三氧化二砷诱导人肝癌细胞株凋亡的初步研究

细胞凋亡在肿瘤治疗学上的意义日益得到人们的重视.我们观察了中药砒霜的主要成分——三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌细胞株的诱导凋亡作用,以探索药物治疗肝癌的新途径.1.材料与方法:(1)药物:0.1%As_2O_3溶液(癌灵Ⅰ号),哈尔滨医科大学第一附属医院药剂科惠赠.(2)细胞株:人肝癌细胞株SMMC-7721.(3)方法:MTT法观察细胞的增殖率,AO/EB荧光染色观察细胞的形态学改变,流式细胞仪检测凋亡率及细胞周期变化.2.结果:As_2O_3对SMMC-7721肝癌细胞株的生长有显著抑制作用,抑制作用强度随浓度提高、作用时间延长而增加.经2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml As_2O_3作用24h,SMMC-7721细胞株在荧光染色时,显微镜下均呈现典型的凋亡形态学改变,如核染色体凝结、固缩成块状,或染色体沿核膜成新月体形排列,或细胞核崩解碎裂,可见部分细胞呈出芽的表现.流式细胞促检测各实验组均见有亚G_1峰.细胞经1μg/     

三氧化二砷(As2O3)治疗难治性恶性淋巴瘤近期疗效

三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)已成为继全反式维甲酸(RARA)后诱导肿瘤细胞分化凋亡的又一范例.体外实验研究初步证明砷剂对淋巴细胞也有一定的诱导凋亡作用.我们应用As2O3注射剂治疗4例难治性淋巴瘤,现报告如下.     

三氧化二砷抗肿瘤研究

用三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)疗效显著。研究表明As2O3还可以诱导多种实体瘤细胞生长阻滞和凋亡,但As2O3对实体瘤的治疗作用及抗肿瘤作用机制仍未明确。     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的细胞分化和凋亡的研究(英文)

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在 BALB/C 裸鼠体内生长的抑制作用并探讨其机制,重点观察其对鼻咽癌细胞的分化诱导作用。方法 CSNE-1鼻咽癌细胞株接种于裸鼠体内构建移植瘤模型。腹腔注入 As_2O_3(5 mg/kg)。光镜及电镜观察移植瘤的形态学变化,TUNEL 染色计算凋亡率,应用免疫组化法检测 PCNA,p53,Bcl-2和 bax 基因的表达。结果腹腔注射 As_2O_3后,鼻咽癌 BALB/C 裸鼠移植瘤生长抑制,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。TUNEL 检查提示凋亡细胞增多;用药后野生型 p53及 bax 高表达,PCNA 低表达,Bcl-2无变化。结论 As_2O_3能诱导人低分化鼻咽裸鼠移植瘤分化和凋亡,可能与 p53及 bax 高表达相关,与 Bcl-2无关。     

三氧化二砷抗肿瘤研究

用三氧化二砷（As2O3）治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）疗效显著。研究表明As2O3还可以诱导多种实体瘤细胞生长阻滞和凋亡，但As2O3对实体瘤的治疗作用及抗肿瘤作用机制仍未明确。     

三氧化二砷对人肝癌细胞选择性抑制作用的实验研究

目的:明确三氧化二砷(As_2O_3)对人类肝癌细胞株和正常肝细胞株的体外抑制作用.方法:采用活细胞观察法、台盘兰拒拖染法和MTT比色法观察了As_2O_3对体外人肝癌细胞株QGY-7701、QGY-7703和正常人肝细胞株L-02生长的影响及其形态学变化.结果:As_2O_3能显著抑制人肝癌细胞QGY-7701和QGY-7703的生长,而对正常人肝细胞L-02无明显作用.As_2O_3作用48小时,对QGY-7701和QGY-7703细胞的IC50分别为1.537μg/ml和1.301μg/ml.结论:As_2O_3对人肝癌细胞有显著选择性抑制作用,而对正常肝细胞无明显影响,值得进一步探究其机理和临床应用价值.     

三氧化二砷抗肿瘤临床应用进展

三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)有特效,在其他恶性肿瘤治疗中也有应用.其抗肿瘤作用涉及诱导细胞分化与凋亡、细胞周期阻滞、抗肿瘤血管生成及调节多种基因表达.现综述As2O3抗肿瘤作用机制及临床应用.     

