大鼠体内川芎多成分序贯代谢研究

目的研究川芎单味药中多成分体内动态变化过程,阐明其体内代谢轮廓。方法采用高效液相色谱法建立川芎水提液指纹图谱,以此同时检测多成分变化情况。体内代谢采用封闭肠环法研究川芎口服后多成分经胃-肠-肝代谢变化过程。结果川芎水提液指纹图谱中监测到17种成分,在胃肠道稳定性研究中均基本稳定,其中有4种成分被肠道菌代谢,3种成分被肝代谢,2种新成分是肠代谢产物,1种新成分是肝代谢产物。结论采用序贯代谢,运用封闭肠环法研究中药口服后各成分代谢轮廓是可行的,为中药的代谢研究提供了实验依据。     

10种抗精神病药物对多巴胺D2受体占有率的模拟分析

目的 模拟分析10种抗精神病药物氟哌啶醇（haloperidol）、舒必利（sulpiride）、美哌隆（melperone）、氯氮平（clozapine）、喹硫平（quetiapine）、利培酮（risperidone）、齐拉西酮（ziprasidone）、瑞莫必利（remoxipride）、氨磺必利（amisulpride）、雷氯必利（raclopride）口服给药后在人体内对多巴胺D₂受体（DRD₂）占有的时间过程。方法 通过对10种抗精神病药物的口服给药和静脉给药的药动学数据模拟计算获取建模的药动学（PK）参数;通过已发表的文献数据计算获取10种抗精神病药物的结合动力学（BK）参数和细胞内DRD₂受体合成动力学（TK）参数;基于获取的PK、BK、TK参数建立10种抗精神病药物的DRD₂受体占有率数学计算模型（PK-BK-TK模型）。结果 已上市的9种（不包含雷氯必利）抗精神病药物在临床推荐剂量下对DRD₂的最大受体占有率均在65%以上,预测的DRD₂受体占有率曲线与其临床药效持续时间有良好的一致性;雷氯必利的合理给药剂量为2mg。结论 利用PK-BK-TK数学模型能准确预测抗精神病药物口服后在人体内对DRD₂受体的占有过程。该模型可为评估化合物在体内拮抗DRD₂受体的活性与潜在毒性提供一种新的研究思路和方法。     

基于大鼠体内序贯代谢的白芍质控成分遴选研究

目的 基于序贯代谢的研究思路,研究白芍Paeoniae Radix Alba多种成分在体内的代谢情况,遴选白芍潜在质控成分。方法 制备白芍水提物,通过在体动物实验的方法,收集白芍的肠代谢、肝代谢以及综合代谢样品,结合超高效液相色谱-四级杆/静电场高分辨质谱联用技术（UPLC-Q-Exacitve MS）,对各个样品所含成分进行分析与鉴别。结果 白芍水提物中共鉴定出36个化学成分。序贯代谢结果显示,共有17个原型入血成分,其中有14个成分在经肠代谢样品中检测到,有8个成分先经肠代谢、再经肝代谢后可检测到,有11个成分在经ig给药的综合代谢样品中检测到;羟基芍药苷、芍药苷、芍药内酯苷、环五（异）亮氨酸、环六（异）亮氨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸这7个成分在3种代谢部位均可以检测到。结论 共遴选出没食子酸、芍药内酯苷等17个经代谢后仍原型入血的成分,可作为日后白芍质控成分。     

桑叶水提物及其含药血清化学成分分析

目的:分析并鉴别桑叶水提取物化学成分及其口服后大鼠血清中的成分。方法:采用HPLC对桑叶水提物及灌胃后大鼠血清样品进行分离,用静电场轨道阱组合式高分辨质谱仪进行在线离子检测、二级碎片离子扫描,分析鉴别桑叶水提物体外成分及血中代谢成分。结果:桑叶水提物中初步鉴定了11个化学成分,分别为异绿原酸(1),5,7-二羟基香豆素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),东莨菪苷(3),绿原酸(4),山柰酚-3,7-二-O-D-吡喃糖苷(5),4-咖啡酰奎宁酸甲酯(6),芦丁(7),金丝桃苷(8),异槲皮苷(9),紫云英苷(10),异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(11)。初步鉴定血中成分30个,多为上述苷类的苷元代谢产物,血清中未发现上述11个原型成分。结论:该方法可成功用于桑叶水提物及其口服后血中成分的鉴别,为桑叶进一步的药效研究及二次开发提供了参考。     

肠S9温孵法研究川芎多成分肠吸收过程中的肠壁代谢

生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system,BCS)研究中,肠吸收性评价实验要考虑吸收过程中的肠壁代谢问题,因此该研究选用大鼠肠S9对川芎中多成分的肠壁代谢进行研究,为进一步BCS肠吸收性评价实验厘清代谢影响。利用大鼠肠S9对川芎水提液进行体外温孵实验研究,通过HPLC指纹图谱技术,对比研究多成分色谱峰面积温孵前后的变化。结果表明川芎水提液经肠S9温孵后,以指纹图谱表征的多成分谱图中,洋川芎内酯I等多个成分发生肠壁代谢,有1个代谢转化成分生成。阿魏酸等多个成分不发生肠壁代谢。因此,建议下一步川芎的BCS肠吸收性评价实验可以对不发生肠壁代谢成分直接测定,而对肠壁代谢成分的肠吸收性评价则需要探索更合适的实验方法。     

