HPLC法测定水飞蓟素胶囊中水飞蓟素异构体的含量

目的建立水飞蓟素胶囊中水飞蓟素异构体的含量测定方法方法采用HPLC法,C18色谱柱(125mm×4.0mm,5μm);流动相为混合溶剂A[85%磷酸-甲醇-水(5∶35∶65)]和混合溶剂B[85%磷酸-甲醇-水(5∶50∶50)]梯度洗脱;流速:0.8mL/min;检测波长为288nm。结果水飞蓟宾在0.5088～2.5440μg范围内呈良好线性关系;加样回收率为99.5%,RSD=2.2%。结论该方法采用水飞蓟宾为对照品,在同一流动相条件下能够同时测定6种水飞蓟素异构体的含量,可用于水飞蓟素胶囊的质量控制。     

超声辅助有机溶剂回流提取水飞蓟籽中水飞蓟素工艺的优化

目的优化超声辅助有机溶剂回流提取水飞蓟籽中水飞蓟素工艺。方法在单因素试验基础上,以提取时间、超声功率、料液比为影响因素,总黄酮、水飞蓟素得率为评价指标,正交试验优化提取工艺。结果最佳条件为提取时间60 min,超声功率360 W,料液比1∶15,总黄酮、水飞蓟素得率分别为3. 60%、1. 64%。结论该方法稳定可靠,可用于超声辅助有机溶剂回流提取水飞蓟籽中水飞蓟素。     

基于壳仁分离的水飞蓟提取纯化工艺

目的研究在壳仁分离条件下,以水飞蓟制备纯化水飞蓟宾的工艺。方法水飞蓟脱壳后,其壳的乙酸乙酯提取物用乙醇洗脱纯化,并以水飞蓟宾纯度和得率为指标,采用中心组合设计-响应面法优化工艺。结果最佳条件是以80%乙醇为洗脱溶剂,液固比1.1,洗脱4次,所得水飞蓟宾纯度为82%,得率为80%。70%乙醇重结晶后,其含有量为97.3%,产率为1.090%。结论该工艺可提高水飞蓟的综合利用,而且简单可行,成本低廉,具有很好的工业应用价值。     

水飞蓟宾的提取工艺研究

先用90%乙醇提取水飞蓟脱油粉,水飞蓟宾含量最高,回收率在95%以上;用凝胶型树脂进一步探索提高水飞蓟宾的含量,2种树脂使水飞蓟宾含量均在30%左右,可以达到工业化生产规模.     

水飞蓟宾提取分离工艺改进

 本文对原水飞蓟宾提取分离工艺作了改进。新工艺为：水飞蓟果实榨油后用乙酸乙酯提取，制得膏状粗品并溶于85％乙醇中，用120号汽油脱脂；分出醇相，置室温下析晶，得水飞蓟宾。收率约1.1%。     

水飞蓟

又名Cardui mariae fructus，Holy Thistle，Lady’s Thistle，Marian Thistle，Mary Thistle，Our Lady’s Thistle，St．Mary Thisde，Silybum，Silymarin。植物名 Silybum marianum，Carduus marianum。活性成分与药理作用水飞蓟果也包括种子。水飞蓟素是一种水飞蓟果实和种子提取物的复合物，含水飞蓟宾(silibinin)、异水飞蓟宾(isosilybinin)、     

正交实验法优选护肝康片中水飞蓟素纯化工艺

目的 优选护肝康片中水飞蓟总黄酮最佳纯化工艺.方法 在考察纯化方法的前提下,采用正交实验法,以提取物中总黄酮量和水飞蓟宾的量为考察指标,考察影响水飞蓟素纯化因素.结果 水飞蓟总黄酮最佳纯化工艺为采用8%浓缩液,3倍量体积醋酸乙酯萃取2次,10 min/次.结论 优选的水飞蓟总黄酮纯化工艺稳定可行.     

注射用水飞蓟宾脂质纳米乳中水飞蓟宾含量测定

 目的建立直接紫外分光光度法，测定最新研制的注射用水飞蓟宾脂质纳米乳中水飞蓟宾含量的方法。方法选用1 mol·L^-1的NaOH碱溶液破乳，弃去以氯仿为萃取剂提取的纳米乳油相，水相层由纳米乳中释放出的水飞蓟宾以无水乙醇溶解，HCl中和，于288 nm处直接测定吸光度，计算水飞蓟宾的含量。结果水飞蓟宾在0.297 0～1.784 mg·mL^-1浓度范围内呈线性，r=0.999 9；高、中、低3种浓度的萃取回收率和方法回收率分别为96.08%～98.95%和99.72%～100.5%，n=3；日内和日间RSD分别为0.37%和3.6%,n=5。结论建立的方法准确度高，重现性好，本实验为水飞蓟宾脂质纳米乳新剂型质量标准的制定提供了方法学依据。     

