荧光定量PCR法检测食管癌外周血Survivin m-RNA的临床意义

目的探讨凋亡抑制基因Survivin在食管癌患者外周血中表达的临床意义。方法共93例食管良、恶性病变患者,采用荧光定量PCR法,检测外周血Survivin m-RNA,分别观察其在食管良性病变、原位癌及浸润癌患者外周血中的表达强度。结果Survivin m-RNA在食管良性病变、原位癌及浸润癌患者外周血中均呈渐进性高表达,并与病期有关。结论外周血中Survivin m-RNA表达强度与食管癌的发生、发展密切相关,实时荧光定量PCR法检测食管癌外周血中Survivin m-RNA,可方便食管癌的诊断及指导治疗。     

凋亡抑制蛋白Livin在食管癌表达的实验研究

目的 探讨食管癌发生、发展过程中凋亡抑制蛋白Livin的表达及其与食管癌临床病理特征的关系.方法 采用实时定量PCR法及蛋白免疫印迹法检测Livin在正常食管黏膜(10例)、不典型增生(10例)、原位癌(10例)及浸润癌(10例)组织中mRNA及蛋白的表达强度.结果 Livin mRNA在正常食管黏膜、不典型增生、原位癌及浸润癌组织中呈渐进性高表达[分别为1.00±0.00、2.26±0.79、7.24±1.06、12.21±2.47],原位癌、浸润癌与正常食管黏膜组织比较,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 Livin与食管癌的发生、发展密切相关,有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点.     

食管癌变过程中p53及PCNA表达与生物学行为的关系

目的:探讨食管上皮癌变过程中p53、增殖细胞核抗原(PCNA)变化趋势以及与食管癌生物学行为的关系。方法:以S-P免疫组化法对215例食管不同病变(正常上皮20例,慢性炎症20例,基底细胞增生35例,非典型增生35例,原位癌25例,浸润癌80例)活检及手术切除标本进行p53、PCNA检测。结果:p53、PCNA随着食管病变的进展,表达率逐渐增加(P<0.05),部分非典型增生与原位癌的表达呈一致性,浸润癌中p53、PCNA表达与分级无关,与淋巴结转移及浸润深度呈正相关。结论:p53、PCNA在食管癌早期诊断中具有重要意义,可提前到部分非典型增生患者。p53、PCNA同时高表达的肿瘤更易扩散和转移。     

缺氧诱导因子1和Survivin蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义

目的：探讨缺氧诱导因子1（HIF-1α）和Survivin蛋白表达与食管癌浸润及转移预后生物学行为的关系。方法：应用免疫组化SP法检测37例食管癌中HIF-1α和Survivin蛋白的表达。结果：从正常上皮组织、轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织到原位癌、浸润癌，HIF-1α和Survivin蛋白表达的阳性率呈逐渐增高趋势，差异均有显著性（P〈0．05）。结论：HIF-1α与Survivin蛋白可作为判断食管癌生物学行为的客观指标，对判断食管癌的预后具有重要意义。     

食管癌患者血清miR-3653-3p和miR-330-3p的作用及临床意义

目的 观察血清miR-3653-3p和miR-330-3p表达水平对食管癌诊断和预后预测的临床价值.方法 选取2015年1月至2017年6月在该院行手术治疗的食管癌患者109例作为食管癌组,同期在该院行手术治疗的食管良性病变患者(65例)和体检健康者(30例)分别作为食管良性病变组和对照组.采用实时荧光定量PCR检测血...     

survivin和Mcm5在食管活检组织中的表达及意义

目的：研究凋亡抑制因子survivin和增殖因子Mcm5在食管癌发生发展过程中表达的意义及相互关系。方法：采用免疫组织化学（S-P）法检测22例食管正常黏膜、19例不典型增生、7例原位癌及139例浸润癌活检标本中survivin和Mcm5的表达情况。结果：①食管活检组织中，survivin和Mcm5蛋白在由正常向癌转变的过程中，表达逐渐增高，二者在正常黏膜中的表达均明显低于不典型增生、原位癌及浸润癌（P〈0．05）；②survivin蛋白表达与Mcm5蛋白表达之间呈正相关关系（P％0．05）。结论：食管癌的发生发展过程涉及凋亡抑制因子survivin的激活及增殖因子Mcm5功能的增强，二者联合应用有助于食管癌及其癌前病变的诊断。     

食管癌组织中Survivin蛋白的表达及其意义

目的 探讨Survivin蛋白在食管癌组织中的表达和,临床意义.方法采用免疫组化方法检测61例食管鳞癌手术切除标本及26例癌旁组织的Survivin蛋白表达情况.结果食管鳞癌组织Survivin阳性表达率为60.7%(37/61);Survivin表达与肿瘤病理分级、浸润深度、临床分期、淋巴结转移和患者生存期有明显相关性(均P<0.01).结论 Survivin的表达可以作为判断食管癌恶性潜能的重要生物学指标,对于临床选择高危复发病例给予积极治疗、提高预后水平具有重要意义.     