黄芩素、槲皮素、高良姜素对黄嘌呤氧化酶靶点占有率的模拟分析

目的 模拟分析黄芩素、槲皮素、高良姜素对黄嘌呤氧化酶体内靶点占有率。方法 通过体外酶促反应测定非布司他、黄芩素、槲皮素、高良姜素对黄嘌呤氧化酶的半数抑制浓度（IC₅₀）,利用分子对接技术对其结合自由能进行预测,同时,采用表面等离子共振技术测定其结合速率常数（k_on）和解离速率常数（k_off）。基于测定的结合动力学参数和提取的药物代谢动力学数据建立体内靶点占有率模型。结果 非布司他、黄芩素、槲皮素、 高良姜素对黄嘌呤氧化酶的IC₅₀分别为0.002 7,1.63,0.38,1.59 μmol·L^-1,非布司他的IC₅₀与文献报道一致。预测的非布司他体内靶点占有率曲线与其临床药效持续时间相吻合。当大鼠按100 mg·kg^-1单次灌胃给予槲皮素长循环脂质体时,体内靶点占有率>70%的持续时间约3.9 h;当大鼠按200 mg·kg^-1单次口服给予黄芩素和高良姜素时,体内靶点占有率>50%的持续时间分别约为10,1.7 h。结论 利用药靶结合动力学和体内药代动力学曲线建立的黄嘌呤氧化酶靶点占有率预测模型能有效地评估化合物对靶点的体内抑制活性。     

中药“质效代关联”研究方法与理论的建立

如何明确中药临床作用的药效物质基础,建立以药效为核心的质量评价方法是目前中药亟待解决的关键问题。为此,根据中药质量评价的基本现状和主要问题,以疗效为理论核心,采用化学分析方法、药理模型实验法和数学分析模型计算相结合的方法,提出中药与“质-效-代”关联的“质量评价方法研究模式”,建立“质效代关联”的中药质量评价理论,从中药吸收、代谢和药效多重角度共同把关中药质量,补充和完善现行“惟成分论”的中药质量控制和评价方法与标准,保证中药产品安全和有效。     

基于PBPK-TO模型预测CYP3A4调节剂对卡博替尼PK/PD的影响

目的 建立卡博替尼的生理药动学及其主要靶点的靶点占有率联用(PBPK-TO)模型,并预测CYP3A4的调节剂(抑制剂和诱导剂)对其PK/PD的影响。方法 通过运用公式和收集参数,建立卡博替尼的PBPK模型,利用文献实测值进行验证,并联合主要靶点的结合、解离速率常数(k_on、k_off)搭建成PBPK-TO模型;通过结合CYP3A4竞争型抑制剂酮康唑、时间依赖抑制剂地拉韦啶和诱导剂利福平的PBPK模型,研究其对卡博替尼的PK/PD的影响。结果 成功建立了卡博替尼PBPK-TO模型;联合用药时,酮康唑、地拉韦啶和利福平对卡博替尼最大血药浓度(c_max)和激酶靶点的最大靶点占有率(TO_max)均无显著性影响;酮康唑能使卡博替尼血浆药物浓度-时间曲线下面积(AUC_0-t)增加34%,3个主要靶点的靶点占有率大于60%的持续时间(D_TO>60%)均增加30%以上;地拉韦啶能使卡博替尼AUC_0-t增加16%,3个主要靶点的D_{TO >60%}均增加20%以上;利福平能使卡博替尼AUC和靶点的D_{TO >60%}减少70%以上。此外,也研究了联合用药时临床合理的剂量调整方案,当单独使用卡博替尼60 mg作为治疗剂量时,与酮康唑联用剂量需要降低至40 mg;与地拉韦啶联用,不需要调整剂量;与利福平联用时,剂量需要增加到80 mg。结论 建立的PBPK-TO模型能较好地预测CYP3A4抑制剂、诱导剂对卡博替尼PK/PD的影响,为药物相互作用模型研究和临床使用剂量调整提供新思路。     

3种量表对肺血栓塞症(PTE)患者的诊断与预测价值

目的:3种量表对肺血栓塞症(PTE)患者的诊断与预测价值进行探讨。方法:对我院内科住院患者,经CT肺动脉造影确诊,80例PTE患者资料进行回顾性收集,并分析PTE临床特点和各危险因素,运用Geneva量表、修正后Geneva量表、Wells量表对PTE进行评估。结果:据Wells量表可知,PTE中高度可能性患者占95%,低度可能性患者占5%;按照修正后Geneva量表可知,中、高度患者所占比例各为1/2,而低度患者可能性则为0;而Geneva量表结果则介于中间。除量表中相关指标,合并心肺疾病患者占25%,出现晕厥患者18例,左束支传导阻滞、D-二聚体升高等阳性率也比较高。结论:PTE临床表现非特异性和心血管疾病相似度非常大,对由于不明原因产生胸痛或呼吸困难患者,需警惕其患有PTE可能性。在临床筛查PTE患者时可采用上述3种方法,对中高度患者实行进一步有创检查或行螺旋CT肺动脉造影(CTPA)明确;对低度患者也不能排除其患有PTE可能,可采取有创检查或行CTPA确诊其患有PTE必要性进行评估。对无条件进行CTPA检查确诊PTE时,用上述3种量表,具有有较大的临床诊断价值。