人乳头状瘤病毒快速导流杂交与传统杂交法比较基因分型及临床应用

目的利用快速导流杂交法对人乳头瘤病毒进行快速基因分型,并探讨该技术临床应用前景. 方法 144例尖锐湿疣患者皮损脱落细胞或组织中提取DNA,PCR扩增后与9种常见HPV亚型探针进行反斑点印迹杂交(reverse dot blot, RDB)检测HPV DNA,通过与传统膜杂交结果做对比,评估导流杂交法的效果. 结果 144例样本中得到134例PCR阳性结果;HPV分型包括:高危HPV亚型16、18、31、33、58;低危亚型6、11、53;未知危险程度的亚型CP8304;68例样本中包括了2～4种亚型的混合感染. 结论两种杂交方法检测结果97%一致;快速导流法优势主要具有更高速度、操作更方便,和节省试剂用量;敏感性和特异性与传统杂交方法相同.     

导流杂交基因芯片技术在人乳头瘤病毒检测中的应用

目的探讨导流杂交基因芯片技术作为临床检测人乳头瘤病毒（HPV）常规方法的实用性,及在宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法采用导流杂交基因芯片技术对676例疑似HPV感染的标本进行基因诊断和分型,检测了13种高危亚型（16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59和68型）、5种低危亚型（6,11,42,43和44型）和3种中国人群常见亚型（53,66和CP8304型）。结果 676例样本中检出HPV阳性175例,检出率25.9%,高危占74.9%、低危占16.0%、中国人常见亚型占9.0%、2种或2种以上亚型混合感染占15.4%。结论导流杂交基因芯片技术适合于临床筛查HPV感染,能更好的检出HPV感染的基因型,为临床提供较有价值的实验资料,对宫颈癌的筛查有较大的帮助。     

导流杂交基因芯片技术检测高危型人乳头瘤病毒在宫颈癌筛查中的应用

目的:研究导流杂交基因芯片技术(HybriMax)检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌筛查上的应用价值,评估其灵敏度及特异性。方法:取150例妇科住院及门诊病人标本,采用导流杂交基因芯片技术检测高危型HPV-DNA,同时作宫颈TCT细胞学检查及行阴道镜下活体组织学检查。结果:导流杂交基因芯片技术检测高危型HPV-DNA检测检出阳性标本49例,阳性率32.6%,子宫颈癌和癌前病变筛查(HybriMax)的灵敏度为93.7%,特异性81.6%,细胞法筛查灵敏度为81.3%,特异性91.3%。结论:导流杂交基因芯片技术HPV-DNA检查可作为常规方法用于子宫颈癌的筛查。     

导流杂交法检测人乳头瘤病毒基因亚型的研究

目的了解许昌地区女性人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况,分析其感染亚型,为女性宫颈疾病的筛查和防治提供可靠的理论依据。方法收集本院妇科门诊宫颈刮取物标本321例,采用聚合酶链反应扩增其特异性基因片段,然后导流杂交法检测目的基因,检测各HPV亚型。结果321例标本中,有82例女性感染人乳头瘤病毒,阳性率为25．5％;其中,低危型18例,高危型56例,高低危合并感染者8例,其中单一型感染者为80．5％（66／82）;二型感染34．1％（28／82）;三型和三型以上感染8．5％（7／82）,感染的HPV型别排前5位的是HPVl6、58、68、18、52型。结论本地区宫颈疾病患者中,HPV的感染率为25．5％,导流杂交法能在同一样本中一次性检测21种HPV型别,为HPV感染的诊断和宫颈癌防治提供重要依据。     

导流杂交技术检测浙西地区女性HPV病毒感染基因谱分析

目的研究浙西地区各育龄年龄段女性人群人乳头状瘤病毒(HPV)感染状况,为HPV感染和宫颈癌防治提供可靠的科学的参考依据。方法收集2013年1月-2017年6月在浙江省衢州市人民医院就诊和体检的3 865例女性宫颈脱落细胞标本,采用PCR扩增和DNA反向点杂交的导流杂交技术,对标本行HPV基因谱筛查。结果感染HPV843例,总感染率为21. 81%,其中高危型739例(占87. 66%);低危型104例(占12. 34%)。在被检测的高危HPV亚型中,感染阳性率前3位依次是HPV16、HPV52、HPV58,HPV44型未检测出;低危HPV亚型感染率前3位依次是HPV11、HPV6、HPV43。843例HPV阳性感染者中,单型感染634例(75. 21%),2种亚型混合感染137例(16. 25%),3种亚型混合感染52例(6. 20%),4种亚型混合感染18例(2. 14%),5种亚型混合感染各3例(0. 36%)。HPV感染的高峰年龄为 50岁组,感染率为29. 33%。结论浙西地区的HPV高危感染优势亚型为HPV16、HPV52、HPV58型, 50岁女性HPV感染率最高,感染以单一亚型感染为主。HPV基因谱分析分型检测对本地区临床宫颈癌的早期预防、防治提供可靠的科学依据。     