小剂量As_2O_3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷(As_2O_3)诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态,WST1实验测定细胞增殖变化,测定和分析细胞周期,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测C／EBPα和C／EBPε的 mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸(ATRA)作用24 h后,随着细胞分化的发生, C／EBPε mRNA的表达明显增加,C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As_2O_3作用24 h后, C／EBPα mRNA的表达降低,C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As_2O_2和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞,C／EBPα mRNA的表达降低,二者差异无显著意义;C／EBPε的表达差异较大(P<0．05),二者差异有显著意义。小剂量As_2O_3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。     

三氧化二砷逆转人胃癌细胞SGC7901/ADR耐药性的作用机制

目的：探讨三氧化二砷(As_2O_3)对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素(ADM)耐药性的逆转作用及其逆转机制。方法：采用MTT法检测As_2O_3的非细胞毒性浓度和SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性,用流武细胞仪检测细胞内药物浓度和P-gp功能,免疫组织化学法检测细胞GST-π和TPPOⅡ的表达。结果：0．4～0．8μmol/L As_2O_3对耐药细胞SGC7901/ ADR无明显毒性,0．8μmol/L的As_2O_3可抑制P-gp功能,下调GST-π表达,显著提高SGC7901/ADR细胞内ADM浓度,增加SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性。结论：As_2O_3可部分逆转SGC7901/ADR细胞对ADM耐药性,其机制可能与抑制P-gp功能及下调GST-π表达有关。     

三氧化二砷抗肿瘤临床应用进展

三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)有特效，在其他恶性肿瘤治疗中也有应用。其抗肿瘤作用涉及诱导细胞分化与凋亡、细胞周期阻滞、抗肿瘤血管生成及调节多种基因表达。现综述As2O3抗肿瘤作用机制及临床应用。     

自噬在急性早幼粒细胞白血病中的研究进展

急性早幼粒细胞白血病（APL）具有特征性的t（15;17）（q22;q21）染色体易位,其表达PML-RARα融合蛋白。全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（As2O3）诱导早幼粒白血病细胞分化或凋亡,使APL成为第一种可以治愈的白血病。自噬是维持细胞稳态的重要代谢方式之一,最近有研究显示自噬在ATRA／As2O3诱导治疗中发挥重要作用,而且还可能影响APL对药物诱导凋亡作用的敏感性。因此,今后靶向自噬、调控自噬可能成为APL乃至于其他白血病治疗的一种新手段。对近年来自噬对APL的作用研究进行综述。     

三氧化二砷诱导A_(549)~(DDP)细胞株耐药基因表达的研究

目的：探讨三氧化二砷(As2O3）的耐药机制。方法：用四甲基偶氮唑蓝(MTT）法检测A_(549)~(DDP)细胞对As_2O_3的耐药性,用逆转录聚合酶链反应(RT－PCR）技术检测As_2O_3处理后A_(549)~(DDP) 细胞多药耐药基因(mdr1）及多药耐药相关蛋白(MRP）基因表达。结果：A_(549)~(DDP) 细胞对As_2O_3具有交叉耐药性。A_(549)和A_(549)~(DDP) 细胞中mdr1基因低表达,MRP基因呈较高水平表达。结论：A_(549)~(DDP) 细胞中MRP基因过度表达可能是As_2O_3耐药的主要机制之一。     

三氧化二砷对非急性早幼粒细胞白血病和实体瘤的实验研究进展

在急性早幼粒细胞白血病(APL)中,三氧化二砷(As₂O₃)有效诱导了APL细胞的凋亡,如果能避免早期死亡,多数患者可达到完全缓解和治愈。近几年,人们也研究了它对非APL白血病和多种实体瘤治疗的可能性。同时,越来越多的研究发现,它在体外或体内也抑制非APL白血病和几种实体瘤如肝癌、食管癌和胃癌等细胞的增殖。人们对非APL白血病和实体瘤中As₂O₃诱导细胞凋亡的机制也进行了研究。并且为取得更满意的疗效和减轻As₂O₃的细胞毒等副作用,人们对新型As₂O₃靶向制剂的研发也进行了探索。本文就上述有关研究进展进行综述。     

细胞外信号调节激酶1/2参与三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞凋亡

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞U251凋亡中的作用,为应用三氧化二砷治疗胶质瘤奠定基础。方法:50μmol/L三氧化二砷作用U251细胞,不同时间检测胶质瘤细胞增殖活性,半定量PCR检测ERK1/2mRNA表达,Western blot检测ERK1/2蛋白表达;Ho-echst33258染色及流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;转染ERK1/2上游激酶MEK1,应用ERK1/2激酶抑制剂U0126观察ERK1/2通路在肿瘤凋亡及增殖中的作用;比色分析法检测Caspase-3活性的变化。结果:三氧化二砷诱导胶质瘤细胞发生明显凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;增加ERK1/2蛋白的表达,呈时间依赖性;阻断ERK1/2信号通路后胶质瘤细胞凋亡受到抑制,Caspase-3活性下降。结论:ERK1/2信号通路在三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞凋亡中起重要作用。     

三氧化二砷与细胞凋亡治疗急性早幼粒细胞白血病

在确定人类急性白血病特殊染色体易位引起的肿瘤融合蛋白质方面的研究,已取得显著进展。由于此类蛋白质只能被白血病克隆内的细胞所表达,所以最有望成为专杀白血病细胞,而不损害正常细胞的新药。全反式维LHNH酸(t-RA)和三氧化二砷(As_2O_3)对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者均显示了这种活性,它们的胚细胞含有t(15:17)染色体易位并表达PML/RARα融合蛋白质。一旦PML/RARα融合基因被克隆,t-RA选择作用的生化基础就明显,因为异常蛋白质含有维甲酸的结合区,即维甲酸受体(RAR)α,随后的工作表明t-RA能诱导白血病早幼粒细胞分化,在临床实验上t-RA与标准细胞毒合并使用,增加了APL病人的存活时间。     

