产ESBLs宋内志贺菌耐药基因分布研究

目的探讨产ESBLs宋内志贺菌的耐药机制,为腹泻疾病的临床治疗提供依据。方法收集2004~2007年解放军302医院门诊腹泻患者分离的多重耐药AmpR、SxtR、CtxR的宋内志贺菌43株,用PCR方法扩增耐药基因,并将菌株进行质粒结合试验。结果携带CTX-M基因27株,其中CTX-M1群16株,CTX-M9群11株,占所有阳性分离株的62.79%;携带TEM基因18株,占41.86%;未检出SHV、OXA和PER基因。同时携带CTX和TEM基因占23.26%。携带2类整合子的宋内志贺菌占95.35%（41/43）。质粒结合试验成功率为92.7%。结论北京地区产ESBLs宋内志贺菌以携带CTX-M基因为主,其次为TEM型。流行亚型为CTX-M-15like、CTX-M-14和TEM-1。2类整合子在产ESBLs宋内志贺菌中多见。耐药基因大多通过质粒水平转移的方式进行传播。产CTX-M-27和CTX-M-64的宋内志贺菌在世界和国内分别属首次报告检出。     

重症监护病房感染病原菌分布及耐药性分析

目的调查医院重症监护病房患者临床感染病原菌的分布及耐药趋势,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对2007年1月～2008年12月住院患者送检的各类标本中分离出的病原菌采用自动微生物鉴定仪Vitek compact进行细菌鉴定,K-B法进行药敏试验,Whonet 5.4软件对结果进行分析。结果在分离到的255株菌中,革兰氏阴性菌120株（47.1%）,革兰氏阳性菌75株（29.4%）,真菌60株（23.5%）。革兰氏阴性菌中非发酵菌所占比例较高（66.7%）,其中铜绿假单胞菌居首位（43.0%）,其次是鲍曼不动杆菌（17.0%）,大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌及阴沟肠杆菌共22株（18.0%）,其中产超广谱内酰胺酶（ESBLs）比率〉70%;革兰氏阳性菌以金黄色葡萄球菌为主29株,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）26株;真菌60株,主要为白色假丝酵母菌40.0%、热带假丝酵母菌23.0%和光滑假丝酵母菌22.0%。对5-氟胞嘧啶、两性霉素、氟康唑、伊曲康唑及氟利康唑均敏感。结论 ICU患者感染及多耐药严重,加强耐药性监测,合理使用抗菌药物十分重要。     

12家部队医院细菌分布及耐药监测分析

目的调查不同地区部队医院患者血液、尿液等标本中的细菌分布及耐药情况,为合理使用抗菌药物提供实验室依据。方法收集12家部队医院2006年1-12月临床分离的1099株不重复细菌,采用琼脂稀释法测定抗菌药物对细菌的最低抑菌浓度(MIC),计算MIC50、MIC90,并按美国临床实验室标准化协会(CLSI)2007年标准判断敏感率(S%)、中介率(I%)、耐药率(R%),利用WHONET5.4软件进行分析。纸片法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),3-氨基苯酚硼酸(APB)纸片增强法检测AmpC酶。结果共获得革兰阳性菌436株(39.7%),革兰阴性菌663株(60.3%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)检出率分别为62%和92%,未发现万古霉素耐药的肠球菌和葡萄球菌。大肠埃希菌(E.coli)、肺炎克雷伯菌产ES-BLs的比率分别为51.1%和45.1%,二者产AmpC酶的比率分别为11.3%和16.2%。血液中E.coli和肺炎克雷伯菌对头孢他啶、阿米卡星、头孢噻肟、头孢西丁和左氧氟沙星的耐药率普遍低于尿液中的相应细菌,而血液中铜绿假单胞菌和不动杆菌对美罗培南、头孢他啶、多黏菌素、米诺环素的耐药率均显著高于尿液中的相应细菌。结论MRSA、MRSCN以及产ESBLs、AmpC酶的耐药细菌在部队医院的发生率较高;自血液和尿液分离的细菌对抗菌药物的耐药性差异较大。     

脉冲场凝胶电泳在白色假丝酵母菌基因核型分析中的应用

目的应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法研究白色假丝酵母菌DNA核型,评价其作为分子流行病学监测手段的价值。方法从11例患者中分离出白色假丝酵母菌14株,采用PFGE法进行基因核型测定,MircroScan WalkAway96 RY-ID快速生化鉴定板进行菌种鉴定。结果14株白色假丝酵母菌有9种不同基因核型。其中从同一例患者不同部位标本中分离出的4株白色假丝酵母菌基因核型完全一致,表明其来源于同一菌株的不同克隆亚型;来源于不同患者的其他10株菌中有3株具有完全相同的基因核型,而其余7株菌具有不同的基因核型。结论PFGE可很好地显示出不同来源的白色假丝酵母菌菌株间的同源性及多态性,可作为其分子流行病学研究的有效手段。     

