FISH 与 IHC 在乳腺癌 HER–2 基因扩增检测中的应用价值

〔摘 要〕 目的：分析荧光原位杂交技术（FISH）与免疫组织化学法（IHC）在乳腺癌人表皮生长因子受体 –2（HER–2） 基因扩增检测中的应用价值。方法：选取惠州市第一人民医院 2018 年 1 月至 2020 年 12 月收治的首发乳腺癌患者 103 例作 为研究对象，收集患者组织穿刺标本以及手术切除组织标本，分别应用 IHC 以及 FISH 对患者 HER–2 进行检测，对两种方 法的检测结果进行统计和分析。结果：103 例乳腺癌组织标本检测结果显示：HER–2 蛋白（–）或（+）者 9 例，（++）者 42 例，（+++）者 52 例；基因扩增情况为：阳性（扩增）72 例，阴性（未扩增）31 例。两种方法的检查结果一致性较高 （Kappa = 0.779，P ＜ 0.05）。结论：IHC 以及 FISH 均可作为对乳腺癌患者 HER–2 基因     

宫颈癌中 p16、p53 和 Ki67 的表达及其临床意义

〔摘 要〕 目的：研究在宫颈癌中 p16、p53、Ki67 的表达与临床意义。方法：选取 2018 年 10 月至 2020 年 9 月间南华 大学附属第二医院收治的 50 例宫颈癌患者，纳入患者均接收免疫组织化学染色法检测 p16、p53、Ki67 表达情况，并分析 其临床意义。结果：50 例宫颈癌患者中，Ki67 阳性表达率占比 72.00 %，p53 阳性表达率占比 42.00 %，p16 阳性表达率占 比 52.00 %，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）；宫颈癌中 p16、p53 和 Ki67 的表达与患者病理分级、临床分期具有显著相 关性（P ＜ 0.05）。结论：在宫颈癌中 p16、p53、Ki67 的表达与病情进展有关，其阳性表达水平与病理分级、临床分期具 有显著相关性。     

不同分子分型乳腺癌雄激素受体表达差异的研究

〔摘 要〕 目的：探讨不同分子分型乳腺癌雄激素受体（AR）的表达差异。方法：收集 2019 年 3 月至 2020 年 9 月 间惠州市第三人民医院 80 例乳腺癌患者的石蜡包埋组织,使用免疫组织化学法及链霉菌康生物素蛋白 – 过氧化物酶 连结法（SP）对 AR 在不同分子分型中表达进行观察,分析 AR 在不同乳腺癌分子分型中表达特征,分析乳腺癌组织 中 AR 表达与各分子分型乳腺癌预后关系。结果：80 例患者分子分型：管腔上皮 A 型（Luminal A）42 例,管腔上皮 B 型（Luminal B）11 例,人表皮生长因子受体 2（HER2）过表达型 10 例,基底细胞样型（Basal–like）9 例,正常 细胞样型（Normal–like）8 例;共有 58 例呈现 AR 阳性,其中又以 Luminal A（80.95 %）、Luminal B（72.73 %）、 Normal–like（75.00 %）分型的阳性比例最高,Basal–like（44.44 %）阳性比例最低。随访截止于 2021 年 9 月或死亡时间, Luminal A、Luminal B、Base–like 与 Normal–like 的 AR 阳性组术后预后不良结局发生率均较阴性组更低,差异具有 统计学意义（P ＜ 0.05）。HER2 过表达型乳腺癌 AR 阳性组术后预后不良结局发生率与阴性组对比差异无统计学意 义（P ＞ 0.05）。结论：AR 在不同分子分型乳腺癌组织中表达存在显著差异,可以为临床分子分型判断及预后不良 结局预测提供可靠依据。     