Survivin与Smac在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨抑凋亡蛋白Survivin与促凋亡蛋白Smac在食管鳞状细胞癌发病中的作用与关系。方法收集35例食管鳞状细胞癌标本,取其食管癌组织,癌旁组织和正常组织,采用Tunel法与免疫组织化法分别测定食管癌组织,癌旁组织和正常组织中细胞凋亡及Survivin与smac表达情况。结果凋亡指数(apoptosis index,AI)癌组织及癌旁组织明显小于正常组织。食管癌组织Survivin的表达高于癌旁组织及正常组织;Smac的表达明显低于癌旁组织及正常组织。Survivin与Smac的表达在食管癌组织中呈负相关,在癌旁组织和正常组织中均不相关。结论 Survivin与Smac可能通过负反馈调节或相互拮抗作用打破凋亡平衡,促进食管鳞状细胞癌的发生。     

外周血中CK18mRNA检测对食管癌微转移的诊断意义

目的探讨CK18mRNA套式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测对食管癌微转移的诊断意义。方法采用套式RT-PCR方法检测50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者及10例食管良性病变对照和10例健康对照外周血中细胞角蛋白CK18mRNA基因的表达。结果食管良性病变对照组和健康对照组的外周血中均未检测出CK18mRNA阳性细胞。50例无远处转移食管癌患者外周血中CK18mRNA表达阳性率为38.0%(19/50)。10例有远处转移的食管癌患者外周血中CK18mRNA表达阳性率为90.0%(9/10)。食管癌Ⅳ期与Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期相比,其阳性率有显著性差异(P<0.05),而其他各期之间没有显著差异。不同病理分化程度之间没有显著差异。结论食管癌患者临床早期已有癌细胞发生微转移。应用套式RT-PCR方法检测外周血中CK18mRNA靶基因有助于食管癌微转移的早期诊断。     

生存蛋白在膀胱癌患者尿液脱落细胞中的表达及临床相关性研究

目的研究生存蛋白(Survivin)在膀胱癌患者尿液脱落细胞中的表达及临床相关性。方法本文选取2016年9月-2018年9月在我院就诊的膀胱癌患者50例,分为膀胱癌组,选取同时期在我院就诊的膀胱良性病变患者20例,分为良性组,选取同一时期在我院健康体检的志愿者20例,分为正常组。尿液脱落细胞DNA提取,实时荧光定量PCR检测Survivin在尿液脱落细胞中的表达。结果膀胱癌组尿液脱落细胞中Survivin表达高于正常组和良性组,良性组尿液脱落细胞中Survivin表达高于正常组,具有统计学差异(P0.05)。有肌层浸润患者Survivin表达89.29%高于无肌层浸润患者54.55%,具有统计学差异(P0.05)。T分期≥T2期患者Survivin表达86.67%高于T分期T2期患者50.00%,具有统计学差异(P0.05)。病理分级G2-G3级患者Survivin表达88.89%高于病理分级G1级患者47.83%,具有统计学差异(P0.05)。结论 Survivin在膀胱癌患者尿液脱落细胞中显示高表达,其表达水平与患者肌层浸润、T分期、病理分级有关,参与膀胱癌发展。     

实时荧光定量RT-PCR检测食管癌Survivin mRNA的表达

SurvivinmRNA是近年来发现的一种新的凋亡抑制因子,属于凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisproteins,IAP)家族的新成员,具有抑制细胞凋亡和调节细胞增殖的双重作用[1]。Survivin选择性地表达于胚胎组织和人类大多数肿瘤组织,而在正常人终末分化组织中不表达[2,3]。对Survivin的     

实时荧光定量RT-PCR检测乳腺癌VEGF mRNA的表达

目的：建立实时荧光定量逆转录一多聚酶链反应（real—timequantitative，RT—PCR）检测乳腺癌患者肿瘤组织VEGFmRNA表达的方法，并验证其与免疫组织化学LsAB方法检测VEGF蛋白表达的相关性。方法：提取组织总RNA，逆转录成mRNA，采用实时荧光定量RT—PCR检测44例乳腺浸润性导管癌、25例癌旁正常小叶组织、13例乳腺良性疾病组织中VEGFmRNA表达；采用免疫组织化学LSAB法和彩色图像病理分析系统半定量检测其VEGF蛋白表达。结果：乳腺癌组织中VEGFmRNA表达水平显著高于癌旁和良性病组织（｜P〈0．001），而后两者之间无明显差异（P〉0．05）；VEGF蛋白表达在癌组织，癌旁和良性病组中的分布特点与VEGFmRNA完全一致。结论；本研究所建立的用于检测人乳腺组织VEGFmRNA表达的实时荧光定量RT—PCR方法，是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法，与免疫组化LSAB方法检测的VEGF蛋白表达具有良好相关性，在乳腺癌的早期诊断和良恶性鉴别诊断中具有重要的参考价值。     