产超广谱β内酰胺酶细菌的检测及耐药分析

随着β内酰胺酶类抗菌素的广泛应用,使产超广谱β内酰胺酶(ESBLS)的菌株日益增多给临床治疗带来很大困难。为了解我院细菌产ESBLS的情况及耐药性,我们对2002年5月~2004年8月从临床分离的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌进行了ESBLS的检测,并对临床常用抗菌素进行耐药分析。结果如下:1材料与方法1.1菌株来源:2002年5月~2004年8月从我院住院及门诊患者、血液、尿液、痰液、胸腹水及分泌物等标本中分离的大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌共计262株,按照全国临床检验操作规程鉴定到种。1.2抗菌素及培养基:药敏试验采用纸片扩散法,抗菌素纸片MH培…     

某犬场犬型钩端螺旋体的分离与鉴定

目的：对疑为钩端螺旋体病的军犬病科进行致病性钩端螺旋体分离和鉴定，为钩端螺旋体病的诊断提供理论依据。方法：对病犬进行解剖观察，用犬尿液接种柯索夫培养基进行钩体的分离，然后对分离到的钩体进行菌型鉴定并用钩体外膜蛋白基因引物进行PCR检测。结果：从尿液中分离到1株钩体，经鉴定为犬群犬型，PCR扩增结果为阳性。结论：从病犬中分离到1株犬型致病钩体。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的 了解大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况,分析产ESBLs细菌的耐药性.方法 对154株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs,用Kirby-Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验.结果 154株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌80株,检出率51.95%.在各类标本中,尿中产ESBLs菌株分离率最高(52.50%),其次是痰(22.50%).除亚胺培南、美罗培南、头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星外,产ESBLs菌株对其他8种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P<0.05).结论 该院产ESBLs大肠埃希菌株对多类药物表现出较高的耐药率,临床应加强对产ESBLs大肠埃希菌耐药性监测,严格掌握抗生素的使用指征,防止耐药菌株的传播流行.     

大肠埃希菌超广谱β-内酰酶产生及耐药分析

目的：探讨临床感染性标本中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的情况及耐药状况，以指导临床合理用药。方法：采用浓度梯度法(E-test法)和Vilek微生物自动分析仪进行ESBL的检测，采用K-B法对临床感染标本中分离出的120株大肠埃希菌进行药敏试验。结果：120株大肠埃希菌对亚胺培南耐药最低，耐药率为5％；其次为头孢哌酮／舒巴坦耐药率为5．8％；对丁胺卡那和头孢他啶也显示较低的耐药性，分别为8．3％和15．8％。120株大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶为18，33％。结论：产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌对广谱头孢菌素及氨曲南耐药，耐药性明显高于非产酶株。亚胺培南和头孢派酮／舒巴坦可作为ESBL阳性菌株感染治疗的首选药物。     

ICU产ESBLs革兰阴性杆菌的耐药性分析

目的：分析重症监护病房（ICU）产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的分布特点及其对抗菌药物的耐药性。方法选择2008年2月-2013年2月ICU临床分离的革兰阴性杆菌共325株,采用双纸片协同试验确诊产ESBLs阳性细菌,采用K-B法做药物敏感试验。结果325株革兰阴性杆菌中分离出产ESBLs菌71例（21.8%）,依次为大肠埃希菌（38.9%）、肺炎克雷伯菌（37.7%）、阴沟肠杆菌（33.3%）和产气肠杆菌（20.0%）;71例产ESBLs革兰阴性杆菌主要从痰液（45例）和术后引流液（11例）中分离而来,痰液和术后引流液产ESBLs革兰阴性杆菌株分离率分别为16.2%、13.4%,明显高于尿液、血液及静脉导管的分离率,所致院内感染主要在下呼吸道和外科手术部位;药敏结果显示产ESBLs革兰阴性杆菌对亚胺培南高度敏感,而对绝大多数青霉素类和头孢菌素类抗生素呈耐药性表现。结论产ESBLs所致ICU院内感染现象较为严重,主要发生在下呼吸道和外科手术部位,仅对亚胺培南高度敏感,应根据药敏试验选择合适抗生素予以治疗。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶基因型及耐药性研究

 目的 了解沈阳地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的流行和耐药特点,初步确定产ESBLs大肠埃希菌的基闪型.方法 收集沈阳地区大肠埃希菌临床分离株246株,通过CLSI确认试验确认产ESBLs大肠埃希菌,应用K-B纸片法进行药敏试验,采用PCR方法检测ESBLs的基冈型.结果 产ESBLs大肠埃希菌共127株(51.6%),对头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南、头孢他啶、头孢两丁及阿莫西林/克拉维酸的耐药率分别是:68.3%、92%、43.1%、24.4%、10.5%及37.4%,亚胺培南和美洛培南的敏感率均为100%;在72株CTX-M型中53株(60.2%)为CTX-M-9型、15株(17%)为CTX-M-1型,4株(4.6%)同时携带了CTX-M-9及CTX-M-1两种基因.结论 产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药的特点,产ES-BLs的大肠埃希菌大都携带CTX-M型ESBLs基因.     