胃癌术后化疗患者血清 PTX–3、SCC–Ag 水平及临床意义

〔摘 要〕 目的：分析胃癌术后化疗患者血清人重组穿透素–3（PTX–3）、鳞状细胞癌相关抗原（SCC–Ag）水平及其临床意义。 方法：选取河南大学第一附属医院 2018 年 5 月至 2020 年 5 月治疗的胃癌患者 80 例及同期体检健康者 112 例,胃癌患者均 进行术后化疗,检测患者化疗前后 PTX–3、SCC–Ag 水平,并与体检健康者进行比较,分析两者与分化程度及临床分期间 关系。结果：胃癌患者血清 PTX–3、SCC–Ag 较体检健康者明显更高,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;胃癌患者血清 PTX–3、SCC–Ag 水平在化疗前、化疗 1、3、6 个周期逐渐降低,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;胃癌 TNM 3 期患者 血清 PTX–3、SCC–Ag 水平较 TNM 2 期明显升高,胃癌高分化患者血清 PTX–3、SCC–Ag 水平较中低分化患者明显降低, 差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）;受试者操作特征曲线（ROC）显示 PTX–3 检测特异度为 98.75 %,优于 SCC–Ag,两 者灵敏度相同,均处于较高水平,且联合检测的曲线下面积（AUC）最大。结论：胃癌患者化疗后血清 PTX–3、SCC–Ag 水平呈下降趋势,且与临床分期、分化程度密切相关。     

南方红豆杉多糖对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

〔摘 要〕 目的：探究南方红豆杉多糖对宫颈癌 HeLa 细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法：经体外培养并取 对数生长期人宫颈癌 HeLa 细胞，分别予以不同浓度红豆杉多糖（30、60、90、120 μmol·L-1），将其设为四组，并设对照 组加入等量 0.9 % 氯化钠溶液。应用 MTT 法检测细胞增殖情况，流式法检测细胞凋亡情况，Western blot 法检测 Survivin、 Caspase–3、Bcl–2、P53 蛋 白 表 达 情 况。 结果： 与 对 照 组 相 比，30 μmol·L-1 组、60 μmol·L-1 组、90 μmol·L-1 组、 120 μmol·L-1 组的宫颈癌 HeLa 细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著升高，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。P53 蛋白表达 量明显升高，Survivin、Bcl–2、Caspase–3 蛋白表水平显著降低，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：南方红豆杉多糖 可抑制宫颈癌 HeLa 细胞增殖，促进细胞凋亡，其作用机制可能与下调 Survivin、Bcl–2、Caspase–3 表达，上调 P53 表达有关。     

肝癌组织中 PFK1 的表达及其与手术 预后的临床相关性研究

〔摘 要〕 目的：探讨肝癌组织中磷酸果糖激酶 1（PFK1）表达的临床意义及其与患者手术预后的相关性。方法：回顾 性分析 2016 年 1 月至 2020 年 1 月收治于东莞东华医院的 102 例肝癌患者的临床资料，用免疫组化法检测患者肝癌组织、 癌旁组织中 PFK1 的表达情况，并探讨其与患者预后的相关性。结果：患者肝癌组织 PFK1 的表达阳性率显著高于癌旁组织， 差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。肝癌组织中 PFK1 阳性表达与肝癌细胞转移及病灶大小相关（P ＜ 0.05），与患者年龄、 性别以及肿瘤分化程度无关（P ＞ 0.05）。对纳入对象的生存资料进行 Kaplan–Meier 分析，结果表明 PFK1 表达阳性患者 中位生存时间显著低于 PFK1 表达阴性患者，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：PFK1 在肝癌组织中表达阳性率较高， 且与患者预后不良密切相关。     

LncRNA SNHG14 调控 miR–656–3p/SIRT5 通路加重肝癌侵袭和迁移

〔摘 要〕 目的：探讨长链非编码 RNA（lncRNA）小核仁 RNA 宿主基因 14（SNHG14）对肝细胞癌（HCC）细胞侵袭 和迁移的影响及机制。方法：采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT–PCR）检测肝癌细胞 SNHG14 和 miR–656–3p 的表 达。与 sh–SNHG14,miR–656–3p 抑制剂,miR–656–3p 模拟物,pcDNA3.1–SIRT5 共转染后,检测 HepG2 和 MHCC97H 细 胞增殖、侵袭和迁移。然后用 qRT–PCR 测定 SNHG14、miR–656–3p 和 SIRT5 的表达水平,荧光素酶报告基因检测和 RNA 下调 SNHG14 与 miR–656–3p 之间的关系,以及 miR–656–3p 与 SIRT5 之间的关系。结果：HCC 细胞中 SNHG14 表达上 调,miR–656–3p 表达下调。抑制 SNHG14 和 miR–656–3p 过表达,可抑制 HepG2 和 MHCC97H 细胞增殖,侵袭和迁移。 SNHG14 直接作用于 miR–656–3p,SIRT5 是 miR–656–3p 的靶基因。miR–656–3p 抑制剂或 pcDNA3.1–SIRT5 可逆转 sh–SN HG14 对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论：SNHG14 通过调节 miR–656–3p/SIRT5 轴促进肝癌细胞的侵袭和迁移。     