水飞蓟宾脂质体包封率及其水飞蓟宾含量测定

目的 :建立一种一阶导数紫外分光光度法测定水飞蓟宾脂质体包封率及脂质体中水飞蓟宾含量。方法 :水飞蓟宾脂质体溶液经SephadexG₁₀₀柱分离后 ,以水飞蓟宾一阶导数紫外扫描图谱在 277nm和 294nm处出现的特征峰和特征谷的振幅ΔA进行定量。结果 :方法的线性范围为 0.5～30.0mg·L^-1(r=0.9998) ,回收率为10 1.7% ,精密度为 1.8%。采用该法测定药脂比为 0.02～0.06的水飞蓟宾脂质体 ,包封率为 65.1%～83.0% ,脂质体中水飞蓟宾平均含量为 760 .4mg·L^-1(n=4)。结论 :一阶导数分光光度法准确、简便 ,可用于水飞蓟宾脂质体的质量控制。     

水飞蓟发状根培养体系的建立及其水飞蓟宾含量的测定

实验采用6种发根农杆菌R1601,R15834,R1000,A4,R1025,R1感染水飞蓟植体,诱导水飞蓟发状根及其水飞蓟宾的产生。6种发根农杆菌均能诱导水飞蓟产生发状根,A4表现出较强的对水飞蓟的感染能力。实验通过侵染时间、预培养、共培养、pH等因素确定了诱导水飞蓟发状根产生的条件,确定MS液体培养基适合水飞蓟发状根的增殖。经过PCR分子鉴定,发根农杆菌中的DNA质粒成功的整合到转化根的基因组中。使用液相色谱测定了水飞蓟发状根中水飞蓟宾含量是水飞蓟植物中的2.5倍。实验所建立的水飞蓟发状根培养系统,为研究水飞蓟发状根大量培养生产水飞蓟宾奠定了基础。     

水飞蓟有效成分的提取研究

目的:通过三种方法对水飞蓟有效成分的提取率进行比较,探讨水飞蓟总黄酮提取的最佳方法;方法:水飞蓟有效成分的提取采用有机溶剂冷渍法、有机溶剂热回流法和有机溶剂连续回流多次回收法,水飞蓟宾的精制利用有机溶剂重结晶法;结论:以乙醇作溶剂采用连续回流多次回收法提取水飞蓟总黄酮,效果最好;水飞蓟宾的精制选用乙醇作重结晶溶剂.     

水飞蓟脱壳前后对降脂保肝颗粒含量的影响

目的:研究水飞蓟脱壳前后对降脂保肝颗粒中主要成分水飞蓟宾的含量影响。方法:采用高效液相色谱法对降脂保肝颗粒中水飞蓟药材脱壳前后水飞蓟宾的含量进行测定。结果:以水飞蓟粕为提取原料时,水飞蓟宾的含量为0.22%,以水飞蓟壳作为提取原料时,水飞蓟宾的含量为0.96%,提高率为336.36%。结论:以水飞蓟壳为原料,可使水飞蓟宾在降脂保肝颗粒中的含量得到有效提高。     

注射用蓟七中三七总皂苷对水飞蓟宾在犬体内的药动学影响

目的 研究注射用蓟七中水飞蓟宾在犬体内的药动学,并观察复方中的三七总皂苷对水飞蓟宾药动学参数的影响.方法 Beagle犬分别静脉给予注射用蓟七与注射用水飞蓟宾,不同时间点采集血浆,以β葡萄糖醛酸-硫酸酯复合酶酶解,乙醚萃取对血浆样品进行处理,高效液相色谱法测定水飞蓟宾的血药浓度,并用BAPP2.3数据处理软件计算动力学参数.结果 注射用蓟七及注射用水飞蓟宾静脉给药后,水飞蓟宾血药浓度一时间曲线在犬体内过程均符合二室模型,两者的主要药动学参数均无显著性差异.结论 注射用蓟七中的水飞蓟宾在体内清除速率较快,复方中三七总皂苷对水飞蓟宾在犬体内的药动学参数基本没有影响.     

水飞蓟宾在正常大鼠和肝损伤模型大鼠体内代谢的比较研究

目的 研究水飞蓟宾在正常和肝损伤模型大鼠的体内分布与代谢差异.方法 分别口饲正常组和免疫性肝损伤模型大鼠相同剂量的水飞蓟宾胶囊水溶液,HPLC法分别测定各类生物样品中不同时间的水飞蓟宾含量.结果 正常组在各时间点各类生物样品中的水飞蓟宾含量均比模型组高,且正常组中水飞蓟宾在各脏器中分布的浓度由大到小顺序依次为肝脏＞肾脏＞血浆＞心脏,而模型组中为肾脏＞心脏＞肝脏＞血浆.结论 水飞蓟宾在正常大鼠的分布与代谢与肝损伤模型大鼠有显著性差异.     