大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌AmpC酶及ESBLs酶的检测及耐药性分析

目的：了解我院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和产ESBLs的情况及耐药性分析，为临床合理用药提供依据。方法：分别采用改良三维试验和CLSI／NCCLS推荐的纸片扩散法确证试验，检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和产ESBLs菌株。结果：大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌单产AmpC酶菌株检出率分别为9．3％和4％，单产ESBLs检出率分别为28％和12％，同时产AmpC酶及ESBLs检出率分别为14．7％和0。两种菌单产AmpC酶和单产ESBLs的菌株以及同时产两种酶的菌株对亚胺培南保持较低耐药率，均低于15％，而对其它类抗菌素大于50％，耐药率均较高。两种菌产酶株与不产酶菌株耐药率相比，均有显著性差异（P〈0．01）。结论：产酶株耐药情况严重，应慎重选择用药，减缓耐药菌株的进一步发生发展。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的:对产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌大肠埃希菌进行耐药检测,指导临床合理用药。方法:采用双纸片扩散法对292株从临床分离的非重复株中检出68株产ESBLs菌,用K-B法检测其对11种抗生素的敏感性。结果:ESBLs菌总阳性率23.3％;产ESBLs菌对头孢他啶、头孢西汀、阿米卡星部分敏感,对亚胺培南100％敏感,对头孢西汀、头孢噻肟、头孢呋辛耐药率达83.3％～100％,显著高于不产ESBLs菌对抗生素耐药率(X_2检验,P<0.05),对阿米卡星、头孢西汀、环丙沙星、复方SMZ交叉耐药达88.9％。结论:治疗ESBLs菌引起感染应选用亚胺培南或含β-内酰胺酶抑制剂复合抗生素。     

老年患者下呼吸道感染细菌谱监测分析

目的：监测老年下呼吸道感染细菌谱的变化。方法：老年下呼吸道感染154例，采用微量肉汤稀释法及双纸片法测定致病菌株。结果：检出革兰阳性菌34株，以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌多见；革兰阴性菌120株，以克雷伯菌属和大肠埃希氏菌常见。结论：引发老年人下呼吸道感染的常见致病菌以革兰阴性菌比例较高，应强调临床合理使用抗生素。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药特性分析

目的了解本院检出的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的发生率和药敏情况,为临床防治产ESBLs肺炎克雷伯菌的感染提供依据。方法对2012～2013年在我院就诊患者的临床标本中分离出的产EBSLs肺炎克雷伯菌进行回顾性分析。结果共检出肺炎克雷伯菌感染182株,其中产EBSLs的98株,占53.8%;多重耐药的细菌数量呈现升高的趋势。产ESBLs肺炎克雷伯菌对青霉素类抗生素及氨基糖苷类等抗生素呈多重耐药,但对亚胺培南高度敏感。结论本院产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率高,临床治疗中应严格掌握抗菌药物应用指征,并动态监测其耐药性变迁,防止产ESBLs肺炎克雷伯菌的局部流行。     

我院1998～2006年临床病原菌的构成及其耐药性

目的了解医院临床分离的病原菌的分布及对抗菌药物的耐药性。方法采用VITEK全自动微生物鉴定仪对临床分离株进行鉴定，药敏试验采用Kirby-bauer（KB）法，结果按照CLSI标准判断。结果共分离出8420株病原菌，其中，革兰氏阴性菌4480株，革兰氏阳性菌2597株，真菌1318株，分别占总数的53．2％，30．8％和15．7％。耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）占葡萄球菌中的检出率为62．0％，产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌在大肠埃希菌和克雷伯菌的的检出率分别为30．0％和15．5％，产ESBLs菌对大多数β-内酰胺抗菌药物高度耐药，革兰阳性球菌中万古霉素抗菌活性最强，绝大多数革兰阴性杆菌则对亚安培南敏感。结论了解医院病原菌的分布及耐药性情况有助于在感染性疾病治疗中合理选择抗生素。     