导流杂交方法检测人乳头状瘤病毒分型的临床应用

目的 探讨导流杂交方法在人乳头状瘤病毒(HPV)分型检测中的临床应用.方法 采用导流杂交方法,对305例HPV感染的女性患者进行HPV分型检测,分析HPV亚型的检出情况,并评价HPV分型在宫颈病变中价值.结果 21种HPV亚型均被检出,305例女性患者中单型感染有173例(56.7%),多重型感染有132例(43.3%),检出率较高的HPV高危型有HPV16型(17.6%)、HPV52型(9.8%)、HPV58型(9.0%)、HPV33型(6.3%)、HPV18型(5.4%)、HPV68型(5.2%),低危型有HPV11型(14.3%)、HPV6型(6.5%);随着宫颈病变级别升高,HPV高危型检出率增加趋势,HPV低危型检出率下降趋势.结论 导流杂交方法可检测HPV多种亚型,对HPV感染亚型的鉴别及宫颈癌的预防和治疗具有较好的临床应用价值.     

基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型

目的针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据.方法18种HPV DNA亚型(HPV6 、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片,生物素标记引物经通用引物介导PCR(GD-PCR)扩增HPV DNA,PCR产物与基因芯片经反向点杂交检测HPV亚型;同时采用荧光定量PCR检测HPV6、11、16和18亚型.结果31例标本中,基因芯片的阳性检出率为74.2%,其中HPV6/18、HPV11/16、HPV33/58和HPV6/11/33多重感染各1例(3.2%);荧光定量PCR阳性检出率为67.7%,与前种方法相比较,漏诊率为6.5%.结论HPV分型基因芯片可1次检测HPV多种亚型,灵敏度高和特异性强,有利于对HPV多重感染的诊断.     

导流杂交技术检测21种人类乳头瘤病毒

目的探讨导流杂交技术在人类乳头瘤病毒感染分型检测中的应用。方法采用导流杂交技术,对3494例妇科患者下生殖道21种HPV亚型进行检测,并对51例HPV16型和50例HPV18型阳性患者DNA进行实时荧光定量PCR比较检测。结果患者标本除43亚型外其它20种HPV亚型均被检出,总的阳性率为36.1%(1262/3494),阳性率大于5%的HPV亚型从高到低分别为:HPV16(19.8%、256/1262)、52(18.8%、237/1262)、58(16.4%、207/1262)、53(7.2%、91/1262)、11(87/1262、6.9%)、68(6.6%、83/1262)、6(5.7%、72/1262)、18(5.4%、68/1262)。单一亚型阳性率为62.8%(792/1262)、二重亚型为30.7%(388/1262)、三重亚型为5.2%(65/1262)、三重以上亚型为1.3%(17/1262)。其中HR-HPV亚型感染占所有阳性标本的比例为77.0%(1069/1388),LR-HPV亚型为12.8%(177/1388),中间型HPV亚型为10.2%(142/1388)。实时荧光定量PCR检测法与导流杂交技术检测符合率均为98%,kappa值均为0.96,说明一致性良好。结论本地区HPV感染的主要亚型为16、52、58、53、11,常见亚型符合亚洲和中国人群的分布规律,又有一定的区域性。在人类乳头瘤病毒检测中,导流杂交技术不但与实时荧光定量PCR检测法的符合率高,而且它还具备分型的优势,可为临床提供更多的帮助。     

导流杂交法检测人乳头状瘤病毒的临床意义

目的:评价快速导流杂交法在人乳头状瘤病毒(HPV)基因型检测中的应用价值,并探讨其临床意义。方法:对新乡市中心医院妇产科及体检中心送检的1 012例样本全部进行快速导流杂交法HPV基因分型检测。结果:21种HPV基因型中检测到18种,常见的6种基因型为HPV16、18、52、31、33。HPV基因型单一感染为77.6%,多重感染为22.4%。结论:快速导流杂交法可准确进行HPV基因分型,诊断宫颈癌快速敏感,是理想的宫颈癌粗筛分型方法。宫颈癌患者常见HPV基因型的分布既符合亚洲人群的分布规律,又有一定的区域性,为该地区HPV的流行状况及基因疫苗研究提供了实验依据。     

闽南女性人乳头状瘤病毒感染流行病学调查分析

[目的]掌握闽南地区女性人乳头状瘤病毒感染流行病学数据,为宫颈癌的防治和疫苗的研发提供理论依据.[方法]运用快速导流杂交基因芯片技术对4911例女性宫颈标本进行21种HPV基因亚型分型.[结果]在4911例标本中共筛查出660例阳性,HPV感染率为13.44%,其中高危HPV亚型感染率为12.91%.[结论]闽南地区女性HPV感染亚型及年龄分布呈独有的特征,具有明显的区域性.     