水飞蓟素亚微粒胶囊体内药代动力学研究

目的:进行了水飞蓟素亚微粒胶囊动物体内的生物利用度研究.方法:采用液质联用法测定Beagle犬血浆中水飞蓟宾浓度,在UltimateTM AQ-C18柱、洗脱剂甲醇-水(50∶50)、流速0.8 mL/min、梯度洗脱,通过ESI离子源、负离子检测,水飞蓟素中3个组分的分离良好.结果:受试制剂和益肝灵片体内药动学均符合一室模型,以原料药为参比制剂,水飞蓟素亚微粒胶囊的相对生物利用度均比片剂高.结论:水飞蓟素亚微粒胶囊具有较高的生物利用度,亚微粒是提高难溶性药物口服生物利用度的良好载体.     

水飞蓟素固体脂质纳米粒体内药代动力学研究

目的:进行了水飞蓟素固体脂质纳米粒动物体内的生物利用度研究.方法:采用HPLC测定Beagle犬血浆中水飞蓟宾浓度,在选定的液相条件下,水飞蓟宾分离良好.结果:受试制剂和益肝灵片体内药动学均符合一室模型,水飞蓟素固体脂质纳米粒的相对生物利用度分别为258%.结论:水飞蓟素固体脂质纳米粒具有较高的生物利用度,固体脂质纳米粒是提高难溶性药物口服生物利用度的良好载体.     

硬脂醇半乳糖苷水飞蓟宾脂质体制备工艺研究

目的确定硬脂醇半乳糖苷修饰的水飞蓟宾脂质体的最佳制备工艺,建立高效液相色谱法测定包封率的方法。方法以包封率为指标,优选乙醇注入法和薄膜分散法制备的硬脂醇苷水飞蓟宾脂质体,并通过单因素考察和正交设计优化处方工艺;用葡聚糖凝胶柱法分离游离药物和脂质体,以HPLC法测定脂质体中水飞蓟宾的包封率。结果最佳处方为:水飞蓟宾∶氢化大豆磷脂=1∶70,氢化大豆磷脂∶胆固醇=3∶1,水合介质为生理盐水,采用薄膜分散法制成20 ml水飞蓟宾半乳糖化脂质体,包封率为(44.47±0.98)%。结论薄膜分散法制备硬脂醇半乳糖苷水飞蓟宾脂质体工艺简单可行且包封率较高。     

有序介孔材料SBA-15提高难溶性药物水飞蓟宾溶出速率的研究

 目的 采用与介孔材料复合的方式提高难溶性药物水飞蓟宾的溶出速率。方法 通过X射线衍射、氮气吸附-脱附曲线、差示扫描量热分析及透射电镜观察水飞蓟宾负载到SBA-15的表面情况。气相色谱法检测水飞蓟宾负载后的丙酮残留情况。溶出速率实验研究水飞蓟宾负载到SBA-15的表面效果。结果 X射线衍射、氮气吸附-脱附曲线与差示扫描量热分析表明水飞蓟宾以非晶的形式负载在SBA-15的孔道内表面,负载前后的透射电镜图片显示无显著差异。气相色谱检测法表明丙酮残留符合要求。溶出速率实验表明负载后水飞蓟宾的溶出速率显著提高。结论 本实验为提高难溶性药物的溶出速率提供了一条新途径。     

专利摘要

159 从水飞蓟属植物中分离水飞蓟素 WO 2004039386-A1 将水飞蓟种子磨成细粉,用烃类溶剂脱脂,中等极性溶剂于18～56℃提取,得到水飞蓟素油状提取物,蒸去水分,进一步精制、洗涤、干燥得结晶水飞蓟素,用于保肝药和营养品。本法无需将种子预冷处理,适合于工业生产,且水飞蓟素收率高(86％～97％)。不使用毒性溶剂,如二氯甲烷、甲醇或乙腈(丙酮的替代物),减少了有机溶剂的用量,溶剂回收率约90％～95％。     

水飞蓟提取物的光稳定性研究

目的 研究水飞蓟90%乙醇提取液中主要成分的光稳定性。方法 在光照前后、不同光照强度和时长、不同含氧量的条件下，对水飞蓟壳90%乙醇提取液中的主要成分进行检测，通过LC-MS法对避光和强光照射5 d的提取液样品进行质谱对比分析，强光照射5 d后的提取液样品用半制备HPLC进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 水飞蓟亭A、水飞蓟亭B、水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾A、异水飞蓟宾B对光照均稳定，水飞蓟宁在光照条件下发生氧化反应，具有光不稳定的特点。结论 水飞蓟宁在光照条件下不稳定，其氧化产物为silyamandin。