非发酵菌院内感染和耐药情况调查与分析

目的：调查了解医院非发酵菌院内感染分布及耐药情况,为临床合理应用抗生素提供依据。方法：采用WHONET5.4分析软件回顾性分析了2006年1月-2008年12月某院非发酵菌院内感染分布及耐药情况。结果：从院内感染者中分离出非发酵菌1159株,占总致病菌数的18.1%,其中铜绿假单胞菌759株,占65.5%;鲍曼不动杆菌226株,占19.5%;嗜麦芽黄单胞菌174株,占15.0%。标本中非发酵菌分布以痰液、创面分泌物和尿液居前3位,分别占82.1%、4.6%及3.4%。头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星具有较好的抗非发酵菌能力,耐药率均低于43.0%。结论：非发酵菌在院内感染致病菌中占18.1%,应及时监测其耐药情况。     

临床分离铜绿假单胞菌株的碳青霉烯类耐药机制研究

目的 了解临床分离的碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌的耐药机制.方法 对临床分离的40株碳青霉烯类耐药和10株对常用药物都敏感的铜绿假单胞菌及标准株ATCC27853,用抑制剂增效试验和双纸片协同试验筛选金属β-内酰胺酶;用SYBRGreen Ⅰ实时定量RT-PCR法检测多药外排泵MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM及膜孔蛋白oprD的mRNA表达水平.结果 在40株碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌中有33株金属β-内酰胺酶阳性,而10株敏感菌中无一株金属β-内酰胺酶阳性.与敏感菌相比,40株碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌中无MexAB-OprM过表达株,2株MexCD-OprJ过表达,8株MexEF-OprN过表达,6株MexXY-OprM过表达,10株OprD低表达,2株OprD缺失.一株菌中可同时存在几种异常.结论 产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制,一株细菌中可同时存在多种耐药机制,且这些机制间并非简单的相加作用.     

部队急性感染性腹泻病原菌分布及耐药性分析

目的：分析部队急性感染性腹泻病原菌分布及耐药性，为防治感染性腹泻提供依据。方法：以部队急性感染性腹泻病人为研究对象，分离、培养致病菌种群，进行药敏试验。结果：在388份粪便标本中，共检出致病菌153株，总分离率39．4％，其中志贺菌属51株（33．4％），产肠毒素大肠杆菌23株（15．0％），假单胞菌18株（11．8％），弗劳地枸橼酸杆菌15株（9．8％），气单胞菌属、沙门菌属、类志贺邻单胞菌各9株（各占5．9％），变形杆菌、产气杆菌、臭鼻克雷伯杆菌各6株（各占3．9％）。枸橼酸杆菌1株（0．7％）。大部分肠道致病菌对氨苄西林、羧苄西林、呋喃唑酮、氯霉素、复方磺胺甲嘿唑耐药，而对第二、三代头孢菌素、亚胺培南和喹诺酮类抗菌药物较敏感。结论：部队急性感染性腹泻病原菌以志贺菌属、产肠毒素大肠杆菌为主，可选用喹诺酮类抗菌药物治疗。     

产超广谱β-内酰酶细菌检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌在我院的分离、分布情况、耐药特点,以便及时监控和治疗.方法:先用纸片扩散初筛法从140株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中筛选出38株可疑产ESBLs菌株,再用纸片扩散确证法确认.结果:ESBLs总阳性率为27.1%,以重症监护病房为最高.产ESBLs菌对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率高达83.3%～96.2%,对亚胺培南全部敏感.结论:纸片扩散法是一种有效地检测ESBLs的方法,治疗ESBLs细菌所致感染,可应用亚胺培南、头霉素类、含β-内酰胺酶抑制复合物及药敏显示敏感的药物.     

某医院重点科室2016—2017年多重耐药菌分布及药敏情况分析

目的了解某医院重点科室多重耐药菌(MDRO)的分布及耐药性,为临床抗菌药的使用提供科学依据。方法收集2016—2017年首都医科大学附属北京世纪坛医院重点科室收治患者的痰液、尿液等各类标本,按照《全国临床检验操作规程》进行标本的接种分离与鉴定,并进行药物敏感性实验。结果共分离出病原菌2 080株。其中,泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-ABA)最多,为969株,占46.59%;其次为泛耐药铜绿假单胞菌(PDR-PAE)、大肠埃希菌(ECO)和耐甲氧西林金葡菌(MRSA)。病原菌主要分布在重症监护室(ICU)、呼吸内科和急诊科病区,其中,ICU占52.45%,呼吸内科和急诊科病区分别占11.92%、9.95%。检出的病原菌分布以G-菌为主,共1 652株,占79.42%,G+菌428株,占20.58%。G-菌对青霉素G、红霉素、克林霉素和万古霉素敏感性较高,余均有不同程度的耐药;G+菌对头孢类、哌拉西林、厄他培南、亚胺培南药物素敏感性较高,余均有不同程度的耐药,检出耐万古霉素肠球菌(VRE)。结论 MDRO主要为条件致病菌,其中,以G-菌较为多见,且无论是G+菌还是G-菌对常用抗生素均广泛存在不同程度的耐药。