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1.
目的明确台州地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的表型和基因型的流行特征以及医院感染的发生率。方法对87株肠杆菌科细菌采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定的标准进行ESBLs表型筛选和确定,并用聚合酶链反应(PCR)和序列分析确定ESBLs的基因型。结果肠杆菌科细菌产ESBLs菌株头胞噻肟的耐药率明显高于头胞他啶;经序列分析后ESBLs基因型别确定为CTX-M-9、CTX-M-1,而CTX-M-2测序结果不理想。结论产ESBLs的肠杆菌科细菌在台州地区较普遍,以CTX-M-9最为常见。  相似文献   

2.
目的探讨湖南地区中南大学三所附属医院肠杆菌科细菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)的检出率及其基因型。方法采用多重PCR法对产ES- BLs的142株临床分离的肠杆菌进行CTX-M酶基因检测,然后用组特异性引物对CTX-M酶整个开放阅读框进行扩增,PCR产物测序并确定其基因型。结果湖南地区中南大学三所附属医院肠杆菌科细菌产CTX-M型ESBLs检出率为76.8%(109/142):对109株产CTX-M型ESBLs肠杆菌科细菌进行特异性PCR扩增,进行分组,发现CTX-M-1组48株,CTX-M-9组48株,另外13株可能属于CTX-M-2组和CTX-M-8组。根据不同病室不同菌株来源,共测序25株,组特异性PCR产物测序后发现有三种基因型,分别为CTX-M-15型、CTX-M-3型和CTX-M-14型。其中CTX-M-15型6株,CTX-M-3型7株,CTX-M-14型11株。结论本地区CTX-M型ESBLs检出率较高,共检出三种CTX-M酶基因型,并且CTX-M-15型ESBLs是在国内首次被发现。  相似文献   

3.
湖南地区CTX-M型超广谱β内酰胺酶的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的了解湖南本地区产CTX—M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的检出率,确定其基因型,并对其流行病学特征进行研究。方法收集2004年10月至2005年7月湖南地区中南大学3家附属医院临床标本分离的多重耐药肠杆菌科细菌171株,按临床实验室标准委员会(CLSI/NCCLS)所推荐的方法进行表型确证试验,聚合酶链反应(PCR)进一步进行CTX—M酶基因型的检测,PCR产物测序并确定其基因型。结果171株多重耐药革兰阴性杆菌中142株表型检测阳性,经多重PCR扩增109株携带CTX—M基因,其中大肠埃希菌45株,肺炎克雷伯菌29株,阴沟肠杆菌21株,其他菌株14,CTX—M酶在产ESBLs肠杆菌科细菌中检出率达76.8%(109/142),经测序25株共检出3种基因型,即7株携带CTX-M-15、7株携带CTX-M-3和11株携带CTX-M-14。RAPD共做50株菌,26株大肠埃希菌有12种RAPD类型,14株肺炎克雷伯菌有6种RAPD类型,10株阴沟肠杆菌有7种RAPD类型。结论在湖南地区检出3种CTX—M型ESBLs基因,在一定程度上CTX—M酶存在克隆传播。  相似文献   

4.
目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阴沟肠杆菌的耐药性、阳性率及基因分布特点。方法改良双纸片法检测80株临床分离阴沟肠杆菌对14种抗生素的耐药性及ESBLs表型,多重PCR检测鉴定ESBLs基因型,DNA测序确认DNA序列。结果 80株阴沟肠杆菌中,29株检出ESBLs,阳性率36.3%。80株阴沟肠杆菌对亚胺培南全部敏感,产ESBLs的阴沟肠杆菌对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等头孢菌素类抗生素的耐药率高达96.1%。29株细菌所产ESBLs中,12株为TEM型,6株为SHV型,24株为CTX-M型。其中CTX-M-1组9株,CTX-M-9组15株,未检出CTX-M-2组及CTX-M-8/CTX-M-25组。结论阴沟肠杆菌ESBLs检出率较高,耐药显著。产ESBLs阴沟肠杆菌的主要基因型为CTX-M型。  相似文献   

5.
目的了解浙江省金华市中心医院临床分离肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其耐药性。方法采用纸片扩散法(K-B)检测肺炎克雷伯菌对18种常用抗菌药物的敏感性。按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的ESBLs表型确证试验检测;聚合酶链反应(PCR)检测菌株中的质粒AmpC酶基因和CTX-M型ESBLs基因。并对阳性扩增产物进行测序明确其基因亚型;接合试验了解质粒AmpC酶基因和ESBLs基因的可转移性;肠杆菌科细菌基因间重复一致序列(ERIC-PCR)分析菌株的同源性。结果 101株肺炎克雷伯菌中35.6%(36/101)的菌株ESBLs表型确证试验阳性,其中77.8%(28/36)的菌株含CTX-M型ESBL基因,以CTX-M-15和CTX-M-14基因型为主。11.9%(12/101)的菌株产质粒AmpC酶基因,DNA测序证实为DHA-1型质粒AmpC酶。5.9%(6/101)的菌株同时产质粒AmpC酶和ESBLs。结论我院存在同时产质粒AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的流行,质粒AmpC基因型别主要为DHA-1型,ESBLs基因型别主要为CTX-M-14或CTX-M-15型。耐药基因可通过接合的方式从供体菌转移至敏感细菌,临床上应加强对此类菌株的监测。  相似文献   

