氧化应激在乙醇诱导内皮细胞凋亡中的作用

目的 观察乙醇诱导的内皮细胞凋亡及氧化应激所起的作用.方法 体外培养人内皮细胞株EA.hy926,实验分对照组、实验组（ 0.6% 乙醇）、N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（0.6% 乙醇＋ 10 mmol•L^-1 NAC）,各组以相应药物孵育12 h,采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞活性氧（ROS）和凋亡率,相应试剂盒测定超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）水平.结果与对照组相比,实验组内皮细胞增殖受到明显抑制,SOD活力从(40.8±2.9 )U•mg^-1蛋白降至（29.2±4.0） U•mg^-1蛋白、MDA水平由（46.5±3.8） nmol•mg^-1蛋白升至（89.5±5.6） nmol•mg^-1蛋白、ROS荧光强度从（93.69±7.58）升高到（162.30±18.85）,凋亡率由（0.49± 0.16）% 增至（5.31±0.54）% (均P＜0.01);而NAC组凋亡率、ROS和MDA水平较实验组均降低（P＜0.01),SOD活力显著恢复.结论 乙醇引起的氧化应激在其诱导的内皮细胞凋亡中起重要作用.     

D-δ-三烯生育酚抗乳腺癌细胞的活性

目的探讨D δ 三烯生育酚抗人乳腺癌MCF 7细胞的生物学活性。方法将细胞分为对照组（无药物培养）和实验组,实验组设低、中、高剂量组,分别加入终浓度为30,40,50 μmol•L－1的D δ 三烯生育酚,药物干预MCF 7细胞24 h后,显微镜下观察各组细胞生长状态,四甲基偶氮唑盐（MTT）法、流式细胞仪分析细胞增殖、周期与凋亡。结果D δ 三烯生育酚抑制乳腺癌MCF 7细胞增殖,低、中、高剂量组细胞增殖抑制率分别为（9.33±1.68）%,（32.47±3.18）%和（76.63±1.00）%,与对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;低、中、高剂量组G1期细胞所占比例分别为（54.34±1.50）%,（58.24±0.81）%和（62.11±1.12）%,与对照组［（43.34±2.51）%］比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;低、中、高剂量组贴壁细胞明显减少,漂浮死亡细胞明显增多,细胞早期凋亡率Q4分别为（10.87±0.50）%,（17.87±2.40）%和（25.83±3.76）%,与对照组［（1.93±0.25）%］比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论D δ 三烯生育酚能抑制MCF 7细胞增殖,阻滞细胞于G1期,诱导细胞凋亡,具有抗乳腺癌MCF 7细胞的生物学活性。     

蟾蜍灵对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分泌 肿瘤坏死因子-α与白细胞介素-1β的影响

［摘要］目的观察蟾蜍灵对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肾系膜细胞分泌肿瘤坏死因子 α（TNF α）及白细胞介素 1β（IL 1β）的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为对照组、LPS刺激组和蟾蜍灵组;采用逆转录 聚合酶链反应（RT PCR）和凝胶图像吸光度分析系统检测蟾蜍灵刺激前后大鼠肾系膜细胞表达的TNF α及IL 1β的mRNA量;用ELISA试剂盒测定各组TNF α及IL 1β的含量。结果①LPS刺激组TNF α mRNA相对表达量（0.59±0.09）显著高于对照组（0.28±0.13）（P＜0.01）;蟾蜍灵组TNF α mRNA相对表达量（0.25±0.03）显著低于LPS刺激组（P＜0.01）。②LPS刺激组IL 1β mRNA相对表达量（0.57±0.16）显著高于对照组（0.26±0.08）（P＜0.01）;蟾蜍灵组IL 1β mRNA相对表达量（0.30±0.04）显著低于LPS刺激组（P＜0.01）。③LPS刺激组TNF α细胞因子表达量［（195.40±6.09 ） pg•mL 1］显著高于对照组［（97.93±8.44） pg•mL 1］（P＜0.01）;蟾蜍灵组的TNF α细胞因子表达量［（108.39±8.81） pg•mL 1］显著低于LPS刺激组（P＜0.01）。④LPS刺激组IL 1β细胞因子表达量［（168.65±12.80） pg•mL 1］显著高于对照组［（79.77±10.14） pg•mL 1］（P＜0.01）;蟾蜍灵组的IL 1β细胞因子表达量［（98.75±6.95） pg•mL 1］显著低于LPS刺激组（P＜0.01）。结论蟾蜍灵能显著抑制LPS刺激后的体外培养的大鼠肾系膜细胞分泌TNF α及IL 1β。     

