高效液相色谱法同时测定不同产地枳壳药材中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、异柚皮苷的含量

目的建立同时测定枳壳药材中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、异柚皮苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱VenusilXBP C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸（梯度洗脱）,检测波长为283 nm,流速为1 mL/min;柱温为30℃。结果柚皮苷进样量在0.5～5μg范围与峰面积线性关系良好,r=0.999 8;异柚皮苷在0.08～2.01μg范围线性良好,r=0.999 8;橙皮苷在0.06～1.2μg范围线性关系良好,r=0.999 9;新橙皮苷在0.09～4.82μg范围线性关系良好,r=0.999 7。异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷平均加样回收率分别为101.17%,98.25%,95.42%和100.95%。结论该方法简便、准确、可靠,适用于枳壳药材质量控制。     

高效液相色谱法同时测定枳壳饮片中4种黄酮类化合物的含量

目的:建立高效液相色谱法测定枳壳饮片中柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量.方法:采用Sunfire C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80)为流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长为283 nm,柱温为30℃.结果:柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷分别在0.074～123.7,0.60～999.0,0.072～120.3和0.59～982.0μg·mL-1范围内线性良好,其平均回收率分别为96.6%,96.1%,96.0%和97.2%.结论:该方法简便、快速、准确、重复性好,可用于枳壳中柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的同时测定.     

清热止咳颗粒标准研究

目的：清热止咳颗粒质量标准研究。方法：建立贝母素甲、贝母素乙的液相色谱-蒸发光法鉴别项;采用HPLC法同时测定陈皮、麸炒枳壳中的柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量和黄芩中黄芩苷的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.2%磷酸溶液（20:80）为流动相;检测波长为283nm。结果：柚皮苷在0.04 μg～0.85 μg范围线性良好,橙皮苷在0.03～0.59 μg范围线性良好,新橙皮苷在0.04～0.71μg范围线性良好,黄芩苷在0.13～2.6 μg范围线性良好;柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷加样回收率（n=9）分别为98.0%、99.4%、99.9%、100.2%。结论：本法分离效果好,准确可靠,适用于清热止咳颗粒的质量控制。     

薄层色谱鉴别胃苏颗粒中橙皮苷和柚皮苷

目的：摸索薄层色谱鉴别胃苏颗粒中橙皮苷和柚皮苷的方法。方法取橙皮苷和柚皮苷标准品以及胃苏颗粒样品溶液,点样,采用碱性硅胶G薄层板,以醋酸乙酯－丁酮－甲酸－水（10∶6∶2∶1）为展开剂展开,在紫外灯365nm下检测。结果橙皮苷和柚皮苷实现分离,其分离度R达到2．24（其中无糖型为2．23）,且主斑点Rf值在0．3～0．7之间,符合目标要求。结论薄层色谱法鉴别橙皮苷和柚皮苷,操作简单,费时较短,可以在快速检验中推广应用。     

HPLC 法同时测定痛经贴剂中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量

目的：建立 HPLC 法同时测定痛经贴剂中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量。方法采用高效液相色谱法,以 Cosmosil-C18为色谱柱（5μm,4．6 mm ×250 mm）;乙腈—0．1％磷酸（21∶79）为流动相;流速为1．0 mL· min －1;检测波长为283 nm;柱温为25℃;进样量为10μL。结果柚皮苷浓度在10．63～340 mg·L －1,橙皮苷浓度在7．81～250 mg·L －1,新橙皮苷浓度在8．13～260 mg·L －1范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98．01％、97．90％和98．60％。结论该方法简单、准确、可靠,可用于痛经贴剂的质量控制。     

枳壳饮片标准汤剂质量评价研究

目的 建立枳壳标准汤剂的质量控制方法，为枳壳配方颗粒及其他枳壳产品的质量评价提供参考。方法 按照标准汤剂制备要求，制备13批枳壳饮片标准汤剂，建立HPLC特征图谱。采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry，HPLC-Q-TOF-MS），电喷雾离子源，在正负离子模式下采集数据，对主要色谱峰进行定性鉴别。采用HPLC测定标准汤剂中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷4种成分含量，计算标准汤剂的出膏率、4种成分转移率和pH。结果 HPLC特征图谱中共6个共有峰，通过质谱定性分析结合对照品比较，对6个共有峰进行了指认，分别为新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷，13批枳壳饮片标准汤剂相似度均>0.98。枳壳标准汤剂中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷质量分数分别为0.07%~0.26%，1.30%~3.40%，0.14%~0.34%，0.85%~3.64%，转移率分别为31.4%~50.6%，31.3%~48.9%，22.9%~48.2%，25.3%~50.9%；出膏率为19.3%~30.71%；pH为3.45~4.64。结论 建立的系统评价枳壳饮片标准汤剂的质量方法稳定可行，为枳壳标准汤剂及其相关制剂的质量评价提供科学依据。     