6.
产超广谱β内酰胺酶49株细菌耐药基因调查   总被引:14,自引:0,他引:14  
目的 了解49株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)细菌的耐药基因。方法 采用纸片扩散法检测产ESBLs细菌,通过基因扩增、序列分析、脉冲场凝胶电泳技术研究ESBLs基因型以及产ESBLs细菌同源性。结果 产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌流行率自2000年的20%,增长至2003年的40%。49株产ESBLs细菌中,以CTX-M-14(n=33)亚型最常见,其他亚型包括CTX-M-3、CTX-M-9、CTX-M-12、CTX-M-15、CTX-M-24、SHV-5a,1株细菌同时产CTX—M-3、CTX—M-14两种CTX-M型ESBLs;4株表型确证试验阳性细菌未能分型。除2株大肠埃希菌、2株肺炎克雷伯菌有亲缘性外,其他菌株间无同源性。结论 产ESBLs细菌分离率逐年增高,以CTX—M型酶为主。PFGE试验证明非流行所致。  相似文献   

7.
目的了解我院2004年110月临床分离的83株阴沟肠杆菌中产ESBLs的情况,并对1株多重耐药菌株进行耐药机制研究。方法采用改良双纸片法(MDDT)进行ESBLs的初筛。以8对ESBLs引物(CTX—M,CTX-M-1,CTX-M-2,CTX-M-9,SHV,TEM,VEB,PER型)进行PCR扩增,对其中1株菌株(37号菌株)的扩增产物进行序列分析。结果MDDT初筛结果证明有43株菌产ESBLs,41株菌多种ESBLs引物均有扩增产物,序列分析表明37号阴沟肠杆菌携带的ESBLs为CTX-M-9,CTX-M-1样,SHV型。结论产多种ESBLs是引起该株阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药的重要原因。  相似文献   

8.
运用多重PCR技术检测CTX-M型耐药基因的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用K-B琼脂扩散法,检测临床分离的85株大肠埃希菌和41株肺炎克雷伯菌对18种抗生素的耐药性,用双纸片增效试验检测产ES-BLs菌株,用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中,ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%。所有检测菌株对亚胺培南敏感。产ESBLs的菌株对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等的耐药率为100.0%;质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多。碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs最有效药物。  相似文献   

9.
目的研究广州肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia,Kp)CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的质粒同源性特征。方法收集2007~2008年广州地区9家医院临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌,PCR检测ESBLs分子表型;用肠杆菌科基因间重复序列PCR(Enterobacteriaceae repetive intergenic consensus-PCR,ERIC-PCR)分析产CTX-M-14型ESBLs菌株的分子同源性;取产CTX-M-14型ESBLs的Kp的所有非克隆株,通过结合试验、质粒图谱、PCR分析blaCTX-M-14基因环境。结果产ESBLsKp共181株,69.1%(125/181)的产ESBLs株为CTX-M表型;其中产CTX-M-14型ESBLs株的检出率为28.2%(51/181),经ERIC-PCR分析,共分为33个基因型;基因环境显示,75.7%(25/33)blaCTX-M-14位于90 kb的可接合质粒上,其他耐药基因blaSHV、blaDHA-1、blaOXA-1、qnr、aac(6’)-Ib-cr等均未检到;有28株菌的blaCTX-M-14位于ISEcp1-like插入序列下游,ISEcp1-like末端与blaCTX-M-14间距均为42 bp,有2株菌ISEcp1末端与blaCTX-M-14起始区间距也为42 bp;但在ISECP1中间有一个S10插入序列。结论广州地区ESBLs主要分子表型为CTX-M型,主要流行为CTX-M-14型,携blaCTX-M-14质粒的传播,可能是本地区CTX-M型ESBLs高发生率的主要原因。  相似文献   

10.
目的评估新的产色培养基ChromIDESBL在检测产超广谱-β内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌中的可靠性。方法用2组肠杆菌科细菌进行评估,一组为285株上海地区检出的临床分离株,这些菌株已用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的确证试验确认了是否产ESBLs,另一组28株产ESBLs肠杆菌科细菌,在以前的研究工作中已确认了这些菌株的产酶特性和ESBLs基因型别。结果ChromIDESBL能有效地检测产ESBLs的肠杆菌科细菌。结论ChromIDESBL是一种可靠的产ESBLs肠杆菌科细菌的筛选培养基。  相似文献   