茶色素体外抗氧化作用研究

目的研究茶色素（TP）体外抗氧化作用。方法通过邻苯三酚自氧化和抗体外氢氧根法分别测定TP与阳性对照药维生素C的抗氧化作用,比较两者作用程度。结果0.1%,0.2%,0.3%TP对邻苯三酚自氧化平均抑制率分别为每分钟7.022%,13.427%,16.910%;0.1%,0.2%维生素C分别为16.340%,32.850%。TP与维生素C对邻苯三酚自氧化平均抑制率呈剂量依赖式增加。0.1%,0.3%,0.5%,0.7%,1.0%TP对体外羟自由基（•OH）生成的平均抑制率分别为（11.00±0.70）%,（20.68±0.60）%,（27.04±0.07）%,（32.70±0.30）%,（42.90±0.70）%;0.1%,0.3%,0.5%,0.7%,1.0%维生素C对体外•OH生成的平均抑制率分别为（4.50±0.30）%,（7.40±1.00）%,（11.42±0.23）%,（14.80±0.40）%,（16.80±0.60）%。TP和维生素C对体外•OH生成抑制率均呈剂量依赖性增加。TP和维生素C对体外•OH生成均有一定抑制作用,TP抑制作用较维生素C显著。相同剂量维生素C 和TP抑制作用差异有统计学意义（P＜0.01）;不同剂量TP对体外•OH生成的抑制作用差异有统计学意义（P＜0.05）。结论TP体外具有抗氧化作用,尤其是在体外抗氢氧根作用方面。     

葛根素对细胞色素P450酶活性的影响

目的研究葛根素体外对细胞色素P450酶 1A2（CYP1A2）、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4活性的影响。方法 分别以咖啡因、甲苯磺丁脲、美芬妥因、美托洛尔和咪达唑仑为探针药, 利用高效液相色谱法测定探针药与相应代谢产物的浓度,采用重组酶研究葛根素对CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4酶活性的影响。结果 在体外重组酶反应体系中,葛根素对CYP2C9、CYP2C19及CYP3A4酶活性无明显影响。但低浓度葛根素（0.1 mmol•L-1）使CYP1A2的活性降低（48±9）%（P＜0.05）,CYP2D6的活性降低 （61±8）%（P＜0.01）;高浓度（0.4 mmol•L-1） 使CYP1A2的活性降低（82±8）%（P＜0.01）,CYP2D6的活性降低（88±6）%（P＜0.01）。结论 葛根素（0.1 mmol•L-1）对CYP1A2和CYP2D6酶活性有较明显的体外抑制作用;且随着葛根素浓度的增高,对这两种酶活性的抑制作用也增强。为研究葛根素与其他药物的相互作用及作用机制等奠定了基础。     

苦参素对人膀胱癌EJ细胞抑制作用研究

目的 探讨苦参素对人膀胱癌EJ细胞的抑制作用及可能机制。方法 MTT法检测EJ细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测EJ细胞周期改变,免疫组化检测EJ细胞Ki-67表达。 结果 2.5 mg•mL-1苦参素作用24和72 h 对EJ细胞的生长抑制率分别为（15.12±2.10）%和（52.61±7.02）%;浓度为10 mg•mL-1时24和72 h抑制率分别为（42.42±7.30）%和（88.52±10.93）%。随着苦参素浓度的增加, G0/G1期和S期EJ细胞所占比例逐渐上升,G2/M期细胞所占比例逐渐下降,且Ki-67的表达下降。结论 苦参素能通过诱导人膀胱癌EJ细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Ki-67的表达来抑制癌细胞的生长增殖。     

千金藤素调控肝癌细胞 HepG2增殖和凋亡的实验研究

目的探讨千金藤素对肝癌细胞 HepG2增殖、凋亡的影响和机制。方法 2020年 1—6月,从上海通派生物科技有限公司购入肝癌细胞 HepG2,用千金藤素( 20 μmol/L)处理肝癌细胞 HepG2,MTT方法测定增殖活性, PI单染法检测细胞周期, Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、 p21、Bcl-2相关 X蛋白( Bax)、活化胱天蛋白酶 3(cleaved caspase-3)、核因子 κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。用 NF-κB信号激活剂和千金藤素联合处理肝癌细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡变化。结果千金藤素处理后的肝癌细胞增殖活性下降,细胞 G0/G1期比例［(65.81±3.73)%比( 50.61±4.17)%］升高,细胞凋亡率［(13.47±1.58)%比( 2.18±0.12)%］升高,细胞中 p21、Bax、cleaved-caspase-3蛋白水平升高, cyclin D1蛋白水平下降, NF-κBp65蛋白水平( 0.19±0.02比 0.36±0.05)降低。 NF-κB信号激活剂处理可以提高千金藤素条件下肝癌细胞增殖活性( 0.46±0.03比 0.35±0.04)减少 G0/G1期比例,降低细胞凋亡率,降低细胞中 p21、Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达水平,提高细胞中 cyclin D1和 NF-κBp65蛋,白水平。结论千金藤素抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,诱     