枳壳不同炮制品中柚皮苷的含量测定

目的 对枳壳不同炮制品的柚皮苷含量进行测定,考察不同炮制方法对枳壳中柚皮苷含量的影响.方法 采用高效液相色谱法对枳壳不同炮制品的柚皮苷含量进行测定,色谱柱为Discovery C18(25 cm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液(20∶80),检测波长283 nm,柱温35℃,流速1.0 ml/min.结果 广东常用品种制枳壳的含量最低,平均含量为3.72%,切薄片的枳壳柚皮苷含量最高,平均含量为5.17%,麸炒枳壳平均含量为4.16%.结论 不同炮制方法的枳壳柚皮苷含量有明显差异.     

HPLC法测定和肝利胆颗粒中柚皮苷和新橙皮苷的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定和肝利胆颗粒中柚皮苷和新橙皮苷含量的方法。方法：采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱 （4.6 mm ×250 mm,4 μm）,流动相为乙腈-水（20 ∶80）（用磷酸调节pH值至3）,流速 1.0 mL·min -1,检测波长283 nm,柱温30.0 ℃。结果：柚皮苷和新橙皮苷线性范围分别为98.65～986.5 ng ,r=0.999 9 ; 86.80～868.0 ng,r=0.999 9。;平均回收率分别为100.90％和99.25％,RSD 分别为0.16％和1.20％。测定 3 批样品,结果柚皮苷和新橙皮苷的含量分别在0.67～1.35 mg·g -1 和 0.97～1.95 mg·g -1之间。结论：该方法操作简便、重复性好、结果准确,可作为和肝利胆颗粒质量的控制方法。     

枳壳与常山胡柚及其多个炮制品的质量评价

目的:建立测定枳壳与常山胡柚及多个炮制品中柚皮苷和新橙皮苷含量的方法,评价枳壳与常山胡柚及其不同炮制品的质量。方法:按2010年版《中国药典》(一部)及《浙江省中药炮制规范(2005年版)》枳壳项下的规定,对枳壳与常山胡柚及两者的不同炮制品进行水分和灰分的检查,并对所含的柚皮苷和新橙皮苷的含量采用高效液相色谱法进行测定。色谱柱为ZORBAX SB-C18,流动相为乙腈-水(20∶80,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为283 nm,柱温为40℃,进样量为10μl。结果:枳壳与常山胡柚经炮制后水分减少、灰分无明显变化。不同炮制品中,柚皮苷和新橙皮苷的含量均有所下降,其中枳壳炭下降显著,除枳壳炭外均符合2010年版《中国药典》(一部)要求。柚皮苷、新橙皮苷进样量线性范围分别为0.028 45~0.284 5、0.085 9~0.858 6μg(r=0.999 7、0.999 6);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.36%;平均加样回收率分别为96.45%~100.43%、98.36%~102.00%,RSD分别为1.45%、1.26%(n=6)。结论:枳壳与常山胡柚的检查和含量测定结果差异无统计学意义。建议对2010年版《中国药典》(一部)和炮制规范中含量测定的限量进行调整。     

高效液相色谱法测定橘红片中柚皮苷和橙皮苷的含量

目的建立HPLC法同时测定橘红片中柚皮苷和橙皮苷的含量。方法采用inertsil ODS色谱柱,流动相：甲醇-冰醋酸-水（34∶4∶61）;流速：1.0mL.min-1,检测波长：283nm,柱温：30℃。结果柚皮苷在0.0244～0.244μg范围内线性关系良好,r=0.999;橙皮苷在0.0163～0.163μg范围内线性关系良好,r=0.9999;平均回收率柚皮苷为100.30%,RSD为1.99%（n=6）;橙皮苷为99.78%,RSD为1.79%（n=6）。结论该方法准确、灵敏度高、重复性好,可用于橘红片的质量控制。     

Identification of O-diglycosyl flavanones in Fructus aurantii by liquid chromatography with electrospray ionization and collision-induced dissociation mass spectrometry