Survivin和b-FGF在食管癌中的表达及临床意义

目的探讨Survivin与b-FGF在食管癌中的表达度临床意义。方法采用免疫组织化学法检测60例食管癌和30倒食管炎组织中Survivin和b—FGF的表达。结果食管癌中Survivin和b-FGF的阳性表达率分别为78．33％和65．00%。明显高于对照组（食管炎组织）（P〈0．05）；Survivin、b—FGF在中晚期食管癌中的阳性表达比早期显著升高（P〈0．05），而与食管癌的组织学类型、病理分级无关（P〉0．05）；Survivin与b-FGF在食管癌中的表达呈正相关（P〈0．05，f=0．364）。结论Survivin和b-FGF可能在食管癌的发生发展中起关键作用，二者与食管癌的临床病理分期密切相关，二者联合检测对食管癌的诊断有一定价值。     

食管癌和淋巴结组织中生存素和CD44v6的表达及临床意义

目的研究生存素和CD44v6在食管癌组织中的表达及其与食管癌细胞发生、发展与转移的关系。方法应用免疫组化SP法检测94例食管鳞癌和83例淋巴结中生存素和CD44v6的表达情况。结果原发癌组织中生存素与浸润深度有关(P<0.05);原发癌组织中CD44v6表达率与淋巴结转移、浸润深度和临床分期等因素有关(P<0.05);原发癌组织和转移淋巴结组织中生存素和CD44v6表达率均高于无转移淋巴结组织(P<0.05);原发癌组织和转移淋巴结组织中生存素和CD44v6表达率差异无统计学意义(P>0.05);生存素和CD44v6在淋巴结中表达无相关性(P>0.05)。结论生存素和CD44v6在食管癌组织和转移淋巴结中高表达,在食管癌的发生发展过程中具有重要作用,可作为评价食管癌生物学行为的指标。     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原（CEA）、生存素（Survivin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）;TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组（P〈0.05、P〈0.01）;Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达的阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者（P〈0.01、P〈0.05）。结论采用逆转录real-time PCR检测外周血CEA、Survivin、MMP-2 mRNA的表达以及TIMP-2/MMP-2比值可以成为一种无创性乳腺癌辅助诊断、分期、转移的方法。     

乳腺浸润性导管癌患者外周血CEA mRNA的检测及临床意义

目的观察乳腺浸润性导管癌患者外周血中癌胚抗原信使核糖核酸（CEAmRNA）的表达情况,从而探讨其在乳腺癌诊治方面的临床价值。方法使用实时荧光定量RT—PCR方法,分别检测48例乳腺浸润性导管癌患者、28例乳腺良性疾病患者外周血中CEAmRNA的表达情况。结果乳腺浸润性导管癌组患者外周血CEAmRNA阳性表达率（18／48）明显高于乳腺良性疾病组（2／28）,差异具有统计学意义（x0=8．40,P〈0．05）。各分期乳腺浸润性导管癌患者外周血中均有CEAmRNA阳性表达,II期和III期患者的CEAmRNA表达阳性率明显高于I期患者,差异具有统计学意义（X2=7．74,P〈0．05）。结论外周血中CEAmRNA的联合检测,可提高乳腺浸润性导管癌的检出率,有助于判断患者发生微转移的风险．值得临床上进一步研究。     

实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌核酸DNA的应用评价

目的探讨实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌核酸DNA浓度的检测范围和检测健康人全血中核酸DNA的Ct本底值。方法采用试剂盒提取纯菌、健康人和临床患者血液中的核酸DNA,应用实时荧光定量PCR进行检测。结果经检测,40份健康人群血液标本Ct值平均值为37.0,标准差为1.9,Ct值95%置信区间为33.0 ~ 38.8。 将布鲁氏菌核酸DNA标准品倍比稀释（56.2 ng ~ 0.026 5 fg）,实时荧光定量PCR检测灵敏度为6.7 fg。结论实时荧光定量PCR检测纯菌核酸DNA的灵敏度相当于2个基因组DNA拷贝数,但用于检测血液标本尚待进一步研究。