半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖及迁移的影响

目的观察半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响并对其机制进行初步探索。方法体外培养非小细胞肺癌 A549细胞,分为阴性对照组、实验组、阳性对照组。阴性对照组用 1640培养液 200 μL处理细胞,实验组分别用 1, 5,10,20,40 μg/mL半枝莲总黄酮处理细胞 24 h,阳性对照组用 200 μL 40 μg/mL芦丁溶液处理细胞。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法( MTT)观察细胞增殖情况;通过流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法( Western Blot)检测凋亡抑制蛋白 Survivin和促凋亡蛋白酶 Caspase?3蛋白的表达;迁移划痕实验检测迁移的情况。结果 MTT检测结果显示,阳性对照组的增殖抑制率为( 57.234±0.533)%,实验组的增殖抑制率分别为( 14.852±1.059)%、(23.486±1.366)%、(36.396±0.321)%、(46.179± 1.334)%和( 51.530±1.054)%,随浓度增加抑制率显著升高,呈浓度依赖( F＝1 408.303,P＜0.001);式细胞术检测细胞凋亡率,阴性对照组( 9.09±0.50)%、阳性对照组( 67.27±1.48)%、实验组分别为( 24.62±0.70)%、(34.67±0.46)%、(46.92±0.29)%、(55.67±0.57)%和( 59.29±0.73)%,实验组的细胞凋亡率均高于阴性对照组( F＝1 467.681,P＜0.001); Western Blot结果显示,实验组 Survivin蛋白表达均低于阴性对照组, Caspase?3蛋白表达均高于对照组( F＝34.176,P＜0.001;F＝57.730,P＜0.001);迁移划痕实验结果显示,半枝莲总黄酮抑制肺腺癌 A549细胞迁移并呈现剂量依赖性。结论半枝莲总黄酮可抑制人肺腺癌 A549细胞的增殖,可能与 Survivin蛋白降低和 Caspase?3蛋白表达量升高有关;另外,半枝莲总黄酮可抑制人肺腺癌 A549细胞的迁移。     

金银花提取物对肝损伤小鼠的保护作用研究

目的探讨金银花提取物对对乙酰氨基酚所致小鼠肝损伤的影响。方法将60只小鼠随机分为6组,正常对照组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,其他各组以0.02 mL•g 1剂量给药,每天1次,连续10 d。除正常对照组外,其余5组腹腔注射对乙酰氨基酚制备肝损伤模型,经眼静脉取血,测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶及肝组织匀浆中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛及一氧化氮水平。结果金银花提取物低、中、高剂量组和联苯双酯组各项指标改善明显,丙氨酸氨基转移酶［分别为（286.32±20.37）,（211.34±18.35）,（181.51±11.17）（191.56±12.24）U•L 1］均低于模型组［（319.37±21.36）U•L 1］（P＜0.05或P＜0.01）;天冬氨酸氨基转移酶［分别为（251.78±20.14）,（223.57±21.78）,（179.67±11.27）,（171.87±9.91）U•L 1］亦低于模型组［（279.97±15.97）U•L 1］（P＜0.05或P＜0.01）;金银花提取物低、高剂量组和联苯双酯组肝组织丙二醛含量［分别为（3.84±0.19）,（2.31±0.21）,（2.39±0.17）U•L 1］均低于模型组［（4.39±0.11）U•L 1］（P＜0.05或P＜0.01）;金银花提取物低、中、高剂量组和联苯双酯组肝组织一氧化氮含量［分别为（4.89±0.61）,（4.11±0.15）,（3.84±0.48）,（3.87±0.57）U•L 1］均低于模型组［（5.74±0.25）U•L 1］（P＜0.05或P＜0.01）;金银花提取物低、中剂量组和联苯双酯组肝组织还原型谷胱甘肽含量［分别为（64.37±2.71）,（65.78±1.57）,（70.17±1.47）U•mg 1］均高于模型组［（40.12±1.37）U•L 1］（P＜0.05或P＜0.01）;金银花提取物低、中、高剂量组和联苯双酯组肝组织超氧化物歧化酶［分别为（104.25±11.21）,（141.27±13.11）,（177.11±14.34）,（163.55±16.78）U•mg 1］均高于模型组［（87.32±16.78）U•L 1］（P＜0.05或P＜0.01）。结论金银花具有显著的抗肝损伤作用。     