三氧化二砷对不同种类人卵巢癌细胞株细胞的体外作用

[目的]了解新型抗癌药物三氧化二砷对不同种类人卵巢癌细胞株细胞体外生长的作用。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法 ,测定不同浓度三氧化二砷作用不同时间对人卵巢癌细胞株3AO、SKOV3、TYK细胞生长的抑制作用 ;采用流式细胞(FCM)技术 ,观察三氧化二砷作用后3AO细胞的凋亡率及细胞周期的变化 ;通过吖啶橙染色 ,荧光显微镜观察三氧化二砷作用后SKOV3 细胞的形态变化。[结果]三氧化二砷可有效地抑制3AO、SKOV3、TYK细胞的生长 ,具有时间、浓度依赖性 (P<0.05);不同细胞株之间的细胞生长抑制率差异无显著性 (P>0.05) ;在一定浓度范围内 ,三氧化二砷诱导3AO细胞的凋亡率具有时间、浓度依赖性(P<0.05) ;3.0μmol/L是诱导细胞凋亡的最佳浓度 ;三氧化二砷低浓度时阻滞3AO细胞S期细胞通过 ,高浓度时选择性诱导S期细胞凋亡 ;三氧化二砷作用后 ,SKOV3 细胞呈现典型的凋亡细胞形态特征。[结论]三氧化二砷通过诱导S期细胞凋亡而抑制人卵巢癌细胞的生长 ,具有量效性、时效性及周期特异性     

三氧化二砷对人肝癌细胞株VEGF表达的影响

近年的研究表明,血管内皮生长因子(Vascularendothelial growth factor,VEGF)是血管内皮细胞的有丝分裂原,可刺激内皮细胞增生和迁移,强效地促进血管形成,并能增加血管的通透性,与许多肿瘤发展过程关系密切.为此,我们观察了中药砒霜的主要成分——三氧化二砷(As_2O_3)对人肝癌细胞株Bel-7402VEGF表达的影响,以探索As_2O_3抗肝癌作用的新机制.     

三氧化二砷诱导雌激素受体阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-435s凋亡和bcl-2、bax表达关系的研究

目的 观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)诱导人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s凋亡的情况及对bcl-2和bax表达的影响,初步探讨了其诱导凋亡的途径.方法 不同浓度As2O3体外作用于MDA-MB-435s细胞24h后,采用TUNEL染色法和DNA梯状电泳法检测细胞凋亡情况,应用免疫组化法检测细胞中bcl-2和bax蛋白表达情况.结果 As2O3作用后,DNA琼脂糖凝胶电泳法呈现凋亡DNA梯状条带;As2O3作用组的凋亡指数明显高于阴性对照组(P＜0.05);bcl-2表达下调,bax表达上调.结论 As2O3能诱导MDA-MB-435s细胞凋亡,上调bcl-2蛋白表达、下调bax蛋白表达是其诱导凋亡的途径之一.     

c-Myc和Fas在三氧化二砷体外诱导HL-60细胞凋亡中的变化与作用的研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在体外诱导急性早幼粒白血病(acute promyelo-cytic leukemia,APL)细胞HL-60凋亡的分子机制。方法:采用MTT方法检测As2O3对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和Fas蛋白表达,RT-PCR检测c-Myc和Fas的mRNA表达。结果:4.0μmol/L的As2O3作用96h可抑制70%的HL-60细胞,并使细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡,P&lt;0.01;Fas蛋白表达升高,作用72h后阳性率由对照组的9.63%增加为32.84%,P&lt;0.01;Fas mRNA表达升高,c-Myc的mRNA表达降低,P&lt;0.01。结论:As2O3诱导HL-60细胞凋亡的机制在于引起细胞周期阻滞,上调Fas蛋白及mRNA表达,下调c-Myc的mRNA表达。     

PTEN在三氧化二砷诱导肝癌细胞(SMMC-7721)凋亡中的作用

目的 研究PTEN在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪定量检测各组细胞的凋亡率;Western blot方法检测各组细胞中PTEN蛋白的表达情况;用PTEN siRNA转染SMMC-7721细胞,观察其对As2O3诱导细胞凋亡作用的影响.结果 As2O3能显著抑制SMMC-7721细胞存活率,其抑制率呈剂量依赖关系;As2O3剂量依赖性诱导肝癌细胞凋亡;Western blot检测显示As2O3明显增加细胞中PTEN蛋白的表达;PTEN siRNA转染可减弱As2O3对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用.结论 As2O3诱导SMMC-7721细胞凋亡可能与其诱导PTEN表达有关.