对异常免疫机能状态下的T、B淋巴细胞增殖活性具有明显的免疫抑制作用,对T淋巴细胞分泌IFN-γ/IL-4活性具有一定的免疫调节作用。经时效关系研究表明,大补阴丸(汤)灌胃后1~1.5 h时相的试验血清免疫药理作用最强。     

四逆汤类方提取物对离体小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的：探讨四逆汤类方提取物对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法：小鼠腹腔巨噬细胞经不同浓度的四逆汤类方提取物作用后，中性红法检测吞噬能力。以巨噬细胞培养液上清对L929细胞和胸腺淋巴细胞增殖的影响为指标，MTY比色法检测肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素-1（IL-1）的生成量。结果：附子、干姜配葱白提取物（EAGO），附子、干姜配甘草提取物（EAGL），附子、干姜、葱白配胆汁提取物（EAGB），附子、干姜、甘草配人参提取物（EAGG）可以提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，但与附子配干姜提取物（EAG）组比较无显著差异。与模型对照组比较，EAGO、EAGL显著减少TNF生成量，EAGL和EAGG可以显著降低IL-1生成量。结论：四逆汤类方均可以提高腹腔巨噬细胞吞噬功能，EAGL和EAGO可以降低TNF生成量，EAGL和EAGG可以降低IL-1的生成量。对LPS诱导炎症反应的实验模型，EAGL的药理活性较全面。类方之间对腹腔巨噬细胞免疫功能的影响不尽相同。     

含红芪与含黄芪玉屏风散含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗衰老作用的比较研究

目的:运用中药血清药理学方法,比较含红芪与含黄芪玉屏风散含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗衰老的影响。方法:用相同剂量的红芪替换玉屏风散中的黄芪后,观察两方高、中、低剂量对老龄小鼠脾脏、胸腺指数和脾淋巴细胞增殖能力的影响,确定最佳剂量;采用MTT法确定最佳剂量含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞刺激增殖作用的最佳稀释浓度和作用时间;用最佳稀释浓度的含药血清与老龄小鼠脾淋巴细胞作用最佳时间后观察衰老细胞的阳性率,检测细胞内总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量的变化。结果:与空白组比较,各剂量组均能提高脾脏、胸腺脏器指数和脾淋巴细胞增殖能力,以中剂量(0.4ml/20g)效果最佳。MTT结果表明不同稀释浓度的中等剂量含药血清均可促进体外培养的老龄小鼠脾淋巴细胞增殖,并表现出一定的时-效和量-效关系,以终浓度为20%的含药血清培养72h刺激增殖效果最佳,且红芪玉屏风散优于黄芪玉屏风散;β-半乳糖苷酶染色结果表明含药血清作用于老龄小鼠脾淋巴细胞后,衰老细胞减少,且红芪玉屏风散效果优于黄芪玉屏风散;红芪和黄芪玉屏风散含药血清均能调节老龄小鼠脾淋巴细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)活性和细胞内活性氧(ROS)水平,且红芪玉屏风散提高T-SOD活性作用较黄芪玉屏风散好,其余二者无显著差异。结论:红芪玉屏风散与黄芪玉屏风散在抗衰老方面有相似作用,且在增强脾细胞增殖能力、提高T-SOD活性,降低衰老细胞数方面优于黄芪玉屏风散。     

肝毒清复方对BCG/LPS所致小鼠免疫性肝损伤免疫功能的影响

目的:探讨肝毒清复方对BCG/LPS所致免疫性肝损伤小鼠脾T、B淋巴细胞增殖能力及脂质过氧化反应的影响,探讨该方的作用机制.方法:制备BCG/LPS所致免疫性肝损伤模型,用MTT比色法测定脾T、B淋巴细胞增殖能力;用TBA(硫代巴比妥酸)法测定SOD活性和MDA含量.结果:各用药组均能提升脾T、B淋巴细胞增殖能力、增强SOD活性、降低MDA含量,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:肝毒清复方抗肝损伤与调节T、B淋巴细胞增殖能力、抗脂质过氧化反应等有关.     