This study reported the application of LC-ESI/MS method to characterize O-diglycosyl flavanones of traditional Chinese medicine Fructus aurantii(Zhiqiao) and UPLC retention parameters method to expatiate the structure-retention relationship of these O-diglycosyl flavanones. The extract of F. aurantii was found containing neoeriocitrin, isonaringin, naringin, hesperidin, neohesperidin and neoponcirin. Tandem mass spectrometric method has been utilized to elucidate structure and differentiate the interglycosidic linkage of isomeric O-diglycosyl flavanones. Based on the relative abundance of fragments formed by fragmentation at glycosidic bonds in positive ion mode and CID MS spectra of deprotonated molecule [M-H](-) in negative ion mode, the interglycosidic linkage of O-diglycosyl flavanones (flavonoid O-neohesperidosides and O-rutinosides, 1,2- and 1,6-) can be unambiguously differentiated. UPLC and a CSASS software were performed to obtain the retention parameters a, c and k values of these compounds. The Deltaa, Deltac and alpha values within compound pair naringin to neoriocitrin, neoponcirin to neohesperidin, naringin to isonaringin, neohesperidin to hesperidin, hesperidin to isonaringin, neohesperidin to naringin were calculated. We found there were some relationship between structure and retention parameters.     

反相高效液相色谱法测定枳实中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量

目的 建立反相高效液相色谱法同时测定枳实中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量。方法 采用Promosil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水（22：78）,流速为1.0 mL· min^-1,检测波长283 nm,柱温为25℃。结果 枳实中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷分别在0.4116～2.470μg（r=0.9997）、0.413 2～2.066μg（r=1.000 0）、0.474 4～3.795μg（r=0.999 9）、0.198 2～1.982μg（r=0.999 7）与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.4%、103.3%、101.2%、99.2%;RSD分别为2.2%、1.6%、2.7%、2.0%。结论 该方法简便、准确、可靠,为枳实的质量控制提供一定的依据。     

LC-MS/MS determination of naringin, hesperidin and neohesperidin in rat serum after orally administrating the decoction of Bulpleurum falcatum L. and Fractus aurantii

To identify and quantify biologically active components in rat serum after orally administrating the decoction of Bulpleurum falcatum L. and Fractus aurantii, one of traditional Chinese medicines (TCMs), high-performance liquid chromatography (HPLC)-tandem mass spectrometry method was developed and validated. The HPLC separation was carried out on a Waters Nova Pak C(18) column using acetonitrile and water as mobile phase after the sample of rat serum was cleaned up with solid-phase extraction. Atmospheric pressure chemical ionization in the negative ion mode and selected reaction monitoring (SRM) method was developed to determine the active components. Three flavonoids of hesperidin, neohesperidin and naringin were identified in the serum by comparing their retention times and three independent SRM precursor/product ion transitions with those of corresponding reference standards. The concentrations of naringin, hesperidin and neohesperidin in rat serum determined by SRM measurement were 16.3, 11.9 and 14.3 ng/ml, respectively, after orally administrating the decoction of B. falcatum L. and F. aurantii. This method was validated in terms of recovery, linearity, accuracy and precision (intra- and interday variation). The recoveries from spiked control samples were 93.0, 89.3 and 91.2% for hesperidin, neohesperidin and naringin, respectively. Linearity in rat serum was observed over the range of 2.0-50.0 ng/ml. Percent bias (accuracy) and precision were well within the acceptable range and the relative standard deviation (R.S.D.) of the measured rat serum samples was less than 10% (n=5).     

枳壳及其制剂归芎养骨合剂的质量标准探讨

目的：探讨枳壳及其制剂归芎养骨合剂现行质量标准。方法：采用薄层色谱法及HPLC法,分别对归芎养骨合剂中的枳壳及药材枳壳进行定性鉴别。结果：药材及制剂现行标准中的薄层色谱鉴别均易产生假阳性结果,不能准确地对枳壳进行定性鉴别,采用HPLC法进一步验证,结果显示,制剂中未检出柚皮苷,所收集3批枳壳均不合有其指标性成分柚皮苷及新橙皮苷。结论：建议枳壳及其制剂的质量标准增加HPLC鉴别项,从而可以更加快速、准确、有效地对目前市场上植物来源品种繁多的枳壳药材、饮片及其制剂进行监管。     