苦参碱对结肠癌 HT29 细胞增殖及凋亡的临床研究

〔摘 要〕 目的：探讨苦参碱对结肠癌 HT29 细胞增殖及凋亡的影响，并分析其作用机制。 方法：选取 2020 年 1 月至 2021 年 3 月间于中国医学科学院肿瘤医院山西医院行结肠癌治疗的 100 例患者的资料进行分析，其中运用 mFOLFOX6 方 案治疗的 50 例纳入对照组，另 50 例在 mFOLFOX6 方案治疗的中后期联合使用苦参碱治疗的纳入观察组。运用 Western blot 法检测两组患者 B 细胞淋巴瘤 –2 抗凋亡蛋白（Bcl–2）、Bcl–2 相关蛋白 X（Bax）、半胱氨酸蛋白酶 –3（Caspase–3） 及表皮生长因子受体（EGFR）水平，以分析苦参碱对 HT29 细胞增殖、凋亡的影响；并比较两组患者癌胚抗原（CEA）、 糖类抗原 19–9（CA19–9）及血管内皮生长因子（VEGF）水平在治疗前后的变化，以分析治疗效果。 结果：治疗后， 观察组患者的 Bcl–2、EGFR 水平均低于对照组，Bax 和 Caspase–3 水平均高于对照组，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）； 观察组患者 CEA、CA19–9 及 VEGF 水平均低于对照组，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：苦参碱具有一定的 抗肿瘤作用，其可以抑制结肠癌 HT29 细胞的增殖，诱导其凋亡，并通过调节 Bcl–2/Bax、EGFR 和 Caspase–3 等相关信号 通路来发挥其作用。     

m6A 甲基化修饰酶 YTHDF3 对食管鳞 癌细胞增殖和迁移的影响及机制

〔摘 要〕 目的：研究 N6– 甲基腺嘌呤（m⁶ A）甲基化修饰酶 YTH 域家族蛋白 3（YTHDF3）对人食管癌细胞（Ec109） 增殖及迁移的影响及其机制。方法：选择食管癌患者为研究对象,取肿瘤组织及癌旁组织检测 YTHDF3 基因信使核 糖核酸（mRNA）和蛋白表达。设计合成 YTHDF3 过表达质粒（pcDNA–YTHDF3）、空载质粒（pcDNA）、干扰 表达质粒（si–YTHDF3）及对照（si–NC）转染至 Ec109 细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT–PCR）检测 YTHDF3、大肿瘤抑制基因 1（LAST1）、锚定蛋白重复域蛋白 1（ANKRD1）、半胱氨酸丰富血管生成诱导因子 61 （CYR61）、结缔组织生长因子（CTGF）基因 mRNA 表达;蛋白质印迹法检测 YTHDF3 基因蛋白表达;MTT 法检 测细胞增殖活力;Transwell 检测细胞迁移。Kaplan–Meier 法比较 YTHDF3 与生存期的关系。结果：转染 si–YTHDF3 后 Ec109 细胞 YTHDF3 及 LAST1 基因 mRNA 和蛋白表达、靶基因 ANKRD1、CYR61 及 CTGF 的 mRNA 表达显著 降低,细胞增殖及迁移显著增加,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。转染 pcDNA–YTHDF3 后 Ec109 细胞 YTHDF3 及 LAST1 基因 mRNA 和蛋白表达、靶基因 ANKRD1、CYR61 及 CTGF 的 mRNA 表达显著升高,细胞增殖及迁移显 著降低,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。食管鳞癌患者肿瘤组织中 YTHDF3 基因 mRNA 及蛋白表达均显著低于癌 旁组织,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。YTHDF3 基因高表达患者中位生存期显著高于 YTHDF3 基因低表达组患者, 差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：YTHDF3 基因可抑制食管鳞癌细胞增殖及迁移,其机制可能与调控 LAST1 基因表达有关。     