珍珠梅醋酸乙酯提取物对荷瘤小鼠免疫功能影响

目的 观察珍珠梅醋酸乙酯提取物对荷瘤小鼠免疫功能影响.方法 45只H22荷瘤小鼠随机分为珍珠梅醋酸乙酯提取物大、中、小剂量组、对照组和环磷酰胺组,共5组.观察珍珠梅醋酸乙酯提取物对荷瘤小鼠体质量的影响,计算抑瘤率,测定胸腺、脾脏指数及吞噬百分率及吞噬指数;MTT比色法测定脾淋巴细胞增殖能力及NK细胞活性.结果 珍珠梅醋酸乙酯提取物组小鼠体重无明显变化,对肿瘤的抑制率分别为49.0％、45.0％、36.2％.胸腺、脾脏指数,吞噬功能,脾淋巴细胞增殖能力及NK细胞活性明显增强,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 珍珠梅醋酸乙酯提取物可以抑制肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠免疫功能可能是作用机制之一.     

BrdU-ELISA法测定四逆汤及组方药提取物对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察四逆汤(SNT)及组方药提取物对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法 采用MTT比色法和Brdu—ELISA法观察药物对离体大鼠VSMC增殖的影响。结果 BrdU—ELISA法结果表明四逆汤总提取物(EST)对VSMC的BrdU掺入DNA没有显著影响，而MTT测定表明：EST可以提高VSMC的脱氢酶活性。甘草(LE)、附子(AE)、干姜(GE)、甘草加附子(LAE)、干姜加附子(AGE)提取物显著提高VSMC的脱氢酶活性，同时提高VSMC的BrdU掺入DNA的水平。结论 EST可以增加VSMC的脱氢酶活性，但对VSMC的BrdU掺入DNA的水平无影响。而其他组方药提取物可以增加VSMC的脱氢酶活性，同时提高VSMC的BrdU掺入DNA的水平。     

复芪止汗颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：探讨复芪止汗颗粒对小鼠非特异性免疫和特异性免疫的调节作用。方法：取正常昆明种小鼠40只,雌雄各半,随机分为4组,正常对照组、环磷酰胺模型组、黄芪颗粒组和复芪止汗颗粒组,每组10只。腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型。测定胸腺、脾脏质量并计算出小鼠胸腺指数、脾指数;腹腔巨噬细胞吞噬中性红法检测单核-巨噬细胞的吞噬功能;血清溶血素法测定体液免疫功能;脾淋巴细胞增殖实验法测定细胞免疫功能;乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞杀伤活性;流式细胞法检测T淋巴细胞亚群的数量。结果：复芪止汗颗粒可显著提高被环磷酰胺抑制的小鼠胸腺指数和脾脏指数;使巨噬细胞吞噬功能明显增加;使血清溶血素水平增高;并能拮抗环磷酰胺对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、杀伤活性、T细胞亚群数量产生的免疫抑制作用。结论：复芪止汗颗粒能增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能。     

裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用研究

目的：探讨裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物在体外的抗肝癌活性。方法：采用磺酰罗丹明染色法（SRB法）,对人肝癌细胞SMMC-7721进行体外抗肿瘤实验。结果：裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721表现出比较明显的高浓度杀死和中低浓度抑制的效果,且抑制率随萃取物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度（IC50）为21.5μg.mL-1。结论：裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721具有比较明显的抑制作用。     

阿里红多糖体外免疫活性的研究

目的:探讨阿里红多糖(FoP)对小鼠体外免疫的调节作用。方法:采用体外淋巴细胞增殖实验考察FoP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度FoP单独作用及其与有丝分裂原ConA、LPS共同作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELSA)法检测不同浓度FoP体外刺激对小鼠脾淋巴细胞诱生白介素2(IL-2)、白介素13(IL-13)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的影响。结果:Fop在25~100μg/m L浓度范围内能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,并与Con A、LPS协同促进T、B淋巴细胞增殖,还能诱导脾淋巴细胞分泌IL-2、TNF-α。结论:FoP具有免疫促进作用。     