HPLC法测定枳实中柚皮苷和新橙皮苷的含量

目的建立高效液相法测定枳实药材中柚皮苷和新橙皮苷的含量。方法样品采用甲醇超声提取的方法制备。采用RP-HPLC法,Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈-0.2%冰乙酸溶液(21∶79)为流动相,流速0.8ml.min-1,检测波长283 nm,柱温30℃。结果柚皮苷在0.204～4.08μg(r=0.999 9),新橙皮苷在0.200～4.00μg(r=1.0000)范围内线性良好;平均回收率分别为96.77%和96.56%;RSD分别为1.02%和0.66%。结论该法简便、快速、可靠,可用于控制枳实的质量。     

反相高效液相色谱法测定不同产地枳实中柠檬苦素的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定枳实中柠檬苦素的含量,并比较不同产地枳实中柠檬苦素的含量。方法采用Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(45:55),流速为1.0mL·min-1,柱温:30℃,检测波长:210 nm。结果枳实中柠檬苦素在0.035 6⁰.534 0μg(r=0.999 2)与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率为103.9%,RSD为2.3%(n=6)。不同产地的16批枳实药材含量测定结果表明,枳实中柠檬苦素的含量在0.480.534 0μg(r=0.999 2)与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率为103.9%,RSD为2.3%(n=6)。不同产地的16批枳实药材含量测定结果表明,枳实中柠檬苦素的含量在0.48².44 mg·g-1。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于枳实中柠檬苦素的含量测定。     

HPLC法同时测定胃苏颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量

目的:建立同时测定胃苏颗粒中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱,流动相为甲醇-醋酸-水(35∶4∶61,V/V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为283 nm,进样量为5μl,柱温为35℃。结果:柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷检测质量浓度分别在9.413～188.3、4.929～98.59、5.112～102.2μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.3%;平均加样回收率分别为101.08%、99.89%、101.46%,RSD分别为0.62%、1.35%、0.45%(n=6)。结论:该方法简便、准确、重复性好,适用于测定胃苏颗粒中3种黄酮苷类成分的含量。     

四磨汤口服液质量标准补充研究

目的补充研究四磨汤口服液的检测方法,为质量标准提高提供参考。方法采用薄层色谱法鉴别枳壳、乌药,并修订了木香、槟榔的薄层色谱鉴别方法;用HPLC法测定柚皮苷与新橙皮苷的含量,采用ThermoSyncronisC18色谱柱（4．6mm×250mm,5m）,以乙腈为流动相A,0．1％甲酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱（0～3min,10％A;3～22rain,10％～30％A;22～35rain,30％～95％A;35～45min,95％A）;流速为1．0mL·mid^-1,柱温为30℃,检测波长为283nm;用HPLC法测定辛弗林、去甲异波尔定与槟榔碱的含量,采用LunaSCX强阳离子交换色谱柱（4．6mmX250mm,5gm）,流动相为甲醇-0．2％磷酸溶液（2→1000mL水,用浓氨试液调节pH值至3．8）（65：35）为流动相,流速为1．0mL·min^-1,检测波长为215nm,柱温为30℃。结果薄层色谱斑点清晰;柚皮苷和新橙皮苷的线性范围分别为31．76～635．2ng、32．02～640．4ng,加样回收率分别为101．1％（n=6,RSD为1．2％）、99．7％（n=6,RSD为1．5％）;辛弗林、去甲异波尔定与槟榔碱的线性范围分别为3．432～3432ng、3．056～3056ng、4．932～4932ng,加样回收率分别为99．0％（n=6,RSD为0．6％）、99．1％（n=6,RSD为1．5％）、99．4％（n=6,RSD为1．5％）。结论本法简便可靠、结果准确,可用于该制剂的质量控制。     

平消胶囊(片)HPLC特征图谱研究

目的建立平消胶囊(片)的特征图谱,提高其质量控制水平。方法以甲醇为溶剂,进行超声提取;色谱柱:Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-5mL·L~(-1)磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0mL·min~(-1);检测波长:263nm;柱温:35℃。结果平消胶囊(片)各成分得到了较好的分离,以柚皮苷为参照物,确定了9个共有色谱峰,分别来源于马钱子、枳壳和五灵脂。结论该方法准确、重复性好,可同时分离平消制剂中的多种成分,尤其是对现有标准方法中枳壳主要成分柚皮苷薄层鉴别项易出现假阳性结果的现象进行补充。