乳腺癌组织中 nm23、E– 钙黏蛋白的 表达及与临床病理特征的关系

〔摘 要〕 目的：探讨乳腺癌组织中 nm23 蛋白、E– 钙黏蛋白的表达情况及与患者临床病理特征间的关系。 方法：选取 2020 年 1 月至 2022 年 12 月莆田九十五医院收治的 91 例乳腺癌患者作研究对象,患者均开展手术治疗,术中采集肿瘤组 织及癌旁正常组织,开展免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 – 过氧化物酶连结（SP）法检测,比较肿瘤组织及癌旁正常组织内 nm23、E– 钙黏蛋白表达情况,并分析 nm23、E– 钙黏蛋白表达与年龄、肿瘤最大径、淋巴结转移、肿瘤分期、绝经状态等 病理特征间的关系。 结果：肿瘤组织内 nm23 蛋白阳性表达率低于癌旁正常组织,E– 钙黏蛋白阳性率高于癌旁正常组织, 差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）;nm23 阳性表达患者肿瘤最大径≥ 3 cm、有淋巴结转移、肿瘤分期 Ⅲ ~ Ⅳ 期占比 低于 nm23 阴性患者,差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）,而 E– 钙黏蛋白表达情况与 nm23 相反。 结论：乳腺癌组织内 nm23 呈低表达、E– 钙黏蛋白呈高表达,nm23 蛋白、E– 钙黏蛋白的表达情况与肿瘤分期、淋巴结转移等关系密切,或可 作为临床治疗的新靶点。     

中西药物对肺腺癌放射增敏基因表达谱初步研究

目的:利用基因芯片技术研究扶正增效方、甲硝唑对肺腺癌放射增敏基因表达谱,筛选出中西药物对放射增敏的差异表达基因及其共同表达基因。方法:捉取中西药物加放射组癌组织及单纯放射组癌组织RNA,分别用Cy5-dCTP或Cy3-dCTP标记,再与38500点人基因芯片杂交,筛选中西药物加放射组与单纯放射组差异表达基因。结果:中药加放射组与单纯放射组差异表达基因857条,上调349条,下调508条,其中39条GeneBank中登录,差异显著基因中15条表达上调,21条表达下调,分别为凋亡、转录调节、信号转导、细胞周期、DNA损伤与修复、免疫等相关基因;差异极显著基因1条,为THRA。西药加放射组与单纯放射组差异表达基因47条,已知显著差异基因3条,分别为DNA损伤与修复、转录调节、信号转导等相关基因。只有RARA基因在中西药放射组出现差异表达。结论:中西药物放射增敏存在不同的基因表达谱,说明中西药物放射增敏基因机制不尽相同,筛选出的特异表达基因和共同表达基因为进一步研究放射增敏药物开发和建立放射增敏动物模型具有重要意义。     

Survivin、P53突变基因、PTEN基因在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因Survivin、P53突变基因和抑癌基因PTEN在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及相关性。方法：应用免疫组织化学法（SP），检测60例NSCLC组织标本和20例正常肺组织标本中的Survivin、P53突变基因、PTEN基因表迭情况。结果①在60例NSCLC组织标本中，Survivin、P53，PTEN表迭结果分别为47例（78．33%）、42例（70．00%）、27例（45．00％）。在20例正常肺组织标本中，Survivin、P53基因无表达，PTEN阳性表达18例（90%）。②Survivin、P53在NSCLC组织中的阳性表达明显高于正常肺组织（P〈0．01）。Survivin的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、是否淋巴结转移及TNM分期无相关性（P〉0．05），P53的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。PTEN在正常肺组织中的阳性表达明显高于NSCLC组织（P〈0．01）。PTEN的阳性表达与NSCLC的组织学类型及TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的分化程度、有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。③Survivin与P53在NSCLC的表达无相关性（P〉0．05），PTEN与Survivin、P53在NSCLC的表达均有显著差异（P〈0．05）。结论Survivin、P53突变基因、PTEN基因的异常表达与非小细胞肺癌的发生发展有关；三者在NSCLC的发生发展中起协同作用；P53突变基因和PTEN基因可作为诊断肺癌和评价肺癌预后的参考标志及基因治疗的新靶点。     