11.
摘要:目的:探讨临床分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌的基因型。 方法:收集2010年1月至2013年6月临床标本中分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌110株,K-B纸片扩散法检测细菌对临床常用药物的敏感性,纸片扩散表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),改良Hodge试验(MHT)检测碳青霉烯酶表型,PCR、DNA测序及BLAST比对等方法确定菌株耐药基因型。 结果:110株碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌中,MHT阳性77株(70.0%)。31株大肠埃希菌、1株产气肠杆菌和1株黏质沙雷菌检出blaKPC-2基因,5株阴沟肠杆菌和1株产气肠杆菌分别检出blaIMP-26和blaVIM-2基因。36株32.7%菌株ESBLs表型试验阳性,主要检出blaCTX-M-15、blaSHV-12和blaCTX-M-3 3种ESBLs基因型。 结论:本项研究碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌以blaKPC-2基因型为主,其次为blaIMP-26和blaVIM-2基因型。  相似文献   

12.
目的 明确平顶山地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的表型流行特征以及医院感染的发生率.方法 对81株肠杆菌科细菌采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定的标准进行产ESBLs株的确定,并有选择地对大肠埃希茼、肺炎克雷伯菌的产ESBLs株和非产酶株进行耐药性方面的比较.结果 子肠杆菌科细菌中还未发现对亚胺培南耐药的产ESBLs菌株;大肠埃希菌、克雷伯菌的产ESBLs株和非产酶株对大多数抗生素的耐药丰存在差异.结论 治疗肠杆菌科细菌时,碳青霉烯类、含酶抑制荆抗生素及头霉素类可作为临床一线用药.  相似文献   

13.
目的 探讨湖南省CTX-M型超广谱B内酰胺酶(ESBLs)基因型分布情况和变性高效液相色谱(DHPLC)方法检测CTX-M型ESBLs基因型的准确性.方法 用多重PCR扩增标准菌株和ESBLs表型阳性的临床菌株blaCTX-M基因,扩增产物经DHPLC分析得到标准菌株和临床菌株色谱峰图,通过比对标准色谱峰图对临床菌株进行基因分型,同时采用单纯随机抽样法选择25株多重PCR扩增阳性菌株进行特异PCR扩增,其产物冉进行基因测序来评估DHPLC法的准确性.结果 142株产ESBLs的肠杆菌科细菌经多重PCR扩增证实109株携带blaCTX-M基因,检出率为76.8%(109/142).109株扩增阳性的菌株经DHPLC分析后检出4种不同的blaCTX-M基因型:33株携带CTX-M-3、19株携带CTX-M-15、5株携带CTX-M-9、52株携带CTX-M-14.25株基因测序结果与DHPLC基因分型结果作比较显示:24株DHPLC的基因分型结果与基因测序结果完全吻合,但有1株DHPLC基因分型为CTX-M-15,而测序为CTX-M-82.结论 DHPLC可对耐药进行基因快速基因分型,具有准确、快速和经济等优点.  相似文献   

14.
高辉  王杨  黄云昆  朱雯梅  王佳  姚瑶 《检验医学》2013,28(9):775-779
目的了解临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性肠杆菌科细菌中16SrRNA甲基化酶基因的分布情况。方法对临床分离的70株革兰阴性肠杆菌科细菌用VITEK.32型全自动微生物分析系统进行细菌鉴定,用纸片扩散法检测ESBLs,并用聚合酶链反应(PCR)检测armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD和npmA6种16SrRNA甲基化酶基因,对检测的阳性产物进行测序,并通过GenBank比对DNA序列。结果70株产ESBLs革兰阴性肠杆菌中,9株16SrRNA甲基化酶基因阳性,其中5株检出armA基因,4株检出rmtB基因,2株同时检出armA和rmtB基因,rmtA、rmtC、rmtD、npmA4种基因扩增均为阴性。结论不同地区医院16SrRNA甲基化酶基因的分布情况各不相同。  相似文献   

15.
目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla相似文献   

16.
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型研究   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的 了解我院临床分离的大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型分布情况.方法 对88株大肠埃希菌进行耐药分析,并用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,对耐药基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增分析,选部分产物测序.结果 88株大肠埃希菌中共检出31株产ESBLs(35.2%)菌株.产ESBLs菌株对头孢他啶的敏感率为58.1%,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感率均为3.2%.PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M型(90.3%),其中以CTX-M-14、CTX-M-3型为主;TEM基因均为TEM-1型,SHV基因均为SHV-1型.结论 我院产ESBLs大肠埃希菌检出率为35.2%,其耐药性明显高于非产ESBLs菌株;其基因均为CTX-M型,其中以CTX-M-14和CTX-M-3型为主;TEM-1型广谱酶广泛存在于产ESBLs的大肠埃希菌中,则SHV-1型少见.  相似文献   