点腺过路黄免疫调节成分的提取及对小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的：观察点腺过路黄提取成分体外对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法：用极性递增的溶剂顺次萃取出全草的脂溶性及水溶性成分，并分别研究它们对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果：氯仿提取部分（10^-10-10^-6g/ml)可显著增强活化的淋巴细胞的增殖，正丁醇提取部分（10^-10-10^-6g/ml)可显著抑制活化的B淋巴细胞的增殖，在10^-6g/ml时可显著增强活化的T淋巴细胞的增殖，而在10^-8-10^-6g/ml时则显著抑制活化的T淋巴细胞增殖。结论：点腺过路黄全草的氯仿及正丁醇部分提取物可能具有免疫调节功能。     

戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响

 目的 研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响。方法 采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖。它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β。结论 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂。     

天麻注射液对小鼠脾淋巴细胞转化的影响

目的 :观察天麻注射液对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。方法 :采用 3H_TdR参入法检测ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖。结果 :①腹腔注射2 5mg/kg,5mg/kg,10mg/kg,20mg/kg天麻注射液12h,ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞转化明显高于对照组 (P<0.05,P<0.01) ;40mg/kg的天麻注射液对小鼠脾淋巴细胞转化无明显影响。②体外实验0 1μg/ml～100μg/ml的天麻注射液组与对照组比较 ,小鼠脾淋巴细胞转化明显增加 (P<0.05,P<0.01) ;200μg/ml～400μg/ml天麻注射液组的小鼠脾淋巴细胞转化与对照组比较 ,差异无显著性意义 ;800μg/ml天麻注射液组的小鼠脾淋巴细胞转化则显著低于对照组。结论 :低浓度的天麻注射液(腹腔注射2 5～20mg/kg,体外实验0 1～100μg/ml)具有提高小鼠脾淋巴细胞转化的功能 ,中等浓度的天麻注射液(腹腔注射40mg/kg,体外实验200～400μg/ml)对ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞转化无明显作用 ,而高浓度的天麻注射液(体外实验800μg/ml)则有抑制小鼠脾淋巴细胞转化的作用     

小柴胡汤对体外培养人肝癌细胞株HepG2增殖的影响

目的探讨小柴胡汤45%乙醇提取物对体外培养人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其可能的机理。方法采用ATP-Lite法测定不同浓度小柴胡汤对体外培养的HepG2增殖的作用,同时利用氧自由基清除能(ORAC)法测定样品的抗氧化活性;以LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮(NO),Griess法测定NO的终产物亚硝酸盐的含量,观察样品对NO生成的影响。结果小柴胡汤在62.5～500mg/L浓度范围内可以显著抑制HepG2增殖,抑制作用呈剂量相关性,计算半数抑制浓度(IC50)为(90.7±23.7)mg/L。小柴胡汤提取物具有一定的抗氧化活性,其抗氧化能力为阳性对照维生素C的1.3倍。小柴胡汤在3.125～50mg/L浓度范围内均可以显著抑制NO的生成(P0.05,P0.01)。结论小柴胡汤具有体外抑制人肝癌细胞株HepG2增殖的作用,其抑制作用可能与其抗氧化活性及抑制NO生成有关。     

白芥子不同提取部位抗炎镇痛作用研究

目的：研究白芥子不同提取物的抗炎镇痛作用.方法：采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠扭体反应和小鼠热板法观察白芥子不同提取部位的抗炎、镇痛作用.结果：白芥子2个提取部位均能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数和抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,且其水部位（WTEF-BA）比乙酸乙酯部位（EAEF-BA）的作用更强.热板试验中,水部位能明显提高小鼠的痛阈值,乙酸乙酯部位具有提高痛阈值的趋势,但未见明显差异.结论：白芥子不同提取部位灌胃给药具有抗炎镇痛作用,其有效部位主要是水部位.