抗凝血酶辅助治疗主动脉夹层20例

目的探讨抗凝血酶对Stanford B型主动脉夹层覆膜支架植入术患者炎性细胞因子和粘附分子的影响及临床意义。方法拟行覆膜支架植入术的Stanford B型主动脉夹层患者40例,随机分为两组各20例。治疗组术中肝素化前和肝素化后24 h输注抗凝血酶3 000 U,大于30 min输完;对照组为空白对照组。分别于手术前和手术后即刻、手术后1 d和2 d采动脉血标本,检测血浆肿瘤坏死因子α（TNF α）、白细胞介素1（IL 1）、IL 6、IL 8和细胞间粘附分子1（ICAM 1）、内皮白细胞粘附分子1（ELAM 1）和血管细胞粘附分子1（VCAM 1）含量变化。结果对照组术后2 d ICAM 1从术前（194.25±42.32） ng•mL－1升至（268.64±22.09） ng•mL－1,治疗组从术前（194.22±41.42） ng•mL－1降至（115.03±24.11） ng•mL－1,两组术后2 d差异有统计学意义（P＜0.01）;两组术后IL 1、IL 6、IL 8、TNF α、VCAM 1和ELAM 1均有升高趋势,但治疗组升高幅度显著低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。结论Stanford B型主动脉夹层覆膜支架植入术患者炎性反应激活,表现为大量炎性因子释放和粘附分子表达,而抗凝血酶能降减低机体高炎性反应状态,预防术后不良反应。     

CIB1下调表达对U87胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响

目的 探讨钙整合素结合蛋白1(CIB1)下调表达对U87胶质瘤细胞增殖和周期调节的作用.方法 体外培养U87胶质瘤细胞,通过感染携带siCIB的pGV-siCIB1慢病毒获得CIB1下调表达的U87胶质瘤细胞,将细胞分为pGV-siCIB感染组、对照慢病毒感染组和对照组,采用甲基噻唑基四唑检测细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡和细胞周期的改变,定量反转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测U87胶质瘤细胞相关基因和蛋白表达情况.结果pGV-siCIB1感染U87细胞的最适感染复数值为5.siCIB1感染组CIB1 mRNA和蛋白表达低于对照慢病毒感染组和对照组(P<0.05).pGV-siCIB1感染组FOXO1、MDM2 mRNA及CyclinD1、Bcl-2 mRNA和蛋白、p-AKT蛋白表达水平低于对照慢病毒感染组,而Bax、p53、Caspase3 mRNA和蛋白表达水平高于对照慢病毒感染组(P<0.05,P<0.01).pGV-siCIB1感染组U87胶质瘤细胞抑制率、凋亡率与对照慢病毒感染组相比显著增加,与对照组和对照慢病毒感染组相比,G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P<0.05).结论 CIB1下调表达抑制胶质母细胞瘤的生长,促进细胞凋亡. AKT信号通路可能是CIB1发挥作用的途径之一,提示CIB1有可能作为胶质瘤靶向治疗的靶点.     

去铁胺抗K562细胞的增殖作用及对细胞周期的影响

目的研究去铁胺对K562细胞的抗增殖活性及细胞周期的作用。方法用K562细胞作为人类红白血病细胞株,用MTT法观察DFO的抗增殖作用;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果小剂量DFO(12.5μM)处理K562细胞时,生长曲线轻微变化,但是中剂量和大剂量DFO(25μM,50μM)干预后,生长曲线高峰显著低于对照组。DFO抗细胞增殖活性为剂量依赖性。用DFO(25μM,50μM)处理K562细胞48h和72h后,G0/G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,与对照组比较均有显著性差异(P<0.001)。结论去铁胺通过阻止细胞由G0/G1期进入S期发挥抗K562细胞的增殖作用。     

胸苷激酶1-新型的细胞增殖动力学标志

胸苷激酶1（TK1）是DNA合成过程中的关键酶之一,作为细胞增殖动力学标志,其在正常细胞周期中的浓度变化与在肿瘤细胞周期中的浓度变化存在差异。研究表明,胸苷激酶1（TK1）与增殖病变进程、肿瘤分期、肿瘤预后因子等众多肿瘤信息存在相关性,因此血清胸苷激酶1检测在临床应用及体检应用方面具有广阔前景。     