17.
目的 确定中国澳门地区产超广谱B内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌的ESBLs基因型,并与沈阳地区产ESBLs的大肠埃希菌的ESBLs基因型进行比较.方法 分别收集澳门与沈阳地区分离的大肠埃希菌209株、150株.按美国临床和实验室标准协会(CLSI)2006年所定标准确定ESBLs表型,并对ESBLs表型阳性的菌株测试其等电点(pI)值,根据pI值范围设计引物,对其进行PCR扩增,扩增产物测序,测序结果与GenBank比对,确定ESBLs的基因型.结果 (1)澳门与沈阳地区产ESBLs大肠埃希菌阳性检出率分别为30.1%(62/209)、54.O%(81/150).(2)57株(90.5%)澳门产ESBLs的大肠埃希菌基因型为CTX-M,以CTX-M-14为主、占76.2%,并同时发现CTX-M-9、CTX-M-22、CTX-M-27、CTX-M-15、CTX-M-24型,分别占4.8%、3.2%、1.6%、1.6%、3.2%;6株未分型.(3)74株(91.4%)沈阳地区产ESBLs的大肠埃希菌基因型为CTX-M,以CTX-M-14为主、占65.4%,发现CTX-M-3、CTX.M-24、CTX-M-22、CTX-M-15、CTX-M-9、CTX-M-28型,分别占13.6%、4.9%、2.5%、2.5%、1.2%、1.2%;7株未分型.结论 澳门产ESBLs大肠埃希菌基因型为CTX-M型,以CTX-M-14为主,同时存在CTX-M-15、CTX-M-22、CTX-M-24、CTX-M-9、CTX-M-27型,基因型与沈阳地区菌株基本相同,未发现CTX-M-3、CTX-M-28型.沈阳地区菌株未发现CTX-M-27型.  相似文献   

18.
目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla_(CTX-M-15)分别位于65 000 bp和90 000 bp的可接合质粒上,65 000 bp质粒除bla_(CTX-M-15)阳性外,未检到bla_(TEM-1)、qnrB、bla_(DHA-1)、bla_(OXA-1),aac(6′)-I6-cr等耐药基因.1株接合菌90 000 bp质粒还存在bla_(OXA-1)和bla_(TEM-1)耐药基因,其余7个90 000 bp质粒所携耐药基因同65 000 bp质粒.所有bla_(CTX-M-15)都位于ISEcp1-like插入序列下游,ISEep1-like末端与blaCTX-M-15间距均为48 bp.结论 广州地区ESBLs主要分子表型为CTX-M型主要流行为CTX-M-14型.以CTX-M-15为代表能水解头孢他啶的CTX-M型ESBLs在本地区检出增多值得关注.  相似文献   

19.
质粒介导的志贺菌产超广谱β内酰胺酶及其耐药基因型   总被引:3,自引:1,他引:3  
目的 探讨产生超广谱β内酰胺酶(ESBLs)志贺菌的特性及与耐药质粒的关系.方法 用K-B法做药敏试验并筛选可疑产ESBLs志贺菌株;ESBLs表型确证试验检测可疑产ESBIs志贺菌;采用TEM、SHV、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-9组β内酰胺酶通用引物进行PCR检测,TEM、CTX-M-9组全编码基因引物进行PCR测定,对扩增产物进行DNA序列分析;对产ESBLs志贺菌进行接合传递试验,供体菌和接合子用稀释法进行MIC测定.结果 在275株志贺菌中有12株为产ESBLs志贺菌,其中8株志贺菌基因型为CTX-M-14型,4株为CTX-M-3型;产ESBLs志贺菌接合传递试验全部阳性,其接合子只对β内酰胺类抗生素耐药.结论 本地区志贺菌对β内酰胺类抗生素的严重交叉耐药是由ESBLs所致,产ESBLs志贺菌可通过质粒传递耐药性.  相似文献   

20.
目的评估新的产色培养基Chrom ID ESBL在检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌中的可靠性。方法用2组肠杆菌科细菌进行评估,一组为285株上海地区检出的临床分离株,这些菌株已用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的确证试验确认了是否产ESBLs,另一组28株产ESBLs肠杆菌科细菌,在以前的研究工作中已确认了这些菌株的产酶特性和ESBLs基因型别。结果Chrom ID ESBL能有效地检测产ESBLs的肠杆菌科细菌。结论Chrom ID ESBL是一种可靠的产ESBLs肠杆菌科细菌的筛选培养基。  相似文献   

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