342bp人骨形态发生蛋白2成熟肽基因的克隆表达

目的探讨克隆人骨形态发生蛋白2(hBMP2)成熟肽的最精简的基因序列并原核表达方法。方法剔除所有信号肽和中间前肽的非必需基因序列,以RT-PCR方法克隆扩增出hBMP2的342 bp的成熟肽基因片段,将其与原核表达载体PBV220酶切后相连接并测序,构建PBV220-hBMP2的真核基因原核表达系统,在DH5α大肠杆菌下扩增并温度诱导表达hBMP2蛋白质,SDS-PAGE检测表达蛋白。结果RT-PCR扩增出hBMP2的成熟肽基因342 bp片段与Genbank公布的序列完全一致,且经DNA电泳和蛋白电泳鉴定,构建PBV220-hBMP2原核表达系统可导入DH5α大肠杆菌,并在温度诱导下表达出约16 kD的蛋白条带,诱导培养4 h后的蛋白表达量达到最高峰。结论成功扩增342 bp的成熟肽hBMP2基因片段能在原核大肠杆菌上有效表达生产hBMP2蛋白质。     

消疣汤对U14荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制

目的：通过实验研究,探讨消疣汤对U14荷瘤小鼠的抑瘤作用。结论：消疣汤对U14荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,其机制可能与抑制突变型bcl-2基因表达和提高细胞周期蛋白Rb基因的表达有关。因此从中医药中寻找抗肿瘤作用的新药是本文的宗旨。实验证明消疣汤不失为一种很有前途的抗癌中药。     

DNA条形码等分子鉴定技术与动植物类中药材的鉴定

中药材鉴定是控制中药质量、确保用药安全与效果的首要环节。DNA分子鉴定是从基因层面上进行中药材鉴别的手段,准确率高。DNA分子鉴定包括电泳技术、免疫技术、随机扩增多态性DNA(RAPD)、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)、简单重复序列(ISSR)及DNA条形码等,以DNA条形码应用最为广泛。DNA条形码是基因组中相对较短的、可用于物种鉴定的特异性基因片段。植物类中药材的条形码多选用核基因和叶绿体基因DNA片段,如叶绿体psbA-trnH基因、内转录间隔区(ITS)、叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(rbcL)和RNA转录体Ⅱ型内含子剪切酶基因(matK)等;动物类中药材的条形码多来自核基因和线粒体基因DNA,主要有线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(COⅠ)、核糖体RNA(rRNA)和线粒体细胞色素b基因(CytB)等。综述动植物类中药材DNA分子标记与鉴定技术应用进展,并探讨DNA条形码在药用动植物类中药材鉴定中存在的局限性及发展前景,为中药质量控制提供参考。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡促进与抑制因子基因表达的调控作用

目的探讨糖心康对糖尿病心肌损伤的保护作用及机理。方法采用STZ加高脂饮食造模。治疗组以中药糖心康灌胃,空白组及模型组以生理盐水灌胃,以基因芯片技术TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果模型组细胞凋亡较正常组发生率明显增加,两组比较差异非常显著(P<0.01),而糖心康组心肌凋亡率则下降,模型组大鼠Fas基因蛋白表达增强,与正常组比较差异非常显著(P<0.01),而糖心康组Fas基因表达减弱,与模型组比较差异显著(P<0.01),模型组Bcl-2表达减弱,而糖心康组Bcl-2表达较模型组增强,二者比较差异显著(P<0.01)。利用基因芯片技术在心肌基因表达谱中筛选出与细胞凋亡有关的促进与抑制因子基因主要有2个,即AFO41376,M75720。结论糖心康有抑制心肌细胞凋亡作用,可使Fas基因、AFD41376基因表达下调,使Bcl-2,M75720表达上调。这也是中药复方糖心康具有心肌损伤保护作用的机制之一。     