红豆杉细胞培养生产紫杉醇

红豆杉细胞培养是工业化生产紫杉醇的很有前景的途径之一。综述了红豆杉细胞培养过程中外植体的选择、愈伤组织的诱导、培养方式、生物反应器及培养动力学等方面的最新研究进展，并对今后利用细胞培养工厂化生产紫杉醇尚需解决的问题作了简略的探讨。     

姜黄素对人皮肤鳞状细胞癌细胞SCL-1凋亡的影响及相关机制研究

目的：探讨不同浓度姜黄素对人皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法：以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCL-1为研究对象,用不同浓度的姜黄素处理后,CCK-8法观察姜黄素对SCL-1细胞的生长抑制作用,AnnxinV-FITC/PI法检测细胞早期凋亡,实时荧光定量RT-PCR法检测Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达,酶标比色法检测Caspase-3 及-9的活性.结果：浓度大于10 μmol·L-1姜黄素能显著抑制SCL-1细胞的增殖,诱导其凋亡,并上调细胞内Caspase-3及-9 mRNA的表达及活性.结论：姜黄素能抑制SCL-1细胞的增殖、诱导其凋亡,上调Caspase-3及-9的表达及活性是其可能的分子机制之一.     

茵陈素对肺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨茵陈素（6，7-二甲基香豆素）对肺癌细胞增殖和细胞周期的影响。应用光镜、四氮甲唑蓝（MTT）方法和流式细胞术分析茵陈素对肺癌细胞的增殖，并呈剂量依赖性，以160цg/mL抑制作用最明显，抑制率达52.4%。细胞被阻滞于Go/G1期，不能进入S及G2/M期，增殖指数明显下降。结论：茵陈素在体外对肺癌细胞具有抑制作用，通过抑制DNA合成，将细胞阻滞于G0/G1期，从而抑制细胞增殖。     

动植物细胞培养生物反应器的研究进展

文章综合介绍了国内外细胞培养生物反应器的研究现状。在此基础上，作者提出了未来动植物细胞培养生物反应器的发展方向。     

新辅助化疗治疗宫颈癌对细胞增殖与凋亡的影响分析

目的探讨新辅助化疗治疗宫颈癌对细胞增殖与凋亡的影响,从而了解新辅助动脉化疗的作用机制,为宫颈癌的治疗提供参考。方法 52例Ib-IIb期宫颈癌患者平分两组,观察组施行动脉灌注栓塞化疗后手术,对照组直接手术治疗,观察临床疗效。分别记录两组手术病例的术中出血量,并作比较;同时检测动脉灌注栓塞化疗前、后及直接手术患者的肿瘤细胞增殖指数（Ki-67）及凋亡指数（AI）。结果观察组宫颈癌动脉灌注栓塞化疗总有效率为80.8%,对照组术后须行放疗或化疗者20例,占76.9%。观察组手术病例手术出血量为（362.5±11.5）ml,对照组手术出血量为（524.5±15.0）ml,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组动脉化疗前活检标本,Ki-67指数（%）为（67.5±76）,对照组直接手术病理标本,Ki-67指数（%）为（80.1±8.5）。观察组AI（%）为（3.5±1.3）,对照组检测AI（%）为（0.8±0.3）。结论 Ib-IIb期宫颈癌行新辅助动脉灌注栓塞化疗,可显著缩小病灶体积,从而提高患者生活质量。可明显减少手术中出血量,有利于患者康复。同时促进肿瘤细胞增殖显著下降、凋亡显著增加,提示动脉化疗有抑制肿瘤细胞增殖、促进凋亡的作用。     

微量热技术在微生物和细胞研究方面的应用

用热力学和动力学原理及微量热技术研究微生物和细胞的生长代谢规律,及外界因素对其生长代谢的影响是一项新兴的研究方法。微量热分析可以绘制生物体生长热谱图,通过建立数学生长模型,可以得到生长速率常数k,最小抑菌浓度MIC,最大发热功率Pm,及总发热量Qtot等一系列热动力学参数,能定性和定量的说明问题。微量热技术是一项灵敏度高、测量准确的热分析技术,具有定量、实时、在线、动态描述等特点,已经在生命科学领域得到了广泛的应用,文章重点介绍微量热技术在微生物和细胞研究方面的应用。