导流杂交基因芯片检测HPV16、18亚型的准确度分析

目的:验证凯普HPV分型检测系统检测HPV16、18型别结果的准确性,分析判读差异的原因。方法:选取110例凯普HPV16、18分型检测阳性的标本,根据显色程度分为显色正常82例(阳性),显色弱28例(弱阳性21例、极弱7例)。使用型别特异性引物PCR扩增+测序方法进行对照验证,判断其检测的准确度。结果:总共110例样本中,有6例显色弱的标本检测阴性,与标准方法比较,基因芯片结果总符合率94.5%,二者差异没有统计学意义(P>0.05)。不同程度显色标本与标准方法比较,显色正常的82例标本全部检出,符合率100%,21例弱阳性标本,4例未检出,符合率81.0%,7例极弱阳性标本,2例未检出,符合率71.4%。显色弱的样本检测符合率显著低于显色正常标本,χ2=11.9,P<0.01。结论:凯普基因芯片法检测HPV16、18亚型具有较高的准确度,但芯片上相应着色点显色弱,可能导致检测结果错误。     

女性宫颈炎患者21种HPV基因型的分子流行病学调查

目的调查21种人乳头状瘤病毒（HPV）基因型的分子流行病学特点。方法取500例女性宫颈炎患者宫颈分泌物，应用HPV基因微陈列分型技术检测HPV6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304共21种基因型，分析21种基因型的流行病学特点。结果HPV总感染率为53．0％，属于高危型的HPV占其中的60．0％；21种基因型中，HPV11型感染率最高（12．4％），但高危型中HPV16型的感染率居首位（11．2％）；不同年龄段HPV感染率，21～30岁组最高，其次为31～40岁组，两组总计达76．6％。结论本研究提供了21种常见HPV基因型的分子流行病学资料，对HPV疫苗开发、应用及HPV感染的防治具有重要价值。     

不同型别人乳头状瘤病毒感染与宫颈病变程度的关系

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)感染患者的各HPV型别分布,及各型别HPV感染与宫颈不同程度病变的关系。方法采用核酸分子快速导流杂交基因微阵列分型检测技术,分析740例女性HPV感染者的HPV型别,同时检测宫颈病变程度。结果在740例HPV感染者中常见的21种亚型均被检出,排在前3位的亚型分别为16、58、52;高危型HPV混合低危型HPV的混合感染与单一高危型HPV感染和多种高危型HPV混合感染之间,宫颈不同程度病变差异无统计学意义,而以上几种感染类型与低危HPV感染相比,宫颈病变程度差异有统计学意义(均P<0.01),多元logistic回归分析显示,感染16型HPV(OR=3.56,P<0.01),58型HPV(OR=1.29,P<0.05)使宫颈癌患病风险大大增加;把宫颈上皮内瘤变分为低等级(CINⅠ)和高等级(CINⅡ、CINⅢ)病变,以不同程度的宫颈上皮内瘤变作为分析因素进行二元logistic回归,显示6型HPV(OR=6.99,P<0.01)、11型HPV(OR=5.92,P<0.01)感染将使感染者宫颈上皮内瘤变CINⅠ的风险大大升高。结论相对于低危型HPV,感染高危型HPV是宫颈病变加重的重要因素;高危型的16、18型HPV感染引起宫颈癌的患病风险增加,低危型的6型、11型HPV感染则更易引低级别的宫颈上皮内瘤变的发生。     

浏阳地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染状况分析

目的了解本地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染状况,为预防HPV感染和宫颈疾病防治提供理论依据。方法应用导流杂交基因芯片技术(可以同时检查21种基因型别),对21例宫颈癌、59例CIN、38例宫颈炎症1、006例宫颈正常的共1 124例宫颈细胞标本进行HPV检测及基因分型,分析其感染情况及型别分布。采用卡方检验,对HPV阳性和阴性在不同程度宫颈病变的构成比进行分析。结果本组资料中总感染率为28.4%(319/1 124),存在多重感染。共查出20种基因型,HPV43型未查出。HPV的主要基因型别为HPV16(19.8%)、HPV58(18.3%)、HPV52(16.1%)、HPV18(6.3%)。HPV阳性与阴性组之间在宫颈正常、宫颈炎症、宫颈CIN和宫颈癌的发病总体构成比差异有统计学意义(χ2=150.4,P0.005)。结论 HPV16、HPV58、HPV52、HPV18为该地区HPV感染的主要型别,感染高危型HPV是引起宫颈CIN及宫颈癌的必要和关键因素。HPV检测能及早发现宫颈疾病,在有效防治宫颈癌前病变,降低宫颈癌症的发病率中有重要的意义。     

应用导流杂交基因芯片技术检测人乳头状瘤病毒亚型的临床意义

[目的]探讨人乳头状瘤病毒(HPV)不同型别的感染情况及其分型检测的临床意义。[方法]用导流杂交基因芯片技术对523例门诊首诊人群的宫颈脱落细胞标本进行HPV基因诊断和分型。[结果]①523例标本中HPV整体感染率为36.1%(189/523),单重感染率为31.4%(164/523);复合型别感染率为4.8%(25/523),包括2.9%(15/523)的双重感染及1.9%(10/523)的多重感染。②20~29岁和50~59岁组的感染率较高。③HPV阳性人群其宫颈高度病变的发生率(45.0%,85/189)显著高于HPV阴性人群(9.6%,32/334)。[结论]HPV分型检测对筛选宫颈高度病变有重要意义。导流杂交基因芯片技术适合临床筛查HPV感染及基因分型。