脂联素调控序列荧光素酶报告基因荧光素酶活性的分析

目的:通过将1 100 bp长度的人脂联素(adiponectin,AD)启动子上游的调控基因(包括启动子,-1066 To+4 bp)插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic中,构建成含启动子调控序列的荧光素酶报告基因(pGL3-Basic-ADI1100),用于脂联素在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达调控研究。方法:利用PCR技术扩增1 100 bp长度AD启动子片段,与PUC19T载体连接,将PUC19T-ADI1100质粒,及荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒转染大肠肝菌(DH5a)后扩增,提取并纯化PUC19T-ADI1100和pGL3-Basic;分别以KpnI,XhoI酶切pGL3-Basic;电泳并回收ADI1100片段和pGL3-Basic酶切大片段,在T4 DNA连接酶的作用下,将ADI1100片段插入荧光素酶报告基因pGL3-Basic中,并转染CHO细胞,检测荧光素酶报告基因活性。结果:通过酶切及基因测序的方法证实所构建质粒含有脂联素启动子上游调控序列;瞬时转染实验显示AD启动子在CHO细胞中的转录表达随时间的变化而升高,转染后48 h的双报告基因活性是pGL3-Basic的30倍。结论:该荧光素酶报告基因构建成功,为后续筛选有抑制肥胖作用的中药提供基础。     

乙型肝炎病毒基因水平研究进展及治疗动态

对乙肝基因水平的研究进展和治疗动态进行综述,分别对乙肝病毒不同基因型与地域、血清学、临床类型、基因变异、抗病毒药效的关系进行深入探讨。并对抗病毒药物、基因疫苗、免疫调节及中药各种治疗对策成果进行总结,并对其各自所存在的问题进行剖析,肯定了中医药治疗肝病的良好前景。     

载白细胞介素18基因多聚复合物纳米粒的性质及表达研究

 目的载小鼠白介素18重组质粒纳米粒的性质及其表达研究。方法以无毒的可生物降解的高分子材料聚乙二醇/乙交酯丙交酯作为载体材料,采用双乳化溶剂蒸发法制备了载聚阳离子-DNA复合物纳米粒(polymer-polycationic peptide-DNA,PPD),用透射电镜观察该多聚复合物的形态,用激光粒度仪测定其粒径和Zeta电位,琼脂糖电泳分析抗核酸酶和抗超声的能力,用Westernblot检测在HepG₂肝癌细胞中的表达情况。结果制得的纳米粒,形态圆整,大小均匀,平均粒径(155±2.97)nm,平均Zeta电位为(-27.31±2.02)mV,平均包封率91.12%,质粒制成纳米粒后提高了质粒对抗超声剪切及核酸酶降解的能力,细胞转染表达效率也显著优于裸质粒。结论PPD纳米粒是基因治疗的临床应用中一种很具前景的多聚复合物载体系统。     

解毒益智胶囊的益智效应及对中枢胆碱能神经功能的影响

目的观察解毒益智胶囊的益智效应及对中枢胆碱能神经功能的影响,为治疗轻度认知障碍提供实验依据。方法建立东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型。按体重随机分为正常对照组、模型对照组、安理申对照组及解毒益智胶囊高、中、低、极低剂量组。采用避暗法、跳台法和Morris水迷宫法观察解毒益智胶囊的益智效应;采用乙酰胆碱酯酶（AchE）试剂盒检测全脑AchE活性;采用实时荧光定量PCR技术,以18SrRNA为内参基因,用SYBRGreenI染料法检测海马M1受体和胆碱乙酰转移酶（ChAT）基因相对表达,双标准曲线法进行计算和数据分析。结果解毒益智胶囊能显著延长东莨菪碱致模型小鼠学习记忆障碍模型避暗实验和跳台实验逃避潜伏期,减少错误次数,显著缩短Morris水迷宫实验平均逃避潜伏期,改善空间搜索策略;能显著提高学习记忆障碍小鼠模型全脑AchE的活性;显著增强海马M1受体和ChAT基因表达,解毒益智胶囊高、中、低、极低剂量组M1受体基因分别较模型组表达增高了14．9、7．3、8．2、1．8倍,而ChAT基因则分别较模型对照组提高了6．6、26．5、1．2、6．1倍。结论解毒益智胶囊具有良好的益智作用。